通过使用单链多肽融合蛋白进行疼痛的治疗的制作方法

通过使用单链多肽融合蛋白进行疼痛的治疗的制作方法【专利摘要】治疗分子的使用，用于特定疼痛病状的治疗，其中所述治疗分子是单链的多肽融合蛋白，其包含：非细胞毒性的蛋白酶，或其片段，所述蛋白酶或蛋白酶片段能够剪切疼痛感应传入器中胞吐融合器的蛋白；能够结合所述疼痛感觉传入器上结合位点的靶向部分，所述结合位点能够进行细胞内吞，以便被并入到所述疼痛感觉传入器的内涵体中；蛋白酶剪切位点，在该位点所述融合蛋白可被蛋白酶剪切，其中所述蛋白酶剪切位点位于所述非细胞毒性的蛋白酶或其片段和所述靶向部分之间；和转运区域，其能够从内涵体中转运所述蛋白酶或蛋白酶片段，跨内涵体膜并进入所述疼痛感觉传入器的细胞溶胶。【专利说明】通过使用单链多肽融合蛋白进行疼痛的治疗本申请是申请日为2007年6月I日、申请号为200780028089.0、题为“通过使用单链多肽融合蛋白进行疼痛的治疗”的专利申请的分案申请。[0001]本发明涉及非细胞毒性的融合蛋白的用途，用于特定类型疼痛的治疗。[0002]根据其在靶细胞上产生效果的类型，毒素可被一般地分为两组。更详细地，第一组毒素杀死它们的天然靶细胞，并因此是通常所说的细胞毒性毒素分子。这一组的毒素特别地由植物毒素，如蓖麻毒素和相思豆毒素；并由细菌毒素，如白喉毒素和假单胞菌外毒素A(PseudomonasexotoxinA)示例。细胞毒毒素在“魔法子弹”(如，免疫偶联物(immunoconjugate)，其包含细胞毒毒素组分和与靶细胞特定标记进行结合的抗体)的设计中已经吸引了极大的兴趣，其被用于细胞紊乱和状况，如癌症的治疗。细胞毒毒素典型地通过抑制蛋白合成的细胞过程杀死它们的靶细胞。[0003]第二组毒素，其被称作非细胞毒性的毒素，不杀死(如它们的名字所证实)它们天然的靶细胞。非细胞毒性的毒素与它们的细胞毒性相似物相比，吸引了较少的商用兴趣，并且通过抑制蛋白合成以外的细胞过程对靶细胞产生它们的影响。非细胞毒性的毒素通过多种植物，并通过多种微生物，如梭菌属某一种(Clostridiumsp.)和奈瑟菌属某一种(Neisseriasp.)产生。[0004]梭菌神经毒素是典型地具有150kDa数量级分子量的蛋白。它们由多种细菌属类物种产生，特别地由梭菌类产生，最重要地，由破伤风梭菌(C.tetani)和肉毒梭菌(C.botulinum)、丁酸梭菌(C.butyricum)和阿根廷梭菌(C.argentinense)的几种菌株产生。目前有8种不同类型的梭菌毒素，即:破伤风毒素，和血清型A、B、Cl、D、E、F和G的肉毒菌神经毒素，并且它们都共享相似的结构和作用形式。[0005]梭菌神经毒素代表了一组主要的非神经毒性的毒素分子，并通过宿主细菌作为单一多肽被合成，所述单一多肽通过蛋白水解剪切事件被翻译后修饰，以形成由二硫键连接在一起的两个多肽链。这两条链被称为具有约IOOkDa分子量的重链(H-链)，和具有约50kDa分子量的轻链(L-链)。[0006]L-链具有蛋白酶功能(锌依靠肽链内切酶活性)并显示出对胞吐(exocytic)过程中涉及的囊泡和/或质膜相关蛋白高的底物特异性。来自不同梭菌属种或血清型的L-链可以水解三种底物蛋白之一中的不同但特异的肽键，所述三种底物蛋白为小突触小泡蛋白(synaptobrevin)、突触融合蛋白(syntaxin)或SNAP-25。这些底物是神经分泌机制的重要组分。[0007]奈瑟菌属,最重要地来自淋球菌(N.gonorrhoeae)的,产生功能相似的非细胞毒性蛋白酶。这些蛋白酶的一个实例是IgA蛋白酶(参见W099/58571)。[0008]现有技术中已经明确记载:毒素分子可以被重新靶向并非该毒素的天然靶细胞的细胞。当被所谓的重新靶向时，修饰的毒素能够结合目标靶细胞，并且接下来转运到细胞溶胶，能够对祀细胞产生其效应。所述重新祀向通过用不同的TM(祀向部分TargetingMoiety)替换该毒素的天然靶向部分(TM)完成。在这一点上，TM被选择以便其结合目标靶细胞，并允许修饰的毒素后续进入革巴细胞内的内涵体之内。修饰的毒素也包含转运区域，以使非细胞毒性的蛋白酶进入细胞溶胶。该转运区域可以是该毒素的天然转运区域，或其可以是从具有转运活性的微生物蛋白中获得的不同转运区域。[0009]上述TM替换可以通过普通技术人员公知的传统化学偶联技术被实现。在这一点上，参考Hermanson,G.T.(1996),Bioconjugatetechniques,AcademicPress,并参考Wong,S.S.(1991),Chemistryofproteinconjugationandcross-linking,CRCPress。[0010]然而，化学偶联通常是不精确的。例如，偶联之后，TM可以在多于一个连接位点被连接到该偶联物的剩余部分。[0011]化学偶联也难以控制。例如，TM可以在蛋白酶组分和/或转运组分的连接位点被连接到修饰毒素的剩余部分。当仅连接到所述组分之一(优选地在单一位点)对治疗效力是期望的时候，这是有问题的。[0012]因此，化学偶联导致混合种类的修饰毒素分子，这是不理想的。[0013]作为化学偶联的替代方案，TM代替可以被单一多肽融合蛋白的重组制备实现(参见TO98/07864)。该技术基于体内细菌机制，通过该机制，原生梭菌神经毒素(即，全毒素)被制备，并产生具有以下结构排列的融合蛋白:NH2-[蛋白酶组分]-[转运组分]-[TM]-C00H[0014]根据W098/07864，TM被置于朝向融合蛋白的C-末端。该融合蛋白随后通过用蛋白酶处理被激活，所述蛋白酶在蛋白酶组分和转运组分之间剪切。双链蛋白随后被产生，其包含共价连接(通过二硫键)到含有转运组分加TM的另一单一多肽链的，作为单一多肽链蛋白酶组分的蛋白酶组分。