本发明涉及体外杀虫剂领域，具体而言，涉及复方乙酰氨基阿维菌素制剂及其制备方法和应用。
背景技术：
随着人们生活水平的提高，不少城市中出现宠物热，养犬养猫甚至饲养一些稀有动物的人不断增加。同时，随着改革开放政策深入，人们往来于国内外的活动日益频繁，在此过程中也引进了一些国外名犬名猫。然而，与此同时，实际上也带入了一些原地区没有的人兽共患的疾病，而疾病最主要的来源就是猫、犬所携带的多种人兽共患寄生虫，在宠物与人类亲密接触过程中，这些寄生虫会传染给人，给人类带来危害。同时，犬也是多种寄生虫的终末宿主，在日常活动中，也会使得牛羊猪等动物感染多种寄生虫，这给动物的健康也带来一定的危害。所以加强动物寄生虫防治工作，特别是家庭宠物的寄生虫防治，这对人和动物的健康都具有十分重要的意义。
虽然人们在动物体内外杀虫剂的研究上取得了相当的进步，然而，一方面，由于寄生虫抗药性的产生，现有的杀虫剂的施用效果逐年减弱，不得不每年增加杀虫剂用量，这不仅造成了成本的提高，也造成了环境的污染以及对人体健康越来越大的威胁；另一方面，现有杀虫剂异味较大，施用后无论是对于动物，特别是对于每日与人类长期接触的宠物，还是施用者而言，都有较为严重的感官刺激。
有鉴于此，特提出本发明。
技术实现要素：
本发明的第一目的在于提供一种复方乙酰氨基阿维菌素制剂，所述的制剂中通过将乙酰氨基阿维菌素等具有杀虫效果的成分复配使用，因而使得本发明制剂具有良好的杀虫效果；同时，本发明中，以辣木籽油等具有芳香味天然植物精油为增效剂，可以掩盖制剂中的异味，并提高使用者的感官。
乙酰氨基阿维菌素：属于大环内酯类杀虫剂，对体内外寄生虫，特别是线虫和节肢动物有高效驱杀作用，通过增加虫体的抑制性递质γ－氨基丁酸(γ－GABA)的释放，以及打开谷氨酸控制的氯离子通道，增强神经膜对氯离子的通透性从而阻断神经信号的传递，最终导致虫体神经麻痹、肌肉细胞失去收缩能力而死亡。乙酰氨基阿维菌素具有高脂溶性，主要经粪便排泄，少量从乳汁和尿液中排泄。可以用于治疗奶牛等畜类体内线虫和体外螨虫等寄生虫病，特别是对于产乳期畜类的寄生虫病有着很好的疗效。
噻嘧啶：本品通过抑制胆碱酯酶，对寄生虫的神经肌产生阻滞作用，能麻痹虫体使之止动，安全排出体外，不致引起胆道梗阻或肠梗阻。本品口服很少吸收，大约7％以原形或代谢物自尿中排出，一半以上的药物自粪便排泄。对蛔虫，蛲虫或钩虫感染的疗效，据报道比哌嗪、恩波维铰、苄酚宁等都好，对鞭虫也有一定疗效，为一广谱高效驱肠虫药。用于驱蛔虫(虫卵阴转率80％～95％)、钩虫、蛲虫(虫卵阴转率达90％以上)或混合感染。由于口服后很少吸收，故全身毒性很低。对家畜多种胃肠虫线虫亦有效。
辣木籽油：辣木(MoringaoleiferaLam)又称鼓槌树，为辣木科(Moringaceae)辣木属热带多年生落叶乔木，因其树根具有辛辣味，故而得名辣木。辣木籽油是从辣木干粉中提取出来的一种挥发油，含有丰富的不饱和脂肪酸，因此其有良好的透皮作用。此外，据研究资料显示，辣木籽油具有抗菌、消炎、抗真菌等作用，对人体癣病、真菌病都有治疗作用。例如，现有技术：一种杀虫剂(申请号：201310107896.9)公开了将辣木树叶液与氮酮混合制备杀虫剂的技术方案。
