一种不含致敏性辅料的九肽微球的制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种不含致敏性辅料的九肽微球的制备方法，其包括：对原料醋酸亮丙瑞林进行预处理；将处理后的醋酸亮丙瑞林投入水中溶解作为内水相溶液，将乳酸-乙醇酸聚合物加入到二氯甲烷中作为油相溶液；将上述配制的两相溶液混合，调节超声的功率使混合液变为乳白色，将混合好的溶液倒入含聚乙烯醇中高速搅拌，将搅拌好的溶液转移至蒸发设备中使二氯甲烷挥发出去，通过离心过筛洗涤收集九肽微球半成品，向洗涤好的半成品微球中加入一定量甘露醇，以-35℃预冻开始，以37℃保温8小时结束，经过51小时的冻干得到冻干粉末即产品。本发明通过优化工艺参数解决了微球制剂中明胶辅料的免疫反应问题，适应于产业化生产。
【专利说明】-种不含致敏性辅料的九化微球的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种医药制剂技术，尤其是一种不含致敏性辅料的九肤微球的制备方 法。
【背景技术】
[0002] 微球（microsphere)是指药物与适宜的载体材料，通过微型包囊技术制得的球形 或类球形微粒，通常将具有药理活性的药物原料与不具有药理活性的可生物降解聚合物的 材料作为载体包合在一起，使用时通常配备一支专用的溶剂。中国正在积极发展具有自主 知识产权的微球技术。近年来，微球在蛋白质和肤类药物、天然药物、治疗毒癒或精神分裂 等特殊疾病的药物等领域的研究尤为引人瞩目。制备微球的方法主要有喷雾干燥法、超临 界流体技术、反相胶束蒸发法、烙融-挤出法、相分离法及溶剂挥发法等，其中应用最为广 泛的方法有喷雾干燥法、复乳-液中干燥法（复乳法，W/0/W法）和相分离一凝聚法等。
[0003] 尽管最近多年来，科学家们投入了相当大的精力并有了显著性进展，但可生物降 解型注射微球作为蛋白质和疫苗递送系统的研究有待加强。究其原因，主要有W下几方面 问题：（1)产率、包封率较低，突释高；（2)制造工艺复杂、条件要求高，不易灭菌，较难大规 模生产，稳定性和重复性差；(3)材料在机体内可引起炎性反应及免疫反应等。不同的制备 方法对微球性质的影响很大，因此在选择方法的同时应注意所需微球的特点。除载体材料 及制备工艺对微球性质有较大影响外，药物性质、有机溶剂种类、乳化剂选择、药物与载体 重量比、载体在有机相中的浓度、乳化温度和溶剂挥发的温度、溶剂挥发时的压力、微球表 面PVA的残留量及微球中水的残留量等均可能影响微球的大小、形态、载药及释放性质。
【发明内容】
[0004] 针对上述问题中存在的不足之处，本发明提供一种不含致敏性辅料的九肤微球的 制备方法，该方法工艺简单，通过优化工艺参数解决了微球制剂中明胶辅料的免疫反应问 题，适应于产业化生产。
[0005] -种不含致敏性辅料的九肤微球的制备方法，其特征在于，该方法包括W下步 骤：
[0006] 步骤1，对原料醋酸亮丙瑞林进行预处理；
[0007] 步骤2,将预处理后的所述原料醋酸亮丙瑞林投入到水中溶解作为内水相W溶液；
[0008] 步骤3,将乳酸-己醇酸聚合物加入到二氯甲焼中作为油相0溶液；
[0009] 步骤4,将所述内水相W溶液和油相0溶液混合，采用超声乳化方法，调节超声的功 率使混合液变为乳白色，得到初乳；
[0010] 步骤5,将所述初乳倒入聚己帰醇外水相W溶液中揽拌，得到复乳；
[0011] 步骤6,将揽拌好的所述复乳转移至蒸发设备中蒸发W使二氯甲焼挥发；
[0012] 步骤7,将蒸发后剩余物质离也过筛，收集得到不含致敏性辅料的九肤微球半成 品，然后加入去离子水洗涂所述收集到的不含致敏性辅料的九肤微球半成品；
[0013] 步骤8,将洗涂好的所述不含致敏性辅料的九肤微球半成品进行冻干处理，得到不 含致敏性辅料的九肤微球成品；
[0014] 其中，步骤2所述内水相W溶液中没有添加致敏性辅料明胶；
[0015] 其中，步骤4所述超声乳化方法包括第一阶段超声和第二阶段超声，所述第一阶 段超声的功率为5-25W，所述第二阶段超声的功率为10-30W。