尽管W098/07864的方法遵循了(按照融合蛋白的结构排列而言)梭菌全毒素的天然表达系统，但是本发明人已经发现该系统可以导致某些融合蛋白的产生，其对预期的靶细胞具有本质上降低的结合能力。[0015]这一问题在治疗特定类型疼痛的情况下特别相关。[0016]本发明通过提供用于生产治疗特定类型疼痛的药物的治疗分子的使用，解决了一个或多个上述问题，其中所述治疗分子是单链的多肽融合蛋白，其包含:a.非细胞毒性的蛋白酶(anon-cytotoxicprotease)或其片段,所述蛋白酶或蛋白酶片段能够剪切疼痛感应传入器(或伤害感应传入器，nociceptivesensoryafferent)中细胞外融合器(exocyticfusionapparatus)的蛋白；b.能够结合疼痛感应传入器上之结合位点(BindingSite)的祀向部分(TargetingMoiety)，所述结合位点能够进行细胞内吞作用，以被并入疼痛感应传入器中的内涵体内；c.蛋白酶剪切位点(proteasecleavagesite),在该位点融合蛋白可被蛋白酶剪切，其中所述蛋白酶剪切位点位于非细胞毒性蛋白酶或其片段和靶向部分之间；和d.转运区域(translocationdomain),其能够将蛋白酶或蛋白酶片段从内涵体中跨内涵体膜转运，并进入疼痛感应传入器的细胞溶胶中。[0017]本发明人已经发现W098/07864的融合蛋白系统对需要N-末端区域与疼痛感应传入器上的结合位点相互作用的TMs来说不是最优化的。这一问题对于TMs来说特别尖锐，所述TMs需要特定的N-末端氨基酸残基或包括N-末端氨基酸残基的特定序列的氨基酸残基，用以与疼痛感应传入器上的结合位点相互作用。[0018]与W098/07864相反，本发明采用了非细胞毒性的融合蛋白，其中所述融合体的TM组分包括内部区域中的相关结合区域或朝向TM中部(B卩，线性肽序列的中部)放置的氨基酸序列，或优选地，朝向TM的N-末端放置，或更优选地位于或接近N-末端的氨基酸序列。所述N-末端区域能够结合疼痛感应传入器上的结合位点，并且所述TM优选地有对特定的和界定的氨基酸残基序列有要求，以在其N-末端是游离的。[0019]本文所述的化合物可被用于治疗患有一种或多种类型慢性疼痛的患者，所述慢性疼痛包括神经性疼痛、炎症疼痛、头痛、身体疼痛、内脏疼痛和牵涉性疼痛。[0020]“治疗”，用在这里，表示医学上的处理。它包括，例如，给予本发明的化合物，以预防疼痛或减轻其严重性。[0021]术语“疼痛”，用在这里，表示任何不愉快的感官经历，通常与身体疾病相关。身体疾病对医生可能明显或可能不明显。疼痛有两种类型:慢性和急性。“急性疼痛”是突然发生的，短时间的疼痛。一种类型的急性疼痛，例如，是在皮肤或其它表面组织的伤口处，如由割伤或烧伤引起的，感觉到的皮肤疼痛。皮肤疼痛感受器仅终止于皮肤以下，并且由于高浓度的神经末端，产生良好定义的短期局部疼痛。“慢性疼痛”是急性疼痛以外的疼痛。慢性疼痛包括神经性疼痛、炎症疼痛、头痛、身体疼痛、内脏疼痛和牵涉性疼痛。1.神经性疼痛[0022]本发明所述的化合物可以被用于治疗由任何以下神经性疼痛状况引起的或与其相关的疼痛。“神经性疼痛”表示来自外周神经系统、中枢神经系统或两者的不正常的感觉输入，导致不适。A.神经性疼痛的症状[0023]神经性疼痛的症状可以包括持续、自发的疼痛，以及痛觉异常(allodynia)(对通常非疼痛的刺激的疼痛反应)、痛觉增敏(hyperalgesia)(对通常仅引起轻微不适的疼痛刺激，如针刺，产生的加重的反应)、或痛觉过敏(hyperpathia)(短暂的不适成为长期严重的疼痛)。B.神经性疼痛的原因[0024]神经性疼痛可由以下任意原因引起。1.外伤性损害，例如，如神经压迫伤(如，神经压迫、神经拉伸、神经卡压(nerveentrapment)或不完整的神经切面);脊柱伤(如，脊柱的一半切除);腿截肢；挫伤；炎症(如，脊柱炎症)；或手术过程。2.缺血性事件，包括，例如，中风和心脏病发作。3.感染物4.暴露于毒性试剂，包括，例如，药物、酒精、重金属(如铅、砷、汞)、工业试剂(如，溶剂、源自胶水的烟气)或一氧化二氮。5.疾病，包括，例如炎症性疾病，神经性肿瘤，获得性免疫缺陷综合症(acquiredimmunedeficiencysyndrome(AIDS)),莱姆病(Lymesdisease),麻风病，代谢疾病，外周神经疾病，如神经瘤、单神经病或多神经病。C.神经性疼痛的种类1.神经痛神经痛是沿一条或多条特异神经路径辐射的疼痛，通常在神经结构上没有任何可显示的病理改变。神经痛的起因是多种多样的。化学腐蚀、炎症、外伤(包括手术)、被附近的结构(如肿瘤)压迫和感染都可以引发神经痛。但是，在多种情况下，起因是未知的或不可识别的。神经痛在老年人中最常见，但是它可以发生在任何年龄。神经痛，包括但不限于三叉神经痛、疱疫后神经痛(post-herpeticneuralgia)、疱疫后神经痛(postherpeticneuralgia)、舌咽神经痛、坐骨神经痛和非典型性面部疼痛。[0025]神经痛是分布在单一神经或多个神经中的疼痛。实例是三叉神经痛、非典型性面部疼痛和疱疹后神经痛(由带状疱疹或疱疹引起)。受影响的神经负责感觉从下颚到额头的面部区域中的触摸、温度和压力。该疾病通常引起短暂的剧痛，通常少于2分钟并仅发生在面部的一侧。疼痛可以多种方式描述，如“剧痛(stabbing)”、“剧烈的(sharp)”、“闪电般的(likelightning)”、“烧灼(burning)”和甚至“痒的(itchy)”。在非典型形式的三叉神经痛中，疼痛也可以严重的或仅疼痛存在，并持续延长的时间。与三叉神经痛(TN)相关的疼痛被识别为可以被经历的最剧烈的疼痛之一。