一种堇菜总黄酮的制备新工艺的制作方法
【专利摘要】本发明公开一种堇菜总黄酮的制备新工艺，该方法为：将原料清洗后从投料斗投入，提取罐组主机旋转，将物料从机组前端向后缓慢推进，同时提取溶剂从机组末端的进液管进入提取罐内，由罐后端穿过移动的物料向前端流动，固液两相物质在这种逆向运动中充分接触，从而将药材中有效成分提取出来。药渣经出料传送器强制推动至出渣口而排出，专门的挤汁机对药渣进行挤压，将药渣中残留药液挤出药材组织，减少药渣中残留药液含量。提取效率更高、提取更完全。本发明同时选用连续萃取罐组萃取并结合硅胶柱层析法纯化，分离效果更佳。可得最高收率为4％，含量为95％以上的总黄酮成品。
【专利说明】一种堇菜总黄酮的制备新工艺
【技术领域】:
[0001]本发明属于天然有机化学领域，涉及一种堇菜总黄酮的分离纯化工艺，特别是涉及一种利用大孔吸附树脂耦合硅胶柱层析分离纯化堇菜总黄酮的工艺。
【背景技术】:
[0002]堇菜(学名:Viola verecunda A.Gray)为堇菜科堇菜属的植物。生长于海拔100米至2，200米的地区，常生于灌丛、田野、山坡草丛、杂木林林缘、湿草地及宅旁。全草供药用，清热解毒，凉血消肿。用于疔疮肿毒，痈疽发背，丹毒，毒蛇咬伤.堇菜性寒味微苦，有清热解毒的功效。主治黄疸、痢疾、乳腺炎、目赤肿痛、咽炎；外敷治跌打损伤、痈肿、毒蛇咬伤。
[0003]堇菜所含黄酮甙类及有机酸对金色葡萄球菌、猪巴氏杆菌、大肠杆菌、链球菌和沙门氏菌都有较强的抑菌作用。所富集微量元素，对人体内多种酶的活性有作用，对核酸蛋白的合成、免疫过程、细胞繁殖都有直接或间接的作用，可促进上皮细胞修复，使细胞分裂增加，T细胞增高，活性增加，从而对生物体的免疫功能起调节作用，通过酶系统发挥对机体代谢的调节和控制。所含锌可抗病毒，并能刺激抗毒素的合成，提高对传染病的抵抗力，是其:“清热解毒”、“治疽疗毒”的基础。近年来，人们发现堇菜中含有大量的黄酮，由于其原料堇菜来源较广，从中提取总黄酮已取得了可喜进展，名称为“一种天山堇菜总黄酮提取纯化工艺”的专利申请中便公开了将堇菜用热水提取法分离纯化总黄酮的制备方法。上述专利文献中的总黄酮提取工艺主要是热水提取、硅胶柱层析等步骤制备而成，工艺路线简单，但最后的总黄酮纯度不高，实际应用效果远远不如大孔吸附树脂耦合硅胶柱层析分离纯化的效果O
【发明内容】
[0004]本发明目的在于提`供一种堇菜总黄酮的制备新工艺；本发明目的还在于提供一种方便快捷、原料来源丰富、提取效率高、分离纯化效果明显、提取纯度高的利用连续逆流提取联合溶剂萃取富集纯化堇菜总黄酮的生产工艺。
[0005]本发明目的是通过如下技术方案实现的。
[0006]一种堇菜总黄酮的制备新工艺，其步骤如下:
[0007]I)将堇菜清洗后加入连续逆流提取罐用丙酮水溶液回流提取；
[0008]2)将经I)处理的提取液过滤，得黄酮粗提液:
[0009]3)将所得黄酮粗提液浓缩，得黄酮粗浓缩液；
[0010]4)将所得黄酮粗浓缩液泵入连续萃取灌组物料罐，萃取溶剂为乙酸乙酯，经由萃取塔得黄酮乙酸乙酯萃取液；
[0011]5)将黄酮乙酸乙酯萃取液浓缩，得总黄酮浓缩膏；
[0012]6)将总黄酮浓缩膏拌硅胶，并将拌好的混合物至于硅胶柱上方，经乙酸乙酯和石油醚混合液洗脱，得洗脱液；
[0013]7)将洗脱液回收溶剂后浓缩干燥得堇菜总黄酮半成品；[0014]8)将堇菜总黄酮半成品用丙酮水溶液溶解，过滤，回收丙酮，浓缩，放置析出晶体，抽滤得堇菜总黄酮成品。
[0015]所述步骤I)中，堇菜清洗后进行丙酮水溶液回流提取。提取溶剂为50%~85%的丙酮水溶液。
[0016]所述步骤I)中，提取的设备为逆流提取生产线，包括提升机、进料传送、逆流提取罐组主机1、掏料器1、挤汁机1、逆流提取罐组主机2、掏料器2、挤汁机2、出料传送、中间泵、出液泵、暂存罐、换热器、进液阀门等。粉碎过筛后原料由提升机加料口处匀速加入，提取液自流至暂储罐经由出液泵连续泵出。
