专利名称：：结合cd19的人类抗体及其用途的制作方法结合CD19的人类抗体及其用途相关申请本专利申请要求于2006年12月13日提交的美国临时申请系列号60/869,904、以及于2007年11月30日提交的美国临时申请系列号60/991,700的优先权，将其内容并入本文作为参考。
背景技术：
：Cl)19是一个95kDa的膜受体，它早期表达于B细胞分化中，并持续表达直到B细胞被触发进行终末分化(PezzuttoW"/.,(1987)//附附wwo/.138:2793;Tedder"fl/.(1994)/附/mmo/roflrflyjj:437)。CD19的细胞外结构域包含两个C2型免疫球蛋白(IG)样结构域，它们被一个较小的潜在的二碌u键连接的结构域分开。CD19的细胞质结构域在结构上是独特的，但在人类、小鼠与豚鼠之间是高度保守的(Fujimoto"(1998)5^附/w/附附"m/.M:267)。CD19是在B淋巴细胞的细胞表面上发现的一种蛋白质复合体的部分。该蛋白质复合体包括CD19、CD21(补体受体，2型)、Cl)81(TAPA-1)、以及CD225(Leu-13)(Fujimoto，在上)。cD19是B细胞中重要的跨膜信号调节体。CD19细胞表面密度的增加或降低影响B细胞的发育以及功能，造成多种疾病，如自身免疫以及低丙种球蛋白血症(Fujimoto，在上)。CD19复合体通过对在B细胞膜上发现的两个单独的信号转导复合体进行交联而增强B细胞在体内对抗原的反应。这两个与膜IgM以及CD19相关的信号转导复合体通过不同的机制激活磷脂酶C(PLC)。CD19以及B细胞受体的交联降低了激活PLC所需的IgM分子的数目(Fujimoto,在上；Ghetie,在上)。此外，CD19作为专门的衔接子蛋白发挥作用，用于Arc家族激酶的扩增(HasegawaWfl/.，10(2001)//附附"冊/167:31卯)。CD19结合已经显示出增强并抑制B细胞的激活以及增殖，这取决于发生交联的量(Tedder，在上)。CD19在大于90%的B细胞淋巴瘤上表达，并已经被预测在体外以及体内影响淋巴瘤的生长(Ghetie，在上)。目前针对CD19产生的抗体为鼠类抗体。使用鼠类抗体治疗人类患者的缺点是施用于患者后的人类抗鼠(HAMA)反应。因此，对于针对CD19的经修饰的治疗抗体存在着需要，这些抗体更有效地治疗和/或预防通过CD19介导的疾病。概述本公开提供了分离的单克隆抗体，特别是人类单克隆抗体，这些抗体特异性结合CD19并且表现出多种所希望的特性。这些特性包括结合人类(:I)19的高亲和力、被表达CD19的细胞内化、和/或介导抗原依赖性细胞毒性的能力。本发明的抗体可以用于(例如)检测CD19蛋白或抑制表达CD19的细胞(如表达CD19的肿瘤细胞)的生长。还提供了使用本公开的抗体以及组合物治疗多种CD19介导的疾病的方法。一方面，本公开涉及一种分离的人类单克隆抗体、或该抗体的抗原结合部分，其中该抗体结合人类CD19,并且表现出以下特性中的至少一种(a)以lxlO.7M或更小的Ko与人类CD19相结合;(b)与Raji以及DaudiB细胞肿瘤细胞相结合；(c)被表达CD19的细胞内化；(d)表现出针对表达CD19的细胞的抗体依赖性细胞毒作用(AI)CC);并且(c)当缀合细胞毒素时在体内抑制表达CD19的细胞的生长。优选地，该抗体表现出特性(a)、(b)、(c)、(d)、以及(e)中的至少两种。更优选地，该抗体表现出特性(a)、(b)、(c)、(d)、以及(e)中的至少三种。更优选地，该抗体表现出特性(a)、(b)、(c)、(d)、以及(e)中的四种。甚至更优选地，该抗体表现出特性(a)、(b)、(c)、(d)、以及(e)中的全部五种。在另一个优选的实施方案中，当该抗体缀合细胞毒素时该抗体抑制表达CD19的肿瘤细胞在体内的生长。在一个实施方案中，该抗体以5x10-SM或更小的Ko与人类CD19相结合，以2xlO-SM或更小的KD与人类CD19相结合，以1xl(T8M或更小的Ko与人类CD19相结合，以5xlO力M或更小的Ku与人类CD19相结合，以4xlO一M或更小的KD与人类CD19相结合，以3xlO力M或更小的Kn与人类CD19相结合，或以2xl(T9M或更小的Ko与人类CD19相结合。优选地，该抗体是一种人类抗体，尽管在备选实施方案中该抗体可以是一种鼠类抗体、嵌合抗体或人源化抗体。另一方面，本发明涉及一种分离的人类单克隆抗体、或其抗原结合部分；其中该抗体交叉竟争结合人类CD19上可被参考抗体识别的表位，其中该参考抗体包含(a)重链可变区，包含氨基紗列SEQIDNO:l;以及(b)轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:8;或该参照抗体包含(a)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:l;以及(b)轻链可变区，包含氨基,列SEQIDNO:9;或该参照抗体包含(a)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:2;以及(b)轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:10;或该参照抗体包含(a)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:3;以及(b)轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:ll;或该参照抗体包含(a)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:4;以及(b)轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:12;或该参照抗体包含(a)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:5;以及(b)轻链可变区，包含氨基紗歹'jSEQlDNO:13;或该参照抗体包含(a)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:6;以及(b)轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:14;或该参照抗体包含(a)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:7;以及(b)轻链可变区，包含氨基,列SEQIDNO:15。另一方面，本公开涉及分离的单克隆抗体、或其抗原结合部分，其中该抗体包含作为人类VH5-51基因的产物或衍生自该基因的重链可变区，其中该抗体异地结合CD19。本公开还提供了一种分离的单克隆抗体、或其抗原结合部分，其中该抗体包含作为人类VHl-69基因的产物或衍生自该基因的重链可变区，其中该抗体特异地结合CD19。本公开还进一步提供了一种分离的单克隆抗体，或其抗原结合部分，包含作为人类VkL18基因的产物或衍生自该基因的轻链可变区，其中该抗体特异地结合CD19。本公开甚至进一步提供了一种分离的人类单克隆抗体、或其抗原结合部分，其中该抗体包含作为人类VKA27基因的产物或衍生自该基因的轻链可变区，其中该抗体特异地结合CD19。本公开甚至进一步了提供一种分离的人类单克隆抗体、或其抗原结合部分，其中该抗体包含作为人类VKL15基因的产物或衍生自该基因的轻链可变区，其中该抗体特异地结合CD19。在一个优选的实施方案中，本公开提供一种分离的人类单克隆抗体、或其抗原结合部分，其中该抗体包含(a)人类VH5-51或1-69基因的重链可变区；以及(b)人矣VkL18、A27或VjcL15的轻链可变区；其中该抗体特异地结合CD19。另一方面，本公开提供了一种分离的人类单克隆抗体、或其抗原结合部分，其中该抗体包含包括CDR1、CDR2、以及CDR3序列的重链可变区；以及包括CDR1、CDR2、以及CDR3序列的轻链可变区，其中(a)该重链可变区CDR3序列包括一个氨基酸序列，该氨基酸序列选自氨基酸序列SEQIDNO:30、31、32、33、34、35以及36，以及它们的保守性修饰；(b)该轻链可变区CDR3序列包括一个氨基酸序列，该氨基酸序列选自氨基酸序列SEQIDNO:51、52、53、54、55、56、57以及58，以及它们的保守性{|"饰；(c)该抗体以lxl(T7M或更小的K。与人类CD19相结合；并且(d)与Raji以及DaudiB细胞肿瘤细胞相结合。优选地，该重链可变区CDR2序列包括一条氨基酸序列，该氨基酸序列选自氨基酸序列SEQIDNO:23、24、25、26、27、28以及29，以及它们的保守性修饰；并且该轻链可变区CDR2序列包括一条氨基酸序列，该氨基齡列选自氨基紗列SEQIDNO:44、45、46、47、48、49以及50,以及它们的保守性修饰。优选地，该重链可变区CDR1序列包括一条氨基酸序列，该氨基酸序列选自氨基酸序列SEQIDNO:16、17、18、19、20、21以及22，以及它们的保守性修饰；并且该轻链可变区CDR1序列包括一条氨基酸序列，该氨基酸序列选自氨基酸序列SEQIDNO:37、38、39、40、41、42以及43,以及它们的保守性修饰。一种优选的组合包括(a)重链可变区CDR1，(b)重链可变区CDR2，(c)重链可变区CDR3，(d)轻链可变区CDR1，(e)轻链可变区CDR2，(f)轻链可变区CDR3，另一种优选的组合包括:(a)重链可变区CDR1，(b)重链可变区CDR2，(c)重链可变区CDR3，(d)轻链可变区CDR1，(e)轻链可变区CDR2，(f)轻链可变区CDR3，另一种优选的组合包括(a)重链可变区CDR1，重链可变区CDR2，重链可变区CDR3，轻链可变区CDR1，(b)(c)(d)(e)(f)包含SEQIDNO:16包含SEQIDNO:23包含SEQIDNO:30包含SEQIDNO:37包含SEQIDNO:44包含SEQIDNO:51包含SEQIDNO:16包含SEQIDNO:23包含SEQIDNO:30包含SEQIDNO:37包含SEQIDNO:44包含SEQIDNO:52包含SEQIDNO:17包含SEQIDNO:24包含SEQIDNO:31以及以及包含SEQIDNO:38;轻链可变区CDR2，包含SEQIDNO:45;以及轻链可变区CDR3，包含SEQIDNO:53。另一种优选的组合包括(a)重链可变区CDR1，(b)重链可变区CDR2，(c)重链可变区CDR3，(d)轻链可变区CDR1，(e)轻链可变区CDR2，(f)轻链可变区CDR3，另一种优选的组合包括(a)重链可变区CDR1，(b)重链可变区CDR2，(c)重链可变区CDR3，(d)轻链可变区CDR1，(e)轻链可变区CDR2,(f)轻链可变区CDR3，另一种优选的组合包括(a)重链可变区CDR1，(b)重链可变区CDR2，(c)重链可变区CDR3，(d)轻链可变区CDR1，(e)轻链可变区CDR2，(f)轻链可变区CDR3，另一种优选的组合包括(a)重链可变区CDR1，(b)重链可变区CDR2，(c)重链可变区CDR3，(d)轻链可变区CDR1，(e)轻链可变区CDR2，(f)轻链可变区CDR3，包含SEQIDNO:18;包含SEQIDNO:25;包含SEQIDNO:32;包含SEQIDNO:39;包含SEQIDNO:46;以及包含SEQIDNO:54。包含SEQIDNO:19;包含SEQIDNO:26;包含SEQIDNO:33;包含SEQIDNO:40;包含SEQlDNO:47;以及包含SEQIDNO:55。包含SEQIDNO:20;包含SEQIDNO:27;包含SEQIDNO:34;包含SEQIDNO:41;包含SEQIDNO:48;以及包含SEQIDNO:56。包含SEQIDNO:21;包含SEQIDNO:28;包含SEQIDNO:35;包含SEQIDNO:42;包含SEQIDNO:49;以及包含SEQIDNO:57。15另一种优选的组合包括:(a)重链可变区CDR1，(b)重链可变区CDR2，(c)重链可变区CDR3，(d)轻链可变区CDR1，(e)轻链可变区CDR2，(f)轻链可变区CDR3:包含SEQIDNO:22包含SEQIDNO:29:包含SEQIDNO:36包含SEQIDNO:43;包含SEQIDNO:50;以及包含SEQIDNO:58。其他优选的抗体、或其抗原结合部分，包括(a)重链可变区，包括一个氨基酸序列，该氨基酸序列选自NO:l、2、3、4、5、6以及7;以及(b)轻链可变区，包括一个氨基酸序列，该氨基酸序列选自NO:8、9、10、11、12、13、14以及15;其中该抗体特异地结合CD19。一个优选的组合包括(a)重链可变区，包含氨基酸序列NO:l;以及(b)轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:8。(a)重链可变区，包含氨基酸序列包含氨基酸序列SEQIDNO:9。(a)重链可变区，包含氨基酸序列包含氨基酸序列SEQIDNO:10。(a)重链可变区，包含氨基酸序列包含氨基酸序列SEQIDNO:ll。(a)重链可变区，包含氨基酸序列NO:4;以及(b)轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:12。另一个优选的组合包括(a)重链可变区，包含氨基酸序列NO:5;以及(b)轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:13。