[0026]简单的刺激，如吃、说话、洗脸或任何轻微的触碰或感觉可以引起发作(甚至微风的感觉)。发作可以一群发生或作为单独的发作发生。[0027]症状包括位于任何位置急剧、剧烈的疼痛或持续、烧灼的疼痛，通常位于或接近身体的表面，对每个期间来说发生在相同的位置；痛沿特定神经途径的疼；由于疼痛受影响的身体部分受损的功能，或由于伴随的运动神经损伤的肌肉衰弱；提高的皮肤敏感性或受影响皮肤区域的麻木(与局部麻醉相似的感觉，如奴佛卜因注射(Novacaineshot));和被解释为疼痛的任何触摸或压力。运动也可能是疼痛的。[0028]三叉神经痛是最常见形式的神经痛。它影响面部主要的感官神经，三叉神经(“三叉的”文字上表示“三个起点(threeorigins)”,指的是神经分成3个分支)。其症状包括严重的疼痛在面部的一侧突然而短暂的发作，沿着该侧三叉神经所牵扯的区域。疼痛发作可能严重到足以引起面部扭曲，其典型地指疼痛抽筋(神经疫挛(ticdouloureux))。有时，三叉神经痛的起因是血管或小肿瘤压迫神经。疾病，诸如多发性硬化症(影响脑和脊柱的炎症性疾病)、某些形式的关节炎和糖尿病(高血糖)也可能引起三叉神经痛，但并非总能识别出起因。在这种情况下，某些运动，如咀嚼、说话、吞咽或接触面部的区域可能引发剧烈疼痛的痉挛。[0029]相关但相当不常见的神经痛影响舌咽神经，其为咽喉提供感觉。该神经痛的症状是位于咽喉的短暂、冲击状发作的疼痛。[0030]神经痛可能发生在诸如带状疱疹的感染之后，带状疱疹由带状疱疹病毒，一种疱疹病毒引起。这种神经痛在带状疱疹的疹子痊愈后产生持续的灼烧疼痛。疼痛由于受影响区域的运动或与其接触而恶化。并非所有诊断为带状疱疹的那些患者继续经历疱疹后神经痛，它会比带状疱疹更疼。疼痛和敏感可以持续数月或甚至数年。疼痛通常是对任何接触，但特别是轻触不可忍受的敏感形式。疱疹后神经痛不限制在面部；它可以发生在身体的任何位置，但通常发生在带状疱疹疹子的部位。[0031]由于疼痛和患病期间的社交孤立，抑郁是常见的。[0032]疱疹后神经痛可能在初始的疱疹感染的标志已经消失很长时间后恶化。可能引起神经痛的其它感染性疾病是梅毒和莱姆病(Lymedisease)。[0033]糖尿病是神经痛的另一常见诱因。这一非常常见的医学问题影响几乎1/20的美国成年人。糖尿病损害向神经提供循环的微小动脉，导致神经纤维故障及有时的神经损失。糖尿病可以产生几乎任何神经痛，包括三叉神经痛、腕管综合症(carpaltunnelsyndrome)(手部和腕部的疼痛和麻木)和感觉异常性股痛(由于股外侧皮神经损伤引起的大腿麻木和疼痛)。血糖的严格控制可以预防糖尿病的神经损伤并可以加速发生神经痛的患者的恢复。[0034]可能与神经痛相关的其它医学症状为慢性肾衰竭和卟啉症(porphyria)-—种遗传疾病，其中身体不能清除身体中血液正常分解后产生的某些物质本身。某些药物也可能引起这个问题。[0035]2.传入神经阻滞传入神经阻滞表示来自身体一部分的感觉输入的缺失，并可以由外周感觉纤维或形成中枢神经系统的神经的打断而引起。传入神经阻滞疼痛症状包括，但不限于脑或脊柱的损伤、中风后疼痛、幻觉痛、半身不遂、上臂神经丛撕裂伤、腰部神经根病(radiculopathies)。[0036]3.复杂性局部疼痛综合症(CRPSs)CRPS是起因于感应维持疼痛(sympathetically-maintained)的慢性疼痛综合症，并以两种形式存在。CRPSl现在代替术语“反射性交感神经营养不良综合症(reflexsympatheticdystrophysyndrome)”。它是一种慢性神经病变,最常见发生在轻微或重大创伤后的胳膊和腿部。CRPSl与严重的疼痛；指甲、骨骼和皮肤上的变化；和对受影响肢体的触碰提高的敏感度相关联。CRPS2替代术语皮肤灼热痛(causalgia)，并且其起因于识别出的对神经的伤害。CRPS包括但不限于I型CRPS(反射性交感神经营养不良综合症)和II型CRPS(皮肤灼热痛)。4.神经病变[0037]神经病变是神经的功能或病理改变，并且通过感觉或运动神经元异常被临床表征。[0038]中枢神经病变是中枢神经系统中的功能或病理改变。[0039]外周神经病变是一个或多个外周神经中的功能或病理改变。外周神经从中枢神经系统(脑和脊柱)传递信息给肌肉和其它器官，并从皮肤、关节和其它器官传递回大脑。当这些神经无法携带信息往返大脑和脊柱时，外周神经病变发生，导致疼痛、感觉缺失、或无法控制肌肉。在一些情况下，控制血管、肠道和其它器官的神经的失效导致异常的血压、消化问题和其它基本身体过程的缺失。神经病变的风险因素包括糖尿病、酗酒和暴露于某些化学物质和药品。一些人具有神经病变的遗传倾向。在神经上长时间的压力是另一种发生神经损伤的风险。受压伤可能由长时间不动(如长时间的手术过程或长期患病)或由对神经的压迫引起。多神经病变表示通常同等影响两侧身体的广布过程。症状取决于何种类型的神经被影响。三种主要类型的神经为感觉、运动和自主神经。神经病变可以影响所有三种类型神经的任何一种或组合。症状也取决于该病症影响整个躯体或仅影响一束神经(如源自创伤)。慢性炎症性多神经病变的原因是异常的免疫反应。特异抗原、免疫过程和激发因子不同，并且在多种情况下是未知的。它可能与其它症状关联发生，如HIV、炎症性肠病、红斑狼疮、慢性活动性肝炎和血细胞异常。[0040]外周神经病变可能包括单一神经或神经束功能或病理的改变(单神经病变)，或影响多个神经的功能或病理改变(多神经病变)。