专利名称：：一种注射给药的环孢素药物组合物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种以环孢素为活性成分的注射给药的药物组合物，具体涉及以环孢素为活性成分的注射液和注射用冻干粉针剂药物组合物。
背景技术：
：环孢素是真菌代谢产生的含ll个氨基酸的环状多肽，能延长皮肤、心脏、肾脏、胰腺，骨髓，小肠和肺等同种异体移植器官和组织的存活，是第三代高效免疫抑制剂。研究表明，环孢素可抑制与细胞相关的反应，皮肤的迟发性过敏，抗宿主移植疾病和T细胞依赖性抗体的产生，临床广泛应用于预防和治疗器官移植和骨髓移植后的排斥反应和移植物的抗宿主病。同其他免疫抑制剂相比，环孢素仅仅具有非常低的骨髓毒性。此外，在临床上，环孢素还可应用于血液系统疾病，如再生障碍性贫血和特发性血小板减少性紫癜的治疗，还可应用于非血液系统疾病，如肾病综合征、I型糖尿病、哮喘、银屑病、类风湿性关节炎、心肌顿抑、溃疡性结肠炎、肺结节病、扁平苔藓、巴特综合征、贫血、获得性血友病、眼色素层炎、嗜酸性筋膜炎以及真菌感染等疾病的治疗。然而，随着环孢素制剂在临床上的长期使用，不得不考虑其潜在的严重毒副作用，特别是对肾的副作用。另外，环孢素制剂口服给药时，其生物利用度通常较低，仅有35%左右。环孢素具有强的疏水性，水溶性差，难于加工成高生物利用度的口服给药制剂，同时也难于加工成低毒副作用的静脉注射剂。目前，上市销售的环孢素注射液存在许多缺陷，主要缺陷是用大量的非离子表面活性剂Crem叩horEL(聚氧乙基蓖麻油)和乙醇来增溶，存在严重的潜在过敏反应，在临床应用时，必须预先采取预防过敏反应的措施。因此，现行环孢素注射液临床用药的顺应性和方便性均差。采用其他制剂技术制备的环孢素注射液和/或环孢素冻干制剂，往往存在稳定不高、用临床常用稀释剂无法获得符合注射剂要求的澄清透明溶液等技术问题。因此，同时解决环孢素注射剂存在的过敏反应、稳定性和溶解性是本领域的一个技术难题。针对环孢素口服给药的不足，有许多相关的研究发明。然而，针对现行上市环孢素注射液存在的缺陷，相关的研究发明则较少。CN1204261公开了包含活性成分环孢素、聚乙氧基化饱和羟基脂肪酸和含有一个或两个羟基的C2CV醇的一种硬胶囊药物组合物。CN1496742公开了包含活性成分环孢素、聚乙氧基化饱和羟基脂肪酸和脂肪酸的单、二和/或三甘油酯的混合物的一种口服给药的药物组合物。CN1204261和CN1496742公开的发明是以环孢素口服制剂的要求，针对口服给药生物利用度不高的缺陷，解决了相应的问题，但是，并不符合注射剂的要求，也不能解决环孢素注射剂存在的诸如稳定性、复溶性等许多问题。DE-OS3924207公开了一种静脉给药的含环孢素制剂，其中包含具有在分子上键合的羟基脂肪酸部分的一种或多种聚乙二醇衍生物与作为共溶剂的一种或多种醇。以聚乙二醇衍生物形式的优选表面活性剂是聚乙二醇-600-12-羟基-硬脂酸酯。但是，该发明仍然没有根本解决环孢素注射液存在稳定性和复溶性问题，迄今没能得到临床应用。因此，目前在临床上获得广泛应用的环孢素注射液，仍然是用大量非离子表面活性剂CremophorEL(聚氧乙基蓖麻油)和乙醇进行增溶，存在严重的过敏反应问题。近年来，针对环孢素注射液存在的诸多问题，已有多篇文献报道采用现代制剂技术将其制备成纳米粒、脂质体等制剂，但这些制剂存在制备工艺复杂、成本高、稳定性差等缺陷，还难成为市场可接受的产品。因此，开发毒副反应小、生产工艺简单、生产成本低、稳定性高、溶解性好、贮藏运输方便和临床应用依从性高的环孢素注射剂，是本领域技术人员期待解决的问题。