另一个优选的组合包括(a)重链可变区，包含氨基酸序列NO:6;以及(b)轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:14。另一个优选的组合包括(a)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDSEQID另一种优选的组合包括N():l;以及(b)轻链可变区另一个优选的组合包括:N():2;以及(b)轻链可变区另一个优选的组合包括:N():3;以及(b)轻链可变区另一个优选的组合包括:SEQIDSEQIDSEQIDSEQIDSEQIDSEQIDSEQIDSEQIDNO:7;以及(b)轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:15。本公开的另一方面，提供了多种抗体、或它们的抗原结合部分或片段，争结合CD19。例如，本公开的抗体可以是全长抗体，例如IgGl或IgG4同种型。备选地，该抗体可以是诸如Fab、Fab，或Fab，2片段的抗体片段，或单链抗体。本公开还提供了一种免疫连接物，其包含连接到治疗剂(例如细胞毒素或放射性同位素)的本公开的抗体、或其抗原结合部分。在一个特别优选的实施方案中，本发明提供了一种免疫连接物，该免疫连接物包括连接到细胞毒素(例如，此处说明的细胞毒素或者说明于2006年12月28日提交的美国专利申请号60/882,461或2007年11月30曰提交的美国专利申请号60/991,300中，将它们完整并入本文作为参考)的本公开的抗体、或其抗原结合部分(例如，通过硫醇连接)。例如，在不同的实施方案中，本发明提供了以下优选的免疫连接物(i)一种免疫连接物，包含一种抗体、或其抗原结合部分，该抗体或其抗原结合部分包含(a)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:l;以及轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:8;(b)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:l;以及轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:9;(c)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:2;以及轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:10;(d)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:3;以及轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:ll;(e)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:4;以及轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:12;(f)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:5;以及轻链可变区，17包含氨基酸序列SEQIDNO:13;(g)重链可变区，包含氨基gl^列SEQIDNO:6;以及轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:14;或者(h)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:7;以及轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:15，其中，该抗体或其抗原结合部分被连接到细胞毒素上(ii)一种免疫连接物，包括连接到细胞毒素的抗体、或其抗原结合部分，该抗体或其抗原结合部分包含(a)重链可变区CDRl,包含SEQIDNO:16;(b)重链可变区CDR2，包含SEQIDNO:23;(c)重链可变区CDR3，包含SEQIDNO:30;(d)轻链可变区CDR1，包含SEQIDNO:37;(e)轻链可变区CDR2，包含SEQIDNO:44;以及(f)轻链可变区CDR3，包含SEQIDNO:51;一种抗体、或其抗原结合部分，包含(a)重链可变区CDR1，包含SEQIDNO:16;(b)重链可变区CDR2，包含SEQIDNO:23;(c)重链可变区CDR3，包含SEQIDNO:30;(d)轻链可变区CDR1，包含SEQIDNO:37;(e)轻链可变区CDR2，包含SEQIDNO:44;以及(f)轻链可变区CDR3，包含SEQIDNO:52;一种抗体、或其抗原结合部分，包含(a)重链可变区CDRl,包含SEQIDNO:17;(b)重链可变区CDR2，包含SEQIDNO:24;(c)重链可变区CDR3，包含SEQIDNO:31;(d)轻链可变区CDR1，包含SEQIDNO:38;(e)轻链可变区CDR2，包含SEQIDNO:45;以及(f)轻链可变区CDR3，包含SEQIDNO:53;一种抗体、或其抗原结合部分，包含(a)重链可变区CDR1，包含SEQIDNO:18;(b)重链可变区CDR2，包含SEQIDNO:25;(c)重链可变区CDR3，包含SEQIDNO:32;(d)轻链可变区CDRl,包含SEQIDN():39;(e)轻链可变区CDR2，包含SEQIDNO:46;以及(f)轻链可变区CDR3，包含SEQIDNO:54;一种抗体、或其抗原结合部分，包含(a)重链可变区CDR1，包含SEQIDNO:19;(b)重链可变区CDR2，包含SEQIDNO:26;(c)重链可变区CDR3，包含SEQIDNO:33;(d)轻链可变区CDR1，包含SEQIDNO:40;(e)轻链可变区CDR2，包含SEQIDNO:47;以及(f)轻链可变区CDR3，包含SEQIDNO:55;一种抗体、或其抗原结合部分，包含(a)重链可变区CDR1，包含SEQIDNO:20;(b)重链可变区CDR2，包含SEQlDNO:27;(c)重链可变区CDR3，包含SEQIDNO:34;(d)轻链可变区CDRl,包含SEQIDNO:41;(c)轻链可变区CDR2，包含SEQIDNO:48;以及(f)轻链可变区CDR3，包含SEQIDNO:56;一种抗体、或其抗原结合部分，包含(a)重链可变区CDR1，包含SEQIDNO:21;(b)重链可变区CDR2，包含SEQIDNO:28;(c)重链可变区CDR3，包含SEQIDNO:35;(d)轻链可变区CDR1，包含SEQIDNO:42;(e)轻链可变区CDR2，包含SEQIDNO:49;以及(f)轻链可变区CDR3，包含SEQIDNO:57;或者一种抗体、或其抗原结合部分，包含(a)重链可变区CDR1，包含SEQIDNO:22;(b)重链可变区CDR2，包含SEQIDNO:29;(c)重链可变区CDR3，包含SEQIDNO:36;(d)轻链可变区CDRl,包含SEQIDNO:43;(e)轻链可变区CDR2，包含SEQIDNO:50;以及(f)轻链可变区CDR3，包含SEQIDNO:58;以及(iii)一种免疫连接物，包括连接到细胞毒素的抗体、或其抗原结合部分，其中该抗体或其抗原结合部分与一种抗体所识别(例如，与下述抗体竟争结合人类CD19)的表位相同的表位相结合，后一抗体包含(a)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:l;以及轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:8。(b)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:l;以及轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:9。(c)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:2;以及轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:10;(d)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:3;以及轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:ll;(e)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:4;以及轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:12;(f)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:5;以及轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:13;(g)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:6;以及轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:14;或者(h)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:7;以及轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:15。本公开还提供了一种双特异性分子，该双特异性分子包含本公开的抗体、或其抗原结合部分或片段，其中该抗体或其抗原结合部位或片段与第二个功能部分相连接，该第二功能部分具有与所述抗体或其抗原结合部分不同的结合特异性。还提供了多种组合物，其包含本公开的抗体、或其抗原结合部分、或免疫连接物、或双特异性分子，以及药学上可接受的载体。本公开还包括对本公开的抗体、或它们的抗原结合部分进行编码的核酸分子、以及包含此类核酸的表达载体以及包含此类表达载体的宿主细胞。还提供了使用包括此类表达载体的宿主细胞制备抗CD19抗体的方法，并且这些方法可包括步骤(i)在宿主细胞中表达该抗体以及(ii)从宿主细胞中分离该抗体。在又一方面中，本发明涉及一种制备抗CD19抗体的方法。该方法包括(a)提供(i)重链可变区抗体序列，包括CDR1序列，该CDR1序列选自SEQIDNO:16至22;CDR2序列，该CDR2序歹寸选自SEQIDN():23至29;和/或CDR3序歹寸，该CDR3序列选自SEQIDNO:30至36;和/或(ii)轻链可变区抗体序列，包含CDR1序列，该CDR1序列选自SEQIDNO:37至43;CDR2序列，该CDR2序列选自SEQIDNO:44至50，和/或CDR3序列，该CDR3序歹寸选自SEQIDNO:51至58;(b)在重链可变区抗体序列和/或轻链可变区抗体序列中改变至少一个氨基酸残基，以产生至少一种被改变的抗体序列；并且(c)将被改变的抗体序列表达成蛋白质。本公开还提供了以高亲和力与CD19特异性结合的分离的抗CD19抗体_配偶体分子缀合物，特别是那些包含人类单克隆抗体的抗CD19抗体-配偶体分子缀合物。此类抗体-配偶体分子缀合物中有某些能被内化至表达CD19的细胞中，并且能介导抗原依赖性细胞毒作用。本公开还提供了使用在此7>开的抗CD19抗体-配偶体分子缀合物治疗癌症的方法，这些癌症例如B细胞恶性肿瘤，包括非霍奇金淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、滤泡型淋巴瘤、B谱系弥漫性大细胞淋巴瘤、以及多发性骨髓瘤。还提供了包含与本公开的配偶体分子相缀合的抗体、或其抗原结合部21分的组合物。可以有利地与在此公开的抗体配偶体分子缀合物中的抗体相缀合的配偶体分子包括但不限于作为药物的分子、细胞毒素、标记分子(如放射性同位素)、蛋白质、以及治疗剂。还在此公开了包含抗体-配偶体分子缀合物以及药学上可接受的栽体的组合物。一方面，此类抗体-配偶体分子缀合物通过化学连接体相缀合。在一些实施方案中，该连接体是肽基连接体，并在此被表示为(L、一F—(L"m。其他连接体包括肼以及二硫键连接体，并在此中被分别表示为(L"p—H—(iJ)m或(L一J—(L"m。除了与配偶体相附着的连接体之外，本发明还提供了适用于附着至基本上任何分子种类的可切割的连接臂。另一方面，本发明涉及抑制表达CD19的肿瘤细胞生长的方法。该方法包括将表达CD19的肿瘤细胞与本公开的抗体-配偶体分子缀合物相接触，使得表达CD19的肿瘤细胞的生长受到抑制。在一个优选的实施方案中，该配偶体分子是一种治疗剂，如细胞毒素。特别优选的表达CD19的肿瘤细胞是B细胞肿瘤细胞。另一方面，本发明涉及治疗受试者体内癌症的方法。该方法包括给予该受试者本公开的抗体-配偶体分子缀合物，使得该受试者体内的癌症得到治疗。在一个优选的实施方案中，该配偶体分子是一种治疗剂，如细胞毒素。用于治疗的特别优选的癌症是B细胞恶性肺瘤，例如非霍奇金淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、滤泡型淋巴瘤、B傳系弥漫性大细胞淋巴瘤、以及多发性骨髓瘤。易见的，这些说明与实施例不得被解释为是对本公开的限制。本申请全文引用的所有参考文献、Genbank登录号、专利、以及已公开的专利申请都明确地并入本文作为参考。