IgG样品中相对高浓度的抗-PCIgG分子（图6)促进进一步调查。 据文献报道，之前Scott等人通过使用放射免疫法已经观察到在人类血清中具有相当大比 例的抗-PC-BSA抗体，及，100-800微克/毫升，血液样品来自多个个体[29]。根据这些值和 IgG在人类血清中的浓度（大约8-16毫克/毫升），使用单分子分析观察到相对高百分比 的抗-PC抗体是合理的。在我们的实验中，PC-BSA中每个BSA蛋白单位包含大约17个PC 基团。这说明根据FluoroPoint观察到的结合不是非特异性结合，而是抗-PC免疫球蛋白 与PC-BSA抗原的高亲和力结合的结果。需要进行进一步工作确定所观察到的是否可以在 其他来源的人IgG样品中重现。
[0088] 为了检测人IgG通过肽脚手架水凝胶释放之前和之后的功能性，使用QCM技术。 IgG功能性标准是单克隆IgG和PC-BSA抗原之间的结合动力学和亲和常数。随着与固定 在QCM金表面上的PC-BSA的相互作用，已经显示在肽水凝胶中48小时后、在一个月和两 个月后，释放的人IgG与天然IgG相比不发生功能性变化。随着如图7中所示的数据拟 合，动力学分析显示天然IgG的相关性ka= 9. 47±0. 05x104M4 1和解离速率常数kd= 1. 65±0. 02x1(T3s1 与水凝胶释放的IgG所观察到的ka= 11. 85±0. 10x104M4Skd= 2. 39±0. 02x1(T3s1相似。而且，天然IgG和水凝胶释放的IgG的结合常数分别为KD= 17. 4±0. 2nM和KD= 20. 2±0. 2nM，也是相似的。这些结果证实单分子分析并且表明在释 放实验过程中，释放后抗体的功能性不受其与肽水凝胶相互作用的影响。
[0089] 结论
[0090] 持续药物释放的一个主要目的是有效的将治疗剂导向具体组织。在药物具有副 作用的情况下，定位传递会对患者产生更少的毒性副作用。本发明的可注射自组装肽脚手 架系统在生理条件下是凝胶态，是一种潜在的鲁棒系统能够用于免疫治疗剂的持续释放应 用，从而在延长的时间段内在特定组织中局部释放活性抗体。在本研究中，已经显示人抗体 只通过ac- (RADA) 4-C0NH2或者ac- (KLDL) 3-C0NH2肽水凝胶在超过3个月的时间内缓慢释 放，并且释放动力学取决于形成水凝胶的自组装肽的氨基酸序列和水凝胶中肽纳米纤维的 密度。一种有效的控制释放系统可以呈递生物活性蛋白质。检测水凝胶释放的抗体的二级 结构和三级结构以及他们的生物活性，结果显示他们不会受到被水凝胶包覆密封和从水凝 胶中释放的影响。这些结果提供了一种创造新型量身定制的并且可编程的肽水凝胶用于持 续释放抗体和其他蛋白质的机会。肽水凝胶系统可以容易地被设计和合成从而控制IgG和 其他治疗剂化合物的释放。肽序列的可编程性是独特的，并且提供了一种将纳米纤维性质 控制在分子水平的方法，这反过来可以改变生物分子扩散和释放动力学。
[0091] 尽管本发明已经参照其优选的实施方案进行了具体显示和描述，但是本领域普通 技术人员应该理解，在不脱离由所附权利要求限定的本发明的范围的情况下，其在形式和 细节上可以进行多种变化。
[0092] 肽序列列表
[0093] ac-(RADA) 2-C0NH2(SEQIDN0：1)
[0094] ac-(RADA) 3-C0NH2(SEQIDNO：2)
[0095] ac-(RADA) 4-C0NH2(SEQIDNO：3)
[0096] ac-(RADA) 5-C0NH2(SEQIDNO：4)
[0097] ac-(KLDL) 2-C0NH2(SEQIDNO：5)
[0098] ac-(KLDL) 3-C0NH2(SEQIDNO：6)
[0099] ac-(KLDL) 3-C0NH2(SEQIDNO：V)
[0100] ac-(KLDL) 4-C0NH2(SEQIDNO：8)
[0101] ac-(KLDL) 5-C0NH2(SEQIDNO：9)
[0102] KLEALWLGFFGFFILGISYIR(SEQIDN0：10)
[0103] KLEALYIIMVLGFFGFFILGIMLSYIR(SEQIDNO： 11)
[0104] 参考文献
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