发明内容针对现有技术存在的上述不足，本发明的目的是提供一种不含聚氧乙基蓖麻油Crem叩horEL的注射给药的环孢素药物组合物，克服现有环孢素注射液存在的严重毒副作用等不足，解决现有技术无法解决的环孢素注射剂所存在的稳定性和复溶性问题，为广大患者提供一种毒副作用小、生产工艺简单、成本较低、稳定性高、溶解性好、储藏运输方便、临床用药依从性高的环孢素注射剂。本发明采用的技术方案是一种注射给药的环孢素药物组合物，包含(a)作为活性成份的环孢素，(b)作为增溶剂的聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯(SolutolHS15)，(c)作为助溶剂的醇类或酯类，和(d)作为溶剂的注射用水。在本发明的药物组合物中，所述活性组分环孢素与增溶剂SolutolHS15的重量比为l:550，优选重量比为i:io30;所述活性组分环孢素与助溶剂的重量比为l:130，优选重量比为1:220。若在其中添加其它表面活性剂(如聚山梨酯80、环糊精衍生物、PEG-400等)进行混合增溶，则环孢素与SolutolHS15的重量比可为1:250。在本发明的药物组合物中，所述增溶剂还可以加入聚山梨酯、环糊精衍生物、聚乙二醇(PEG)和中链甘油酸酯中的一种或多种。在本发明的药物组合物中，所述助溶剂为甲醇、乙醇、丙二醇、丙三醇、乙酸乙酯中的一种或多种，优选为乙醇、丙二醇和乙酸乙酯的一种或两种。在本发明的药物组合物中，所述聚山梨酯选自聚山梨酯20、聚山梨酯40、聚山梨酯60、聚山梨酯65、聚山梨酯80中的一种或多种，优选为聚山梨酯80在本发明的药物组合物中，所述环糊精衍生物选自羟丙基-a-环糊精、羟丙基-p-环糊精、羟丙基-Y-环糊精、甲基-(3-环糊精、磺丁基-J3-环糊精中的一种或多种，优选为羟丙基-(3-环糊精。在本发明的药物组合物中，所述聚乙二醇(PEG)选自PEG-200、PEG-300、PEG-400和PEG-600中的一种或多种，优选为PEG-400。在本发明的药物组合物中，所述中链甘油酸酯为C6d2脂肪酸的甘油单、双、三酯中的一种或多种，优选为Cs和Cw脂肪酸的甘油三酯的一种或两种。本发明的药物组合物的剂型为注射液和注射用冻干粉针剂。在本发明的药物组合物中，按照注射用冻干粉针剂的要求，需要加入赋形剂。在本发明的药物组合物中，所述赋形剂选自甘露醇、葡萄糖、山梨醇、右旋糖酐、蔗糖、甘氨酸中的一种或多种，优选葡萄糖、山梨醇、乳糖、甘露醇的一种或多种。在本发明的药物组合物中，所述活性成分环孢素的用量为环孢素注射剂临床应用的任何有效剂量。本发明是在对环孢素的增溶问题进行充分研究的基础上，对许多种表面活性剂、表面活性助剂、增溶剂的组合进行大量研究的结果。结果表明，聚乙二醇15-轻基硬脂酸酯(SolutolHS15)是解决环孢素增溶问题的一种优秀增溶剂，同时参照CN1204261、CN1496742和DE-OS3924207的部分
发明内容，按照注射剂的相关要求，针对现行环孢素注射剂存在的问题以及DE-OS3924207存在的不足进行了更细致的研究，从而获得令人惊喜的发现。本发明既解决了现行环孢素注射液因含大量CremophorEL而存在严重过敏反应的问题，又解决了原有技术无法解决的环孢素注射液所存在的稳定性和复溶性问题，同时还避免了采用纳米、脂质体等技术带来的制备工艺复杂、成本高等不足。本发明最独特的特点之一是在DE-OS3924207的
发明内容基础上，针对其存在的稳定性差和溶解性差的严重缺陷，通过大量创造性的研究工作，发现注射用水(DE-OS39242075的
发明内容没有水)在本发明的药物组合物中具有非常重要的作用，注射用水是能否同时解决环孢素注射剂存在的过敏反应、稳定性和溶解性这一技术难题的技术关键。研究发现，本发明的环孢素注射液中注射用水的添加量是影响稳定性和溶解性的关键，通常注射用水与助溶剂的重量比在535%:9565%范围内，能够获得稳定性和溶解性均良好的环孢素注射液。在上述范围以外制成的环孢素注射液易出现冻结、临床应用时易产生沉淀等问题。同时，注射用水对于本发明制备成环孢素冻干粉针剂也是非常重要的，本发明的冻干前水溶液具有很良好的加工性，能方便地溶解、过滤和冻干，也赋予本发明冻干粉针剂良好的复溶性。本发明另一个独特的特点之一是本发明的药物组合物能通过常规的冻干制剂生产步骤加工成环孢素冻干粉针剂，解决了原有技术无法解决的冻干粉针剂的稳定性和复溶性技术难题。本发明再一个独特的特点之一是通过大量的助溶剂筛选发现，乙酸乙酯对本发明的药物组合物的助溶作用显著，是原有技术没有公开过的。在本发明的冻干粉针剂制备过程中，乙酸乙酯和乙醇一样发挥良好的助溶作用。利用本发明制备成的环孢素注射剂，与普通环孢素注射液和利用上述
