专利名称：一种前列地尔脂微球的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种前列地尔脂微球的制备方法。
背景技术：
前列地尔，又称前列腺素E, (PGE,)，是一种活性极强的生理活性物质，具有抑制血小板聚集、血栓素A2生成、动脉粥样脂质斑块形成及免疫复合物的作用，并能扩张外周和冠脉血管的药理作用，主要用于治疗慢性动脉闭塞症(血栓闭塞性脉管炎、闭塞性动脉硬化症等)引起的四肢溃疡及微小血管循环障碍引起的四肢静息疼痛，改善心脑血管微循环障碍以及慢性肝炎的辅助治疗。目前上市的品种为前列地尔粉针(环糊精包合物)和前列地尔注射液(乳剂)，其性状为一种白色乳状液体。前列地尔粉针在临床使用过程中，不良反应发生率高，病人依从性差。游离的前列地尔在临床使用过程中存在较人的刺激性，如引起局部疼痛、肿胀感、严重的出现发红和沿静脉走向出现红线。前列地尔注射液采用脂微球的载药方式，将药物包封于油相中，大大减少了刺激性的发生。但如果包封率低的话，水相中游离的前列地尔仍可能引起不良反应的发生。其次，前列地尔化学稳定性差，在水溶液中容易降解成前列腺素A'，已上市的前列地尔'沐射液(乳剂)中降解产物前列腺素A,的含量限度为3ug/ml，占主药含量的60%。现有质量标准中未制定包封率考察项，因此，有必要对前列地尔的包封率进行控制。
专利申请200910010165. 6公开了 一种荷电性的前列腺素E,脂微球及其制备方法，其所用辅料为注射用油，乳化剂，助乳化剂，等渗调节剂，抗氧剂，和PH调节剂，其制备的脂微球脂微球中的药物主要分布于油水界面中，可将90%左右的药物包裹丁'油相和油水界面中，游离在水中的药物不到10%，根据其说明书第13页表1中公开的数据，药物的包封率在92%以上。
脂肪乳中常用的油如大豆油等，为长链脂肪酸酯，长期使用可能诱发卨血脂症，损害免疫系统和M状内皮系统及肝功能。中链甘油三酯(MCT)是指含1种或多种具约6至14个碳原子长度的中链脂肪酸的三酸甘油酯或其混合物。中链甘油三酯与脂蛋白酶亲和力高且迅速，易于在血中被脂蛋白酶降解，不易被网状内皮系统吞噬。长期使用毒副作用小于长链脂肪酸酯。同时，前列地尔在中链甘油三酯中的溶解度大于其在长链脂肪酸酯中的溶解度，也有利于增加前列地尔在油相中的含量。
冃前脂微球的形成理论尚未成熟，根据界面吸附膜学说，乳化剂在降低两相界面张力的同时，乳化剂定向排列于液滴周围，形成吸附膜。根据前列地尔的分子结构，推测前列地尔与磷脂的亲和性大于其在油中的溶解性，因此，现有技术报道中前列地尔主要分散在油水界面处。但由于其与磷脂之间的结合力仍不够，仍会有约10%甚至更多的前列地尔分散到水相中。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是克服现有技术之缺陷，提供一种高包封率的前列地尔脂微球的制备方法。
本发明的技术方案如下
本发明提供一种前列地尔脂微球的制备方法，由前列地尔，注射用油，乳化剂，稳定剂，等张剂，和注射用水制成，其特征在于，包括以下歩骤
(1) 取磷脂溶于适宜溶剂中，加入前列地尔溶解，减压回收溶剂，干燥；
(2) 油相的制备注射用油中分别加入乳化剂，稳定剂和歩骤(1)前列地尔，搅拌使其溶解；
(3) 水相的制备将等张剂加入水中溶解；
(4) 初乳的制备将步骤(3)油相加入歩骤(2)水相中，高速剪切分散，形成初乳；
(5) 高压匀化将步骤(4)初乳经微射流仪高压匀化，；
(6) 歩骤(1)至(5)均在氮气保护下操作。本发明所述的前列地尔脂微球的制备方法，其特征在于，歩骤(4)所述的高速剪切分散
时间为10 60分钟，剪切速度为3000 10000rpm，温度55 70。C。
本发明所述的前列地尔脂微球的制备方法，其特征在于，歩骤(5)所述的高压匀化压力为600 2000bar，匀化次数3 6次，温度15 3(TC。
本发明所述的前列地尔脂微球的制备方法，其特征在于，歩骤(1)所述的溶剂为乙醇、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、甲醇、丙酮中的一种或一种以上。