柠檬精油：芸香科植物柠檬果实或鲜柠檬皮中提取的挥发油，主要促渗活性物质为柠檬烯，具有较好的促皮渗透作用，能够促进川芎嗪、吲哚美辛、尼卡地平、模拟地坪、尼可地尔和地尔硫的经皮渗透。一项有关控释TTS的研究采用羟丙纤维素或羟丙甲纤维素凝胶作为药物(尼卡地平、尼莫地平、尼可地尔)储库，内含4％或2％柠檬烯作为透皮制剂，经大鼠和健康受试者的透皮吸收实验表明，上述TTS能够提供令人向往的液态血液浓度至24h或20h，从而大大提高了其生物利用度。
油酸：十八碳－顺－9－烯酸，含18个碳原子和一个双键的不饱和脂肪酸，脂溶性高，经常用于非水溶性药物的增效剂，可显著提高非水溶性药物的生物利用度。同时，也是常用的脂肪酸类透皮促进剂，其促进机制主要有两个方面：(1)油酸的不对称双键在深入皮肤脂质后，与脂肪作用造成脂质的空间不对称，形成流动性微孔；(2)当相转变温度降低后，在同等的温度条件下膜脂流动性更强，药物在角质层的溶解度更高，随脂质进入机体的效率越高，油酸能够降低脂质层的相转温度。丁香酚(Eugenol)：淡黄色或无色的澄清透明油状的有香味的化合物，是一种良好的植物源药物。丁香酚具有广泛的药理作用，主要有抗菌消炎、防腐保鲜、杀虫驱虫、解热镇痛、抗动物寄生虫的作用。
经发明人经大量研究发现，将辣木籽油、柠檬精油和/或油酸/丁香酚，与乙酰氨基阿维菌素配合应用，可显著提高乙酰氨基阿维菌素的杀寄生虫作用，经过透皮试验研究，发现辣木籽油、柠檬精油和/或油酸/丁香酚等增效剂的添加可显著提高乙酰氨基阿维菌素的透皮作用。
本发明的第二目的，在于提供所述的复方乙酰氨基阿维菌素制剂的制备方法，该方法中，通过将本发明组分作为原料并混合以制备相应的透皮试剂、滴剂，或者注射液，具有制备方法简单、效率高且所制得的制剂杀虫效果好等优点。
本发明的第三个目的在于提供所述复方乙酰氨基阿维菌素制剂的应用，本发明制剂具有良好的杀虫效果，因而能够用于动物体内外寄生虫的杀灭。
为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：
一种复方乙酰氨基阿维菌素制剂，按照重量百分数计，所述复方乙酰氨基阿维菌素制剂主要由以下组分制成：
乙酰氨基阿维菌素0.5～20％；
增效剂1～10％；
抗氧化剂0.1～0.5％；
溶剂75～95％；
其中，所述增效剂为辣木籽油，和/或柠檬精油；和/或油酸；和/或丁香酚。
可选的，本发明中，所述复方乙酰氨基阿维菌素制剂还进一步包括噻嘧啶。
可选的，本发明中，按照重量百分数计，所述复方乙酰氨基阿维菌素制剂由以下组分制成：
乙酰氨基阿维菌素0.5～20％；
噻嘧啶3～8％；
抗氧化剂0.1～0.5％；
溶剂75～90％；
辣木籽油0.5～5％；
柠檬精油0.5～2％，和/或油酸0.5～5％/丁香酚0.5～5％。
可选的，本发明中，所述的抗氧化剂为BHA和或/BHT。
可选的，本发明中，所述的溶剂为α吡咯烷酮；和/或二甲基亚砜；和/或二甲基甲酰胺；和/或二甲基乙酰胺；和/或乙醇。
可选的，本发明中，所述复方乙酰氨基阿维菌素制剂，为透皮制剂、滴剂，或者注射液。
同时，本发明还提供了所述复方乙酰氨基阿维菌素制剂的制备方法，其特征在于，所述复方乙酰氨基阿维菌素制剂是由本发明所述的组分混合制备得到的。
可选的，本发明中，所述方法包括如下步骤：
1)将乙酰氨基阿维菌素以大部分溶剂溶解；
2)向步骤1)所得溶液中加入增效剂，并继续搅拌混合；