背景技术：
中制备的环孢素注射剂相比，具有以下显著特点1、该注射剂不含CremophorEL(聚氧乙基蓖麻油)，不会产生严重的过敏反应，剌激性小，显著提高了患者的临床依从性。2、该注射剂具有良好的水溶性，可以用临床常用溶媒溶解，获得澄明注射液，具有很高的临床医生用药的方便性。3、该注射剂具有很好的稳定性，可以常温(103(TC)储存，而普通环孢素注射液的储存温度为2(TC以下。4、该注射剂可制备成含水量低于3%的冻干制剂，有利于降低储存和运输成本。5、该注射剂可制备成冻干制剂，不含或含微量乙醇，显著减少了乙醇引起的刺激性。6、该注射剂的制备工艺简单，质量控制简便，生产成本较低，便于工业化生产，同时，也可大大降低患者用药的经济负担。具体实施方案下面通过具体优选实施方式对本发明作进一步描述，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。一种注射给药的环孢素药物组合物，包括(a)作为活性成份的环孢素，(b)作为增溶剂的聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯(SolutolHS15)，(c)作为助溶剂的醇类或酯类，和(d)作为溶剂的注射用水。本发明注射给药的环孢素药物组合物通过常规方法制备成注射液或冻干制剂。具体步骤包括(1)将环孢素与增溶剂和助溶剂依次混合和搅拌溶解；(2)将上述混合液制备成注射液，包括加入各种辅料(如赋形剂)，混合后加入活性炭搅拌除热原，经过0.8Mm滤膜脱炭后，再经0.22pm滤膜过滤除菌，分装；(3)将冷冻干燥前溶液经常规冷冻干燥技术制成冻干粉针剂。本发明最终需要制备成环孢素注射液和冻干粉针剂进行应用，下面将根据不同的剂型，按照每1000瓶药品计算列举实施例进行进一步说明。环孢素注射液，按照常规注射液的制备方法，经过配制、活性炭处理、过滤除菌、灌封等工序制备成环孢素注射液。列举实施例1到实施例8进行说明，但本发明不仅限于此。实施例l:环孢素250g，SolutolHS153500g，pH值自然，用75%(w/w)的乙醇注射用水溶液定容至5L。实施例2:环孢素250g，SolutolHS157500g，pH值自然，用75%(w/w)的乙醇注射用水溶液定容至10L。实施例3:环孢素250g，SolutolHS151250g，丙二醇200g,pH值自然，用75%(w/w)的乙醇注射用水溶液定容至10L。实施例4:环孢素250g，SolutolHS157500g，丙三醇150g，pH值自然，用95%(w/w)的乙醇注射用水溶液定容至10L。实施例5:环孢素250g，SolutolHS157500g，丙二醇100g，丙三醇50g，pH值自然，用65%(w/w)的乙醇注射用水溶液定容至10L。实施例6:环孢素250g，SolutolHS15500g，PEG-400200g，pH值自然，用75%(w/w)的乙醇注射用水溶液定容至10L。实施例7:环孢素250g，SolutolHS151600g，羟丙基-卩-环糊精50g，聚山梨酯801400g，中链甘油三酯50g，pH值自然，用75%(w/w)的乙醇注射用水溶液定容至10L。实施例8:环孢素250g，SolutolHS15500g，甲基-|3-环糊精500g，聚山梨酯401000g，pH值自然，用75%(w/w)的乙醇注射用水溶液定容至10L。环孢素冻干粉针剂，按照常规冻干制剂的制备方法，经过配制、活性炭处理、过滤、分装、冷冻千燥等工序制备成环孢素冻干粉针剂。列举实施例9到实施例21进行说明，但本发明不仅限于此。实施例9:环孢素250g，SolutolHS153500g，无水乙醇650g，甘露醇1500g，pH值自然，注射用水溶液定容至15L。实施例10:环孢素250g，SolutolHS153500g，无水乙醇650g，甘露醇1000g，乳糖700g，pH值自然，注射用水溶液定容至15L。实施例ll:环孢素250g，SolutolHS1512500g，无水乙醇1200g，甘露醇1500g，pH值自然，注射用水溶液定容至25L。