一种可用于创面修复的复合微球的制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种可用于创面修复的复合微球的制备方法，该方法主要为：将PLGA溶于二氯甲烷中，得到溶液a；将高比面积SiO2、磷酸三钙和碳酸氢铵溶液加溶液a中，进行搅拌，得到混合液；混合液体加入到聚乙烯醇溶液中，进行搅拌；用去离子水冲洗微球，然后进行冻干，得到一种可用于创面修复的复合微球。与未加碳酸氢铵制作的微球相比，添加碳酸氢铵后，微球表面会观察到很多细小的孔洞，所以使得微球的比表面积增大，将微球附着于皮肤创伤处，由于高比面积SiO2和微球表面孔洞的存在，能够充分吸收皮肤渗透出的体液，而且钙皮肤止血和细胞增殖方面发挥着重要作用，加入磷酸钙盐能促进皮肤创伤部位的快速恢复。
【专利说明】一种可用于创面修复的复合微球的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及皮肤创伤药物的载药微球的制备方法，具体涉及一种可用于创面修复 的复合微球的制备方法。
【背景技术】
[0002] 当今社会随着人们对生活品质需求的提高，人们对外表形象也越来越重视。在日 常生活中人们的皮肤会难免受到外界的影响而产生创伤。创伤后皮肤渗透出的体液要及时 清理，否则会引发炎症等，使得皮肤创伤部位的组织修复受阻。
[0003] 高比表面的SiO2内部具有孔洞结构，能够充分吸收体液，将其与PLGA和磷酸钙盐 结合制成微球，可以发挥多方面的效果。PLGA作为支架材料广泛用于骨组织修复工程，通 过对PLGA的一些改性，使得其在骨组织修复工程领域具有广阔的应用前景。在此微球中， PLGA同样发挥支架作用，其将高比表面的SiOJP磷酸钙盐结合在一起，既能使高比表面的 SiO 2起到吸收体液的作用，又能发挥磷酸钙盐中钙离子的止血效果。具有孔洞的微球则增 大了微球与皮肤的接触面积，更能发挥上述两作用。但传统方法制备得到的多孔微球存在 孔道较大，比表面积小的问题。
【发明内容】
[0004] 本发明克服上述缺陷，提供一种可用于创面修复的复合微球的制备方法，通过加 入少量的碳酸氢铵溶液，让其作为致孔剂来使得微球中产生极小的孔道，孔道的大小与传 统方法在制得同等粒径大小的多孔微球相比，形成的孔道小很多，可以增加微球的比表面 积。
[0005] 本发明通过以下技术方案实现。
[0006] 一种可用于创面修复的复合微球的制备方法，包括以下步骤：
[0007] (1)将PLGA溶于二氯甲烷中，得到溶液a ;
[0008] (2)将高比面积SiO2、碱性成纤维细胞生长因子FGF-21、磷酸三钙和碳酸氢铵溶液 加入步骤（1)所得溶液a中，进行搅拌，使溶液中各物质分散均匀，得到混合液；
[0009] (3)将（2)混合液体加入到聚乙烯醇溶液中，进行搅拌；
[0010] (4)用去离子水冲洗微球，然后进行冻干，得到一种可用于创面修复的复合微球。
[0011] 上述方法中，在步骤（1)中，所述PLGA加入量为0. 5?I. 5g，二氯甲烷为4. 5? 5. 5ml 〇
[0012] 上述方法中，在步骤（2)中，高比面积SiO2和磷酸三钙的加入量均为0. 1?0. 15g， 碱性成纤维细胞生长因子FGF-21为15?25 y g，碳酸氢铵溶液浓度为1?I. 5mg/ml、体积 为1?I. 5ml，搅拌速率为2000?2500r/min，搅拌时间为5?7min。
[0013] 上述方法中，在步骤（3)中，所述聚乙烯醇溶液质量百分比浓度为1?1. 5%、体积 为500?550ml，搅拌速率为450?550r/min、时间为6?12h。
[0014] 上述方法中，步骤（4)中，所述冻干的时间为48?72h。
[0015] 与现有技术相比，本发明的优势在于：
[0016] 1)微球中加入高比面积SiO2，能够充分吸收受伤处的体液。
[0017] 2)微球中复合磷酸三钙，可发挥钙离子的止血效果。
[0018] 3)微球制备时加入碳酸氢铵，产生孔隙，可增大微球与皮肤的接触面积。
[0019] 4)微球中高比面积SiO2和孔隙为修复皮肤的药物增加了附着位点，提高了修复皮 肤的效率。
【专利附图】
【附图说明】
[0020] 图1为实施例1中未添加碳酸氢铵的复合微球的SM扫描图像。
[0021] 图2为实施例1中未添加碳酸氢铵的复合微球的局部SEM扫描图像。
[0022] 图3为实施例2添加碳酸氢铵的复合微球的SEM扫描图像。
[0023] 图4为实施例2添加碳酸氢铵的复合微球的局部SEM扫描图像。
【具体实施方式】
[0024] 下面结合具体实施例对本发明作进一步地具体详细描述，但本发明的实施方式不 限于此，对于未特别注明的工艺参数，可参照常规技术进行。
[0025] 实施例1
[0026] (1)将IgPLGA溶解于5ml二氯甲烷中。
[0027] (2)待PLGA完全溶解后，向溶液中加入0?Ig高比面积SiOjP0?15g磷酸三妈，在 2000r/min 下揽拌 5min。
[0028] (3)上述溶液加入到500ml，1 %的聚乙稀醇溶液中，室温以500r/min的转速下搅 拌 IOh0