[0041]外周神经病夺遗传疾病进行性排骨肌萎缩症(Charcot-Marie-Toothdisease)弗里德赖希氏共济失调(Friedreich’sataxia)全身或代谢失调糖尿病(糖尿病神经痛)膳食缺乏(特别是维生素B-12)过量饮酒(酒精性神经痛)尿毒症(源自肾衰竭)癌症感染或炎症性病症AIDS肝炎科罗拉多壁虱热白喉格林-巴利综合症(Guillain-Barresyndrome)HIV感染而没有AIDS发展麻风病莱姆病(Lyme)结节性多动脉炎风湿性关节炎结节病干燥综合症(Sjogrensyndrome)梅毒全身红斑狼疮淀粉状物质(amylοid)暴露于有毒化合物吸入胶水或其它有毒化合物一氧化二氮工业试剂一特别是溶剂重金属(铅、砷、汞等)从属于像镇痛剂肾病的药物的神经痛多种诱因贫血(降低的氧/降低的血流)长时间暴露于冷的温度a.多神经病变多神经病变是外周神经病变，包括由多个外周神经损伤或解体引起的运动或某一区域感觉的缺失。多神经病变疼痛包括，但不限于脊髓灰质炎后综合症、乳房切除术后综合症(postmastectomysyndrome)、糖尿病神经痛、酒精性神经痛、淀粉状物质(amyloid)、毒素、AIDS、甲状腺机能减退、尿毒症、维生素缺乏、化疗引起的疼痛、2’，3’-双脱氧胞苷(ddC)治疗、格林-巴利综合症(Guillain_Barr6syndrome)或法布瑞氏症(Fabry’sdisease)。b.单神经病变单神经病变是外周神经病变，包括由单一外周神经或神经束损伤或解体引起的运动或某一区域感觉的缺失。单神经病变最常见由起因于自创伤或外伤的局部区域损伤引起，尽管偶尔地，全身疾病可能引起单独的神经损伤(如多数单神经炎(mononeuritismultiplex))。常见的原因是直接外伤、对神经长时间的压迫、和由附近身体结构的肿胀或受伤对神经的压迫。损伤包括神经髓鞘(遮盖物)的解体或部分神经细胞(轴突)的解体。损伤减缓或阻止了冲动通过神经的传导。单神经病变可能涉及身体的任何部分。单神经病变痛包括，但不限于坐骨神经功能异常、腓总神经功能异常、桡神经功能异常、尺神经功能异常、颅骨单神经病变V1、颅骨单神经病变VI1、颅骨单神经病变III(压迫型)、颅骨单神经病变III(糖尿病型)、腋神经功能异常、腕管综合症、股神经功能异常、胫神经功能异常、面神经麻痹(Be11’spalsy)、胸廓出口综合症、腕管综合症和第六(外展)神经麻痹。c.普遍的外周神经病变普遍的外周神经病变是对称的，并且通常是由于各种全身疾病和病痛过程，这些疾病和病痛过程影响外周神经系统的整体。它们被进一步分为几个类别:1.远端轴突病变(Distalaxonopathies)是神经元的一些代谢或毒性错乱的结果。它们可能由代谢疾病引起，例如糖尿病，肾衰竭，缺乏综合症(deficiencysyndrome),如营养不良和酗酒，或毒素或药物的影响。远端轴突病变(也被成为逆行死亡神经病变(dyingbackneuropathy))是一种外周神经病变,其起因于外周神经系统(PNS)神经元的一些代谢或毒性的混乱。这是神经对代谢或毒素紊乱的最常见反应，并且照这样，可由代谢疾病引起，例如糖尿病，肾衰竭，缺乏综合症(deficiencysyndrome),如营养不良和酗酒，或毒素或药物的影响。远端轴突病变的最常见诱因是糖尿病，并且最常见的远端轴突病变是糖尿病神经痛。i1.髓鞘质病是由于髓鞘质的主要攻击，引起冲动传导的急性失败。最常见的诱因是急性炎症性脱髓鞘多神经病变(acuteinflammatorydemyelinatingpolyneutopathy(AIDP，也被称作格林-巴利综合症))，虽然其它诱因包括慢性炎症性脱髓鞘综合症(CIDP)、遗传代谢紊乱(如，脑白质营养不良)或毒素。髓鞘质病是由于髓鞘或髓鞘化许旺细胞(myelinatingSchwanncells)的大部分解体,其使得轴突完整,但引起冲动传导的急性衰竭。脱髓鞘化减缓或完全阻止了电冲动通过神经的传导。最常见的诱因是急性炎症性脱髓鞘多神经病变(AIDP，也被称作格林-巴利综合症)，虽然其它诱因包括慢性炎症性脱髓鞘综合症(CIDP)、遗传代谢紊乱(如，脑白质营养不良或进行性腓骨肌萎缩)或毒素。ii1.神经病变是外周神经系统(PNS)神经元破坏的结果。它们可能由运动神经元疾病，感觉神经病变(如，带状疱疹)，毒素或自主神经功能异常。神经毒素可能引起神经病变，例如化学治疗试剂长春新碱。神经病变是由于外周神经系统(PNS)的神经元损伤，导致外周神经病变，引起的功能异常。它可能由运动神经元疾病，感觉神经病变(如，带状疱疹)，有毒物质或自主神经功能异常。患有神经病变的人可能以多种形式存在，取决于诱因、其影响神经细胞的方式，和被影响最严重的神经细胞的类型。iv.聚焦节流神经病变(Focalentrapmentneuropathies)(如腕管综合症)I1.炎症性疼痛[0042]本发明所述的化合物可以被用于治疗由任何以下炎症性症状引起的或与其相关的疼痛。[0043]A.关节炎关节炎包括，例如，风湿性关节炎；青少年风湿性关节炎；系统性红斑狼疮(SLE);痛风性关节炎；硬皮病；骨关节炎；牛皮癣关节炎；强直性脊柱炎；莱特氏综合症(Reiter’ssyndrome)(反应性关节炎)；成人斯提耳病(adultStill’sdisease);病毒感染引起的关节炎；细菌感染引起的关节炎，例如，如淋病性关节炎和非淋病性细菌关节炎(脓毒性关节炎)；三期莱姆病(TertiaryLymedisease);结核性关节炎；和真菌感染引起的关节炎,例如，如芽生菌病。[0044]B.自免疫疾病自免疫疾病包括，例如格林-巴利综合症、桥本氏甲状腺炎(Hashimoto’sthyroiditis)、恶性贫血、爱迪生氏病(Addison’sdisease)、〗型糖尿病、系统性红斑狼疮、皮肌炎、干燥综合症(Sjogren’ssyndrome)、红斑狼疮、多发性硬化症、重症肌无力、莱特氏综合症和格雷氏病(Grave’sdisease)。