附图简述图1A示出了21D4以及21D4a人类单克隆抗体的重链可变区的核苷酸序列(SEQIDNO:59)以及氨基餅列(SEQIDNO:1)。描绘了CDR1)、以及CDR3(SEQIDNO:30)区，并指明了V、D、以及J的种系来源。图1B示出了21D4人类单克隆抗体的轻链可变区的核苷i^f列(SEQIDNO:66)以及氨基酸序列(SEQIDNO:8)。描绘了CDRl(SEQIDNO:37)、CDR2(SEQIDNO:44)、以及CDR3(SEQIDNO:51)区，并指明了V与J的种系来源。图1C示出了21D4a人类单克隆抗体的轻链可变区的核苷^列(SEQIDNO:67)以及氨基酸序列(SEQIDNO:9)。描绘了CDRl(SEQIDN():37)、CDR2(SEQIDNO:44)、以及CDR3(SEQIDNO:52)区，并指明了V与J的种系来源。图2A示出了47G4人类单克隆抗体的重链可变区的核苷酸序列(SEQIDN():60)以及氨基酸序列(SEQIDNO:2)。描绘了CDRl(SEQIDN():17)、CDR2(SEQIDNO:24)、以及CDR3(SEQIDNO:31)区，并指明了V、D、以及J的种系来源。图2B示出了47G4人类单克隆抗体的轻链可变区的核苷i^f列(SEQII)NO:68)以及氨基酸序列(SEQIDNO:10)。描绘了CDRl(SEQIDIN():38)、CDR2(SEQIDNO:45)、以及CDR3(SEQIDNO:53)区，并指明了V与J的种系来源。图3A示出了27F3人类单克隆抗体的重链可变区的核苷酸序列(SEQIDNO:61)以及氨基酸序列(SEQIDNO:3)。描绘了CDRl(SEQIDN():18)、CDR2(SEQIDNO:25)、以及CDR3(SEQIDNO:32)区，并指明了V、D、以及J的种系来源。图3B示出了27F3人类单克隆抗体的轻链可变区的核苷,列(SEQIDNO:69)以及氨基酸序列(SEQIDNO:11)。描绘了CDRl(SEQIDN():39)、CDR2(SEQIDNO:46)、以及CDR3(SEQIDNO:54)区，并指明了V与J的种系来源。图4A示出了3C10人类单克隆抗体的重链可变区的核苷^f列(SEQIDNO:62)以及氨基酸序列(SEQIDNO:4)。描绘了CDRl(SEQIDN():19)、CDR2(SEQIDNO:26)、以及CDR3(SEQIDNO:33)区，并指明了V、D、以及J的种系来源。图4B示出了3C10人类单克隆抗体的轻链可变区的核苷,列(SEQIDNO:70)以及氨基酸序列(SEQIDNO:12)。描绘了CDR1(SEQIDNO:40)、CDR2(SEQIDNO:47)、以及CDR3(SEQIDNO:55)区，并指明了V与J的种系来源。图5A示出了5G7人类单克隆抗体的重链可变区的核苷酸序列(SEQIDNO:63)以及氨基酸序列(SEQIDNO:5)。描绘了CDR1(SEQIDN():20)、CDR2(SEQIDNO:27)、以及CDR3(SEQIDNO:34)区，并指明了V、D、以及J的种系来源。图5B示出了5G7人类单克隆抗体的轻链可变区的核苷酸序列(SEQIDNO:71)以及氨基酸序列(SEQIDNO:13)。描绘了CDR1(SEQIDNO:41)、CDR2(SEQIDNO:48)、以及CDR3(SEQIDNO:56)区，并指明了V与J的种系来源。图6A示出了13F1人类单克隆抗体的重链可变区的核苷酸序列(SEQII)NO:64)以及氨基酸序列(SEQIDNO:6)。描绘了CDR1(SEQIDN():21)、CDR2(SEQIDNO:28)、以及CDR3(SEQIDNO:35)区，并指明了V、D、以及J的种系来源。图6B示出了13Fl人类单克隆抗体的轻链可变区的核苷酸序列(SEQIDNO:72)以及氨基酸序列(SEQIDNO:14)。描绘了CDR1(SEQIDNO:42)、CDR2(SEQIDNO:49)、以及CDR3(SEQIDNO:57)区，并指明了V与J的种系来源。图7A示出了46E8人类单克隆抗体的重链可变区的核苷酸序列(SEQII)NO:65)以及氨基酸序列(SEQIDNO:7)。描绘了CDRl(SEQIDN():22)、CDR2(SEQIDNO:29)、以及CDR3(SEQIDNO:36)区，并指明了V、D、以及J的种系来源。图7B示出了46E8人类单克隆抗体的轻链可变区的核苷酸序列(SEQIDNO:73)以及氨基酸序列(SEQIDNO:15)。描绘了CDRl(SEQIDNO:43)、CDR2(SEQIDNO:50)、以及CDR3(SEQIDNO:58)区，并指明了V与J的种系来源。图8示出了21D4以及21D4a的重链可变区的氨基酸序列(均为SEQIDNO:l)与人类种系VH5-51氨基酸序列(SEQIDNO:74)的比对。JH4b种系被/^开为SEQIDNO:80。图9示出了47G4的重链可变区的氨基酸序列(SEQIDN():2)与人类种系VHl-69氨基酸序列(SEQIDNO:75)的比对。JH5b种系被公开为SEQIDNO:81。图IO示出了27F3的重链可变区的氨基酸序列(SEQIDNO:3)与人类种系VH5-51氨基酸序列(SEQIDNO:74)的比对。JH6b种系被公开为SEQIDNO:82。图11示出了3C10的重链可变区的氨基酸序列(SEQIDNO:4)与人类种系VH1-69氨基醋列(SEQIDNO:75)的比对。JH6b种系被公开为SEQIDNO:82。图12示出了5G7的重链可变区的氨基酸序列(SEQIDNO:5)与人类种系VH5-51氨基醋列(SEQIDNO:74)的比对。JH6b种系被公开为SEQl關O:83。图13示出了13F1的重链可变区的氨基酸序列(SEQIDNO:6)与人类种系VH5-51氨基酸序列(SEQIDNO:74)的比对。JH6b种系被公开为SEQIDNO:82。图14示出了46E8的重链可变区的氨基紗列(SEQIDNO:7)与人类种系VH5-51氨基餅列(SEQIDNO:74)的比对。JH6b种系被公开为SEQIDNO:82。图15示出了21D4的轻链可变区的氨基醋列(SEQIDNO:8)与人类种系VKL18氨基酸序列(SEQIDNO:76)的比对。JK2种系被公开为SEQIDNO:84。图16示出了21D4a的轻链可变区的氨基酸序列(SEQIDNO:9)与人类种系VKL18氨基醋列(SEQIDNO:76)的比对。JK3种系被公开为SEQIDNO:85。图17示出了47G4的轻链可变区的氨基酸序列(SEQIDNO:IO)与人类种系VkA27氨基酸序列(SEQIDNO:77)的比对。JK3种系被公开为SEQIDNO:85。图18示出了27F3的轻链可变区的氨基断列(SEQIDNO:ll)与人类种系VkL18氨基断列(SEQIDNO:76)的比对。JK2种系被公开为SEQIDNO:84。图19示出了3C10的轻链可变区的氨基酸序列(SEQIDNO:12)与人类种系VkL15氨基酸序列(SEQIDNO:78)的比对。JK2种系被公开为SEQIDNO:84。图20示出了5G7的轻链可变区的氨基紗列(SEQIDNO:13)与人类种系VkL18氨基酸序列(SEQIDNO:76)的比对。JK1种系被公开为SEQIDNO:86。图21示出了13F1的轻链可变区的氨基酸序列(SEQIDNO:14)与人类种系VkL18氨基餅列(SEQIDNO:76)的比对。JK2种系被公开为SEQIDNO:87。图22示出了46E8的轻链可变区的氨基财列(SEQIDNO:15)与人类种系VkL18氨基酸序列(SEQIDNO:76)的比对。JK2种系被公开为SEQIDNO:87。图23是显示实验结果的一个曲线图，这些实验证明针对人类CD19的人类单克隆抗体47G4与人类CD19特异性地相结合。图24A及B是显示实验结果的一个曲线图，这些实验结果证明针对CD19的人类单克隆抗体在Raji细胞竟争结合。图25A至D示出了流式细胞术实验的结果，证明针对人类CD19的人类单克隆抗体21D4、21D4a、47G4、3C10、5G7以及13F1结合B细胞肿瘤细胞系的细胞表面。(A)在经人类CD19转染的CHO细胞上HuMAb211)4以及47G4的流式细胞术。(B)在DaudiB肺瘤细胞上HuMAb47G4的流式细胞术。(C)在RajiB肺瘤细胞上HuMAb21D4以及47G4的流式细胞术。(D)在RajiB肺瘤细胞上HuMAb21D4、21D4a、3C10、5G7以及13F1的流式细"包术。图26A至B示出了内化实验的结果，通过3H-胸苷释放测定，证明针对人类CD19的人类单克隆抗体21D4以及47G4进入CHO-CD19细胞以及表达CD19的RajiB胂瘤细胞。(A)HuMAb47G4内化进入CHO-CD19细胞。(B)HuMAb21D4以及47G4内化进入RajiB肿瘤细胞。图27A及B示出了胸苷掺入测定的结果，证明针对人类CD19的人类单克隆抗体杀死RajiB细胞肺瘤细胞。图28示出了Ramos系统模型中小鼠存活的Kaplan-Meier曲线。图29A至B示出了Ramos系统模型中小鼠体重的变化。图30A至B示出了体内小鼠肿瘤模型研究的结果，证明用棵露的抗CIM9抗体21D4的治疗对淋巴瘤具有直接的体内抑制作用。(A)ARH-77肿瘤(B)Raji肿瘤。图31示出了抗体依赖性细胞毒作用(ADCC)测定的结果，证明非岩藻糖基化的人类单克隆抗CD19抗体以ADCC依赖的方式增强了对人类白血病细胞的细胞毒性。图32示出了体内小鼠肿瘤模型研究的结果，证明缀合了细胞毒素的抗CIM9抗体减小肿瘤体积。毒素1是细胞毒素Nl，而毒素2是细胞毒素N2。'图33示出了Raji肿瘤模型研究中小鼠的体重变化。毒素1是细胞毒素N1，而毒素2是细胞毒素N2。图34示出了猕猴研究的结果，表明用岩藻糖基化或非岩藻糖基化的抗CD19HuMAb治疗后CD20阳性细月包群体减少。图35示出了用岩藻糖基化或非岩藻糖基化的抗CD19HuMAb治疗后各个猕猴的结果。图36A至C示出了胸苷掺入测定的结果，证明仅针对人类CD19或者缀合了细胞毒素的人类单克隆抗体杀死Raji以及SU-DHL-6B细胞肿瘤细胞。图37示出了在皮下异种移植SCID小鼠模型中免疫连接物抗CD19-N2针对肺瘤形成的体内功效。图38示出了在皮下伯基特淋巴瘤SCID小鼠模型中免疫连接物抗CD19-N2针对肺瘤形成的体内功效。图39示出了在系统的SCID小鼠模型中免疫连接物抗CD19-N2针对肿瘤形成的体内功效。图40A示出了在给予21D4后B细胞(CD20阳性)以剂量依赖方式减少，在O.Olmg/kg时具有最小的或者完全没有清除。在给予O.lmg/kg后，B细胞减少至基线的16%到32%。图40B展示了在给予21D4后B细胞清除的量级以及时间长度与注射0.1mg/kg利妥希玛后B细胞清除的量级以及时间长度相似。图41示出了在Raji异种移植SCID小鼠模型中单次剂量的抗CD19-细胞毒素A针对肿瘤形成的体内功效。图42示出了在Raji异种移植SCID小鼠模型中单次剂量的抗CD19-细胞毒素A针对肺瘤形成的体内功效，包括同种型对照。图43示出了在Ramos异种移植Esie棵鼠模型中单次剂量以及重复剂量的抗CD19-细胞毒素A针对肺瘤形成的体内功效。图44示出了在Daiidi异种移植SCID小鼠模型中单次剂量的抗CD19-细胞毒素A针对肿瘤形成的体内功效。图45示出了在SU-DHL6异种移植SCID小鼠模型中单次剂量的抗CI)19-N2针对肿瘤形成的体内功效。N2=细胞毒素B。图46是细胞毒素A的结构。详述本公开涉及分离的单克隆抗体，特别是人类单克隆抗体，这些抗体以高亲和力特异地结合人类CD19并且具有所希望的功能特性。在某些实施方案中，本公开的抗体衍生自特定的重链及轻链种系序列和/或包含特定的结构特征，例如包括特定的氨基酸序列的CDR区。本公开提供了分离的28抗体，制备此类抗体、抗体-配偶体分子缀合物、以及包括此类抗体的双特异性分子的方法，以及包含本公开的抗体、抗体-配偶体分子缀合物、或双特异性分子的药物组合物。本公开还涉及使用所述抗体如检测CD19，以及治疗与CD19的表达相关的疾病(例如表达CD19的B细胞恶性肿瘤)的方法。因此，本公开还提供使用本公开的抗CD19抗体以及抗体-配偶体分子缀合物治疗B细胞恶性肿瘤的方法，例如，治疗非霍奇金淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、滤泡型淋巴瘤、B谱系弥漫性大细胞淋巴瘤、以及多发性骨髓瘤。为了更容易地理解本公开，首先定义了某些术语。其他定义在整个详细说明中给出。如此处使用的术语"CD19"指(例如)人类CD19的变体、同种型、同源物、直向同源物、以及侧向同源物。因此，本公开的人类抗体在某些情况下可以与来自除人类之外的其他物种的CD19进行交叉反应。在某些实施方案中，该抗体对于一个或多个人类CD19蛋白可能是完全特异的，并且可能不表现出物种或其他类型的非人类交叉反应性，或者可能与来自某些其他物种但不是所有其他物种的CD19交叉反应(如与灵长类CD19进行交叉反应但不与小鼠CD19进行交叉反应)。术语"人类CD19，，指人类序列CD19，如具有Genbank登录号NM—001770的人类CD19的完整氨基酸序列(SEQIDNO:79)。术语"小鼠CD19"指小鼠序列CD19,如具有Genbank登录号AAA37390的小鼠CD19的完整氨基#列。通过具有例如保守突变或在非保守区的突变，该人类CD19序列可能不同于Genbank登录号NMJHH770的人类CD19，而该CD19具有基本上与Genbank登录号NM—001770的人类CD19相同的生物功能。