实施例12:环孢素250g，SolutolHS1512500g，无水乙醇1200g，甘露醇1000g，右旋糖酐800g，pH值自然，注射用水溶液定容至25L。实施例13:环孢素250g，无水乙醇750g，SolutolHS151600g，羟丙基-(3-环糊精50g，聚山梨酯801400g，中链甘油三酯50g，甘露醇2500g，pH值自然，，注射用水溶液定容至15L。实施例14:环孢素250g，无水乙醇850g，SolutolHS15500g，羟丙基-|3-环糊精100g，聚山梨酯402000g，中链甘油三酯70g，甘露醇1500g，乳糖500g，pH值自然，，注射用水溶液定容至15L。实施例15:环孢素250g，无水乙醇250g，SolutolHS152500g，羟丙基-(3-环糊精100g，聚山梨酯40800g，中链甘油三酯70g，甘露醇1500g，乳糖500g，pH值自然，，注射用水溶液定容至15L。实施例16:环孢素250g，无水乙醇550g，SolutolHS151500g，羟丙基-[3-环糊精100g，聚山梨酯40800g，PEG4001000g，中链甘油三酯60g，甘露醇1500g，葡萄糖600g，pH值自然，注射用水溶液定容至15L。实施例17:环孢素250g，无水乙醇650g，SolutolHS152000g，磺丁基-(3-环糊精80g，聚山梨酯40800g，中链甘油三酯60g，甘露醇1000g，蔗糖900g，pH值自然，，注射用水溶液定容至15L。实施例18:环孢素250g，乙酸乙酯550g，SolutolHS152000g，磺丁基-卩-环糊精80g，聚山梨酯40800g，中链甘油三酯60g，甘露醇2000g，pH值自然，，注射用水溶液定容至15L。实施例19:环孢素250g，无水乙醇750g，SolutolHS151600g，羟丙基-p-环糊精50g，聚山梨酯401400g，中链甘油三酯50g，甘露醇1000g，山梨醇600，pH值自然，，注射用水溶液定容至15L。实施例20:环孢素250g，乙酸乙酯750g，SolutolHS151600g，羟丙基-P-环糊精50g，聚山梨酯401400g，中链甘油三酯50g，甘露醇1000g，甘氨酸700，pH值自然，，注射用水溶液定容至15L。实施例21:环孢素250g，无水乙醇200g，乙酸乙酯300g，SolutolHS151500g，羟丙基-J3-环糊精100g，聚山梨酯40800g，PEG4001000g，中链甘油三酯60g，甘露醇1500g，葡萄糖600g，pH值自然，，注射用水溶液定容至15L。本发明对溶液pH值及pH值调节剂的种类也进行过细致的研究，研究结果显示，在pH值210范围内的环孢素的稳定性受pH值影响较小，pH值调节剂的种类对环孢素的稳定性影响也不显著，本发明的药物组合物冻干前溶液不调pH值，其pH值在67范围内，符合注射剂的pH值要求。本发明对环孢素的用量未明确限定，其用量为环孢素注射剂临床应用的任何有效剂量。根据临床文献，环孢素注射液的用量通常为250mg/瓶，因此，本发明只列举了剂量为250mg/瓶的实施例。就本发明而言，环孢素的用量无须限定。本发明的最终目的是制备成具有临床应用价值的不含聚氧乙基蓖麻油CremophorEL的低过敏反应的环孢素注射液和/或环孢素冻干制剂，下面列举实施例22和实施例23对本发明的实施效果进行说明。实施例22:加速试验和长期稳定性试验研究。利用本发明上述优选处方制备出的环孢素注射液和环孢素冻干粉针样品，按照"化学药物稳定性研究技术指导原则"进行加速试验和长期稳定性试验研究。加速试验(40°C)和长期稳定性试验(25°C)6个月，测定其优选的环孢素注射液实施例1和环孢素冻干粉针实施例9的含量、有关物质等质量指标，结果见表1表4所示。表1.加速试验结果(环孢素注射液)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>表3.长期稳定性试验结果(环孢素注射液)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>表4.