本发明所述的前列地尔脂微球的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的磷脂用量与前列地尔的重量比为1 10: 1。
本发明所述的前列地尔脂微球的制备方法，其特征在于，所述的注射用油为精制大豆油、花生油、红花油、棉籽油、橄榄油、椰子油、麻油、鱼油、中链甘油单酯、中链甘油双酯、中链甘油三酯、油酸乙酯、乙酰化单甘油酯、丙二醇双酯、亚油酸甘油酯、聚乙二醇月桂酸甘油酯中的一种或一种以上。
本发明所述的前列地尔脂微球的制备方法，其特征在于，所述的注射用油为精制大豆油和中链甘油三酯，两者重量比为1: 1。本发明所述的前列地尔脂微球的制备方法，其特征在于，所述的乳化剂为大豆磷脂或蛋 黄卵磷脂，其中磷脂酰胆碱的含量为80%以上。
本发明所述的前列地尔脂微球的制备方法，其特征在于，所述的稳定剂为油酸或其盐、 辛酸、癸酸、月桂酸、棕榈酸、亚油酸、亚麻油酸、胆酸、脱氧胆酸中的一种或一种以上。
本发明所述的前列地尔脂微球的制备方法，其特征在于，所述的等张剂为甘油、甘露醇、 山梨醇、葡萄糖、蔗糖、乳糖中的一种或一种以上。
本发明通过调整制备方法，将药物和磷脂先溶解到适宜溶剂中，然后除去溶剂，意外的 发现，药物的包封率显著提高，而且降解产物也有一定程度的减少。其原因可以解释为，通 过此反应，药物均匀的镶嵌在磷脂屮，形成类似复合物的结构，从而增加了药物与磷脂以及 与油相的亲和性，进而提高了前列地尔脂微球的包封率。与现有技术的制备方法相比，木发 明的方法明显提高了产品的包封率，同时，由于提高了包封率，降解产物前列腺素A,的量也 得到了一定程度的缓解，得到了更加稳定的前列地尔脂微球制剂。 具体实施例
为方便考察工艺，本发明拟定处方如下，但本发明的工艺不仅限于适应该具体处方。 对比实施例1 处方
前列地尔(PGE,) 5mg 精制大豆油 100g 蛋黄卵磷脂 12g 油酸 1.8g 甘油 22.5g 注射用水加至 1000ml
工艺过程
(1) 油相的制备将精制大豆油加热至7(TC，分别加入蛋黄卵磷脂，油酸和前列地尔， 搅拌使其溶解；
(2) 水相的制备将甘油加入水中溶解，加热至7(TC;
(3) 初乳的制备将歩骤(1)油相加入步骤(2)水相中，温度70"C,高速剪切分散， 剪切速度8000rpm，时间10分钟，形成初乳，快速降温至15 30°C，用氢氧化钠调节pH值
4.0 6.0;;
(4) 高压匀化将步骤(3)初乳经微射流仪高压匀化3 6次，压力800 1500 bar， 温度控制15 30°C;(5)歩骤(1)至(4)均在氮气保护下操作:
对比实施例2
处方
前列地尔
精制大豆油
中链甘油三酯
蛋黄卵磷脂
油酸
甘油
5mg
50g
50g
12g
1.8g
22.5g
注射用水加至 1000ml
工艺过程
(1) 油相的制备将精制大豆油和中链甘油三酯混合后加热至70°C，分别加入蛋黄卵 磷脂，油酸和前列地尔，搅拌使其溶解；
(2) 水相的制备将甘油加入水中溶解，加热至70。C;
(3) 初乳的制备将步骤(1)油相加入歩骤(2)水相中，温度7(TC，高速剪切分散， 剪切速度8000rpm，时间10分钟，形成初乳，快速降温至15 30°C，用氢氧化钠调节pH值 4.0 6.0;;
(4) 高压匀化将歩骤(3)初乳经微射流仪高压匀化3 6次，压力800 1500 bar， 温度控制15 30°C;
(5) 歩骤(1)至(4)均在氮气保护下操作。
实施例1:
处方:
工艺过程:
前列地尔(PGE。
精制大豆油
蛋黄卵磷脂
油酸
甘油
注射用水加至
5mg
謂g
12g
1.8g
22.5g
1000ml(1) 取蛋黄卵磷脂20mg，加入乙醇溶解，加入前列地尔5mg，搅拌使溶解， 一边搅拌， 一边用氮气挥干乙醇；
(2) 油相的制备将精制大豆油加热至7(TC，分别加入蛋黄卵磷脂，油酸和歩骤(1) 前列地尔，搅拌使其溶解；
(3) 水相的制备将甘油加入水中溶解，加热至7(TC;
