专利名称：医用锂盐和/或医用丙戊酸类药物作为治疗肌萎缩性侧索硬化药物的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及医用锂盐和/或医用丙戊酸类药物新的药物用途。
背景技术：
肌萎缩性侧索硬化(ALS)是一种神经系统变性病，它能选择性影响脊髓前角、脑神经运动核以及锥体束，导致患者全身进行性肌无力和肌肉萎缩，随意运动逐渐丧失最终死亡。ALS起病缓慢，但进展较快。前驱症状为手臂无力、吞咽发音困难、小腿无力或者前述症状联合出现，但通常的方式为手和臂的对称性软弱无力，精细动作困难，逐步出现肌萎缩，骨间肌、蚓状肌及鱼际肌早期受累，向邻近和近端肌群蔓延。下肢受累在后或与上肢同时发生。舌肌、口轮匝肌、咀嚼肌萎缩无力逐渐发生，引起吞咽和发音困难、流涎或呛咳，肌束震颤广泛地、不定时地出现于四肢、躯干、口舌、面等部位。锥体束征与肌萎缩、肌束震颤等下运动神经元损害症状共存，四肢腱反射亢进并出现病理反射。有时上肢腱反射减弱或消失，而下肢反射亢进，出现痉挛。括约肌与性功能障碍不常见，多无客观的感觉障碍。大部分病例发病后2～5年内死亡，恶性程度高，以延髓症状起病或者为主者存活时间最短。
进入上世纪九十年代后，随着铜-锌超氧化物歧化酶(SOD1)基因突变、兴奋性氨基酸毒性、氧化应激、凋亡、免疫与炎性反应、神经营养因子缺乏等相关发病机制的发现，使得人类对该病治疗的研究有了长足的进步。但由于ALS致病机制复杂，至今仍缺乏有效的治疗手段，临床上也没有有效治疗ALS的药物。目前，Riluzole(力鲁唑)作为一种谷氨酸拮抗剂，是唯一被FDA(美国食品与药物管理局)批准用于治疗ALS的药物。相关研究报道(①Miller RG，Mitchell JD，Lyon M，Moore DH.Riluzole for amyotrophic lateral sclerosis(ALS)/motor neuron disease(MND).Amyotroph Lateral Scler Other Motor NeuronDisord.Cochrane Database Syst Rev.2002；(2)CD001447.Review./2003Sep；4(3)191-206/Cochrane Database Syst Rev.2007 Jan 24；(1)CD001447.Review.；②Tavakoli M.Disease progression in amyotrophic lateral sclerosis.Identifying the cost-utility of riluzole by disease stage.Eur J Health Econ.2002；3(3)156-65)，Riluzole能使ALS病人生命延长3-6个月，肌张力得到部分改善，但对其它功能没有明显改善。而且Riluzole价格昂贵，一个疗程达30～40万元人民币。
医用锂盐主要用于治疗躁狂症，对躁狂和抑郁交替发作的双相情感性精神障碍有很好的治疗和预防复发作用，对反复发作的抑郁症也有预防发作作用，也用于治疗分裂—情感性精神病；医用丙戊酸类药物主要用于单纯或复杂失神发作、肌阵挛发作和大发作的单药或合并用药治疗，对复杂部分性发作也有一定疗效。医用锂盐和医用丙戊酸类药物都具有神经保护作用，能够拮抗兴奋性氨基酸毒性，上调脑源性神经营养因子(BDNF)，这恰好与已知的ALS发病机制相吻合。
发明内容
本发明的目的是为了解决目前对于ALS的治疗缺乏有效的治疗药物，以及现有治疗ALS的药物存在价格昂贵、只能延长生存时间而对肢体运动功能无改善的问题，提供将医用锂盐和/或丙戊酸类药物作为用于治疗肌萎缩性侧索硬化的药物。本发明是将医用锂盐或医用丙戊酸类药物或二者联合作为治疗肌萎缩性侧索硬化的药物。经过实验，本发明能有效延迟患ALS小鼠的发病时间10天、延长患ALS小鼠的生存时间19.3天、明显改善患ALS小鼠的肢体运动功能，所用药物价格便宜、容易获得。