[0029] (4)停止搅拌，用去离子水冲洗10次。
[0030] (5)将冲洗后的微球进行冻干，冻干时间为48h，得到磷酸钙盐/PLGA/高比面积 Si O2微球。
[0031] 实施例2
[0032](1)将IgPLGA溶解于5ml二氯甲烷中。
[0033] (2)待PLGA完全溶解后，向溶液中加入0. Ig高比面积Si02、0. 15g磷酸三钙和Iml 浓度为lmg/ml的碳酸氢按溶液，在2000r/min下搅拌5min。
[0034] (3)上述溶液加入到500ml 1 %的聚乙稀醇溶液中，室温以500r/min的转速下搅拌 IOh0
[0035] (4)停止搅拌，用去离子水冲洗10次。
[0036] (5)将冲洗后的微球进行冻干，冻干时间为48h，得到带有孔的磷酸钙盐/PLGA/高 比面积SiO 2微球。
[0037] 实施例3
[0038] (1)将IgPLGA溶解于5ml二氯甲烷中。
[0039] (2)待PLGA完全溶解后，向溶液中加入0. Ig高比面积Si02、20 y g碱性成纤维细 胞生长因子FGF-21和0. 15g磷酸三钙，在2000r/min下搅拌5min。
[0040] (3)上述溶液加入到500ml 1 %的聚乙稀醇溶液中，室温以500r/min的转速下搅拌 IOh0
[0041] (4)停止搅拌，用去离子水冲洗10次。
[0042] 将冲洗后的微球进行冻干，冻干时间为48h，得到磷酸钙盐/PLGA/高比面积SiO2 微球。
[0043] 实施例4
[0044] (1)将IgPLGA溶解于5ml二氯甲烷中。
[0045] (2)待PLGA完全溶解后，向溶液中加入0. Ig高比面积Si02、20 y g碱性成纤维细 胞生长因子FGF-21、0. 15g磷酸三钙和Iml浓度为lmg/ml的碳酸氢铵溶液，在2000r/min 下搅拌5min〇
[0046] (3)上述溶液加入到500ml 1 %的聚乙稀醇溶液中，室温以500r/min的转速下搅拌 IOh0
[0047] (4)停止搅拌，用去离子水冲洗10次。
[0048] (5)将冲洗后的微球进行冻干，冻干时间为48h，得到带有孔的磷酸钙盐/PLGA/高 比面积SiO 2微球。
[0049] 实施例5
[0050] SEM图像对比
[0051] 图1-4中可以看出，因为制作工艺相同，2组微球的粒径大小相同，均为200 ym左 右，而且两种微球的表面粗糙度相似。从整体SEM图像中能够看到图3与图1相比，表面有 很多微小的孔，在局部SEM图像中能清晰的看到图2中，微球表面没有孔洞，而图4中分散 着孔洞，孔径大小为Iu m。
[0052] 实施例6
[0053] 大鼠皮肤创伤愈合率的对比
[0054] 取30只200g左右的SD大鼠，麻醉后背部剃毛，以手术刀在背部各做一个5晕米 深、3厘米长的切口，对照组使用生理盐水，实验组创伤处涂抹本发明实施例1的创面修复 凝胶，分别于3, 10, 17天记录创伤愈合率。结果表明，具有孔的复合微球愈合效果优于无孔 的复合微球，而且因为高比表面积3102可以与细胞生长因子相互吸附，具有载药的作用，同 时微球的孔洞增大了比表面积，使得载药量增大，能够载更多的细胞生长因子，所以实施例 4的愈合效果最为理想。
[0055] 表1不同时间点记录的不同处理组大鼠皮肤创伤愈合率
[0056]
【权利要求】
1. 一种可用于创面修复的复合微球的制备方法，包括以下步骤： (1) 将PLGA溶于二氯甲烷中，得到溶液a ; (2) 将高比面积Si02、碱性成纤维细胞生长因子FGF-21、磷酸三钙和碳酸氢铵溶液加入 步骤（1)所得溶液a中，进行搅拌，使溶液中各物质分散均匀，得到混合液； (3 )将（2 )混合液体加入到聚乙烯醇溶液中，进行搅拌； (4)用去离子水冲洗微球，然后进行冻干，得到一种可用于创面修复的复合微球。
2. 根据权利要求1所述的可用于创面修复的复合微球的制备方法，其特征在于，在步 骤（1)中，所述PLGA加入量为0? 5~1. 5g，二氯甲烷为4. 5~5. 5ml。
3. 根据权利要求1所述的可用于创面修复的复合微球的制备方法，其特征在于，在 步骤（2)中，高比面积Si02和磷酸三钙的加入量均为0. 1~0. 15g，碱性成纤维细胞生长因 子FGF-21为15~25 y g，碳酸氢铵溶液浓度为1~1. 5mg/ml、体积为1~1. 5ml，搅拌速率为 2000~2500r/min，搅拌时间为 5~7min。
4. 根据权利要求1所述的可用于创面修复的复合微球的制备方法，其特征在于，在步 骤（3)中，所述聚乙烯醇溶液质量百分比浓度为1~1. 5%、体积为500~550ml，搅拌速率为 450~550r/min、时间为 6~12h。
5. 根据权利要求1所述的可用于创面修复的复合微球的制备方法，其特征在于，步骤 (4)中，所述冻干的时间为48~72h。
【文档编号】A61P7/04GK104474533SQ201410682602
【公开日】2015年4月1日 申请日期:2014年11月24日 优先权日:2014年11月24日
【发明者】魏坤, 梁猛 申请人:华南理工大学