3)将BHT/BHA以剩余溶剂溶解后，将所得溶液与步骤2)所得溶液混合，即得所述复方乙酰氨基阿维菌素制剂。
可选的，本发明中，步骤1)中还进一步包括在步骤1)加入乙酰氨基阿维菌素的同时，还加入噻嘧啶，并搅拌混合的步骤。
进一步的，本发明还提供了所述复方乙酰氨基阿维菌素制剂在制备动物驱虫药物中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
(1)本发明中，通过乙酰氨基阿维菌素、噻嘧啶等药效成分复配使用，从而可以使得本发明制剂具有良好的杀虫效果，同时也不会产生抗药性；
(2)本发明中，增效剂辣木籽油等天然植物油能够有效改善本发明制剂的使用感官；同时，本发明中，将桉叶油与柠檬精油，和/或油酸/丁香酚配合使用，也能够有效提高本发明药效成分的渗透效果，同时还能够有效提高对寄生虫等害虫的杀灭效果。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
本发明所述复方乙酰氨基阿维菌素制剂是以乙酰氨基阿维菌素为药效成分的动物体内外杀虫制剂，按照重量百分数计，所述制剂主要由以下组分制成：乙酰氨基阿维菌素0.5～20％，例如可以为，但不限于2、5、10或者15％等；增效剂1～10％，例如可以为，但不限于2、3、4、5、6、7、8或者9％等；抗氧化剂0.1～0.5％，例如可以为，但不限于0.2、0.3或者0.4％等；溶剂75～95％，例如可以为，但不限于78、80、82、85或者90％等
其中，所述乙酰氨基阿维菌素制剂组分中，所述增效剂为辣木籽油；和/或柠檬精油；和/或油酸；和/或丁香酚；例如，所述增效剂可以为辣木籽油和柠檬精油；或者，所述增效剂可以为辣木籽油和油酸；或者，所述增效剂可以为辣木籽油和丁香酚；或者，所述增效剂可以为辣木籽油和柠檬精油以及油酸；或者，所述增效剂可以为辣木籽油、柠檬精油和丁香酚。
其中，所述抗氧化剂为BHT和/或BHA；其中BHT为2，6－二叔丁基－4－甲基苯酚，BHA为丁基羟基茴香醚；
其中，所述溶剂为α－二甲基吡咯烷酮；和/或二甲基亚砜；和/或二甲基甲酰胺；和/或二甲基乙酰胺；和/或乙醇。
进一步的，本发明所述制剂还可以包括噻嘧啶等其他药效成分，这种包括噻嘧啶的复方乙酰氨基阿维菌素制剂，按照原料重量百分数计，是由以下组分制成的：乙酰氨基阿维菌素0.5～20％，例如可以为，但不限于2、5、10或者15％等；噻嘧啶3～8％，例如可以为，但不限于4、5、6或者7％等；抗氧化剂0.1～0.5％，例如可以为，但不限于0.2、0.3或者0.4％等；溶剂75～90％，例如可以为，但不限于80、82或者85％等；以及增效剂；
所述增效剂的组成为辣木籽油0.5～5％、柠檬精油0.5～2％；或者，所述增效剂的组成为辣木籽油0.5～5％、油酸0.5～5％；或者，所述增效剂的组成为辣木籽油0.5～5％、丁香酚0.5～5％；或者所述增效剂的组成为辣木籽油0.5～5％、柠檬精油0.5～2％、油酸0.5～5％；或者，所述增效剂的组成为辣木籽油0.5～5％、柠檬精油0.5～2％、丁香酚0.5～5％。
同样的，所述乙酰氨基阿维菌素制剂组分中，抗氧化剂为BHT和/或BHA；其中BHT为2，6－二叔丁基－4－甲基苯酚，BHA为丁基羟基茴香醚；