具体实施例方式
具体实施方式
一本实施方式医用锂盐和/或医用丙戊酸类药物作为治疗肌萎缩性侧索硬化药物的应用是将医用锂盐或医用丙戊酸类药物或二者联合作为治疗肌萎缩性侧索硬化的药物。
具体实施例方式
二本实施方式与具体实施方式
一的不同点是本实施方式中医用锂盐为碳酸锂、枸橼酸锂、氯化锂、醋酸锂、溴化锂、门冬氨酸锂、γ亚麻酸锂或肝素锂。
具体实施例方式
三本实施方式与具体实施方式
一的不同点是本实施方式中医用丙戊酸类药物为丙戊酸、丙戊酸钠、丙戊酸镁、丙戊酰铵、丙戊酸铋或丙戊酸半钠。
实验选用的模型是从美国Jackson Laboratory(杰克逊实验室)引进的hmSOD1-G93A转基因小鼠，该鼠是hmSOD1基因高拷贝数表达的ALS小鼠模型，相对于低拷贝数表达的小鼠具有发病时间早、进展快、生存时间短、发病不受外界因素影响等特点。hmSOD1-G93A转基因小鼠是迄今为止最接近人ALS的经典动物模型，也是目前国际上公认的研究ALS的理想动物模型。
将同一天出生的40只hmSOD1-G93A转基因小鼠平均分为A、B、C、D四组。在小鼠出生第100天时，分别给A组小鼠注射生理盐水，B组小鼠注射氯化锂，C组小鼠注射丙戊酸钠，D组小鼠注射氯化锂和丙戊酸钠。其中，生理盐水的注射量为10ml/Kg，氯化锂的注射量为60mg/Kg，丙戊酸钠的注射量为300mg/Kg。实验参考国内外针对ALS以及小鼠后肢运动能力的实验设计方法(①Azzouz M，Ralph GS，Storkebaum E，et al.VEGF delivery with retrogradelytran sported lentivector prolongs survival in a mouse ALS mode[J].Nature，2004，429413-417.；②Garbuzova-Davis S，Willing AE，Zigova T，etal.Intravenous administration of human umbilical cord blood cells in a mousemodel of amyotrophic lateral sclerosisdistribution，migration，and differentiation.JHematother Stem Cell Res，2003，12(3)255-270.；③徐叔云，卞如濂，陈修.药理学实验方法学.第2版.北京人民卫生出版社，1994.178-179，643-674.)，采用姿势反射实验、前肢放置实验、平衡木行走测评、转棒上行走测评、网屏试验五种方法对每只小鼠的肢体运动功能进行评定，五项得分之和为每只小鼠的得分，得分越高说明小鼠肢体功能越差，0分为正常，18分为肢体全部功能丧失。在每次评定中，每组小鼠的平均得分为该组得分。评定从小鼠出生第100天开始，每5天评定一次，共评定10次。评定结果统计见表6。
1、姿势反射实验主要观察大鼠后肢反射情况。评分标准见表1。
表1
2、前肢放置实验通过小鼠对视觉、轻触觉、本体感觉刺激的反应，测试小鼠的感觉运动整合能力。视觉刺激分为前方、侧方视觉刺激。前方视觉刺激将小鼠提起，缓慢下降至距桌面10cm高处，使前肢可自由活动。正常小鼠表现双前肢同时向桌面伸展，触及桌面。侧方视觉刺激将小鼠向桌面边缘轻推，观察瘫痪侧肢体活动情况。轻触觉刺激，以小鼠前爪的背面和侧面轻触桌面边缘，观察瘫痪侧前肢反应情况。本体感觉刺激，将小鼠瘫痪侧前肢挤压桌面边缘，刺激其关节和肢体肌肉，观察瘫痪侧肢体活动情况(进行轻触觉和本体感觉测定时，将小鼠头上仰45°，避免视觉刺激干扰)。评分标准见表2。
表2