[0016] 步骤2所述处理后的醋酸亮丙瑞林投料量为0-18g。
[0017] 步骤3所述使用的乳酸-己醇酸聚合物分子量在12000-15000,乳酸与己醇酸摩尔 比为75:25,所述使用的乳酸-己醇酸聚合物选用酸性封端聚合物。
[0018] 步骤4所述超声乳化方法包括第一阶段超声和第二阶段超声，所述第一阶段超声 的功率为10W，所述第二阶段超声的功率为30W。
[0019] 步骤5所述外水相W溶液体积与原料醋酸亮丙瑞林重量比值范围为1:1-9:1。优 选，所述外水相W溶液体积与原料醋酸亮丙瑞林重量比值为5:1。
[0020] 步骤5所述初乳相和外水相W溶液混合揽拌的转速为3000-620化pm。优选，所述 初乳相和外水相W混合揽拌转速为5800rpm。
[0021] 步骤6所述复乳溶液温度控制在4-18C。优选，所述复乳溶液温度为1(TC。
[0022] 步骤6将所述揽拌好的复乳转移到蒸发设备中蒸发3个小时。
[0023] 步骤8所述洗涂好的不含致敏性辅料的九肤微球半成品冻干处理包括；加入含 5%，IOml甘露醇，W -35C预冻开始，W 37C保温8小时结束，经过51小时的冻干。
[0024] 本发明的有益效果为：
[0025] 在混合内水相和油相的工艺过程中通过调节混合乳化时的工艺参数，控制整个过 程的工艺参数和时间，使微球制备过程不用添加致敏性明胶辅料，实现了：
[0026] (1)本发明可产业化，解决了产业化难的难题，可将投料扩大到原料投料达到 O-ISg ;
[0027] (2)明胶作为一种外源性蛋白，对受体产生致敏性，采用本技术制备的制剂成品中 不含有该一成分，增大适用人群的范围，该产品可明显降低发生炎性反应及免疫反应的风 险；
[0028] (3)减少病人用药次数，延长用药间隔，提高病人的顺应性和用药水平。
【专利附图】
【附图说明】
[0029] 图1为一种不含致敏性辅料的九肤微球制备方法的流程图；
[0030] 图2为本发明的复乳温度为4C时制备微球的扫描电镜图；
[0031] 图3为本发明的复乳温度为18C时制备微球的扫描电镜图；
[0032] 图4为本发明的复乳温度为IOC时制备微球的扫描电镜图；
[0033] 图5为本发明制备的醋酸亮丙瑞林微球的比格犬体内睾丽药效实验数据图。
【具体实施方式】
[0034] 为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，下面结合实施例对本发明 作进一步详细说明。但所举实例不作为对本发明的限定。
[00巧]本技术所用具有药理活性的原料；醋酸亮丙瑞林意指亮丙瑞林的己酸存在形式， 英文名为Leuprorelin Acetate,是一种常用的激素类抗恶性肿瘤药物，为促性腺素释放激 素（LHRH，一种十肤）的九肤合成类似物，属LH-RH枯抗剂。化学名；5-氧代-脯氨醜-组 氨醜-色氨醜-丝氨醜-酪氨醜-D-亮氨醜-亮氨醜-精氨醜-N-己基-脯氨醜胺醋酸盐。
[0036] 本发明所用的其他辅料W药典为标准。
[0037] 实施例1
[0038] 考察外水相体积对于醋酸亮丙瑞林包封的影响
[0039] 对原料醋酸亮丙瑞林进行预处理；
[0040] 将所述预处理后的IOOmg醋酸亮丙瑞林原料投入到300mg水中溶解作为内水相W 溶液，内水相W溶液中没有添加致敏性辅料明胶；
[0041] 将2. Og乳酸-己醇酸聚合物加入到20g二氯甲焼中作为油相0溶液，使用的乳 酸-己醇酸聚合物分子量在12000-15000,乳酸与己醇酸摩尔比为75:25,乳酸-己醇酸聚 合物选用酸性封端聚合物；
[0042] 将所述配制的内水相W溶液和油相0溶液混合，采用超声乳化方法，所述超声乳 化方法包括第一阶段超声和第二阶段超声，第一阶段超声功率为10W，第二阶段超声功率为 30W，调节超声的功率使混合液变为乳白色，即得初乳；
[004引将混合好的初乳溶液倒入聚己帰醇外水相溶液W中，外水相溶液W体积从 100ml-900ml中选取5个不同数值进行溶液配制，将上述初乳溶液和聚己帰醇溶液的混合 溶液在5800转每分钟的转速下进行揽拌，即得复乳，复乳温度为IOC ;