[0045]C.结缔组织疾病结缔组织疾病包括，例如脊柱关节炎(spondyloarthritis)、皮肌炎和肌纤维痛(fibromyalgia)ο[0046]D.受伤由受伤引起的炎症可能引起慢性炎症性疼痛，所述受伤包括，例如组织或关节的挤压、刺穿、拉伸。[0047]E.感染由感染引起的炎症可能引起慢性炎症性疼痛，所述感染包括，例如肺结核或间质性角膜炎。[0048]F.神经炎神经炎是影响神经或一组神经的炎症性过程。症状取决于涉及的神经，但可能包括疼痛、感觉异常、局部麻痹或感觉减退(麻木)。实例包括:a.臂神经炎b.眼球后神经病变，一种炎症性过程，其影响恰好位于眼球后的视神经。c.视神经病变，一种影响视神经的炎症性过程，在受影响的眼中引起突然下降的视力。视神经炎的诱因未知。视神经(连接眼睛和脑的神经)的突然发炎导致髓鞘的肿胀和解体。炎症偶尔可能是病毒感染的结果，或其可能由自免疫疾病，如多发性硬化引起。风险因素与可能的诱因相关。d.前庭神经炎，病毒感染引起的影响前庭神经的炎症性过程。[0049]G.关节炎症关节的炎症，如由粘液囊炎或肌腱炎引起的，例如，可能引起慢性炎症性疼痛。II1.头痛[0050]本发明所述的化合物可以被用于治疗由任何以下头痛症状引起的或与其相关的疼痛。头痛(医学上也被称为头痛(cephalgia))是头部轻微到严重疼痛的一种症状；有时颈部或上背部疼痛可能也被解释为头痛。它可能表明潜在的局部或全身疾病，或可能是其本身的疾病。[0051]A.肌肉/肌原性头痛肌肉/肌原性头痛表现为包括面部和颈部肌肉的收紧(tightening)或紧张(tensing);它们可能向前额辐射。紧张性头痛是最常见形式的肌原性头痛。[0052]紧张性头痛是涉及头部、头皮或颈部疼痛或不适的症状，通常与这些区域的肌肉紧张相关。紧张性头痛起因于颈部和头皮肌肉的收缩。这一肌肉收缩的一个原因是对压力、沮丧或紧张的反应。导致头部长时间保持在一个位置不运动的任何活动可以引起头痛。这样的活动包括打字或使用计算机，用手进行的精细工作和显微镜的使用。在寒冷的屋子中睡觉或以颈部处在不正常的位置下进行睡觉，也可能引发这一类型的头痛。紧张型头痛包括，但不限于阵发性紧张性头痛和慢性紧张性头痛。[0053]B.血管性头痛最常见类型的血管性头痛是偏头痛。其它类型的血管性头痛包括集束性头痛，其引起紧张型头痛的反复阵发；和高血压导致的头痛。1.偏头痛偏头痛是异源疾病，其通常包括反复头痛。偏头痛与其它头痛不同，因为它们伴有其它症状发生，例如，如恶心、呕吐或对光敏感。在大多数人中，抽动的疼痛仅在头部一侧感受得到。临床症状，例如先兆症状的类型、预征候的存在、或相关症状，如眩晕，可能在具有不同潜在病理生理和遗传机理的患者亚组中观察到。偏头痛包括，但不限于没有先兆的偏头痛(普通偏头痛)、具有先兆的偏头痛(传统偏头痛)、月经偏头痛、等价偏头痛(migraineequivalent)(无头痛性的偏头痛(acephalicheadache))、复杂型偏头痛(complicatedmigraine)、腹型偏头痛(abdominalmigraine)和混合型紧张偏头痛(mixedtensionmigraine)。2.集束型头痛集束型头痛影响一侧头部(单侧的)并且可能与眼睛流泪和鼻塞相关联。它们集群发生，每天在相同时间反复发生，持续数周后缓和。[0054]D.高血压头痛[0055]E.牵引性(Traction)和炎症性头痛牵引性和炎症性头痛通常是从中风到鼻窦炎的其它病症的症状。[0056]F.激素型头痛[0057]G.反弹性头痛反弹性头痛，也被称为药物过度使用头痛(medicationoveruseheadaches),在过度频繁服用药物以缓解头痛时发生。反弹性头痛每天经常发生，并可会非常疼痛。[0058]H.慢性鼻窦炎头痛鼻窦炎是鼻旁窦细菌、真菌、病毒、过敏或自免疫的炎症。慢性鼻窦炎是普通感冒最常见的并发症之一。症状包括:鼻塞；面部疼痛；头痛；发烧；全身不适；浓绿或黄鼻涕；俯身时面部“肿胀(fullness)”感恶化。在少数情况下，慢性上颌鼻窦炎也可以由牙齿感染细菌的蔓延引起。慢性增生性嗜酸性鼻窦炎(Chronichyperplasticeosinophilicsinusitis)是非感染形式的慢性鼻窦炎。[0059]1.器质性头痛[0060]J.猝发性头痛猝发性头痛是与癫痫活动关联的头痛。IV.身体疼痛[0061]本发明所述的化合物可以被用于治疗由任何以下身体疼痛状况引起的或与其相关的疼痛。身体疼痛开始于韧带、肌腱、骨骼、血管和甚至神经本身。其用身体疼痛感受器检测。在这些区域中的疼痛受体的缺乏产生比皮肤疼痛时间更长的，迟钝，局部化较差的疼痛；实例包括扭伤和骨折。额外的实例包括以下。[0062]A.过度肌肉紧张过度肌肉紧张可以通过，例如扭伤或拉伤引起。[0063]B.反复性动作疾病反复性动作病可以起因于手部、腕部、肘部、肩部、颈部、背部、臀部、膝盖、足部、腿部或脚踝的过度使用。[0064]C.肌肉疾病引起身体疼痛的肌肉疾病包括，例如，多发性肌炎、皮肌炎、狼疮、肌纤维痛、风湿性多肌痛和横纹肌溶解。[0065]D.肌肉痛肌肉痛是肌肉疼痛并且是多种疾病和紊乱的症状。肌肉痛最常见的诱因是肌肉或肌肉群的过度使用或过度拉伸。无外伤史的肌肉痛通常是由于病毒感染。较长时期的肌肉痛可能是代谢肌病、一些营养缺乏或慢性疲劳综合症的指示。[0066]E.感染感染可以引起身体疼痛。这些感染的实例包括，例如，肌肉中的脓肿，旋毛虫病，流感，莱姆病(Lymedisease)，疟疾，落基山斑疹热，禽流感，普通感冒，社区获得性肺炎，脑膜炎，猴痘，严重急性呼吸道综合症，中毒性休克综合症，旋毛虫病，伤寒症和上呼吸道感染。[0067]F.