一个特定的人类CD19序列与Genbank登录号NM—001770的人类CIM9在氨基酸序列上通常会有至少卯％的同一性，并且含有多个氨基酸残基，当与其他物种(如鼠类)的CD19氨基酸序列相比时，这些氨基酸残基将该氨基酸序列鉴定为是人源的。在某些情况下，人类CD19与Genbank登录号为NM—001770的CD19在氨基酸序列上可具有至少95%,或者甚至至少96%、97%、98%或99%的同一性。在某些实施方案中，与Genbank登录号NM—001770的CD19序列相比，人类CD19序列可展示出不超过10个氨基酸差异。在某些实施方案中，与Genbank登录号NM—001770的CD19序列相比，该人类CD19可展示出不超过5个，或者甚至不超过4、3、2或1个氨基酸差异。百分比同一性可以如此处所说明进行确定。术语"免疫应答"是指例如，淋巴细胞、抗原呈递细胞、吞噬细胞、粒细胞、以及由上述细胞或肝脏产生的可溶性大分子(包括抗体、细胞因子、以及补体)的作用，这些作用导致对侵入性病原体、被病原体感染的细胞或组织、癌细胞，或者，在自身免疫及病理炎症情况下，正常的人类细胞或组织的选择性损害、破坏或将它们从人体清除。"信号转导途径"是指在多种信号传导分子之间的生物化学关系，这些分子在将信号从细胞的一部分传递到细胞的另一部分中发挥作用。在此使用的短语"细胞表面受体，，包括，例如，能够接受信号并将这种信号传递穿过细胞的原生质膜的分子及分子的复合体。本公开的"细胞表面受体"的一个实例是CD19受体。在此使用的术语"抗体"包括整个抗体及它们的任何抗原结合片段(即"抗原结合部分")或它们的单链。"抗体"指包括通过二硫键互相连接的至少两条重链(H链)及两条轻链(L链)的糖蛋白，或其抗原结合部分。每一条重链都包括重链可变区(在此缩写为VH)以及重链恒定区。该重链恒定区包括三个结构域，CH1、Ch2以及Ch3。每一条轻链都包括轻链可变区(在此缩写为VL)及轻链恒定区。该轻链恒定区包括一个结构域，Cl。Vn和VL.区域可以进一步被细分为多个高可变性区域，被称为互补决定区(CI)R)，其间散布有更为保守的被称为构架区(FR)的多个区域。每个VH以及VL均由3个CDR及4个FR构成，按照以下顺序从氨基端至羧基端排布FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。重链及轻链的可变区包含与抗原相互作用的结合域。这些抗体的恒定区可以介导免疫球蛋白与宿主的组织或因子的结合，这些宿主的组织或因子包括免疫系统的不同细胞(例如效应细胞)及经典补体系统的第一成分(Clq)。在此所使用的术语"抗体片段"以及抗体的"抗原结合部分"(或简称为"抗体部分")是指保留特异性结合抗原(例如CD19)的能力的抗体的一个或多个片段。已经发现抗体的抗原结合功能可以由全长抗体的片段来实现。术语抗体的"抗原结合部分"中所涵盖的结合片段的实例包括(i)Fab片段，由VL、Vh、Cl及Cm结构域构成的单价片段组成；(ii)F(ab')2片段，为包括在铰链区由二硫桥连接的两个Fab片段的一个二价片段；(iii)Fab，片段，它实质上是带有铰链区部分的Fab(见，FUNDAMENTALIMMUNOLOGY(Pauled"3rded.1993);(iv)由Vh及CH1结构域构成的Fd片段；(v)由抗体的一个单臂的Vl及VH结构域构成的Fv片段；(vi)dAb片段(Warde"/.，(1989)A^""341:544-546),它由VH结构域构成；(vii)分离的互补决定区(CDR);以及(viii)纳米抗体(nanobody)，含有一个单一可变结构域及两个恒定结构域的重链可变区。此外，虽然FV片段的两个结构域，Vl与Vh，是由单独的基因编码的，但是可以使用重组方法由合成接头将它们连接起来，该接头使它们成为单一蛋白链，其中VL及V区域配对形成单价分子(被称为单链Fv(scFv);参见例如BirdC(1988)Science242:423-426;及Hustonetal.(1988)Science242:423-426;及Hustona/.(1988)/Voc.TV",/.Jaw/.S"'，CAS"/!85:5879-5883)(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA85:5879-5883)。术语抗体的"抗原结合部分"也旨在涵盖此类单链抗体。这些抗体片段可通过本领域技术人员已知的常规方法获得，并且对于这些片段进行的有用性的筛选与筛选完整抗体的方式相同。此处使用的"分离的抗体"，意指抗体，它基本上没有具有不同抗原特异性的其他抗体(例如，特异性结合CD19的分离的抗体基本上没有特异性结合除CD19以外的抗原的抗体)。然而，特异性结合CD19的分离的抗体对于其他抗原，例如来自其他物种的CD19分子，可以具有交叉反应性。此外，分离的抗体可以基本上没有其他细胞材料和/或化学物。此处使用的术语"单克隆抗体"或"单克隆抗体组合物，，是指由单一分子31组分的抗体分子形成的制剂。单克隆抗体组合物显示了针对某一特定表位的单一结合特异性及亲和力。此处使用的术语"人类抗体，，意指包括具有可变区的抗体，在这些可变区中，构架区及CDR区均源自人类种系免疫蛋白序列。此外，如果该抗体包括恒定区，则该恒定区也源自人类种系免疫球蛋白序列。本公开的人类抗体可以包括不是由人类种系免疫球蛋白序列所编码的氨基酸残基(例如，在体外由随机诱变或位点特异性诱变引入的突变或在体内由体细胞突变引入的突变)。然而，此处使用的术语"人类抗体"并非意指包括以下抗体其中源自另一个哺乳动物物种(例如小鼠)的种系的CDR序列被移植到人类构架区序列上。术语"人单克隆抗体，，是指显示出单一结合特异性的抗体，这些抗体具有多个可变区，其中构架和CDR区均源自人类种系免疫球蛋白序列。在一个实施方案中，人单克隆抗体由杂交瘤产生，该杂交瘤包括由转基因非人类的动物(例如转基因小鼠)获到的B细胞，所述动物具有包括融合至无限增殖化细胞的人类重链转基因及轻链转基因的基因组。此处使用的术语"重组人类抗体，，包括通过重组方法制备、表达、产生或分离的所有人类抗体，例如(a)从动物(例如小鼠)中分离的抗体，该动物对于人类免疫球蛋白基因是转基因的或转染色体的，或从由其制备出的杂交瘤分离的抗体(以下将进一步说明)；(b)从经转化以表达人类抗体的宿主细胞(例如转染瘤)中分离的抗体，(c)从重组的组合人类抗体文库中分离的抗体，以及(d)通过任何其他方法来制备、表达、产生或分离的抗体，这些方法包括将人类免疫球蛋白基因序列剪接到其他DNA序列。这种重组人类抗体具有可变区，其中构架区及CDR区均源自于人类种系免疫球蛋白序列。然而，在某些实施方案中，这种重组人类抗体也可经受体外诱变(或者，在使用对于人类Ig序列转基因的动物时，经受体内体细胞诱变)，并且接着，重组抗体的Vh和Vt区域的氨基酸序列为这样的序列其尽管衍生于人类种系Vh和VL序列并与其相关，但是并不天然存在于体内人类抗体种系所有组成成分之中。此处使用的"同种型"是指由重链恒定区基因编码的抗体种类(例如IgM或IgGl)。短语"识别抗原的抗体"与"对抗原特异的抗体，，此处可以与术语"特异性结合抗原的抗体"互换使用。术语"人类抗体衍生物"是指人类抗体的任何经修饰的形式，例如，该抗体与另一种试剂或抗体的偶联物。术语"人源化抗体"意指以下抗体，其中源自另一个哺乳动物物种(如小鼠)的种系的CDR序列被移植到人类构架序列上。可以在人类构架序列中进行额外的构架区修饰。术语"嵌合抗体，，意指以下抗体，其中可变区序列源自一个物种而恒定区序列源自另一个物种，例如一种抗体，其中可变区序列源自小鼠抗体而恒定区序列源自人类抗体。术语"抗体模拟物"旨在表示能够模拟抗体的结合抗原的能力的分子，但是它们不局限于天然抗体结构。此类抗体模拟物的实例包括但不限于亲和体(Affibody)、经设计的锚蛋白重复蛋白(DARPin)、抗运载蛋白(Anticalin)、Avimer、以及万能抗体(Versabody)，所有这些抗体模拟物采用结合结构，尽管它们模拟常规抗体结合，但是这些结构从不同的作用机理产生并通过这些机理发挥作用。此处使用的术语"配偶体分子"指实体，它缀合至抗体-配偶体分子缀合物中的抗体上。配偶体分子的实例包括药物、细胞毒素、标记分子(包括但不限于肽以及小分子标记物，如荧光染料标记物，以及单原子标记物，如放射性同位素)、蛋白质以及治疗剂。此处使用的"特异性结合人类CD19，，的抗体旨在表示以1xl(T7M或更小，更优选地5x10_8]\!或更小，更优选地3xlO-SM或更小，更优选地1xl()-SM或更小，甚至更优选地5xr9M或更小的Ko结合人类CD19的抗体。此处使用的术语"基本上不结合"一种蛋白质或细胞是指不结合或不以高亲和力结合蛋白质或细^n即，以lxlO"M或更大，更优选为lxl(T533M或更大，更优选为1x10"M或更大，更优选为1xl(T3M或更大，甚至更优选为1x1(^M或更大的Ko结合蛋白质或细胞。此处使用的术语"K股。e，，或"Ka"旨在表示特定的抗体-抗原相互作用的结合速率，而此处使用的术语"Kdis"或"Kd"旨在表示特定的抗体-抗原相互作用的解离速率。此处使用的术语"Ko"旨在表示解离常数，它是由Ka与Ka之比(即Kd/Ka)得到，并被表示为摩尔浓度(M)。抗体的Kj)值可以使用本领域成熟的方法进行确定。确定抗体的KD的一种优选方法是通过使用表面等离振子共振，优选使用诸如Biacore⑧系统的生物传感器系统。此处使用的术语IgG抗体的"高亲和力"是指抗体对于靶抗原具有的KD为1xl(T7M或更小，更优选地为5xl(T8M或更小，并且甚至更优选地为1xl(T9M或更小，并且甚至更优选地为5xi(T9M或更小。然而，对于其他抗体同种型而言，"高亲和力"结合可以发生变化。例如，对于IgM同种型而言，"高亲和力"结合是指抗体具有的Ko值为l(T6M或更小，更优选为10々m或更小，甚至更优选为10—Sm或更小。此处使用的术语"受试者"包括任何人类或非人类动物。术语"非人类动物，，包括所有脊推动物，例如哺乳动物及非哺乳动物，例如非人灵长类动物、绵羊、犬、猫、马、奶牛、鸡、两栖动物、爬行动物等等。符号"-"，不论是用作一个鍵或显示为垂直于一个键时均表明一个点，在该点处所显示的部分(moiety)连接到该分子、固相支持体等的其余部分上。除非另作说明，术语"烷基"，就其本身或作为另一个取代基的部分，是指直链或支链的或环状烃基、或它们的组合，它可以是完全饱和的、单不饱和的、或多不饱和的，并且能包括二价以及多价原子弹，具有所指定的碳原子数目(即CVCh)是指1至10个碳原子)。饱和烃基的实例包括但不限于以下基团，例如曱基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基、环己基、(环己基)曱基、环丙基甲基、以及(例如)正戊基、正己基、正庚基、正辛基的同系物或异构体、以及类似物。不饱和烷基基团是具有一个或多个双键或三键的基团。不饱和烷基基团的实例包括但不限于乙烯基、2-丙烯基、丁烯基、2-异戊烯基、2-(丁二烯基)、2,4-戊二烯基、3-(l，4-戊二烯基)、乙炔基、l-丙炔基以及3-丙炔基、3-丁炔基，以及更高级同系物以及异构体。除非另有说明，术语"烷基"还意在包括那些以下详细说明的烷基衍生物，如"杂烷基"。限于烃基基团的烷基基团被称为"同烷基"。术语"亚烷基"其本身或作为另一个取代基的部分是指衍生自烷烃的二价基团，例如但不局限于-CH;jCH2CH2CH2-，并且进一步包括那些如下说明为"杂亚烷基"的基团。典型地，烷基(或亚烷基)基团将具有1到24个碳原子，其中具有10个或更少的碳原子的那些基团在本发明中是优选的。"低级烷基"或"低级亚烷基"是较短链的烷基或亚烷基基团，一般具有八个或更少的碳原子。除非另作说明，术语"杂烷基"就其本身或与另一个术语组合，是指稳定的直链或支链、或环状烃基、或它们的组合，由所说明的数目的碳原子以及至少一个杂原子组成，该杂原子选自O、N、Si、以及S，并且其中氮、碳、以及硫原子会可任选地被氧化，并且氮杂原子会可任选地被季铵化。一个或多个杂原子O、N、S、及Si可位于杂烷基基团的任何内部位置，或可位于该烷基团附着于该分子的其余部分的位置。实例包括但不限于-CH2-CH2-OCH3、-CH2-CH2NH-CH3、CH2-CH2N(CH3)CH3、CH2-S-CH2-CH3、CH2-CH2-S(0)-CH3、-CH2-CH2S(0)2-CH3、-CH=CH-OCH3、-Si(CH3)3、-CH2-CH=N-OCH3、以及-CH=CH-N(CH3)-CH3。多达两个杂原子可以是连续的，例如-CH2-NH-OCH3"A-CH2-0-Si(CH3)3。类似地，术语"杂亚烷基，，就其本身或作为另一个取代基的部分是指衍生自杂烷基的二价基，例如但不限于-CH2-CH2-S-CH2-CH2-以及—CH2-SCH2-CH2-NH-CH2-。对于杂亚烷基基团，杂原子也可占据链末端的任一端或两端(例如，亚烷氧基、亚烷二氧基、亚烷基氨基、亚烷基二氨基、等等)。术语"杂烷基"与"杂亚烷基"包括聚(乙二醇)及其4汙生物(参见例如，ShearwaterPolymersCatalog,2001)。此外，对于亚烷基以及杂亚烷基连接基团，书写连接基团的分子式的方向并不表示连接基团的方向。例如，式-C(0)2R，-代表-C(0)2R，-以及-R，C(())2-。与术语"烷基"或"杂烷基，，组合使用的术语"低级"是指具有1到6个碳原子的部分。术语"烷氧基"、"烷氨基"、"烷基磺酰基"、以及"烷硫基"(或硫代烷氧基)都是以它们的常规意义使用，并分别指通过氧原子、氨基基团、so2基团、或硫原子附着于该分子的其余部分的那些烷基基团。