[0044] 将揽拌好的复乳转移到蒸发设备中蒸发3个小时；
[0045] 将蒸发后剩余物质离也过筛收集不含致敏性辅料的九肤微球半成品，然后加入 50ml去离子水洗涂收集到的不含致敏性辅料的九肤微球半成品；
[0046] 将洗涂好的不含致敏性辅料的九肤微球中加入含5%，IOml甘露醇，W -35C预冻 开始，W 37C保温8小时结束，经过51小时冻干处理，得到含致敏性辅料的九肤微球成品。
【权利要求】
1. 一种不含致敏性辅料的九肽微球的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤： 步骤1，对原料醋酸亮丙瑞林进行预处理； 步骤2,将预处理后的所述原料醋酸亮丙瑞林投入到水中溶解作为内水相W溶液； 步骤3,将乳酸-乙醇酸聚合物加入到二氯甲烷中作为油相0溶液； 步骤4,将所述内水相W溶液和油相0溶液混合，采用超声乳化方法，调节超声的功率使 混合液变为乳白色，得到初乳； 步骤5,将所述初乳倒入聚乙烯醇外水相W溶液中搅拌，得到复乳； 步骤6,将搅拌好的所述复乳转移至蒸发设备中蒸发以使二氯甲烷挥发； 步骤7,将蒸发后剩余物质离心过筛，收集得到不含致敏性辅料的九肽微球半成品，然 后加入去离子水洗涤所述收集到的不含致敏性辅料的九肽微球半成品； 步骤8,将洗涤好的所述不含致敏性辅料的九肽微球半成品进行冻干处理，得到不含致 敏性辅料的九肽微球成品； 其中，步骤（2)所述内水相W溶液中没有添加致敏性辅料明胶； 其中，步骤（4)所述超声乳化方法包括第一阶段超声和第二阶段超声，所述第一阶段 超声的功率为5-25W，所述第二阶段超声的功率为10-30W。
2. 根据权利要求1所述一种不含致敏性辅料的九肽微球的制备方法，其特征在于，步 骤（2)所述处理后的醋酸亮丙瑞林投料量为0_18g。
3. 根据权利要求1所述一种不含致敏性辅料的九肽微球的制备方法，其特征在于， 步骤（3)所述使用的乳酸-乙醇酸聚合物分子量在12000-15000,乳酸与乙醇酸摩尔比为 75:25。
4. 根据权利要求3所述一种不含致敏性辅料的九肽微球的制备方法，其特征在于，所 述使用的乳酸-乙醇酸聚合物选用酸性封端聚合物。
5. 根据权利要求1所述一种不含致敏性辅料的九肽微球的制备方法，其特征在于，步 骤（4)所述超声乳化方法包括第一阶段超声和第二阶段超声，所述第一阶段超声的功率为 10W，所述第二阶段超声的功率为30W。
6. 根据权利要求1所述一种不含致敏性辅料的九肽微球的制备方法，其特征在于，步 骤（5)所述外水相W溶液体积与原料醋酸亮丙瑞林重量比值范围为9:1-1:1。
7. 根据权利要求6所述一种不含致敏性辅料的九肽微球的制备方法，其特征在于，所 述外水相W溶液体积与原料醋酸亮丙瑞林重量比值为5:1。
8. 根据权利要求1所述一种不含致敏性辅料的九肽微球的制备方法，其特征在于，步 骤（5)所述初乳相和外水相W溶液混合搅拌的转速为3000-6200rpm。
9. 根据权利要求8所述一种不含致敏性辅料的九肽微球的制备方法，其特征在于，所 述初乳相和外水相W混合搅拌转速为5800rpm。
10. 根据权利要求1所述的一种不含致敏性辅料的九肽微球的制备方法，其特征在于， 步骤（6)所述复乳溶液温度控制在4-18°C。
11. 根据权利要求10所述一种不含致敏性辅料的九肽微球的制备方法，其特征在于， 所述复乳溶液温度为l〇°C。
12. 根据权利要求1所述一种不含致敏性辅料的九肽微球的制备方法，其特征在于，步 骤（6)将所述搅拌好的复乳转移到蒸发设备中蒸发3个小时。
13.根据权利要求1所述一种不含致敏性辅料的九肽微球的制备方法，其特征在于，步 骤（8)所述洗涤好的不含致敏性辅料的九肽微球半成品冻干处理包括：加入含5%甘露醇 10ml，以-35°C预冻开始，以37°C保温8小时结束，经过51小时的冻干。
【文档编号】A61K38/08GK104224731SQ201410461306
【公开日】2014年12月24日 申请日期:2014年9月11日 优先权日:2014年9月11日
【发明者】周晓庆, 王魁, 罗翰文 申请人:北京天晟泰丰医药科技有限公司