一种新型的完全水溶的光敏剂单体及其制备方法及应用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种新型的完全水溶的光敏剂单体，其以叶绿素-a为原料通过脱镁叶绿酸-a直接合成3-去乙烯基-3-（1’-己羟）乙基-脱镁叶绿酸-a甲酯，并经碱金属氢氧化物处理获得结构式所示的水溶性盐，其中，R1、R2、R3为：H或M，且R1、R2、R3不同时为H，M选自Na、K或NH4+。上述水溶性盐并不改变具备光敏性的大环结构，水溶性好，因而在应用上带来诸多方便，适宜制备用于光动力疗法的药物，用于治疗或诊断：恶性肿瘤（特别是所有管腔内浅表性恶性肿瘤）、癌前病变、良性病变。
【专利说明】
【技术领域】
[0001] 本发明涉及光动力疗法的药物一光敏剂，具体涉及一种新型的完全水溶的光敏剂 单体及其制备方法及应用。 一种新型的完全水溶的光敏剂单体及其制备方法及应用
【背景技术】
[0002] 作为光动力疗法的新的药物，第二代光敏剂受到普遍关注。以叶绿素为原料制备 第二代光敏剂的方法及所得的产品也已经有了很多。ZL01823093. 8涉及提取螺旋藻生物质 制造二氢卟酚e6、紫红素5和紫红素18的混合物光敏剂。
[0003] 美国专利第5198460号及其引用的参考文献，通过低温破碎螺旋藻细胞，再进行 萃取，层析纯化和再结晶分离得到脱镁叶绿酸_a甲酯，然后在回流温度下在三甲基吡啶中 进行热脱羧分离。由此得到的焦脱镁叶绿酸_a甲酯用正己醇和酸处理形成二己基醚基团 (部分）。最后皂化去除甲酯，得到3-去乙烯基-3(1'-己羟）乙基-焦脱镁叶绿酸-α， 或称为ΗΡΡΗ。ΗΡΡΗ是比二氢卟酚e6更好的光敏剂。但是其过程复杂。
[0004] 美国7053210B2首先用一种碱性物三甲基酯来处理二氢卟酚e6,加热得到焦脱镁 叶绿酸a，在酸性环境中用正己醇处理将其转化为HPPH。其步骤减少，控制条件容易满足， 产率高。然而获得二氢卟酚e6也还是要经过一些过程的（如ZL01823093. 8)。
【发明内容】
[0005] 为了通过简单高效的方法获得新的光敏剂，本发明目的在于以叶绿素_a为原料 通过脱镁叶绿酸_a直接合成获得可满足光动力疗法的新物质，以克服已有技术过程复杂 的弊端。
[0006] 本发明首先要实现的目的是提供一种新型的完全水溶的光敏剂。
[0007] 本发明提供的新型的完全水溶的光敏剂是式III、式IV所示的水溶性盐，
[0008]
【权利要求】
1.式I、式II所示的化合物，以及由它们制备的式III、式IV所示的水溶性盐，
其中，R1、R2、R3为：Η或M，且R1、R2、R3不同时为H，M选自Na、K或NH4。
2. 权利要求1中式I、式II所示的化合物的制备方法，其特征在于：包括下述步骤： A) 以叶绿素-a为原料制备脱镁叶绿酸-a甲酯； B) 由脱镁叶绿酸_a甲酯制得3-去乙烯基-3- ( Γ -己羟）乙基-脱镁叶绿酸-a甲 酯，即为式I和式II所示的化合物； C) 纯化，得式I和式II所示的化合物单体。
3. 根据权利要求2所述的方法，其特征在于：在步骤A)，将叶绿素-a浸膏溶解于预 先配制好的H2S0 4/甲醇混合溶液中，在室温下搅拌:T5h后，将其倒入水中，用有机溶剂萃 取，用水洗涤萃取液，去除有机溶剂后的残余物用乙酸乙酯/植物油抽提溶剂结晶；在步 骤B)，将脱镁叶绿酸-a甲酯溶解于CH 2C12中，加入2(Γ40%溴化氢/乙酸溶液，反应混合物 在18~25°C搅拌反应:T5h，然后在低于50°C下去除CH 2C12，所得物用植物油抽提溶剂处理， 然后将其溶解于无水CH2C1 2中，加入正己醇、碳酸钾，在室温下搅拌2~5h，将其倒入水中， 用有机溶剂萃取，用水洗涤萃取液，去除有机溶剂，残留物经硅胶柱层析分离纯化得黑色固 体粉末；在步骤C)，将步骤B)所得物用正已烷溶解，压入手性层析柱中，用正已烷/乙醇 =70/3(Γ95/5进行洗脱，将洗脱液分段接收，定性检测后，相应部分分别合并浓缩至干，得式 I和式II所示的化合物。
4. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于：在步骤A)，所述H2S04的体积比浓度为 39Γ8% ;所述用于萃取有机溶剂为CH2C12或CHC13 ;所述结晶包括先用乙酸乙酯溶解，然后再 加入植物油抽提溶剂，乙酸乙酯/植物油抽提溶剂的体积比为3/7~7/3 ;在步骤B)，所述用 植物油抽提溶剂处理包括析晶，洗晶过程，重复2~3次；所述用于萃取有机溶剂为CH2C1 2或 CHC13 ;所述硅胶柱层析包括：用20(Γ300目硅胶作固定相，用二氯甲烷/乙酸乙酯体积比为 8/1~20/1的混合溶剂作流动相。
5. 权利要求1中式III、式IV所示的水溶性盐的制备方法，其特征在于：包括下述步骤： D) 由式I或式II所示的化合物单体制得3-去乙烯基-3- (Γ -己羟）乙基-脱镁叶绿 酸-a甲酯水溶性盐，即分别为式III或式IV所示的化合物； E) 精制纯化，得式III或式IV所示的化合物单体。
6. 根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：在步骤D)将式I或式II所示的化 合物单体溶解于乙腈或丙酮、或四氢呋喃中，加入氢氧化钠、氢氧化钾或氢氧化铵水溶液， 混合物在热水浴下超声反应2~3h，将反应液过滤，固体物以水/乙腈或丙酮、或四氢呋喃结 晶；在步骤E)将步骤D)所得晶体用甲醇或乙腈溶解，压入反相柱，用碱调PH > 7的甲醇或 乙腈/水混合液进行洗脱，将洗脱液分段接收，定性检测后，相应部分分别合并浓缩至干， 再将浓缩物真空干燥24~36h，得黑色单体产物。
7. 根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：在步骤D)所述氢氧化钠或氢氧化 钾水溶液浓度为〇. 5~4mol · ΙΛ氢氧化铵浓度为4. (Γ8. Omol · I71 ;所述热水浴温度为 45~55°C;所述以水/乙腈或丙酮、或四氢呋喃结晶包括将前述过滤的固体物溶解在水中，之 后加入乙腈或丙酮、或四氢呋喃，搅拌后静置，加入乙腈或丙酮、或四氢呋喃的量为溶解用 水量的 20?100/lml/ml ; 在步骤E)所述反相柱使用的填料为C18;所述甲醇或乙腈/水混合液的体积比为 3/7?7/3。
8. 用于光动力疗法的药物组合物，其特征在于：其包含至少一种可药用的辅料和权利 要求1中式III或式IV所示的水溶性盐。
9. 权利要求1中式III或式IV所示的水溶性盐和权利要求8所述的药物组合物在制备药 物中的用途，所述药物用于光动力疗法治疗或诊断：恶性肿瘤、癌前病变、良性病变。
10. 权利要求1中的化合物及水溶性盐的检测方法，其特征在于： 1) 、对式I、式II所示的化合物，用稀释剂超声溶解，用高效液相色谱法，使用手性柱， 检测波长407nm，洗脱液为正己烷：无水乙醇（94:6)，稀释剂为正己烷/无水乙醇（94:6); 2) 、对式III或式IV所示的水溶性盐，用高效液相色谱法，使用反相色谱柱，检测波长为 395nm，梯度洗脱，流动相A :K2HP04水溶液，流动相B :甲醇，稀释剂：水。
【文档编号】A61K41/00GK104086554SQ201410238812
【公开日】2014年10月8日 申请日期:2014年5月30日 优先权日:2014年5月30日
【发明者】丁志坚, 韩臻, 周春秋, 陈双文, 苏文祖, 梁玉杰, 刘海明 申请人:桂林晖昂生化药业有限责任公司