术语"芳香磺酰基"是指通过S02基团附着于该分子其佘部分的芳基基团，且术语"巯基"是指SH基团。一般而言，"酰基取代基"也选自以上所给出的组。在此使用的术语"酰基取代基"指附着于羰基碳并满足其化合价的基团，该羰基碳直接或间接地附着于本发明的此合物的多环核上。除非另作说明，术语"环烷基"与"杂环烷基"，就它们本身或与其他术语组合，分别表示环型的取代或未取代的"烷基，，以及取代或未取代的"杂烷基"。另外，对于杂环烷基，杂原子可占据杂环附着于分子的其余部分的位置。环烷基的实例包括但不限于环戊基、环己基、l-环己烯基、3-环己烯基、环庚基、等等。杂环烷基的实例包括但不限于l-(l，2，5，6-四氢吡咬基)、l-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-吗啉基、3-吗啉基、四氢呋喃-2-基、四氢呋喃-3-基、四氢噻吩-2-基、四氢噻吩-3-基、l-哌溱基、2-哌溱基、等等。环结构的杂原子以及碳原子可任选地被氧化。除非另作说明，术语"卣，，或"卣素"，就它们自身或作为另一个取代基的部分，是指氟、氯、溴、或碘原子。此外，术语如"卣烷基"是指包括单卤烷基以及多卣烷基。例如，术语"卣(C广C4)烷基，，旨在包括但不限于三氟曱基、2，2,2-三氟乙基、4-氯代丁基、3-溴丙基、等等。除非另作说明，术语"芳基"是指取代或未取代的多不饱和的芳香烃取代基，它可以是单一的环或多环(优选地从1至3个环)，这些环稠合在一起或以共价键相连接。术语"杂芳基"指芳基基团(或环)，这些芳基基团含有一至四个选自N、O、以及S的杂原子，其中氮、碳、以及硫原子可任选地被氧化，并且氮原子可任选地被季铵化的。杂芳基可以通过杂原子附着于该分子的其余部分。芳基以及杂芳基基团的非限制性实例包括苯基、l-萘基、2-萘基、4-联苯基、l-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、3-吡唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、吡溱基、2-喁哇基、4-噁峻基、2-苯基-4-噁哇基、5-噍哇基、3-异噁唑基、4-异喁唑基、5-异噁唑基、2-蓬唑基、4-^>上基、5-噻唑基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-瘗吩基、3-瘗吩基、2-吡淀基、3-吡梵基、4-吡啶基、2-嘧淀基、4-嘧咬基、5-苯并噻唑基、噤呤基、2-苯并咪唑基、5-吲味基、l-异喹啉基、5-异喹啉基、2-喹喔啉基、5-喹喔啉基、3-喹啉基、以及6-喹啉基。以上提到的每一个芳基以及杂芳基环状体系的取代基选自以下说明的可接受的取代基的组。"芳基，，以及"杂芳基"也包括环体系，其中一个或多个非芳香族环体系被稠合、或者以其他方式结合至芳基或杂芳基体系上。简言之，术语"芳基"当与其他术语(如芳氧基、芳硫基、芳烷基)组合使用时，包括以上定义的芳基环以及杂芳基环。因此，术语"芳烷基，，意在包括那些基团，其中芳基基团附着于烷基基团(例如，苯甲基、苯乙基、吡啶基曱基、等等)；包括那些烷基基团，其中一个碳原子(例如，亚曱基基团)已被(例如)一个氧原子取代(如苯氧基曱基、2-吡啶基氧基曱基、3-(l-萘氧基)丙基、等等)。以上术语(如"烷基"、"杂烷基"、"芳基"、以及"杂芳基")各自均包括指定基团的取代以及未取代的形式。以下提供每个类型基团的优选取代基。烷基、以及杂烷基的取代基(包括那些经常提到的如亚烷基、链烯基、杂亚烷基、杂烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、环烯基、以及杂环烯基)一般分别称为"烷基取代基"以及"杂烷基取代基，，，并且它们可以是一个或多个基团，这些基团选自但不限于-OR'、=0、=NR，、=N-OR，、-NR，R"、SR，、-卣素、-SiR，R，，R，"、-OC(O)R,、-C(O)R，、-C02R，、-CONR，R"、-()C(O)NR，R"、-匿，C(O)R，、-NR，-C(O)NR"R"，、-NR"C(0)2R，、-NR-C(NR，R"R，，，)=NR，，，，、-NR-C(NR,R，，)=NR，，，、-S(O)R，、-S(0)2R，、-S(())2NR，R"、-NRS02R，、-CN、以及一N02，数量在从0到(2m，+l)的范围内，其中m，是这种基团的碳原子的总数。R，、R"、R，"以及R，，"各自均优选地独立地指氢、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的芳基，例如取代有1至3个卣素的芳基、取代或未取代的烷基、烷氧基或硫代烷氧基基团、或芳烷基基团。当本发明的化合物包括多于一个R基团时，例如，当这些基团中多于一个基团存在时，这些R基团各自均独立地选为R，、R"、R"，以及R，，，，基团。当R，和R，，附着于相同的氮原子时，它们可与氮原子组合成5、6、或7元环。例如，-NR，R，，旨在包括，但不局限于，1-吡咯烷基以及4-吗啉基。从以上取代基的讨论中，本领域中的技术人员会明白术语"烷基"旨在包括结合到非氢基团的基团上的碳原子的基团，例如卣烷基(如CFj以及-CH2CF3)以及酰基(如-C(0)CH3、-C(0)CF3、-C(0)CH2OCH3、等等)。类似于对烷基基团所说明的取代基，芳基取代基以及杂芳基取代基通常分别被称为"芳基取代基"以及"杂芳基取代基"，并且是不同的并选自，例如卣素、OR，、=0、=NR，、=N-OR，、-NR，R"、-SR，、画卣素、SiR，R"R"，、OC(())R，、-C(O)R，、-C02R，、-CO麼R"、-OC(O)NR，R"、-匿，C(O)R，、-NR，-C(O)NR"R，"、-NR，，C(0)2R，、-NR-C(NR，R")=NR，"、-S(O)R，、-S(())2R，、S(0)2NR，R"、-NRS02R，、-CN以及一N02、-R，、-N3、CH(Ph)2、氟(C广C4)烷氧基、以及氟(c广co烷基，并且其数目从o到芳香环状体系上开i文化合价的总数的范围内；并且其中R，、R"、R"，以及R""优选独立地选自氢、(d-Q)烷基以及杂烷基、未取代的芳基以及杂芳基、(未取代的芳基)-(d-C4)烷基、以及(未取代的芳基)氧基-(C,-C4)烷基。当本发明的化合物包括多于一个R基团时，例如，当这些基团中多于一个基团存在时这些R基团各自均被独立地选为R，、R"、R"，以及R，"，基团。任选地，在该芳基或杂芳基环的相邻原子上的两个芳基取代基可被具有式为-T-C(O)-(CRR，)q-U-的取代基取代，其中，T和U独立为-NR-、-O-、-CRR，-或单键；且q是从0到3的整数。备选地，在该芳基或杂芳基环的相邻原子上的两个取代基可任选被具有式-A-(CH2)r-B-的取代基取代，其中，A和B独立地为-CRR，-、-O-、画NR-、-S-、-S(O)-、-S(0)2-、-S(0)2NR，-或单键；且r是从1到4的整数。如此形成的新环的单键之一可任选被双键代替。备选地，在该芳基或杂芳基环的相邻原子的取代基上的两个取代基可任选地被具有式为-(CRR，)s-X-(CR"R"，)d-的取代基取代，其中s和d独立地是从0至3的整数，并且X是-O-、-NR，-、-S-、-S(O)、-S(0)2-、或-S(0)2NR，-。优选地，取代基R、R，、R"以及R，"独立地选自氢或取代或未取代的(d-C6)烷基。此处使用的术语"二磷酸酯"包括但不局限于包含两个磷酸酯基团的磷酸的酯。术语"三磷酸酯，，包括但不局限于包含三个磷酸酯基团的磷酸的酉旨。例如，具有二磷酸酯或三磷酸酯的特定的药物包括i=_石悉醋船此处使用的术语"杂原子"包括氧(O)、氮(N)、硫(S)、以及硅(Si)。符号"R"是一个通用缩写，它代表取代基，该取代基选自取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、以及取代或未取代的杂环基基团。在以下各分部中进一步详细地说明了本发明的不同方面。具有特定功能特性的抗CD19抗体本公开的抗体的特征为抗体的特定的功能特征或特性。例如，该抗体特异地结合人类CD19。优选地，本公开的抗体以高亲和力结合CD19，例如以lxl(T7M或更小的Kd。本公开的抗CD19抗体优选地显示以下特征中的一种或多种39(a)以lxl0—7M或更小的KD与人类CD19相结合;(b)与Raji以及DaudiB细胞肿瘤细胞相结合；(c)被表达CD19的细月包内化；(d)表现出针对表达CD19的细胞的抗体依赖性细胞毒作用(ADCC);并且(e)当与细胞毒素相缀合时抑制表达CD19的细胞在体内的生长。优选地，该抗体表现出特性(a)、(b)、(c)、(d)、以及(e)中的至少两种。更优选地，该抗体表现出特性(a)、(b)、(c)、(d)、以及(e)中的至少三种。更优选地，该抗体表现出特性(a)、(b)、(c)、(d)、以及(e)中的四种。甚至更优选地，该抗体表现出特性(a)、(b)、(c)、(d)、以及(e)中的全部五种。在另一个优选的实施方案中，当该抗体缀合细胞毒素时该抗体抑制表达CD19的肺瘤细胞在体内的生长。优选地，该抗体以5xl0—SM或更小的KD与人类CD19相结合，以lxl(T8M或更小的Ko与人类CD19相结合，以5xl(T9M或更小的Kd与人类CD19相结合，以4x10-9M或更小的Ko与人类CD19相结合，以3xl(T9M或更小的Ko与人类CD19相结合，或以2x10—9M或更小的KD与人类CD19相结合，或以1xl(T9M或更小的KD与人类CD19相结合。本发明的抗体与CD19的结合可用一种或多种本领域已建立的技术进行评估。例如，在一个优选的实施方案中，抗体可用流式细胞术测定进行检测，其中该抗体与表达人类CD19的细胞系进行反应，例如已经被转染而能在CH()细胞表面表达CD19的CHO细胞，或表达CD19的细胞系，如OVCAR3、NCI-H226、CFPAC-1和/或KB(例如，对于一种合适的测定参见实施例3A,以及细胞系的进一步说明)。另外地或可选择地，抗体的结合，包括结合动力学(如KD值)可在BIAcore结合测定中进行测试(例如，针对合适的测定参见实施例3B)。其他适宜的结合测定包括ELISA测定，例如使用重组的CD19蛋白(例如，针对合适的测定参见实施例1)。优选地，本公开的抗体与CD19蛋白结合的KD为5xl(T8M或更小、与CI)19蛋白结合的KD为3x10—SM或更小、与CD19蛋白结合的KD为1x10-8M或更小、与CD19蛋白结合的KD为7xl(T9M或更小、与CD19蛋白结合的Ku为6x10—9M或更小、或者与CD19蛋白结合的K。为5xi(r9M或更小。该抗体对CD19的结合亲和力可以通过例如标准BIACORE分析来评估(参见例如实施例3B)。用于通过表达CD19的细胞评估抗CD19抗体的内化作用的标准测定在本领域中是已知的(参见如实施例5中说明的Hum-ZAP以及免疫荧光测定)。用于通过抗CD19抗体评估CD19与CA125的结合及其抑制作用的标准测定在本领域中也是已知的(参见如实施例6中说明的OVCAR3细胞黏着测定)。用于评估针对表达CD19的细胞的ADCC的标准测定在本领域中也是已知的(参见如实施例7中说明的ADCC测定)。用于通过抗CI)19抗体评估体内肿瘤细胞生长的抑制作用，以及其细胞毒素缀合物的标准测定在本领域中也是已知的(参见如实施例8中说明的肿瘤异种移植小鼠模型)。本发明的抗体优选是人类单克隆抗体。另外地或备选地，该抗体可以是例如嵌合的或人源化的单克隆抗体。单克隆抗体21D4、21D4a、47G4、27F3、3C10、5G7、13F1以及46E8本公开的优选的抗体是人类单克隆抗体21D4、21D4a、47G4、27F3、3C10、5G7、13F1以及46E8，它们如在实施例16、17、18、19、20、21以及22所说明的那样进行分离并且进行结构表征。21D4、21D4a、47G4、27F3、3C10、5G7、13F1以及46E8的Vh氛基酸序列分別示于SEQIDN():l、2、3、4、5、6、以及7中。21D4、21D4a、47G4、27F3、3C10、5G7、13F1以及46E8的VL氨基酸序列分别示于SEQIDNO:8、9、10、11、12、13、14以及15中。考虑到这些抗体中每一种均能结合CD19，可将Vh和Vt序列进行"混合并匹配"，以产生本公开的其他抗CD19结合分子。可以使用以上所说明以及实施例中的结合测定(如ELISA)来测试此类"混合并匹配，，的抗体与CD19的结合。优选地，当Vh和VL链被混合并匹配时，来自特定Vh/Vl对的Vh序列被結枸相似的Vh序列代替。同样地，优选地来自特定VH/Vt对的Vij序列被结构相似的Vl序列代替。因此，一方面，本公开提供了分离的单克隆抗体、或其抗原结合部分，包括(a)重链可变区，包含氨基酸序列，该氨基^f列选自SEQIDNO:1、2、3、4、5、6、以及7;以及(b)轻链可变区，包含氨基酸序列，该氨基酸序列选自SEQIDNO:8、9、10、11、12、13、14以及15;其中该抗体特异地结合CD19，优选人类CD19。