(4) 初乳的制备将歩骤(2)油相加入歩骤(3)水相中，温度7(TC，高速剪切分散， 剪切速度8000rpm，时间10分钟，形成初乳，快速降温至15 30°C，用氢氧化钠调节pH值 4X) 6.0;;
(5) 高压匀化将歩骤(4)初乳经微射流仪高压匀化3 6次，压力800 1500 bar， 温度控制15 30'C;
(6) 歩骤(1)至(5)均在氮气保护下操作。
实施例2
处方:
前列地尔
精制大豆油
中链甘油三酯
蛋黄卵磷脂
油酸
甘油
5mg
50g
50g
12g 1.8g 22.5g
注射用水加至 1000ml
工艺过程
(1) 取蛋黄卵磷脂20mg,加入乙醇溶解，加入前列地尔5mg，搅拌使溶解，减压挥干
乙醇
(2) 油相的制备将精制大豆油和中链甘油三酯混合，加热至70'C，分别加入蛋黄卵 磷脂，油酸和歩骤(1)前列地尔，搅拌使其溶解；
(3) 水相的制备将甘油加入水中溶解，加热至7(TC;
(4) 初乳的制备将歩骤(2)油相加入步骤(3)水相中，温度70'C，高速剪切分散， 剪切速度8000rpm，时间10分钟，形成初乳，快速降温至15 30°C，用氢氧化钠调节pH值 4.0 6.0;;
(5) 高压匀化将步骤(4)初乳经微射流仪高压匀化3 6次，压力800 1500 bar，温度控制15 30°C;
(6)步骤(1)至(5)均在氮气保护下操作。
实施例3
前列地尔 5mg
棉籽油 100g
大豆磷脂 15g
油酸 1.8g
蔗糖 120g 氢氧化钠
注射用水加至 1000ml
(1) 取大豆磷脂50mg，加入乙酸乙酯溶解，加入前列地尔5mg，搅拌使溶解， 一边搅 拌一边用氮气挥干乙酸乙酯-,
(2) 油相的制备将棉籽油加热至6(TC，分别加入大豆磷脂，油酸溶解，加入歩骤(1) 前列地尔，搅拌使其溶解；
(3) 水相的制备将蔗糖加入水中溶解，加热至60。C;
(4) 初乳的制备将步骤(2)油相加入歩骤(3)水相中，温度60'C，高速剪切分散， 剪切速度5000rpm,时间3U分钟，形成初乳，快速降温至15 3(TC，用氢氧化钠调节pH值
4.0 6.0;;
(5) 高压匀化将歩骤(4)初乳经微射流仪高压匀化3 6次，压力600 1200 bar， 温度控制15 30°C;
(6) 无菌过滤将步骤(4)制得乳剂经0.2211111微孔滤膜过滤除菌，无菌灌封，冷冻 干燥，即得注射用前列地尔脂微球；
(7) 歩骤(1)至(6)均在氮气保护下操作。
实施例4 处方
前列地尔 5mg 精制大豆油 50g
8中链甘油三酯 50g 大豆磷脂 15g 油酸 1.8g 海藻糖 100g
氢氧化钠_适量
注射用水加至 1000ml
工艺过程；
(1) 取大豆磷脂10mg，加入二氯甲垸和甲醇混合溶剂(体积比l: 1)溶解，加入前列 地尔5mg，搅拌使溶解，减压挥干一氯甲烷和甲醇；
(2) 油相的制备将精制大豆油和中链甘油三酯混合加热至55。C，分别加入大豆磷脂， 油酸溶解，加入歩骤(1)前列地尔，搅拌使其溶解；
(3) 水相的制备将海藻糖加入水中溶解，加热至55'C;
(4) 初乳的制备将歩骤(2)油相加入歩骤(3)水相中，温度55'C，卨速剪切分散， 剪切速度3000rpm，时间60分钟，形成初乳，快速降温至15 30°C，用氢氧化钠调节pH值
4.0 6.0;;
(5) 高压匀化将歩骤(4)初乳经微射流仪高压匀化3 6次，压力600 1200 bar， 温度控制15 30°C;
(6) 无菌过滤将歩骤(4)制得乳剂经0.22ym微孔滤膜过滤除菌，无菌灌封，冷冻 干燥，即得注射用前列地尔脂微球；
(7) 歩骤(1)至(6)均在氮气保护下操作
实施例5
采用低温超速离心法测定包封率
1、 药物在水相中的含量测定
采用二歩离心法，取本品置于低温超速离心机中，设定温度为25'C，第一次调节转速至 5000rpm，分别置于10mL离心管中高速离心3h，取出，小心吸取下层溶液(稀薄乳液)适 量，分别置于低温超速离心机中，第二次调节转速为8000rpm，继续离心lh，至下层为澄清 水溶液，同上述操作，分别吸取下层澄清水溶液，以0.22pm微孔滤膜滤过，取续滤液，照含 量测定项下方法，测定药物在水相中的含量。
2、 药物总含量的测定
