一种恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂及其制备方法和用途
【专利摘要】本发明公开了一种恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂及其制备方法和用途。所述恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂含有恩替卡韦（Entecavir），磷脂，胆固醇，和载脂蛋白A1（ApoA1）；恩替卡韦、磷脂、胆固醇和载脂蛋白A1的重量比为5∶7∶3∶5-20。
【专利说明】一种恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂及其制备方法和用途
【技术领域】
[0001]本发明涉及药物脂质体领域，尤其涉及一种恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂及其制备方法和用途。
【背景技术】
[0002]目前，已有12种以上的纳米材料载药系统(nanoparticle drug deliverysystem)获得FDA的临床批文而上市，所有这些已上市的纳米材料载药系统都不具备器官革巴向性(organ-specific targeting)。[0003]世界上共有7种已上市(FDA)的抗乙肝药物，两种是干扰素和PEG化的干扰素，另外5种是核苷酸的类似物，其中PEG化的干扰素，tenofovir,恩替卡韦(entecavir)这三种药将在未来占主导作用。entecavir在中国的抗乙肝药物场销售额每年递增，2008年我国恩替卡韦(entecavir)销售行业年销售额达到了 8.56亿元，同比增加了 19.1%, 2009年1-11月，我国恩替卡韦行业销售额达到了 11.24亿元，同比增长了 31.3%, 2010年，研制抗乙肝药物entecavir的美国制药公司百时美施贵宝公布了恩替卡韦的年全球销售额，为
9.31亿美元，2011年，恩替卡韦的年全球销售额为12亿美元，由此可见，抗乙肝药物市场发展潜力大，远未饱和。
[0004]然而现在已上市的口服抗乙肝药物entecavir在人体中60%_70%经肾脏排除，造成了 entecavir肾毒性的药物副作用，小于1%的entecavir由感染乙肝病毒的器官肝脏吸收，因此，99%左右的entecavir到了不该去的人体器官。
[0005]因此，本领域迫切需要提供一种可有效达至肝靶向部位的抗乙肝药物entecavir。
【发明内容】
[0006]本发明旨在提供一种恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂。
[0007]本发明的另一个目的是提供所述恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂的制备方法。
[0008]本发明的再一个目的是提供所述恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂的用途。
[0009]在本发明的第一方面，提供了一种恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂，所述恩替卡韦闻密度脂蛋白包封制剂含有恩替卡韦(Entecavir),憐脂，胆固醇，和载脂蛋白Al(ApoAl)；
[0010]恩替卡韦、磷脂、胆固醇和载脂蛋白Al的重量比为5: 7: 3: 5-20。
[0011]在另一优选例中，所述恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂的粒径为30_50nm ;优选30_40nm。
[0012]在另一优选例中，恩替卡韦、磷脂、胆固醇和载脂蛋白Al的重量比为5:7:3: 8-10。
[0013]在另一优选例中，所述的磷脂是氢化大豆磷脂。
[0014]在另一优选例中，所述恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂的包封率为85 - 99% ;优选 90 — 99%。[0015]在本发明的第二方面，提供了一种如上所述的本发明提供的恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂的制备方法，所述方法包括步骤:
[0016](1)将胆固醇、磷脂和缓冲液I混合，通过超临界流体反应釜得到装载缓冲液I的高密度脂蛋白颗粒前体；
[0017](2)将装载缓冲液I的闻密度脂蛋白颗粒如体和载脂蛋白Al混合，超声处理使闻密度脂蛋白颗粒粒径为30-50nm ；
[0018](3)步骤(2)得到的高密度脂蛋白颗粒过分子筛，用缓冲液2洗脱得到溶液，其中憐脂的内相是缓冲液I，外相是缓冲液2 ;和
[0019](4)将恩替卡韦和步骤(3)得到的溶液混合，在50_60°C孵育得到如上所述的本发明提供的恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂。
[0020]在另一优选例中，所述的缓冲液I是铵盐缓冲液，所述的缓冲液2是磷酸缓冲液，缓冲液2的pH值高于缓冲液I的pH值，差值大于等于3。
[0021]在另一优选例中，步骤(1)中超临界流体反应釜压力为200_240bar ;优选200-220bar。
[0022]在另一优选例中，步骤(1)中，以混合物的总体积计，其中磷脂浓度为0.28g/ml-0.35g/ml ;优选 0.30g/ml_0.32g/ml。
[0023]在本发明的第三方面，提供了一种如上所述的本发明提供的恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂的用途，用于制备治疗乙肝的药物。
[0024]据此，本发明提供了一种可有效达至肝靶向部位的抗乙肝药物entecavir的制剂。