优选的重链及轻链组合包括(a)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:l;以及(b)轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:8;或者(a)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:l;以及(b)轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:9;或者(a)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:2;以及(b)轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:10;或者(a)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:3;以及(b)轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:ll;或者(a)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:4;以及(b)轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:12;或者(a)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:5;以及(b)轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:13;或者(a)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:6;以及(b)轻链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:14;或者(a)重链可变区，包含氨基酸序列SEQIDNO:7;以及(b)轻链可变区，包含氨基醋列SEQIDNO:15。另一方面，本公开提供了包括21D4、21D4a、47G4、27F3、3C10、5G7、13F1以及46E8的重链和轻链CDR1、CDR2、以及CDR3或它们的组合的抗体。21D4、21D4a、47G4、27F3、3C10、5G7、13F1以及46E8的VhCDR1的氨基財列示于SEQIDNO:16、17、18、19、20、21、以及22中。21D4、21D4a、47G4、27F3、3C10、5G7、13F1以及46E8的VHCDR2的氨基*列示于SEQIDNO:23、24、25、26、27、28、以及29中。21D4、21D4a、47G4、34F3、3C10、5G7、13F1以及46E8的VHCDR3的氨基酸序列示于SEQIDNO:30、31、32、33、34、35、以及36中。21D4、211)4a、47G4、27F3、3C10、5G7、13F1以及46E8的VKCDR1的氨基,列示于SEQIDNO:37、38、39、40、41、42、以及43中。21D4、21D4a、47G4、27F3、3C10、5G7、13F1以及46E8的VKCDR2的氨基酸序列分另J^口SEQIDNO:44、45、46、47、48、49、以及50戶斤示。21D4、21D4a、47G4、27F3、3C10、5G7、13F1以及46E8的VKCDR3的氨基酸序列分别如SEQIDNO:51、52、53、54、55、56、57、以及58所示。CDR区是用Kabat系统描述的(Kabat，E.A""fl/.(1991)SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,FifthEdition,U.S.DepartmentofHealthandHumanServices,NIHPublicationNo.91-3242)。在这些抗体中每一种均能够结合CD19、并且抗原结合特异性主要由CDR1、CDR2、及CDR3区提供的条件下，VHCDR1、CDR2、以及CDR3序列与VkCDRl、CDR2、以及CDR3序列可以被"混合并匹配，，(即，来自不同抗体的CDR可以被混合并匹配，尽管每种抗体均必须包含VHCDR1、CDR2、以及CDR3以及VkCDRl、CDR2，以及CDR3)，以产生本公开的其他抗CD19结合分子。可以使用以上所说明及实施例中的结合测定(例如，ELISA、Biacore⑧分析)检测CD19与此类"混合并匹酉己，，的抗体的结合。优选地，当VHCDR序列被混合并匹配时，来自特定Vh序列的CDR1、CDR2和/或CDR3序列被结构上相似的一种或多种CDR序列代替。同样，当VkCDR被混合并且匹配时，来自特定Vk序列的CDRl、CI)R2、和/或CDR3序列被结构上相似的一个或多个CDR序列代替。对于本领域普通技术人员非常清楚的是，通过用来自在此公开的单克隆抗体211)4、21D4a、47G4、27F3、3C10、5G7、13F1以及46E8的CDR序列的结构上类似的序列代替一个或多个Vh和/或VlCDR区序列，可以产生新颖的Vh和V^序列。因此，另一方面，本公开提供了一种分离的单克隆抗体、或其抗原结合部分，包含(a)重链可变区CDR1,包含氨基^列，该氨基酸序列选自SEQI關()16、17、18、19、20、21、以及22;(b)重链可变区CDR2，包含氨基酸序列，该氨基酸序列选自SEQII)NO:23、24、25、26、27、28、以及29;(c)重链可变区CDR3，包含氨基酸序列，该氨基酸序列选自SEQIDNO:30、31、32、33、34、35、以及36;(d)轻链可变区CDR1，包含氨基酸序列，该氨基酸序列选自SEQn)NO:37、38、39、40、41、42、以及43;(e)轻链可变区CDR2，包含氨基酸序列，该氨基酸序列选自SEQ1DNO:44、45、46、47、48、49以及50;以及(f)轻链可变区CDR3,包含氨基酸序列，该氨基酸序列选自SEQIl)NO:51、52、53、54、55、56、57以及58;其中该抗体特异地结合CD19，优选人类CD19。在一个优选的实施方案中，该抗体包含(a)重链可变区CDR1,包含SEQIDNO:16;(b)重链可变区CDR2，包含SEQIDNO:23;(c)重链可变区CDR3，包含SEQIDNO:30;(d)轻链可变区CDR1，包含SEQIDNO:37;(e)轻链可变区CDR2，包含SEQIDNO:44;以及(f)轻链可变区CDR3，包含SEQIDNO:51。在另一个优选的实施方案中，该抗体包含(a)重链可变区CDR1,包含SEQIDNO:16;(b)重链可变区CDR2,包含SEQIDNO:23;(c)重链可变区CDR3，包含SEQIDNO:30;44(d)轻链可变区CDR1，包含SEQIDNO:37;(e)轻链可变区CDR2,包含SEQIDNO:44;以及(f)轻链可变区CDR3,包含SEQIDNO:52。在另一个优选的实施方案中，该抗体包含(a)重链可变区CDR1，包含SEQIDNO:17;(b)重链可变区CDR2，包含SEQIDNO:24;(c)重链可变区CDR3,包含SEQIDNO:31;(d)轻链可变区CDR1，包含SEQIDNO:38;(e)轻链可变区CDR2，包含SEQIDNO:45;以及(f)轻链可变区CDR3,包含SEQIDNO:53。在另一个优选的实施方案中，该抗体包含(a)重链可变区CDR1，包含SEQIDNO:18;(b)重链可变区CDR2，包含SEQIDNO:25;(c)重链可变区CDR3,包含SEQIDNO:32;(d)轻链可变区CDR1，包含SEQIDNO:39;(e)轻链可变区CDR2，包含SEQIDNO:46;以及(f)轻链可变区CDR3，包含SEQIDNO:54。在另一个优选的实施方案中，该抗体包含(a)重链可变区CDR1，包含SEQIDNO:19;(b)重链可变区CDR2，包含SEQIDNO:26;(c)重链可变区CDR3，包含SEQIDNO:33;(d)轻链可变区CDR1,包含SEQIDNO:40;(e)轻链可变区CDR2，包含SEQIDNO:47;以及(f)轻链可变区CDR3,包含SEQIDNO:55。在另一个优选的实施方案中，该抗体包含(a)重链可变区CDR1，包含SEQIDNO:20;(b)重链可变区CDR2，包含SEQlDINO:27;(c)重链可变区CDR3，包含SEQIDNO:34;(d)轻链可变区CDR1，包含SEQIDNO:41;(e)轻链可变区CDR2，包含SEQIDNO:48;以及(f)轻链可变区CDR3，包含SEQIDNO:56。在另一个优选的实施方案中，该抗体包含(a)重链可变区CDR1，包含SEQIDNO:21(b)重链可变区CDR2,包含SEQIDNO:28;(c)重链可变区CDR3，包含SEQIDNO:35;(d)轻链可变区CDR1,包含SEQIDNO:42;(e)轻链可变区CDR2，包含SEQIDNO:49;以及(f)轻链可变区CDR3,包含SEQIDNO:57。在另一个优选的实施方案中，该抗体包含(a)重链可变区CDR1，包含SEQIDNO:22;(b)重链可变区CDR2，包含SEQIDNO:29;(c)重链可变区CDR3,包含SEQIDNO:36;(d)轻链可变区CDR1，包含SEQ1DNO:43;(e)轻链可变区CDR2,包含SEQIDNO:50;以及(f)轻链可变区CDR3，包含SEQIDNO:58。在本领域中所熟知的是，CDR3结构域独立于一个或多个CDR1和/或CDR2结构域，可以单独决定抗体对于同族抗原的结合特异性，并且可预期地产生多种抗体，这些抗体具有基于共同的CDR3序列的相同的结合特异性。参见，例如KlimkaCff/"5"力^。/Omcc83(2):252画260(2000)(描述了仅^f吏用鼠类抗CD30抗体Ki-4的重链可变结构域CDR3来产生人源化抗CD30抗体)；BeiboerCa/.，/Mo/.肌o/.296:833-849(2000)(描述了仅使用亲代鼠类MOC-31抗EGP-2抗体的重链CDR3序列的重组上皮糖蛋白-2(EGP画2)抗体)；RaderWA^/.t/.5".A95:8910-8915(1998)(描述了4吏用鼠类抗整联蛋白0^卩3抗体LM609的重链及轻链可变CDR3结构域的一组人源化抗整联蛋白avf33抗体，其中每一种成员抗体在CDR3结构域之外均包含不同的序列，并且与亲代鼠类抗体一样结合相同的表位，并且亲和力与亲代鼠类抗体一样高或比亲代鼠类抗体更高)；BarbasW"/.，/爿附.C7^附，5^c.116:2161-2162(1994)(披露了CI)R3结构域对抗原结合的贡献度最大)；Barbas"AW/.^ctw/.92:2529-2533(1995)(描迷了将三个针对人类胎盘DNA的Fab(SI-1、SI-40、以及SI-32)的重链CDR3序列移植到抗破伤风类毒素Fab的重链上，由此替换现有的重链CDR3，并证实仅有CDR3结构域就能够赋予结合特异性)；以及Ditzel"fl/.，丄/附附w柳/.157:739-749(1996)(描述了移植研究，其中仅将亲代多特异性FabLNA3的重链CDR3移植到单特异性IgG破伤风类毒素结合的Fabp313抗体的重链上，就足以保留亲代Fab的结合特异性)；Berezovetal"BIAjournal8:ScientificReview8(2001)(说明了基于抗HER2单克隆抗体的CDR3的肽模拟物)；Igarashictal.，，J.Biochem(roAyo)117:452-7(1995)(i兌明了对应于抗磷脂酰丝氨酸抗体的CDR3结构域的一种12个氨基酸的合成多肽)；Bourgeoisetal.，丄Virol72:807-10(1998)(显示了衍生自抗呼吸道合胞病毒(RSV)抗体的重链CDR3结构域的一个单肽能够在体外中和该病毒)；Levietal.，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.90:4374-8(1993)(说明了基于鼠类抗HIV抗体的重链CDR3结构域的一种肽)；Polymenis和Stoller，J,Immunol.152:5218-5329(1994)(说明了通过移植Z-DNA结合抗体的重链CDR3区使得能够结合scFv);以及Xu和Davis,Immunity13:37-45(2000)(说明了重链CDR3的多样性足以使得其他部分相同的IgM分子区分多种半抗原以及蛋白质抗原)。还见于美国专利号6,951,646;6,914,128;6,090,382;6,818,216;6,156,313;6,827,925;5,833,943;5，762，卯5;以及5,760,185，说明了由单一CDR结构域定义的已获得专利的抗体。这些参考文献中每一篇均完整引入本文作为参考。因此，本公开提供了单克隆抗体，其包含来自衍生自人类或非人类动物的抗体的一个或多个重和/或轻链CDR3结构域，其中该单克隆抗体能够特异性结合CD19。在某些方面，本公开提供了包括来自非人类抗体(例如小鼠或大鼠抗体)的一个或多个重链和/或轻链CDR3结构域的单克隆抗体，其中该单克隆抗体能够特异地性结合CD19。在一些实施方案中，包括来自非人类抗体的一个或多个重链和/或轻链CDR3结构域的此类创造性的抗体与相应的亲代非人类抗体相比(a)能够与其竟争结合；(b)保留其功能特性；(c)与其结合至相同的表位；和/或(d)与其具有相似的结合亲和力。在其他方面，本公开提供了单克隆抗体，其包含来自人类抗体(例如，获自非人类动物的一种人类抗体)的一个或多个重和/或轻链CDR3结构域，其中该人类抗体能够特异性结合CD19。在其他方面，本公开提供了多种单克隆抗体，其包括来自第一人类抗体(例如，从非人类的动物获得的人类抗体)的一个或多个重链和/或轻链CDR3结构域，其中该第一人类抗体能够特异性结合CD19，并且其中来自该第一人类抗体的CDR3功能域替换了人类抗体中缺乏CD19结合特异性的CDR3结构域，以产生能够特异性结合CD19的第二人类抗体。