照含量测定项下的测定法测定，结果即为本品的药物总含量。3 、包封率的测定
由于药物在油、油水界面的含量难以测定，因此本品的包封率如下式计算即得-药物总含量-药物在水相中的含〗
包封率(％)=-
:100%
药物总含量 4、测定结果
取三批样品，根据上述测定方法检测，结果见下表。由结果可以看出，三批样品的包封 率在均在97%以上。
总含量(％)水相中含量(％)包封率(％)降解产物PGA,
对比实施例1110. 510. 3990. 63. 96%
对比实施例2108, 67. 0693. 53. 75%
实施例1107. 92. 3797.83. 05%
实施例2116. 22. 2198, 12. 77%
实施例3113. 72.9697. 42. 81%
实施例4110. 71. 6698. 52. 56%
对比实施例中，前列地尔的包封率在90%左右，本发明所制备的前列地尔脂微球，药物 包封率在97%以上，游离在水中的前列地尔不到5%。
权利要求
1、一种前列地尔脂微球的制备方法，由前列地尔，注射用油，乳化剂，稳定剂，等张剂，和注射用水制成，其特征在于，包括以下步骤(1)取磷脂溶于适宜溶剂中，加入前列地尔，搅拌使其溶解，除去溶剂，备用；(2)油相的制备注射用油中分别加入乳化剂，稳定剂和步骤(1)所得的前列地尔和磷脂混合物，搅拌使其溶解，作为油相；(3)水相的制备将等张剂加入水中，搅拌使其溶解，作为水相；(4)初乳的制备将步骤(3)油相加入步骤(2)水相中，高速剪切分散，形成初乳；(5)高压匀化将步骤(4)初乳高压匀化，即得；(6)步骤(1)至(5)均在氮气保护下操作。
2、 根据权利要求1所述的前列地尔脂微球的制备方法，其特征在于，歩骤(4)所述的高 速剪切分散时间为10 60分钟，剪切速度为3000~10000rpm，温度55 70。C。
3、 根据权利要求2所述的前列地尔脂微球的制备方法，其特征在于，歩骤(5)所述的高 压匀化压力为600 2000bar，匀化次数3 6次，温度15 30°C 。
4、 根据权利要求1 3任一所述的前列地尔脂微球的制备方法，其特征在于，歩骤(1)所 述的溶剂为乙醇、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、甲醇、丙酮中的一种或一种以上。
5、 根据权利要求1 3任一所述的前列地尔脂微球的制备方法，其特征在于，歩骤(1)中 所述的磷脂用量与前列地尔的重量比为1 10: 1。
6、 根据权利要求1 3任一所述的前列地尔脂微球的制备方法，其特征在于，所述的注射 用油为精制大豆油、花生油、红花油、棉籽油、橄榄油、椰子油、麻油、鱼油、中链甘油 单酯、中链甘油双酯、中链甘油三酯、油酸乙酯、乙酰化单甘油酯、丙二醇双酯、亚油酸 甘油酯、聚乙二醇月桂酸甘油酯中的一种或一种以上。
7、 根据权利要求6所述的前列地尔脂微球的制备方法，其特征在于，所述的注射用油为精 制大豆油和中链甘油三酯，两者重量比为l: 1。
8、 根据权利要求1 3任一所述的前列地尔脂微球的制备方法，其特征在于，所述的乳化 剂为大豆磷脂或蛋黄卵磷脂，其中磷脂酰胆碱的含量为80%以上。
9、 根据权利要求1 3任一所述的前列地尔脂微球的制备方法，其特征在于，所述的稳定 剂为油酸或其盐、胆酸或其盐、脱氧胆酸或其盐中的一种或一种以上。
10、 根据权利要求1 3任一所述的前列地尔脂微球的制备方法，其特征在于，所述的等张 剂为甘油、甘露醇、山梨醇、葡萄糖、蔗糖、乳糖、海藻糖中的一种或一种以上。
全文摘要
本发明涉及前列地尔脂微球的制备方法，由前列地尔，注射用油，乳化剂，稳定剂，等张剂，和注射用水制成。通过将药物和磷脂先溶解到适宜溶剂中，除去溶剂后再加入油相中，所制得的产品包封率有明显的提高，并且减少了降解产物的生成。
文档编号A61K9/16GK101664390SQ200910093399
公开日2010年3月10日 申请日期2009年9月29日 优先权日2009年9月29日
发明者刘启悦, 宋华先, 张占军, 宇 程, 马红萍, 海 黄 申请人:北京中海康医药科技发展有限公司