药物药物可以引起身体疼痛。这样的药物包括，例如，可卡因，降低胆固醇的抑制素(statin)(如阿托伐他汀(atorvastatin)、辛找他汀(simvastatin)和洛弗斯特丁(1vastatin))和降低血压的ACE抑制剂(如依那普利(enalapril)和卡托普利(captopril))。V.内脏疼痛[0068]本发明所述的化合物可以被用于治疗由任何以下内脏疼痛状况引起的或与其相关的疼痛。内脏疼痛起始于身体的内脏或器官。内脏疼痛感受器被置于身体器官或内腔中。在这些区域中疼痛感受器的进一步缺乏产生了通常比身体疼痛更疼且时间更长的疼痛。内脏疼痛极其难定位，并且内脏组织的若干损伤显示出“牵涉性(referred)”疼痛，其中感觉被定位于与受伤位置完全无关的区域。内脏疼痛的实例包括以下。[0069]A.功能性内脏疼痛功能性内脏疼痛包括，例如，肠道易激综合症(irritablebowelsyndrome)和慢性功能性腹痛(CFAP)，功能性便秘和功能性消化不良，非心源性胸痛(NCCP)和慢性腹痛。[0070]B.慢性胃肠炎慢性胃肠炎症包括，例如，胃炎，肠炎，像例如，克罗恩氏病(Crohn’sdisease)、溃疡性结肠炎、显微镜结肠炎、憩室炎(diverticulitis)和肠胃炎；间质性膀胱炎；肠缺血；胆囊炎；阑尾炎；食道胃酸逆流(gastroesophagealreflux);溃瘍，肾结石,尿路感染,胰腺炎和疝气。[0071]C.自免疫疼痛自免疫疼痛包括，例如，结节病和脉管炎。[0072]D.器质性内脏疼痛器质性内脏疼痛包括，例如，起因于肠道外伤、炎症或病变性损伤，或由肿瘤侵入感觉神经分布产生。[0073]E.治疗诱导的内脏疼痛治疗诱导的内脏疼痛包括，例如，接受化学疗法的疼痛，或接受放射性疗法的疼痛。V1.牵涉性疼痛[0074]本发明所述的化合物可以被用于治疗由任何以下牵涉性疼痛状况引起的或与其相关的疼痛。[0075]牵涉性疼痛来自定位于与疼痛刺激部位不同区域的疼痛。通常，当神经在位于或接近其起点被压迫或损伤时，牵涉性疼痛发生。在这种情况下，疼痛的感觉一般在该神经达到的区域被感觉到，尽管损伤起始于另外的地方。常见的实例发生在椎间盘突出，其中从脊柱伸出的神经根部被相邻的盘物质压迫。尽管疼痛可能来源于受损的椎间盘本身，疼痛也将在被压迫神经达到的区域(例如，大腿、膝盖或脚)被感觉到。缓解神经根部的压力可能缓解牵涉性疼痛，只要永久性神经损伤还没有发生。心肌缺血(部分心肌组织血流的缺少)可能是被最熟知的牵涉性疼痛的实例；感觉可以发生在胸腔上部，受限的感觉(restrictedfeeling)，或左肩、臂或甚至手的疼痛。[0076]本发明所述的非细胞毒性蛋白酶组分是非细胞毒性的蛋白酶或其片段，所述蛋白酶或蛋白酶片段能够剪切以下三种底物蛋白的一种中存在的不同但特异的肽键，所述底物蛋白为疼痛感应传入器(nociceptivesensoryafferent)中胞吐融合器(exocyticfusionapparatus)的小突触小泡蛋白(synaptobrevin)、突触融合蛋白(syntaxin)或SNAP-25。这些底物是神经分泌机制的重要组分。本发明所述的非细胞毒性蛋白酶组分优选地为奈瑟菌属IgA蛋白酶或其片段，或梭菌属神经毒素L-链或其片段。特别优选的非细胞毒性蛋白酶组分为肉毒菌神经毒素(BoNT)L-链或其片段。[0077]本发明所述的转运组分使非细胞毒性蛋白酶(或其片段)能够转运进靶细胞，以便蛋白酶活性的功能表达发生在靶细胞的细胞溶胶中。转运组分优选地能够在低PH值的条件下，在脂膜上形成离子可渗透的孔。优选地，已经发现仅使用蛋白分子的那些部分能够在内涵体膜中形成孔。转运部分可能从微生物蛋白来源获得，特别地从细菌或病毒蛋白来源获得。因此，在一种实施方式中，转运组分是诸如细菌毒素或病毒蛋白的酶的转运区域。本发明所述的转运组分优选地为梭菌属神经毒素H-链或其片段。最优选地，它是区域Hn(或其功能组分)，其中Hn表示梭菌属神经毒素H-链的部分或片段，其约等价于H-链氨基端的一半，或对应于完整H-链中该片段的区域。[0078]本发明所述的TM组分负责将本发明所述的融合蛋白结合到靶细胞的结合位点(BindingSite)。因此，TM组分简单地是配体,通过它本发明所述的融合蛋白结合到选定的靶细胞。[0079]在本发明的文字中，靶细胞是疼痛感觉传入器，优选地是初级的疼痛传入器(例如A-纤维，如Aδ-纤维或C-纤维)。因此，本发明所述的融合蛋白能够抑制神经递质或神经调节物质[如，谷氨酰胺、P物质、降血钙素基因相关肽(calcitonin-generelatedP印tide(CGRP))和/或神经肽Y]从疼痛感受传入器神经元的分散群落中的释放。在使用中，融合蛋白降低或防止感觉传入器信号(如神经递质或神经调控物质)从外周向中枢疼痛纤维的传导；并因此具有作为治疗疼痛，特别是慢性疼痛的治疗分子的应用。[0080]确定TM结合到疼痛感受传入器是常规。例如，简单的放射性位移实验可能被采用，其中代表疼痛感觉传入器的组织或细胞(如DRGs)在过量未标记配体存在的情况下被暴露给已经标记(如氚化)的配体。在这样的实验中，非特异和特异结合的相对比例可以被估计，由此允许确认配体结合到疼痛感觉传入器靶细胞。任选地，该测试可能包括一种或多种结合拮抗剂，并且该测试可能进一步包括观察配体结合的损失。这一类型实验的实例可以在Hulme,E.C.(1990),Receptor-bindingstudies,abriefoutline,pp.303-311,InReceptorbiochemistry,APracticalApproach,Ed.E.C.Hulme,OxfordUniversityPress中找到。