【专利附图】
【附图说明】
[0025]图1显示了本发明得到的恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂中恩替卡韦在纳米材料载药系统中形成的独特的复合物结晶。
[0026]图2显示了制备实施例1和2分别得到的恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂和包封于脂质体中的恩替卡韦的体外释放情况；其中，
[0027]曲线A是恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂的释放曲线，
[0028]曲线B是包封于脂质体中的恩替卡韦的释放曲线。
[0029]图3显示了游离的荧光标记药物恩替卡韦口服(I小时)后在小鼠的各种器官的分布情况。
[0030]图4显示了本发明得到的恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂中荧光标记药物恩替卡韦静脉注射(I小时)后在小鼠的各种器官的分布情况。
[0031]图5显示了注射制备实施例1得到的恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂和口服游离恩替卡韦的抑制乙肝病毒DNA复制曲线；其中，
[0032]曲线A是注射恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂(0.005mg/kg)的抑制乙肝病毒DNA复制曲线，
[0033]曲线B是口服游离的恩替卡韦(0.05mg/kg)的抑制乙肝病毒DNA复制曲线。【具体实施方式】[0034]发明人经过广泛而深入的研究，使用高密度脂蛋白(HDL)包封恩替卡韦获得一种纳米级恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂，包封工艺中将超临界流体技术、利用PH梯度差的主动载药方式和超声处理有机结合，获得的恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂包封率高，并且大幅度提高了恩替卡韦的安全性和有效性。
[0035]如本文所用，“恩替卡韦”的结构如式I所示:
【权利要求】
1.一种恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂，其特征在于，所述恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂含有恩替卡韦(Entecavir),磷脂,胆固醇,和载脂蛋白Al (ApoAl)； 恩替卡韦、磷脂、胆固醇和载脂蛋白Al的重量比为5: 7: 3: 5-20。
2.如权利要求1所述的恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂，其特征在于，所述恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂的粒径为30-50nm ;优选30_40nm。
3.如权利要求1所述的恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂，其特征在于，恩替卡韦、磷月旨、胆固醇和载脂蛋白Al的重量比为5: 7: 3: 8-10。
4.如权利要求1-3任一所述的恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂，其特征在于，所述的磷脂是氢化大豆磷脂。
5.如权利要求1所述的恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂，其特征在于，所述恩替卡韦高密度脂蛋白包封制 剂的包封率为85 — 99% ;优选90 — 99%。
6.一种如权利要求1-5任一所述的恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂的制备方法，其特征在于，所述方法包括步骤: (1)将胆固醇、磷脂和缓冲液I混合，通过超临界流体反应釜得到装载缓冲液I的高密度脂蛋白颗粒前体； (2)将装载缓冲液I的高密度脂蛋白颗粒前体和载脂蛋白Al混合，超声处理使高密度脂蛋白颗粒粒径为30-50nm ； (3)步骤(2)得到的高密度脂蛋白颗粒过分子筛，用缓冲液2洗脱得到溶液，其中磷脂的内相是缓冲液I，外相是缓冲液2 ； (4)将恩替卡韦和步骤(3)得到的溶液混合，在50-60°C孵育得到如权利要求1-5任一所述的恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂。
7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述的缓冲液I是铵盐缓冲液，所述的缓冲液2是磷酸缓冲液，缓冲液2的pH值高于缓冲液I的pH值，差值大于等于3。
8.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中超临界流体反应釜压力为200-240bar ;优选 200_220bar。
9.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，以混合物的总体积计，其中磷脂浓度为 0.28g/ml-0.35g/ml ;优选 0.30g/ml_0.32g/ml。
10.一种如权利要求1-7任一所述的恩替卡韦高密度脂蛋白包封制剂的用途，其特征在于，用于制备治疗乙肝的药物。
【文档编号】A61K9/14GK103655477SQ201210321702
【公开日】2014年3月26日 申请日期:2012年9月3日 优先权日:2012年9月3日
【发明者】唐为钢 申请人:唐为钢