专利名称：见血清提取物及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及见血清提取物及其用途。
背景技术：
见血清为兰科植物脉羊耳兰Liparis nervosa (Thunb. ) Lindl.的全草,又称“立地好”、“黑兰”、“矮胖儿”，性寒，味苦，凉血止血、清热解毒。见血清常生长在山野、溪边等阴湿处，分布于四川、湖北、台湾等地，目前民间用药材均为野生。
迄今，国内外对见血清的研究报道较少，文献记载也不够详尽。在对见血清的止血研究上，周继铭等使用见血清与其他药材进行组方，发现复方见血清止血药对临床 14类54例手术切口有显著止血效果，药物能被机体吸收，无继发性出血，伤口快速愈合 (周继铭，刘常五，冉崇行等.复方见血清外用止血药的初步研究[J].中国医院药学杂志，1983，3(3) :101-2.)。
目前，还未见有见血清有效部位和活性成分的相关报道。发明内容
本发明的目的在于提供一种见血清提取物，以及该提取物的用途。
本发明提供了一种见血清乙醇提取物，它是由如下方法制成取见血清药材，将其粉碎后用60、5%的乙醇提取，提取液回收溶剂后，即得见血清乙醇提取物。
上述提取方法包括冷浸、回流、超声或微波提取。
本发明还提供了一种见血清乙醚提取物，它是由如下方法制成取上述见血清乙醇提取物，加水混悬后依次用石油醚、乙醚萃取，取乙醚萃取液，回收溶剂后，即得见血清乙醚提取物。将乙醚提取物经过反复硅胶柱层析，采用不同比例的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，石油醚乙酸乙酯(30:1)得到β-谷甾醇，石油醚乙酸乙酯(20:1)得到木栓酮，石油醚乙酸乙酯(10:1)得到乙酰胺。
本发明还提供了一种见血清乙酸乙酯提取物，它是由如下方法制成取上述见血清乙醇提取物，加水混悬后依次用石油醚、乙醚、乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯萃取液，回收溶剂后，即得见血清乙酸乙酯提取物。
本发明还提供了一种见血清正丁醇提取物，它是由如下方法制成取上述见血清乙醇提取物，加水混悬后依次用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，取正丁醇萃取液，回收溶剂后，即得见血清正丁醇提取物。将正丁醇提取物加入蒸馏水后上DlOl大孔吸附树脂，用包括浓度为60%的乙醇进行梯度洗脱，回收60%部位浸膏，然后通过硅胶短柱层析，分别以不同比例的氯仿-甲醇梯度洗脱，氯仿甲醇(15:1)得到3，5- 二(3-甲基-2- 丁烯) 苯甲酸-4-0- β -D-吡喃木糖-(I — 2) - β -D-吡喃葡萄糖苷，氯仿甲醇(10:1)得到腺苷。
本发明还提供 了一种见血清水相提取物，它是由如下方法制成取上述见血清乙醇提取物，加水混悬后依次用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，将萃余液浓缩后，即得见血清水相提取物。
本发明还提供了上述的见血清提取物在制备止血药物中的应用。
本发明提供的见血清乙醇提取物、乙醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、 水相提取物或其混合物加上药学上可接受的载体形成组合物。
本发明所提供的见血清提取物均具有良好的止血活性，可广泛用于治疗体内、外出血及手术出血。
具体实施方式
实施例1见血清乙醇提取物的制备
取见血清药材，将其粉碎后加入85%的乙醇回流提取2次，每次3h，每次加入药材 10倍量(W/V)的乙醇，趁热过滤，合并滤液，回收至无醇味后干燥，即制得见血清乙醇提取物。
上述用乙醇提取时还可采用冷浸、回流、超声或微波提取。
实施例2 见血清各有效部位的制备
取实施例1制备的见血清乙醇提取物，加水混悬后，依次用等体积的石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，每种溶剂萃取3次，分别收集石油醚萃取液、乙醚萃取液、乙酸乙酯萃取液、正丁醇萃取液以及萃余液，回收溶剂后，60°C减压干燥，分别得到见血清石油醚部位、乙醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水相部位。
将见血清乙醚提取物经过反复硅胶柱层析，以不同比例的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，石油醚乙酸乙酯(30:1)得到化合物(1)，石油醚乙酸乙酯(20 :1)得到化合物(2)， 石油醚乙酸乙酯(10:1)得到化合物(3)，应用多种光谱及波普技术(IR，UV，MS，NMR)对化合物(I )、化合物(2 )和化合物(3 )进行结构鉴定，确定化合物(I)为β-谷留醇，化合物(2)为木栓酮，化合物(3)为乙酰胺。化合物(I)、化合物(2)和化合物(3)的结构式如下
权利要求
1.一种见血清乙醇提取物，其特征在于由如下方法制成取见血清药材，将其粉碎后用60、5%的乙醇提取，提取液回收溶剂后，即得见血清乙醇提取物。
2.—种见血清乙醚提取物，其特征在于由如下方法制成取权利要求1所述的见血清乙醇提取物，加水混悬后依次用石油醚、乙醚萃取，取乙醚萃取液，回收溶剂后，即得见血清乙醚提取物。
3.—种见血清乙酸乙酯提取物，其特征在于由如下方法制成取权利要求1所述的见血清乙醇提取物，加水混悬后依次用石油醚、乙醚、乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯萃取液，回收溶剂后，即得见血清乙酸乙酯提取物。
4.一种见血清正丁醇提取物，其特征在于由如下方法制成取权利要求1所述的见血清乙醇提取物，加水混悬后依次用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，取正丁醇萃取液， 回收溶剂后，即得见血清正丁醇提取物。
5.一种见血清水相提取物，其特征在于由如下方法制成取权利要求1所述的见血清乙醇提取物，加水混悬后依次用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，将萃余液浓缩后，即得见血清水相提取物。
6.权利要求1-5任意一项所述的见血清提取物在制备止血药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种见血清乙醇提取物、乙醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、水相提取物以及包括乙醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和水相提取物活性成分的提取物，本发明还公开了上述见血清提取物的用途。本发明提供的见血清提取物均具有良好的止血活性，可广泛用于治疗体内、外出血及手术出血。
文档编号A61P7/04GK103041176SQ20131000612
公开日2013年4月17日 申请日期2013年1月8日 优先权日2013年1月8日
发明者宋芹, 杨伟峰, 苟小军, 陈封政, 颜军, 郭晓强 申请人:成都大学