其中，所述溶剂为α－吡咯烷酮；和/或二甲基亚砜；和/或二甲基甲酰胺；和/或二甲基乙酰胺；和/或乙醇。
本发明所述复方乙酰氨基阿维菌素制剂的制备方法较为简易，是将各组分原料混合即能够制得本发明制剂的，具体的：
本发明中作为溶剂使用的溶剂是分为两部分使用的，其中大部分是在步骤1)中用于将乙酰氨基阿维菌素通过搅拌溶解，剩余的少部分是在步骤3)中用于溶解BHA/BHT；
进一步的，由于本发明制剂的主要的原料组分有两种，因而在此步骤的制备方法上也有所差异，具体的，如果原料组分中不包含噻嘧啶，则此步骤中，仅需将乙酰氨基阿维菌素加入步骤1)所得溶液中，并进一步搅拌混合；如果原料组分中包含噻嘧啶，则将乙酰氨基阿维菌素以及噻嘧啶共同加入步骤1)所得溶液中，并进一步搅拌混合；
步骤2)中，是将作为增效剂的辣木籽油等组分加入混合溶液中，并继续搅拌混合，搅拌混合的时间优选为20min；
步骤3)则是将BHA/BTH以剩余部分的溶剂溶解后，加入之前的混合溶液中，并再次搅拌混合；在混合结束后，还可以将所得混合液经滤纸或滤布过滤，最终得到所述制剂；
进一步的，当所制备的制剂为注射液制剂时，则还需要将最终得到的制剂进行进一步的灭菌；
所述制剂进一步经抽检合格后，方可进行分装或者罐装，进行销售和使用。
进一步的，本发明所述制备方法具体可以总结为如下步骤：
1)将乙酰氨基阿维菌素，或者乙酰氨基阿维菌素和噻嘧啶，以大部分溶剂溶解，并搅拌混合；
2)向步骤1)所得溶液中加入增效剂，并继续搅拌混合20～30min；
3)将BHT/BHA以剩余溶剂溶解后，将所得溶液与步骤2)所得溶液混合，并将所得混合溶液通过滤纸或滤布过滤，即得所述复方乙酰氨基阿维菌素制剂。
本发明所述制剂可用于家禽、家畜等动物的体内外驱虫。优选的，本发明所述制剂适用于家养宠物的体内外驱虫，例如可以用于猫、犬等家养宠物的体内外驱虫。
在具体使用方法上，可以将制剂滴于寄生虫寄生处，或者还可以将制剂稀释后，采用药浴的方式进行大面积的体内外杀虫。
实施例1
按照重量百分数：0.5％乙酰氨基阿维菌素，2％辣木籽油，3％柠檬精油，0.1％BHT，以及余量的α－吡咯烷酮，分别称取适量各原料；
然后，按照如下方法制备乙酰氨基阿维菌素透皮剂：
1)将乙酰氨基阿维菌素以大部分α－吡咯烷酮溶解；
2)向步骤1)所得溶液中加入辣木籽油以及柠檬精油，并继续搅拌混合20～30min；
3)将BHT以剩余α－吡咯烷酮溶解后，将所得溶液与步骤3)所得溶液混合，并将所得混合溶液通过滤纸或滤布过滤，即得实施例1的复方乙酰氨基阿维菌素透皮剂。
进一步的，还可以将步骤3)过滤后所得产物进一步消毒、封装，从而得到实施例1的复方乙酰氨基阿维菌素注射液制剂。
实施例2
按照重量百分数：10％乙酰氨基阿维菌素，2％辣木籽油，3％油酸，0.1％BHA，以及余量的α－吡咯烷酮，分别称取适量各原料；
然后，按照实施例1所述方法制备得到实施例2的复方乙酰氨基阿维菌素透皮剂；其中，步骤2)中，是向所得溶液中加入辣木籽油和油酸。
实施例3
按照重量百分数：0.5％乙酰氨基阿维菌素，5％噻嘧啶，2％辣木籽油，3％丁香酚，0.1％BHT，以及余量的α－吡咯烷酮，分别称取适量各原料；
然后，按照如下方法制备乙酰氨基阿维菌素透皮剂：
1)将乙酰氨基阿维菌素和噻嘧啶以大部分α－吡咯烷酮溶解；