[0081]当与相应的“游离(free)”TM比较时，本发明所述的融合蛋白通常显示出对疼痛感觉传入器靶细胞降低的结合亲和度(在达100倍的区间)。然而，尽管有这一观察结果，本发明所述的融合蛋白令人吃惊地显示出良好的效力。这可归因于两个主要的特征。第一，所述非细胞毒性蛋白酶组分是催化的一因此，若干这些分子的治疗效果被迅速扩大。第二，在疼痛感受传入器上存在的受体仅需要发挥用于治疗进入的通路作用，而非必须需要被刺激到要求的水平，以便达到配体-受体介导的药物反应。因此，本发明所述的融合蛋白可能以比其它类型的止痛分子，如NSAIDS、吗啡和加巴喷丁(Gabapentin)所使用低的多的剂量被给药。后者分子典型地以高微克到毫克(甚至到数百毫克)的量被给药，而本发明所述的融合蛋白可能以低得多的剂量给药，典型地至少低10倍，而更典型地至少低100倍。[0082]TM优选地包含最多50个氨基酸残基,更优选地最多40个氨基酸残基,特别优选地最多30个氣基酸残基，和最优选地最多20个氣基酸残基。[0083]阿片样物质(Opioids)代表优选的本发明所述的TM。在肽家族内包括脑啡肽(met和leu)、内源性吗啡(endomorphin)l和2、β-内啡肽和强啡肽。阿片样物质肽经常被用于临床，以修饰对疼痛感受器和疼痛反应中涉及的其它细胞的活性。如三级世界卫生组织止痛剂梯度(AnalgesicLadder),阿片样物质具有进入慢性癌症和非癌症性疼痛药物治疗的所有三个阶段的切入点，强调了它们对疼痛治疗的重要性。提到阿片样物质，包括其片段、变异体和衍生物，它们保留了结合疼痛感受传入器的能力。[0084]本发明所述的TM也可以是在疼痛感受传入器上，更特别地在初级疼痛传入器上存在的一个或多个受体发挥“激动剂”作用的分子。传统地，激动剂已经被认为是能够在细胞内提高或降低活性的任何分子，即简单地引起细胞活性改变的任何分子。例如，传统方式的激动剂包括能够与细胞上受体结合病起始反应或活性的化学物质，或通过激活受体引起活性反应的药物，无论该反应是细胞活性的提高或降低。[0085]然而，对于本发明的目的，激动剂更特异地被界定为能够刺激靶细胞内胞吐融合过程(exocyticfusion)的分子,该过程容易被能够剪切所述祀细胞中胞吐融合元件的蛋白的蛋白酶(或其片段)抑制。[0086]因此，本发明特定激动剂的定义排除了传统上被认为是激动剂的多种分子。例如，在其通过结合到TrkA受体启动神经元分化的能力方面，神经生长因子(NGF)是激动剂。然而，当由上述条件评估时，NGF不是激动剂，因为它不是胞吐融合体的主要诱导剂。此外，NGF刺激的过程(即细胞分化)不易于被非细胞毒性毒素分子的蛋白酶活性抑制。[0087]结合疼痛感受传入器上受体的TM的激动剂的性质可以用实施例10中所述的方法确认。[0088]在本发明优选的实施方式中，所述TM的目标是ORL1受体。该受体是G蛋白偶联类受体的一个成员，并且具有7个跨膜域结构。ORL1受体的性质在Mogil&Pasternak(2001),PharmacologicalReviews,Vol.53,N0.3，pages381_415中被详细讨论。[0089]在一种实施方式中，TM是结合(优选地特异结合)ORL1受体的分子。更优选地，TM是ORL1受体的“激动剂”。术语“激动剂”在文中如上文定义。[0090]结合ORL1受体的TM激动剂的性质可以用实施例10中所述的方法确认。这些方法基于前述实验(参见，Inoueetal.1998[Proc.Natl.Acad.Sc1.，95，10949-10953])，其证实了受体的天然激动剂，伤害感受肽(或者孤啡肽)(nociceptin))，引发了P物质从疼痛感受初级传入器神经元释放的诱导。这被以下事实支持:>伤害感受肽诱导的反应通过特异受体(P物质受体)拮抗剂消除；和>用辣椒素(其耗尽小直径初级传入器神经元中的P物质)预处理细胞减弱了伤害感受肽诱导的反应。[0091]相似地，Inoue等人证实了A类肉毒菌神经毒素的足底内注射消除了伤害感受肽诱导的反应。由于已知BoNT抑制P物质从初级传入器神经元的释放(Welchetal.，2000,Toxicon,38，245-258)，这证实了伤害感受肽-ORL1相互作用与P物质的后续释放之间的关联。[0092]因此，如果TM引起P物质从疼痛感觉传入器神经元释放的诱导，TM可以被称为在ORL1受体具有激动剂活性(参见实施例10)。[0093]在本发明特别优选的实施方式中，所述TM是伤害感受肽一ORL1受体的天然配体。伤害感受肽靶向ORL1受体，具有高亲和度。其它优选TMs的实例包括:【权利要求】1.单链的多肽融合蛋白，其包含:a).非细胞毒性蛋白酶或其片段，所述蛋白酶或蛋白酶片段能够剪切疼痛感应传入器的胞吐融合器的蛋白；b).能够结合所述疼痛感应传入器上之结合位点的靶向部分，所述结合位点能够进行细胞内吞作用，以被并入疼痛感应传入器中的内涵体内；c).蛋白酶剪切位点，在该位点所述融合蛋白可被蛋白酶剪切，其中所述蛋白酶剪切位点位于所述非细胞毒性蛋白酶或其片段与所述靶向部分之间；d).转运区域，其能够将所述蛋白酶或蛋白酶片段从内涵体中跨内涵体膜转运，并进入所述疼痛感应传入器的细胞溶胶中；其中所述靶向部分位于所述蛋白酶剪切位点和所述转运区域之间，并且其中所述靶向部分和所述蛋白酶剪切位点由最多10个氨基酸残基分隔，并且其中所述靶向部分和所述蛋白酶剪切位点不由O个氨基酸残基分隔。2.单链的多肽融合蛋白，其包含:a).非细胞毒性蛋白酶或其片段，所述蛋白酶或蛋白酶片段能够剪切疼痛感应传入器的胞吐融合器的蛋白；b).能够结合所述疼痛感应传入器上之结合位点的靶向部分，所述结合位点能够进行细胞内吞作用，以被并入所述疼痛感应传入器中的内涵体内；c).