3、平衡木行走测评主要观察小鼠的运动协调功能。评分标准见表3。
表3
4、转棒上行走测评主要观察小鼠四肢被动运动功能。将小鼠放在转棒仪上(60Hz/min，Φ90mm)，记录小鼠呆在转棒上的时间(t)。每只小鼠每次测定3次，取最长的1次时间。小鼠呆在转棒上的时间不小于180s为正常，如果大于180s则可以中止测定。评分标准见表4。
表4
5、网屏试验主要观察小鼠的抓握能力。评分标准见表5。
表5
表6
hmSOD1-G93A转基因小鼠的发病时间是在出生后的第100天左右，由表6可知，A组小鼠的发病时间符合理论值。在任意一次评定中，B组和C组得分均小于A组，说明氯化锂或丙戊酸钠单独用于治疗ALS对肢体运动功能有明显改善(P＜0.05)；在任意一次评定中，D组得分均小于B组和C组得分，说明氯化锂和丙戊酸钠联合治疗ALS对肢体运动功能有显著改善(P＜0.05)，且优于氯化锂和丙戊酸钠单独用于治疗ALS。
前四次评定中，D组得分均为0，说明氯化锂和丙戊酸钠联合治疗ALS能够延迟发病15天(P＜0.05)；在前两次评定中，B组得分和C组得分均为0，说明氯化锂或丙戊酸钠单独用于治疗ALS能够延迟发病时间10天(P＜0.05)。
研究对A、B、C、D四组小鼠的生存时间进行了统计，统计数据见表7。
表7 hmSOD1-G93A转基因小鼠的死亡时间是在出生后的第140天左右。由表7可知，A组小鼠的平均生存时间符合理论值，B组和C组的平均生存时间比A组多12.5天和13.7天，D组的平均生存时间比A组多19.3天，说明氯化锂或丙戊酸钠或二者联合用于治疗ALS均能够延长生存时间，并且氯化锂和丙戊酸钠联合治疗的效果最好。
实验按以上方法分别对碳酸锂、枸橼酸锂、醋酸锂、溴化锂、门冬氨酸锂、γ亚麻酸锂、肝素锂、丙戊酸、丙戊酸镁、丙戊酰铵、丙戊酸铋或丙戊酸半钠单独用于治疗ALS进行了实验，实验结果数据与表6和表7中相应数据的差值均小于5％；实验还按同样方法对碳酸锂、枸橼酸锂、氯化锂、醋酸锂、溴化锂、门冬氨酸锂、γ亚麻酸锂或肝素锂中的一种与丙戊酸、丙戊酸钠、丙戊酸镁、丙戊酰铵、丙戊酸铋或丙戊酸半钠中的一种联合治疗ALS进行了实验，实验结果数据与表6和表7中相应的数据的差值均小于5％。
以上实验研究表明锂盐或丙戊酸类药物或二者联合治疗ALS能够达到延迟发病时间、延长生存时间、改善肢体运动功能，且锂盐和丙戊酸类药物联合治疗效果最好。
权利要求
1.医用锂盐和/或医用丙戊酸类药物作为治疗肌萎缩性侧索硬化药物的应用，其特征在于将医用锂盐或医用丙戊酸类药物或二者联合作为治疗肌萎缩性侧索硬化病症的药物。
2.根据权利要求1所述的医用锂盐和/或医用丙戊酸类药物作为治疗肌萎缩性侧索硬化药物的应用，其特征在于医用锂盐为碳酸锂、枸橼酸锂、氯化锂、醋酸锂、溴化锂、门冬氨酸锂、γ亚麻酸锂或肝素锂。
3.根据权利要求1所述的医用锂盐和/或医用丙戊酸类药物作为治疗肌萎缩性侧索硬化药物的应用，其特征在于医用丙戊酸类药物为丙戊酸、丙戊酸钠、丙戊酸镁、丙戊酰铵、丙戊酸铋或丙戊酸半钠。
全文摘要
医用锂盐和/或医用丙戊酸类药物作为治疗肌萎缩性侧索硬化药物的应用，它涉及医用锂盐和/或医用丙戊酸类药物新的药物用途。它解决了目前对于肌萎缩性侧索硬化的治疗缺乏有效的治疗药物，以及现有治疗肌萎缩性侧索硬化的药物存在价格昂贵、只能延长生存时间而对肢体运动功能无改善的问题。本发明医用锂盐和/或医用丙戊酸类药物作为治疗肌萎缩性侧索硬化药物的应用是将医用锂盐或医用丙戊酸类药物或二者联合作为治疗肌萎缩性侧索硬化的药物。本发明能有效延迟发病时间、延长生存时间、明显改善肢体运动功能，所用药物价格便宜、容易获得。
文档编号A61K31/19GK101049316SQ200710072199
公开日2007年10月10日 申请日期2007年5月11日 优先权日2007年5月11日
发明者丰宏林, 任明, 张隽 申请人:丰宏林