2)向步骤1)所得溶液中加入辣木籽油和丁香酚，并继续搅拌混合20～30min；
3)将BHT以剩余α－吡咯烷酮溶解后，将所得溶液与步骤2)所得溶液混合，并将所得混合溶液通过滤纸或滤布过滤，即得实施例3的复方乙酰氨基阿维菌素透皮剂。
实施例4
按照重量百分数：10％乙酰氨基阿维菌素，5％噻嘧啶，2％辣木籽油，1.5％柠檬精油，1.5％丁香酚，0.1％BHT，以及余量的α－吡咯烷酮，分别称取适量各原料；
然后，按照实施例3所述方法制备得到实施例4的复方乙酰氨基阿维菌素透皮剂；其中，步骤2)中向所得溶液中加入辣木籽油、柠檬精油以及丁香酚。
实施例5
按照重量百分数：2.5％乙酰氨基阿维菌素，5％噻嘧啶，2％辣木籽油，1.5％柠檬精油，1.5％油酸，0.1％BHT，以及余量的α－吡咯烷酮，分别称取适量各原料；
然后，按照实施例3所述方法制备得到实施例5的复方乙酰氨基阿维菌素透皮剂；其中，步骤2)中向所得溶液中加入辣木籽油、柠檬精油以及油酸。
实验例1患病犬只治疗效果
宠物场选择病史、病情(均为经兽医诊断患有犬螨病的犬只)相当的患病犬30只，随机分为3组，分别为试验组1、试验组2和对照组，每组10只。试验组1给予本发明实施例1，按每5kg体重给予1ml，滴于犬背部肩胛骨之间，用药1次，观察治愈情况；试验组2给予本发明实施例3，按每5kg体重给予1ml，滴于犬背部肩胛骨之间，用药1次，观察治愈情况；对照组犬不用药，观察病发情况。
结果显示，试验组1、试验组2病犬用药后，第2天症状明显好转，或虫减少，患犬抓痒次数明显减少，脱毛停止，皮肤颜色由潮红转为粉红，炎症症状减轻，3天虫粪减少第4天皮炎基本消失，开始长出新毛，无抓痒现象，第7天后，皮肤颜色转为正常，无破损，而对照组患犬症状每日症状无明显改善，呈加重状态发展。
同时，在治疗过程中和治疗后，实验犬只饮水饮食均正常，未出现任何异常情况；在用药过程中，发现本发明制剂的并无农药异味，感官良好。
实验例2本发明制剂杀虫效果
在某宠物市场，随机选取100只健康的12～24月龄的宠物猫，随机分为5组，每组20只；
试验药物：本发明实施例2和实施例4；
阳性对照药物1：实施例2不添加含天然植物精油的透皮制剂的药物，即：2.5％乙酰氨基阿维菌素，0.1％BHA，以及余量的N，N－二甲基吡咯烷酮，按照实施例2方法制备。
阳性对照药物2：实施例4不添加含天然植物精油的透皮制剂的药物，即：2.5％乙酰氨基阿维菌素，5％噻嘧啶，0.1％BHT，以及余量的N，N－二甲基吡咯烷酮，按照实施例4方法制备。
实验前，每组宠物猫体表进行清洗，清洁宠物猫体表；然后，分别在每只宠物猫的前胸部侵染100只左右的猫蚤；然后，在侵染2d后，分别对第1－2组宠物猫以实施例1和实施例3的复方乙酰氨基阿维菌素制剂进行治疗；第3组给予阳性对照药物1进行治疗；第4组给予阳性对照药物2进行治疗；第5组宠物猫不接受治疗，仅以清水清洗；
治疗方法如下：将2.5g本发明实施例的复方乙酰氨基阿维菌素剂按照1：100的比例与水混合，然后在侵染部位及周边部位进行药浴治疗。
分别在给药24、48以及72h对各组宠物猫的猫蚤感染情况进行观察，并统计感染结果，判定标准：每只宠物猫在检查过程中，如果视野目标内猫蚤的数量超出100只，则记为无效；如果视野猫蚤的数量为30～50只，则记为有效；如果视野内未出现猫蚤，则记为痊愈。治疗效果对照如下：