在一些实施方案中，包括来自第一人类抗体的一种或多种重链和/或轻链CDR3结构域的这种发明的抗体对相应的亲代第一人类抗体而言(a)能够与其竟争结合；(b)保留其功能特征；(c)与其结合至相同的表位；和/或(d)与其具有相似的结合亲和力。具有特定种系序列的抗体在某些实施方案中，本公开的抗体包括来自特定的种系重链免疫球蛋白基因的重链可变区和/或来自特定的种系轻链免疫球蛋白基因的轻链可变区。例如，在一个优选的实施方案中，本公开提供了一种分离的单克隆抗体、或它的抗原结合部分，包含作为人类VH5-51基因的产物或衍生自该基因的重链可变区，其中该抗体特异地结合CD19。在另一个优选的实施方案中，本公开提供了一种分离的单克隆抗体、或它的抗原结合部分，包含作为人类VHl-69基因的产物或衍生自该基因的重链可变区，其中该抗体特异地结合CD19。在另一个优选的实施方案中，本^^开提供了一种分离的单克隆抗体、或它的抗原结合部分，包含作为人类VKL18基因的产物或衍生自该基因的轻链可变区，其中该抗体特异地结合CD19。在另一个优选的实施方案中，本公开提供了一种分离的单克隆抗体、或它的抗原结合部分，包含作为人类VKA27基因的产物或衍生自该基因的轻链可变区，其中该抗体特异地结合CD19。在另一个优选的实施方案中，本公开提供了一种分离的单克隆抗体、或它的抗原结合部分，包含作为人类VKL15基因的产物或衍生自该基因的轻链可变区，其中该抗体特异性结合CIM9。在另一个优选的实施方案中，本公开提供了一种分离的单克隆抗体、或它的抗原结合部分，其中该抗体(a)包含重链可变区，该重链可变区是人类VH5-51或1-69基因的产物或衍生自该基因(这些基因所编码的氨基酸序列分别在SEQIDNO:74以及75中给出)；(b)包含轻链可变区，该轻链可变区是人类基因VKL18、VKA27、或VKL15基因的产物或衍生自该基因(这些基因所编码的氨基酸序列分别在SEQIDNO:76、77、以及78中给出)；并且(c)特异地结合CD19，优选人类CD19。此类抗体也可能拥有以上详细说明的一个或多个功能特性，例如结合人类CD19的高亲和力、被表达CD19的细胞内化、介导针对表达CD19的细胞的ADCC的能力、和/或当与一种细胞毒素相缀合时在体内抑制表达CD19的肿瘤细胞的肺瘤生长的能力。分别具有VH5-51以及VkL18的VH以及Vk的抗体的实例是21D4、21D4a、27F3、5G7、13F1以及46E8。分别具有VH1-69以及VKA27的Vn以及VK的抗体的一个实例是47G4。分别具有VH1-69以及VkL15的V以及VK的抗体的一个实例是3C10。如此处所用，如果一种人类抗体的可变区由使用人类种系免疫球蛋白基因的系统获得，则所述人类抗体包括的重链或轻链可变区是特定种系序列的"产物"或者由其"衍生"。这种系统包括用目的抗原对携带人类免疫球蛋白基因的转基因小鼠进行免疫，或者用目的抗原对在噬菌体上展示的人类免疫球蛋白基因文库进行筛选。通过对人类抗体的氨基酸序列与人类种49系免疫球蛋白的氨基酸序列进行比较，并选择在序列上最接近(即最大百分数同一性)人类抗体的序列的人类种系免疫球蛋白序列，"产自"或"源自，，人类种系免疫球蛋白序列的人类抗体就可以被鉴定为是此类抗体。一种"产自"或"源自，，特定的人类种系免疫球蛋白序列的人类抗体，与该种系序列相比，可以含有氨基酸差异，因为例如，自然产生的体细胞突变或故意引入定点突变。然而，经选择的人类抗体典型地与由人类种系免疫球蛋白基因所编码的氨基酸序列在氨基酸序列上具有至少90%的同一性，而且与其他物种的种系免疫球蛋白氨基酸序列(例如，鼠类种系序列)进行比较时，含有将所述人类抗体鉴定为人源的氨基酸残基。在某些情况下，人类抗体与该种系免疫球蛋白基因所编码的氨基酸序列在氨基酸序列上可以具有至少95%、或甚至至少96%、97%、98%、或99%的同一性。典型地，与由人类种系免疫球蛋白基因所编码的氨基^f列相比，来自特定的人类种系序列的人类抗体将展示不超过10个氨基酸差异。在某些情况下，与由该种系免疫球蛋白基因所编码的氨基酸序列相比，所述人类抗体可以展示不超过5个，或甚至不超过4个、3个、2个，或l个氨基酸差异。同源抗体在又一个实施方案中，本公开的抗体包括一些重链可变区及轻链可变区，这些可变区含有与本文所述的优选抗体的氨基酸序列同源的氨基酸序列，并且其中，该抗体保留本公开的抗-CD19抗体的所希望的功能特性。例如，本公开提供了一种分离的单克隆抗体、或其抗原结合部分，包括重链可变区及轻链可变区，其中(a)该重链可变区包括氨基酸序列，它与选自SEQIDNO:l、2、3、4、5、6、以及7的氨基酸序列具有至少80。/。的同源性；(b)该轻链可变区包括氨基酸序列，它与选自SEQIDNO:8、9、10、11、12、13、14以及15的氨基酸序列具有至少80%的同源性；(c)该抗体以lxlO^M或更小的Ko与人类CD19相结合；(d)与Raji以及DaudiB细胞肿瘤细胞相结合。另外地或者备选地，该抗体可具有以上讨论的以下功能特性中的一个或多个，例如结合人类CD19的高亲和力、被表达CD19的细胞内化、介导针对表达CD19的细胞的ADCC的能力、和/或当与一种细胞毒素相缀合时在体内抑制表达CD19的肿瘤细胞的肿瘤生长的能力。在不同的实施方案中，该抗体可以是(例如)人类抗体、人源化抗体、或嵌合抗体。在其他实施方案中，VH和/或VL氨基酸序列可以与以上给出的序列具有85%、90%、95%、96%、97%、98%、或99。/。的同源性。具有与以上给出的序列的VH与VK区具有高度同源性(即，80%或更大)的VH与VL区的抗体可以通过以下方式来获得对编码SEQIDNO:59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72或73的核酸分子进行i秀变(例如，位点定向诱变或PCR介导的诱变)，然后用此处所述的功能测定才全测所编码的、#:改变的抗体所保留的功能(即以上(c)到(d)所给出的功能)。如在此所使用，两个氨基酸序列之间的同源性百分比等同于两个序列之间的同一性百分数。在这两个序列之间的同一性百分数是这些序列共有的相同位置的数目的函数(即，。/。同源性-相同位置凄t/位置总数xl00)，考虑到空位(gap)的数目，及每个空位的长度，它们需要被引入用于这两条序列的最优比对。正如在以下的非限制性实例中所述，使用数学算法可以完成两条序列之间的序列比较以及同一性百分数的测定。4吏用E.Meyers及W.Miller(O附尸",.AVwd.，4:11-17(1988)的算法可以确定在两条氨基酸序列之间的同一性百分数，该算法已经结合至ALIGN程序(版本2.0)中，该算法使用了PAM120权重残基表(weightresiduetable)、空位长度罚分(gaplengthpenalty)12以及空位罚分4。此外，使用Needleman及Wunsch(丄Mo/.肌o/,48:444-453(1970))算法能确定在两条氨基酸序列之间的同一性百分数，该算法已结合至GCG软件包的GAP程序中(可在http:〃www.gcg.com获得)，该算法使用了Blossum62矩阵或PAM250矩阵，以及空位^又重16、14、12、10、8、6，或4以及长度外又重1、2、3、4、5，或6。额外地或者可替代地，本公开的蛋白质序列可进一步用作"查询序列"，对公共数据库进行检索，例如鉴定相关序列。这种检索可采用Altschul,etal.(19卯)/.Afo/.215:403-10的XBLAST程序(版本2.0)来进行。通过XBLAST程序，记分=50，字长-3进行BLAST蛋白质检索，以获得与本公开的抗体分子同源的氨基酸序列。为获得用于比较目的的空位比对，可利用如Altschul"((1997)7V"c/"c/^.25(17):3389-3402所述的GappedBLAST。当利用BLAST及GappedBLAST程序时，可使用各自的程序(例如XBLAST与NBLAST)的默认参数。参见www.ncbi.nlm.nih.gov。具有保守性修饰的抗体在某些实施方案中，本公开的抗体包含含有CDR1、CDR2、以及CDR3序列的重链可变区以及含有CDR1、CDR2、以及CDR3序列的轻链可变区，其中这些CDR序列中的一个或多个序列包括特定的氨基^列，这些氨基酸序列基于已知的抗CD19抗体、或它们的保守性修饰，并且其中这些抗体保留了本公开的抗CD19抗体的所希望的功能特性。在本领域中所理解的是，可以进行某些保守性序列修饰，这些保守性序列修饰并不去除抗原结合。见，例如，BrummellCfl/.(1993)5/oc/^/w32:1180-8(说明了在对沙门氏菌特异的抗体的CDR3重链结构域的突变分析)；deWildtWfl/.(1997)/VW.￡>ig.10:835-41(i兌明了抗UA1抗体的突变研究)；KomissarovW"/.(1997)/CVie附.272:26864-26870(显示了在HCDR3中间的突变导致净皮消除或减低的亲和力)；Hall""(1992)/./m/mmo/.149:1605-12(说明在CDR3区中的单一氨基酸改变消除了结合活性)；Kelley和0'Conne11(1993)所oc/^附.32:6862-35(说明了酪氨酸残基在抗原结合中的贡献)；Adib-Co叫uy"a/.(1998)/w,./麵歸/.10:341-6(说明了疏水性在结合中的作用)以及Beers"/.(2000)C/Z/i.Om./^.6:2835-43(说明了HCDR3氨基酸突变体)。因此，本公开提供了分离的单克隆抗体，或其抗原结合部分，包括含有CDR1、CDR2、以及CDR3序列的重链可变区以及含有CDR1、CDR2、以及CDR3序列的轻链可变区，其中(a)该重链可变区CDR3序列包括氨基酸序列，该氨基酸序列选自氨基酸序列SEQIDNO:30、31、32、33、34、35以及36，以及它们的4呆守性^修饰；(b)该轻链可变区CDR3序列包括氨基酸序列，该氨基酸序列选自氨基酸序列SEQIDNO:51、52、53、54、55、56、57以及58，以及它们的保守性修饰的氨基酸序列；(c)该抗体以lxl(T7M或更小的Ko与人类CD19相结合；(d)与Raji以及DaudiB细胞胂瘤细胞相结合。另外地或者备选地，该抗体可能拥有以上说明的以下功能特性中的一个或多个，例如结合人类CD19的高亲和力、被表达CD19的细胞内化、介导针对表达CD19的细胞的ADCC的能力、和/或当与一种细胞毒素相缀合时在体内抑制表达CD19的肿瘤细胞的肿瘤生长的能力。在一个优选的实施方案中，该重链可变区CDR2序列包括一条氨基酸序列，该氨基酸序列选自氨基酸序列SEQIDNO:23、24、25、26、27、28以及29，以及它们的保守性修饰；并且该轻链可变区CDR2序列包括一条氨基酸序列，该氨基酸序列选自氨基酸序列SEQIDNO:44、45、46、47、48、49、以及50，以及它们的保守性修饰。在另一个优选的实施方案中，该重链可变区CDR1序列包括一条氨基酸序列，该氨基酸序列选自氨基酸序列SEQIDNO:16、17、18、19、20、21以及22，以及它们的保守性修饰；并且该轻链可变区CDR1序列包括一条氨基酸序列，该氨基酸序列选自氨基酸序列SEQIDNO:37、38、39、40、41、42以及43,以及它们的保守性修饰。在不同的实施方案中，该抗体可以是例如人类抗体、人源化抗体、或嵌合抗体。如在此所使用，术语"保守性序列修饰，，意指不会显著影响或改变含有该氨基酸序列的抗体的结合特性的氨基酸修饰。这种保守性修饰包括氨基酸的置换、添加、以及缺失。通过本领域已知的标准技术(例如位点定向诱变及PCR介导的诱变)可将修饰引入本公开的抗体中。保守性氨基酸置换是指以下的置换，其中氨基酸残基被具有相似侧链的氨基酸残基替换。已经在本领域中定义了具有相似側链的氨基酸残基的家族。这些家族包括具有碱性侧链的氨基酸(如赖氨酸、精氨酸、组氨酸)，具有酸性侧链的氨基酸(如天冬氨酸、谷氨酸)，具有不带电荷的极性側链的氨基酸(如甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、色氨酸)，具有非极性侧链的氨基酸(如丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、曱硫氨酸)，具有P-分支侧链的氨基酸(如苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸)，以及具有芳香族侧链的氨基酸(如酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸)。因此，本公开的抗体的CDR区中的一个或多个氨基酸残基可以被来自相同侧链家族的其他氨基酸残基替代，并且使用此处说明的功能测定对已改变的抗体的保留功能(即，在以上(c)至(d)中给出的功能)进行测试。与本/>开的抗CD19抗体结合至相同表位的抗体在另一个实施方案中，本公开提供了多种抗体，它们结合至本公开的抗CD19单克隆抗体中的任何抗体所识别的人类CD19上的表位上(即，有能力与本公开的单克隆抗体中的任一抗体进行交叉竟争而结合至CD19上的抗体)。在优选的实施方案中，用于交叉竟争研究的参照抗体可以是单克隆抗体21D4(具有分别示于SEQIDNO:1和8的Vh和Vl序歹iJ)、或单克隆抗体21D4a(具有分别示于SEQIDNO:1和9的VH和V^序列)、或单克隆抗体47G4(具有分别示于SEQIDNO:2和10的VH和Vl序列)、或单克隆抗体27F3(具有分别示于SEQIDNO:3和11的Vh和Vl序歹'J)、或单克隆抗体3C10(具有分别示于SEQIDNO:4和12的VH和V^序列)、或单克隆抗体5G7(具有分别示于SEQIDNO:5和13的Vh和V[序歹iJ)、或单克隆抗体13F1(具有分别示于SEQIDNO:6和14的VH和Vl序歹寸)、或单克隆抗体46E8(具有分别示于SEQIDNO:7和15的VH和Vl序歹,J)。