蛋白酶剪切位点，在该位点所述融合蛋白可被蛋白酶剪切，其中所述蛋白酶剪切位点位于所述非细胞毒性蛋白酶或其片段与所述靶向部分之间；d).转运区域，其能够将所述蛋白酶或蛋白酶片段从内涵体中跨内涵体膜转运，并进入所述疼痛感应传入器的细胞溶胶中；其中所述靶向部分位于所述蛋白酶剪切位点和所述转运区域之间，并且其中所述蛋白酶(或其片段)和所述转运区域彼此由最多100个氨基酸残基隔开。3.单链的多肽融合蛋白，其包含:a).非细胞毒性蛋白酶或其片段，所述蛋白酶或蛋白酶片段能够剪切疼痛感应传入器的胞吐融合器的蛋白；b).能够结合所述疼痛感应传入器上之结合位点的靶向部分，所述结合位点能够进行细胞内吞作用，以被并入所述疼痛感应传入器中的内涵体内；c).蛋白酶剪切位点，在该位点所述融合蛋白可被蛋白酶剪切，其中所述蛋白酶剪切位点位于所述非细胞毒性蛋白酶或其片段与所述靶向部分之间；d).转运区域，其能够将所述蛋白酶或蛋白酶片段从内涵体中跨内涵体膜转运，并进入所述疼痛感应传入器的细胞溶胶中；其中所述靶向部分位于所述蛋白酶剪切位点和所述转运区域之间，并且其中(i)所述非细胞毒性蛋白酶组分与所述融合蛋白的转运组分形成二硫键，其中形成二硫键的所述蛋白酶组分的氨基酸残基位于所述蛋白酶组分的最后20个C-末端氨基酸残基之内，并且形成二硫键的第二部分的所述转运组分内的氨基酸残基位于所述转运组分的前20个N-末端氨基酸残基之内；或(ii)所述非细胞毒性蛋白酶组分与所述融合蛋白的TM组分形成二硫键，其中形成二硫键的所述蛋白酶组分的氨基酸残基位于所述蛋白酶组分的最后20个C-末端氨基酸残基之内，并且形成二硫键的第二部分的在所述TM组分中的氨基酸残基位于所述TM组分的最后20个C-末端氨基酸残基之内。4.根据权利要求1的融合蛋白，其中所述靶向部分和所述蛋白酶剪切位点由最多5个氣基酸残基分隔。5.根据权利要求2或3的融合蛋白，其中所述靶向部分和所述蛋白酶剪切位点由最多10个氨基酸残基分隔，优选地由最多5个氨基酸残基分隔，更优选地由O个氨基酸残基分隔。6.根据任一前述权利要求的融合蛋白，其中所述非细胞毒性蛋白酶是梭菌神经毒素L-链蛋白酶或IgA蛋白酶。7.根据任一前述权利要求的融合蛋白，其中所述靶向部分是选自如下的阿片样物质靶向部分:伤害感受肽、β-内啡肽、内啡素-1、内啡素_2、强啡肽、met-脑啡肽、Ieu-脑啡肽、甘丙肽、和PAR-2肽。8.根据任一前述权利要求的融合蛋白，其中所述转运区域是梭菌神经毒素的HN区域、或选自如下的转运区域:白喉毒素、假单胞菌外毒素A的结构域I1、炭疽病毒素、源自流感病毒血凝素的融合和/或两亲肽、塞姆利基森林病毒融合蛋白、水泡性口炎病毒糖蛋白G、SER病毒F蛋白、泡沫病毒包膜糖蛋白。9.根据权利要求7的融合蛋白，其中所述阿片样物质靶向部分:(i)是存在于疼痛感应传入器上的受体的激动剂，优选地其中所述阿片样物质靶向部分是初级疼痛感应传入器上存在的受体的激动剂；(ii)结合ORLl受体，优选地其中所述阿片样物质靶向部分特异地结合ORLl受体，更优选地，其中所述阿片样物质靶向部分是ORLl受体的激动剂。10.根据权利要求7-9任一项的融合蛋白，其中所述阿片样物质靶向部分与SEQIDN0.38或其片段具有至少70%的同源性，或其中所述靶向部分与SEQIDN0.38或其片段具有至少80%的同源性；或其中所述靶向部分与SEQIDN0.38或其片段具有至少90%的同源性；或其中所述靶向部分与SEQIDN0.38或其片段具有至少95%的同源性；或其中所述靶向部分是SEQIDN0.38或其片段，或其中所述靶向部分是SEQIDNos:40、42、44、46、48或50之一，或其中其中所述靶向部分是伤害感受肽。11.根据任一前述权利要求的融合蛋白，其中所述融合蛋白包含纯化标记；优选地，其中所述融合蛋白包含纯化标记，其存在于所述融合蛋白的N-末端和/或C-末端；更优选地，其中所述纯化标记通过肽间隔分子被连接到所述融合蛋白。12.根据任一前述权利要求的融合蛋白，其中所述转运区域由肽间隔分子与所述靶向部分分隔。13.核酸序列，其编码根据任一前述权利要求的多肽融合蛋白。14.DNA载体，其包括启动子、根据权利要求13的核酸序列，其中所述DNA序列位于所述启动子的下游，并且终止子位于所述DNA构建物的下游。15.根据权利要求13或者权利要求14的DNA序列的互补DNA链。16.用于制备根据权利要求1-12任一项所述的单链多肽融合蛋白的方法，包括:在宿主细胞中，表达根据权利要求13的核酸序列、或者权利要求14的DNA载体。17.制备非细胞毒性的剂的方法，包括:a.使根据权利要求1-12任一项所述的单链多肽融合蛋白与能够剪切所述蛋白酶剪切位点的蛋白酶接触；b.剪切所述蛋白酶剪切位点；并由此形成双链融合蛋白。18.非细胞毒性的多肽，可通过权利要求17述的方法获得，其中所述多肽是双链多肽，并且其中:(a).所述第一条链包含非细胞毒性的蛋白酶或其片段，所述蛋白酶或蛋白酶片段能够剪切疼痛感应传入器的胞吐融合器的蛋白；(b).所述第二条链包含靶向部分和转运区域，其能够将蛋白酶或蛋白酶片段从内涵体中跨内涵体膜转运并进入所述疼痛感应传入器的所述细胞溶胶中；并且所述第一条链和第二条链被二硫键连接在一起。19.根据权利要求1-12任一项的融合蛋白或者根据权利要求18的多肽的用于制备药物中的用途，所述药物用于治疗、预防或缓解疼痛，优选地，其中所述疼痛是慢性疼痛。【文档编号】A61P25/04GK103602650SQ201310439850【公开日】2014年2月26日申请日期:2007年6月1日优先权日:2006年6月1日【发明者】K·福斯特,J·查多克,P·马科斯,P·斯坦库姆,K·R·奥基,J·弗朗西斯,L·斯图尔德申请人:赛恩泰新公司,爱力根公司