由上述对照可知，在用药24h后实验组1～4组的有效率和治愈率均显著高于未用药组，说明本发明的对驱杀体内外寄生虫是有效的。同时，由实验数据可知，本发明实施例2和实施例4，用药72h后，有效率可达100％，治愈率分别为95％和100％。而实验组3和实验组4用药72h后有效率仅为80％和85％，治愈率仅为75％和80％；实验组1和实验组2的有效率和治愈率均显著高于实验组3和实验组4，说明本发明在添加增效剂后，其驱虫药效作用可显著增强，发生此效果的机理推断，一方面是透皮的作用，促进了药物更多的进入动物机体，药物的利用度提升，另外本发明所用的增效剂成分辣木籽油本身就有比较良好的驱虫作用。
同时，在治疗过程中和治疗后，宠物猫饮水饮食均正常，未出现任何异常情况；在用药过程中，发现本发明制剂的异味较小，感官较好。
实验例3渗透性效果
取乳猪腹部已剃毛的皮肤，并除去皮下脂肪、组织和毛细血管，然后用生理盐水反复冲洗，擦干待用；
取适量乙酰氨基阿维菌素，并以α－吡咯烷酮溶解，并使得乙酰氨基阿维菌素的浓度为2.5％，然后向所得溶液中加入适量辣木籽油，柠檬精油以及油酸，并使得三者浓度分别为2％、1.5％和1.5％，并将所得混合溶液作为释放剂，接受剂为空白α－吡咯烷酮溶剂；记为实验组1
同时，乙酰氨基阿维菌素，并以α－吡咯烷酮溶解，并使得乙酰氨基阿维菌素的浓度为2.5％，然后向所得溶液中加入适量辣木籽油，柠檬精油以及丁香酚，并使得三者浓度分别为2％、1.5％和1.5％，并将所得混合溶液作为释放剂，接受剂为空白α－吡咯烷酮溶剂；记为实验组2；
在常温下，进行皮肤体外透皮吸收实验，释放剂用量为2ml，接受剂为7ml，实验温度为37℃，在第1、2、4、6、8、10、12h时间点分别取5.0ml接受液，同时补充等量接受液，并利用高效液相色谱法测定乙酰氨基阿维菌素含量，并计算出不同时间点乙酰氨基阿维菌素单位面积渗透量。结果如下：
然后，取4份乙酰氨基阿维菌素，并以适量α－吡咯烷酮溶解，并使得乙酰氨基阿维菌素的浓度为2.5％；
然后，分别以辣木籽油(记为对照组1)，柠檬精油(记为对照组2)，油酸(记为对照组3)和丁香酚(记为对照组4)作为渗透剂，并分别加入各份乙酰氨基阿维菌素溶液中；
其中对照组1中，溶液中辣木籽油的浓度为5％；对照组2中，溶液中柠檬精油的浓度为5％；对照组3溶液中油酸的浓度为5％；对照组4溶液中丁香酚的浓度为5％；
分别将三组溶液分别作为释放剂，接受剂为空白α－吡咯烷酮溶剂；并分别按照如上所述相同的方法进行乙酰氨基阿维菌素单位面积渗透量，实验结果表明，对照组1的12h单位面积渗透量为145.39μg/cm2；对照组2的12h单位面积渗透量为151.18μg/cm2；对照组3的12h单位面积渗透量为176.23μg/cm2；对照组3的12h单位面积渗透量为161.39μg/cm2；。
由此可见，本发明复合渗透剂的促渗透作用更好。
尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明，然而应意识到，在不背离本发明的精神和范围的情况下可以作出许多其它的更改和修改。因此，这意味着在所附权利要求中包括属于本发明范围内的所有这些变化和修改。