[0017]所述步骤I)中，逆流生产线参数为，提升机频率15~30Hz，主机I频率18~20Hz，挤汁机I频率45~50Hz，主机2频率20~22Hz，挤汁机2频率40~45Hz，出液泵流量 0.5 ~2T/h，进料 100 ~400kg/h。
[0018]所述步骤4)中，萃取步骤由连续萃取罐组完成，包括溶剂罐、物料罐、重液罐、轻液罐、残液罐、萃取塔、流量计、物料泵等。
[0019]所述步骤4)中，连续萃取罐组参数为,溶剂泵流量I~3L/min,物料泵流量0.4~lL/min。[0020]所述步骤6)中，硅胶层析步骤采用湿法装柱，保留液面，将浓缩膏按重量1:1拌活化后硅胶，并将拌好的混合物置于硅胶柱上方，洗脱液为乙酸乙酯:石油醚体积比为50~85:15的乙酸乙酯与石油醚混合物，洗脱流速每分钟0.lml/g硅胶，洗脱体积为5BV。硅胶活化条件为，110 °C 30min。
[0021]所述步骤8)中，堇菜总黄酮的半成品用9~16倍量50%丙酮水溶液40°C热溶。浓缩密度为d = 1.03~1.05。
[0022]本发明选用连续逆流提取生产线提取，原料经粗粉碎后从投料斗投入，提取罐组主机旋转，将物料从机组前端向后缓慢推进，同时提取溶剂从机组末端的进液管进入提取te内，由te后端芽过移动的物料向如端流动，固液两相物质在这种逆向运动中充分接触，从而将药材中有效成分提取出来。药渣经出料传送器强制推动至出渣口而排出，专门的挤汁机对药渣进行挤压，将药渣中残留药液挤出药材组织，减少药渣中残留药液含量。提取效率更高、提取更完全。
[0023]本发明同时选用连续萃取罐组萃取并结合硅胶柱层析法纯化，分离效果更佳。
【具体实施方式】:
[0024]实施例1:
[0025]称取堇菜500kg，洗净后，由提升机加料口以50kg/h的速度匀速加入，75%丙酮水溶液用管道泵以200kg/h的流量由进液管加入，提升机频率设定为20Hz，主机I频率设定为16Hz，挤汁机I频率设定为50Hz，主机2频率设定为22Hz，挤汁机2频率设定为45Hz，得堇菜总黄酮粗提液2T ;堇菜总黄酮粗提液自流至暂储罐经由出液泵连续泵至浓缩罐浓缩，得堇菜总黄酮粗浓缩液200L ;调节物料泵阀门，使堇菜总黄酮粗浓缩液以lL/min进入萃取塔，调剂溶剂泵阀门，使乙酸乙酯以3L/min进入萃取塔，得堇菜总黄酮乙酸乙酯萃取液600L ;浓缩得堇菜总黄酮浓缩膏18kg ;堇菜总黄酮浓缩膏拌18kg活化硅胶，置于硅胶柱上方，洗脱液为乙酸乙酯:石油醚体积比为85:15的乙酸乙酯与石油醚混合物，洗脱流速每分钟0.lml/g硅胶，得洗脱液90kg ;洗脱液回收溶剂后浓缩干燥得堇菜总黄酮半成品45kg ；堇菜总黄酮半成品用450L50%丙酮水溶液40°C热溶，过滤，回收乙醇，浓缩至d= 1.05，放置析出晶体，抽滤得堇菜总黄酮成品20kg，含量98.5%。
[0026]实施例2:
[0027]称取堇菜1.4T，洗净后，由提升机加料口以200kg/h的速度匀速加入，75%丙酮水溶液用管道泵以600kg/h的流量由进液管加入，提升机频率设定为25Hz，主机I频率设定为18Hz，挤汁机I频率设定为45Hz，主机2频率设定为20Hz，挤汁机2频率设定为40Hz，得堇菜总黄酮粗提液4.2T ;堇菜总黄酮粗提液自流至暂储罐经由出液泵连续泵至浓缩罐浓缩，得堇菜总黄酮粗浓缩液2T ;调节物料泵阀门，使堇菜总黄酮粗浓缩液以0.5L/min进入萃取塔，调剂溶剂泵阀门，使乙酸乙酯以2L/min进入萃取塔，得堇菜总黄酮乙酸乙酯萃取液6T ；浓缩得堇菜总黄酮浓缩膏600kg ;堇菜总黄酮浓缩膏拌600kg活化硅胶，置于硅胶柱上方，洗脱液为乙酸乙酯:石油醚体积比为70:15的乙酸乙酯与石油醚混合物，洗脱流速每分钟
0.lml/g硅胶，得洗脱液3T ;洗脱液回收溶剂后浓缩干燥得堇菜总黄酮半成品145kg ;堇菜总黄酮半成品用2.9T50%丙酮水溶液40°C热溶，过滤，回收乙醇，浓缩至d = 1.05，放置析出晶体，抽滤得堇菜总黄酮成品52kg，含量96.5%。
[0028]实施例3:
[0029]称取堇菜800kg，洗净后，由提升机加料口以80kg/h的速度匀速加入，80%丙酮水溶液用管道泵以250kg/h的流量由进液管加入，提升机频率设定为22Hz，主机I频率设定为18Hz，挤汁机I频率设定为50Hz，主机2频率设定为22Hz，挤汁机2频率设定为45Hz，得堇菜总黄酮粗提液2.5T ;堇菜 总黄酮粗提液自流至暂储罐经由出液泵连续泵至浓缩罐浓缩，得堇菜总黄酮粗浓缩液250L;调节物料泵阀门，使堇菜总黄酮粗浓缩液以0.8L/min进入萃取塔，浓缩得堇菜总黄酮浓缩膏27kg ;堇菜总黄酮浓缩膏拌27kg活化硅胶，置于硅胶柱上方，洗脱液为乙酸乙酯:石油醚体积比为65:15的乙酸乙酯与石油醚混合物，洗脱流速每分钟0.lml/g硅胶，得洗脱液135kg ;洗脱液回收溶剂后浓缩干燥得堇菜总黄酮半成品19kg ；堇菜总黄酮半成品用570L50%丙酮水溶液40°C热溶，过滤，回收乙醇，浓缩至d = 1.03，放置析出晶体，抽滤得堇菜总黄酮成品12kg，含量97.5%。
【权利要求】
1.一种堇菜总黄酮的制备新工艺，其特征在于该方法包括如下步骤: 1)将堇菜清洗后加入连续逆流提取罐用丙酮水溶液回流提取； 2)将经I)处理的提取液过滤，得黄酮粗提液: 3)将所得黄酮粗提液浓缩，得黄酮粗浓缩液； 4)将所得黄酮粗浓缩液泵入连续萃取灌组物料罐，萃取溶剂为乙酸乙酯，经由萃取塔得黄酮乙酸乙酯萃取液； 5)将黄酮乙酸乙酯萃取液浓缩，得总黄酮浓缩膏； 6)将总黄酮浓缩膏拌硅胶，并将拌好的混合物至于硅胶柱上方，经乙酸乙酯和石油醚混合液洗脱，得洗脱液； 7)将洗脱液回收溶剂后浓缩干燥得堇菜总黄酮半成品； 8)将堇菜总黄酮半成品用丙酮水溶液溶解，过滤，回收丙酮，浓缩，放置析出晶体，抽滤得堇菜总黄酮成品。
2.根据权利要求1所述的堇菜总黄酮的制备新工艺其特征在于所述的步骤I)中，堇菜清洗后进行丙酮水溶液回流提取。提取溶剂为50%~85%的丙酮水溶液。
3.根据权利要求1所述的堇菜总黄酮的制备新工艺其特征在于所述的步骤I)中，提取的设备为逆流提取生产线，包括提升机、进料传送、逆流提取罐组主机1、掏料器1、挤汁机1、逆流提取罐组主机2、掏料器2、挤汁机2、出料传送、中间泵、出液泵、暂存罐、换热器、进液阀门等。粉碎过筛后原料由提升机加料口处匀速加入，提取液自流至暂储罐经由出液泵连续泵出。
4.根据权利要求1所述的堇菜总黄酮的制备新工艺其特征在于所述的步骤I)中，逆流生产线参数为，提升机频率15~30Hz，主机I频率18~20Hz，挤汁机I频率45~50Hz，主机2频率20~22Hz，挤汁机2频率40~45Hz，出液泵流量0.5~2T/h，进料100~400kg/h。
5.根据权利要求1所述的堇菜总黄酮的制备新工艺其特征在于所述的步骤4)中，萃取步骤由连续卒取te组完成，包括溶剂te、物料te、重液te、轻液te、残液te、卒取塔、流量计、物料泵等。
6.根据权利要求1所述的堇菜总黄酮的制备新工艺其特征在于所述的步骤4)中，连续萃取罐组参数为，溶剂泵流量I~3L/min，物料泵流量0.4~lL/min。
7.根据权利要求1所述的堇菜总黄酮的制备新工艺其特征在于所述的步骤6)中，硅胶层析步骤采用湿法装柱，保留液面，将浓缩膏按重量1:1拌活化后硅胶，并将拌好的混合物置于硅胶柱上方，洗脱液为乙酸乙酯:石油醚体积比为50~85:15的乙酸乙酯与石油醚混合物，洗脱流速每分钟0.lml/g硅胶，洗脱体积为5BV。硅胶活化条件为，IlO0C 30min。
8.根据权利要求1所述的堇菜总黄酮的制备新工艺其特征在于所述的步骤8)中，堇菜总黄酮的半成品用9~16倍量50%丙酮水溶液40°C热溶。浓缩密度为d = 1.03~1.05。
【文档编号】A61K36/86GK103690693SQ201310694945
【公开日】2014年4月2日 申请日期:2013年12月13日 优先权日:2013年12月13日
【发明者】姚德坤, 苏学辉, 姚德利, 张亚红, 姚航, 黄运生, 吴海龙, 孟祥敏 申请人:大兴安岭嘉迪欧营养原料有限公司