长期稳定性试验结果(环孢素冻干粉针)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>\\表1表4结果显示，利用本发明制备的环孢素注射液和环孢素冻干粉针均具有良好的稳定性。实施例23:刺激性试验研究利用本发明最优选处方制备出的环孢素注射液和环孢素冻干粉针样品，按照"化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则"，对全身用药的过敏性、溶血性、血管刺激性等进行了试验研究，以市售环孢素注射液为对照。结果表明本发明制备出的环孢素注射液和环孢素冻千粉针对全身用药无溶血性、无血管刺激性和无过敏反应。权利要求1、一种注射给药的环孢素药物组合物，其特征在于，包括(a)作为活性成份的环孢素，(b)作为增溶剂的聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯(SolutolHS15)，(c)作为助溶剂的醇类或酯类，和(d)作为溶剂的注射用水。2、根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述活性组分环孢素与增溶剂SolutolHS15的重量比为1:550;所述活性组分环孢素与助溶剂的重量比为1:130。3、根据权利要求1和2所述的药物组合物，其特征在于，所述活性组分环孢素与增溶剂SolutolHS15的重量比为1:1030;所述活性组分环孢素与助溶剂的重量比1:220。4、根据权利要求l、2或3所述的药物组合物，其特征在于，所述增溶剂还包括聚山梨酯、环糊精衍生物、聚乙二醇(PEG)和中链甘油酸酯中的一种或多种，则环孢素与SolutolHS15的重量比可为1:250;所述助溶剂为甲醇、乙醇、丙二醇、丙三醇、乙酸乙酯中的一种或多种，优选为乙醇和丙二醇的一种或两种。5、根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，还包括(e)赋形剂。6、根据权利要求4所述的药物组合物，其特征在于，所述聚山梨酯选自聚山梨酯20、聚山梨酯40、聚山梨酯60、聚山梨酯65、聚山梨酯80中的一种或多种，优选为聚山梨酯80;所述环糊精衍生物选自羟丙基-a-环糊精、羟丙基-P-环糊精、羟丙基-Y-环糊精、甲基-卩-环糊精、磺丁基-(3-环糊精中的一种或多种，优选为轻丙基-P-环糊精；所述聚乙二醇(PEG)选自PEG-200、PEG-300、PEG-400和PEG-600中的一种或多种，优选为PEG-400;所述中链甘油酸酯为QCu脂肪酸的甘油单、双、三酯中的一种或多种，优选为Q和d。月旨肪酸的甘油三酯的一种或两种。7、根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述赋形剂选自甘露醇、乳糖、葡萄糖、山梨醇、右旋糖酐、蔗糖、甘氨酸中的一种或多种，优选葡萄糖、山梨醇、乳糖、甘露醇的一种或多种。全文摘要一种注射给药的环孢素药物组合物，包括作为活性成份的环孢素、作为增溶剂的聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯(SolutolHS15)、作为助溶剂的醇类或酯类和作为溶剂的注射用水。该药物组合物可制备成注射液或冻干制剂。本发明既解决了现行环孢素注射液因含大量CremophorEL而存在严重过敏反应的问题，不会产生严重的过敏反应，刺激性小；又解决了原有技术无法解决的环孢素注射液所存在的稳定性和复溶性问题，同时还避免了采用纳米、脂质体等技术带来的制备工艺复杂、成本高等不足；而且解决了原有技术无法解决的冻干粉针剂的稳定性和复溶性技术难题，具有稳定性好和溶解性良的特点；该注射剂的制备工艺简单，质量控制简便，生产成本较低，可大大降低患者用药的经济负担。文档编号A61K47/40GK101502641SQ20091010324公开日2009年8月12日申请日期2009年2月23日优先权日2009年2月23日发明者姚定全申请人:姚定全