此类交叉竟争抗体可以在标准的CD19结合测定中基于它们与21D4、5421D4a、47G4、27F3、3C10、5G7、13F1或46E8进行交叉竟争的能力而被鉴别。可使用标准ELISA测定，其中将重组的人类CD19蛋白固定在板上，这些抗体中有一种用荧光进行标记，并且评价了未标记的抗体进行竟争使被标记的抗体脱离结合(offthebinding)的能力。另外地或备选地，BIAcore分析也可以用于评价抗体的交叉竟争的能力。例如，如进一步在实施例3中所说明的，使用BIAcore的表位封闭(epitopebinning)实验证明了3C10、6A4以及7B1抗体识别并结合CD19上不同的表位。一种试验抗体抑制(例如)21D4、21D4a、47G4、27F3、3C10、5G7、13F1或46E8结合人类CD19的能力证明该试验抗体能与21D4、21D4a、47G4、27F3、3C10、5G7、13F1或46E8竟争而与人类CD19相结合，并且因此与21D4、21D4a、47G4、27F3、3C10、5G7、13F1或46E8结合至人类CD19上的相同的表位。在一个优选的实施方案中，与21D4、21D4a、47G4、27F3、3C10、5G7、13F1或46E8结合至人类CD19上的相同表位的抗体是人类单克隆抗体。正如在该实例中所说明的，可以对此类人类单克隆抗体进行制备并分离。工程化并且经纟务饰的抗体通过以下方式可以进一步制备本发明的抗体可以使用具有一个或多个已知的CD19抗体Vh和/或VL序列的抗体作为起始材料，对经修饰的抗体进行工程化，这种经修饰的抗体与起始抗体相比可能具有经改变的特性。通过在一个或两个可变区(即Vh和/或Vl)中，例如在一个或多个CDR区内和/或在一个或多个构架区内中修饰一个或多个氨基酸，可以对抗体进行工程化。额外地或备选地，通过在一个或多个恒定区中修饰残基，可以对抗体进行工程化，例如以改变该抗体的一种或多种效应功能。在某些实施方案中，可以使用CDR移植以对抗体的可变区进行工程化。抗体与靶抗原主要通过位于六个重链及轻链互补决定区(CDR)中的氨基酸残基进行相互作用。因此，CDR中的氨基酸序列在各个抗体之间比在CDR之外的序列更具有多样性。因为CDR序列负责大部分抗体-抗原相互作用，所以通过构建表达载体，表达模拟特定自然发生的抗体特性的重组抗体是可能的，所述表达载体包括来自自然发生的抗体的CDR序列，其被移植至来自具有不同特性的不同抗体的构架序列(参见，例如Riechmann,L."a/.(1998)7V"似/r332:323-327;Jones,P."(1986)旭321:522-525;Queen,C.e,fl/(1989)尸亂TV"".爿ca^.to.t/U.86:10029-10033;Winter的美国专利号5,225,539，以及Queen等人的美国专利号5,530,101;5,585,089;5,693,762及6,180,370)。因此，本公开的另一个实施方案涉及一种分离的单克隆抗体、或其抗原结合部分，该单克隆抗体、或其抗原结合部分包括含有CDR1、CDR2、以及CDR3序列的重链可变区，该CDR1、CDR2、以及CDR3序列包括一个氨基酸序列，该氨基酸序列分别选自SEQIDNO:16、17、18、19、20、21以及22，SEQIDNO:23、24、25、26、27、28以及29，以及SEQII)NO:30、31、32、33、34、35以及36;以及含有CDR1、CDR2、以及CI)R3序列的轻链可变区，该CDR1、CDR2、以及CDR3序列包括一个氨基酸序列，该序列分别选自SEQIDNO:37、38、39、40、41、42以及43，SEQIDNO:44、45、46、47、48、49以及50,以及SEQIDNO:51、52、53、54、55、56、57以及58。因此，此类抗体含有单克隆抗体211)4、21D4a、47G4、27F3、3C10、5G7、13F1或46E8的VH和的C1)R序列，但是可能包含与这些抗体不同的构架序列。这种构架序列可以从包括种系抗体基因序列的公共DNA数据库或已公开的参考文献获得。例如，人类重链及轻链可变区基因的种系DNA序列可以在"VBase"人类种系序列数据库中找到(在互联网http:〃www.mrc-cpe.cain.ac.uk/vbase中获得)，并且在以下文献中找到Kabat，E.A.，Wa/.(1991)SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,FifthEdition,U.S.DepartmentofHealthandHumanServices,N1HPublicationNo,91-3242;Tomlinson，I.M.,"a/.(1992)"TheRepertoireofHumanGermlineVhSequencesRevealsaboutFiftyGroupsofVHSegmentswithDifferentHypervariableLoops"/.A/o/.丑/</.227:776-798;以及Cox，J.P.LWfl/,(1994)"ADirectoryofHumanGerm-lineVhSegmentsRevealsaStrongBiasintheirUsage"/./附/"冊0/.24:827-836;这些文献的每一篇内容均明确地并入本文作为参考。作为另一个实例，人类重链及轻链可变区基因的种系DNA序列可以在Genbank数据库中找到。例如，在HCo7HuMAb小鼠中发现的以下重链种系序列在所附的Genbank登录号中可获得1-69(NG—0010109、NT024637、以及BC070333)、3-33(NG—0010109以及NT024637)、以及3-7(NG—0010109以及NTJ)24637)。作为另一个实例，在HCol2HuMAb小鼠中发现的以下的重链种系序列在所附的Genbank登录号中可获得l-69(NG_0010109、NT—024637、以及BC070333)、5-51(NG—0010109以及NT—024637)、4-34(NG—0010109以及NT—024637)、3-30.3(CAJ556644)、以及3-23(AJ406678)。然而人类重链和轻链种系序列的另一个来源为人类免疫球蛋白基因数据库，该数据库可获自IMGT(http:〃imgt.cines.fr)。用序列相似性检索方法中的一种方法(被称为GappedBLAST)将抗体蛋白序列与汇编的蛋白数据库进行比较(AltschulC"/.(1997)/4"Vfe/m^wr/i25:3389-3402)，这种方法对于本领域的才支术人员而言是熟知的。BLAST是一种启发式算法，因为在抗体序列与数据库序列之间的在统计学上显著的比对可能包含比对字符的高得分片段对(HSP)。通过扩展或修正不能提高片段对分数的片段对被称为命中项(hit)。简言之，翻译VBASE来源的核苷酸序歹'j(A印；//v6flwe./wroc/7e.oww.flc.wA/v6flse//Z/1sC/;/i/7)，并JU呆留FRl至FR3构架区之间的区域(包括FRl至FR3构架区)。这些数据库序列具有的平均长度为98个残基。除去重复序列(它们是蛋白质全部长度上的精确匹配)。用于蛋白质的BLAST搜索，使用带有默认值的程序blastp、除低复杂性过滤(已被关闭)以外的标准参数，以及BLOSUM62的置换矩阵，针对实现序列相配的前5个命中项进行过滤。在全部六个框架中翻译核苷酸序列，并且在数据库序列的匹配片段中不具有终止密码子的框架被视为潜在的命中项。进而使用BLAST程序tblastx对此进行确认。该程序翻译了全部六个框架中的抗体序列，并且将这些翻译与在全部六个框架中被动态翻译的VBASE核苷酸序列进行比较。可以如以上说明使用类似于VBASE的方法对其他人类种系序列数据库(例如可从IMGT(http:〃imgt.cines.fr)获得的数据库)进行检索。同一性是在抗体序列与蛋白质数据库之间序列的全长上精确的氨基酸匹配。这些阳性项(同一性+取代匹配)不是相同的，而是由BLOSUM62置换矩阵所引导的氨基酸置换。如果抗体序列以相同的同一性匹配数据库序列中的两条序列，则具有最大阳性的命中项将被判定为匹配的序列命中项。用的构架序列在结构上类似的那些构架序列，例如类似于本公开的优选的单克隆抗体所使用的以下构架序列Vh5-51枸架序列(SEQIDNO:74)和/或VH1-69构架序列(SEQIDNO:75)和/或VKL18构架序列(SEQIDN():76)和/或VkA27枸架序列(SEQIDNO:77)和/或VkL15枸架序列(SEQIDN():78)。这些VHCDR1、CDR2、和CDR3序列，以及VKCDR1、C1)R2、和CDR3序列可以被移植至多个构架区上，这些构架区具有与从中衍生出该构架序列的种系免疫球蛋白基因中所发现的序列相同的序列，或者这些CDR序列可以被移植至多个构架区上，这些构架区与这些种系序列相比含有一个或多个突变。例如，已发现在某些情况下对构架区内的残基进行突变以保持或增强该抗体的抗原结合能力是有益的(参见例如Qucen等人的美国专利号5,530,101;5,585,089;5,693,762以及6,180,370)。另一种类型的可变区修饰是在Vh和/或VkCDR1、CDR2和/或CDR3区中对氨基酸残基进行突变，由此改善目的抗体的一种或多种结合特性(例如亲和力)。可以进行定向诱变或PCR介导的诱变来引入一种或多种突变，并且对于抗体的结合能力、或其他目的功能特性的作用可以在体内或体外试验中进行评估，如本文所述并在实施例中所提供。优选地引入保守性修饰(如上所述)。这些突变可以是氨基酸置换、添加、或缺失，但优选是58置换。此外，典型地在一个CDR区域中改变不超过一个、两个、三个、四个或五个残基。因此，在另一个实施方案中，本公开提供了分离的抗CD19单克隆抗体、或其抗原结合部分，包括重链可变区，该重链可变区包含(a)VhCDR1区，包括一种氨基酸序列，该氨基酸序列选自SEQIDNO:16、17、18、19、20、21以及22，或者与SEQIDNO:16、17、18、19、20、21以及22相比具有一个、两个、三个、四个、或五个氨基酸置换、缺失、或添加的氨基酸序列；(b)VHCDR2区，包括一种氨基酸序列，该氨基酸序列选自SEQIDNO:23、24、25、26、27、28以及29，或者与SEQIDNO:23、24、25、26、27、28以及29相比具有一个、两个、三个、四个、或五个氨基酸置换、缺失、或添加的氨基酸序列；(c)VhCDR3区，包括一种氨基酸序列，该氨基酸序列选自SEQIDNO:30、31、32、33、34、35以及36，或者与SEQIDNO:30、31、32、33、34、35以及36相比具有一个、两个、三个、四个、或五个氨基酸置换、缺失、或添加的氨基^^列；(d)VKCDR1区，包括一种氨基酸序列，该氨基酸序列选自SEQIDNO:37、38、39、40、41、42以及43，或者与SEQIDNO:37、38、39、40、41、42以及43相比具有一个、两个、三个、四个、或五个氨基酸置换、缺失、或添加的氨基酸序列；(e)VKCDR2区，包括一种氨基酸序列，该氨基酸序列选自SEQIDNO:44、45、46、47、48、49以及50,或者与SEQIDNO:44、45、46、47、48、49以及50相比具有一个、两个、三个、四个、或五个氨基酸置换、缺失、或添加的一个氨基酸序列；以及(f)VkCDR3区，包4舌一种氨基酸序列，该氨基酸序列选自SEQIDNO:51、52、53、54、55、56、57以及58，或者与SEQIDNO:51、52、53、54、55、56、57以及58相比具有一个、两个、三个、四个、或五个氨基酸置换、缺失、或添加的氨基酸序列。本公开的工程化抗体包括以下抗体其中在Vh和/或Vk内已经对构架残基进行了修饰，例如改进了抗体的特性。典型地，对这种构架进行修饰，以降低抗体的免疫原性。例如，一个方法是将一个或多个构架残基"回复突变"成为相应的种系序列。更具体地说，已经经历了体细胞突变的抗体可能包含与从中衍生出该抗体的种系序列不同的构架残基。这些残基可以通过将该抗体构架序列与从中衍生出该抗体的种系序列进行比较而被鉴定。例如，在以下表1中显示在抗PD-1抗体17D8、2D3、4H1、5C4、4A11、71)3以及5F4的构架区内的许多与重链亲代种系序列不同的氨基酸改变。为了将构架区序列中氨基酸残基中的一个或多个氨基酸残基返回至它们的种系构型，通过例如定点诱变或PCR介导的i秀变，可以将体细胞突变"回复突变"为该种系序列。表1.对来自重链种系构型的抗体17D8、2D3、4H1、5C4、4A11、7D3以及5F4的4务饰抗CD19抗体氨基酸位置抗体的氨基酸种系构型的原始氨基酸21D430ST77RS211)4a30ST77RS47G424DA3C1077NS88AS5G719NK77NS13F119QK28TS85Gs46E819QK28TS85Gs另一种类型的构架修饰涉及对构架区内一个或多个残基，或甚至对一个或多个CDR区域内的一个或多个残基进行突变，以去除T细胞表位，由此降低该抗体的潜在免疫原性。这一方法也被称为"去免疫原化"，并且在Carr等人的美国专利发明者C·拉奥-耐克,C·潘,D·J·金,D·布兰塞特,J·卡尔达雷利申请人:梅达雷克斯公司