下在单独容器 中预混合，直至获得澄清溶液。将相B3混合，同时将其加热到75-80°C，直至它是澄清的。将 相B2和相B3在混合下添加到相Bl中。然后，将相B在混合下缓慢添加到相A中（随着粘度增 加，混合速度适当增加）。当添加结束时，再继续混合10分钟，然后加入预混合的相C。在混合 下缓慢加入相D，直至它被充分分散，并且获得所需乳剂。
[0058] 实施例4 本发明的组合物 制剂D:W/Si乳剂(凝胶）
如下制备制剂D。在主容器中，将相A用匀浆器混合。在单独容器中，将相B混合，直至所 有固体完全溶解。然后，将相B的pH用NaOH调节到4.5±0.1。在另一副容器中，将相C混合，直 至白藜芦醇完全溶解。然后，将相B缓慢添加到相A中以产生乳剂，将其混合，直至均匀。然 后，将相C在混合下逐渐添加到主容器中。然后，将相D在混合下逐渐添加到主容器中。在加 入相D后继续混合，直至混合物是均匀的并且呈现稳定的乳剂。
[0059]使制剂D中的三种主要抗氧化剂成分（即，黄芩苷、白藜芦醇和生育酚)作为混合物 一起经受管内抗氧化剂测试，以测定混合物的抗氧化剂活性。下文描述称为ORAC和HORAC的 所述测试。
[0060] ORAC 氧自由基吸收能力（ORAC)分析是最常用的用于评估抗氧化剂对抗ROS (反应性氧物 质）的能力的方法之一，其对于过氧化氢是特异性的，过氧化氢是存在于人皮肤环境中的最 重要的自由基之一。
[0061] ORAC分析测定荧光探针（荧光素)在与自由基发生剂，例如偶氮引发剂化合物(2， 2'_偶氮双(2-脒基丙烷)二盐酸盐，AAPH)混合后的氧化降解。偶氮引发剂被认为通过加热 产生过氧自由基，其损害荧光分子，从而导致荧光损失。抗氧化剂被认为保护荧光分子免于 氧化变性。通过使用荧光计定量荧光的衰减，测定保护程度以与标准对照抗氧化剂Trolox 进行比较。结果以每克样品的Trolox μπιο?当量（即，μ molΤΕ/g)表示。可自动测定并计算所 述能力的设备可商购，例如来自Thermo Scientific的VarioSkan闪光微孔板阅读仪。
[0062] 为通过使用ORAC测试样品，将化合物溶解到基于水的NaH2PO4缓冲液中。
[0063] HORAC HORA^i是检验抗氧化剂活性的另一种常用方法。它对于羟基自由基是特异性的。
[0064] 使用Varioskan Flash来定量抗氧化剂避免羟基自由基的能力。从过氧化氢和氟 化钴（II)生成的羟基自由基会通过氢原子转移反应猝灭荧光探针。然而，在抗氧化剂存在 下，所述分子将螯合Co(II)，从而防止羟基自由基的生成并最初阻断或防止探针的猝灭，进 而实现荧光衰减曲线的延迟。将在有和没有抗氧化剂分子存在下样品的荧光衰减曲线下面 积与标准参考材料进行比较，并测定羟基自由基避免能力。
[0065] 通过使用荧光计定量荧光的衰减，通过与标准对照抗氧化剂没食子酸(标准参考 材料)进行比较来测定保护程度。结果以每克样品的没食子酸μπιο?当量（即，ymolGAE/g)表 示。可自动测定并计算所述能力的设备可商购，例如来自Thermo Scientific的VarioSkan 闪光微孔板阅读仪。
[0066]为通过使用HORAC测试样品，将化合物溶解到基于水的NaH2PO4缓冲液中。
[0067] 测试结果示于下表中。
[0068]上表中所示的预期值是基于制剂中的每种单独抗氧化剂的已知活性的计算出的 抗氧化剂活性(即，0.5%黄芩苷、1%白藜芦醇和1%维生素 E (或生育酚)的活性的总和）。每种 抗氧化剂的已知活性示于下表中。在ORAC和HORAC测试中，测得的活性比预期的活性要大得 多，从而表明制剂中的这三种抗氧化剂的组合提供协同抗氧化剂活性。
[0069]个别值
如下所述对实施例4的组合物（即，制剂D)进行稳定性测试。第一测试是室温稳定性测 试。在该测试中，将样品在室温下在密封容器(螺旋盖玻璃小瓶;80%装满）中保持两个月。第 二测试是在45°C下进行的加速稳定性测试。在第二测试中，将样品在45°C下在密封容器(螺 旋盖玻璃小瓶;80%装满）中保持两个月。使用这些条件来模拟将样品在室温下保持三年。
[0070]将来自稳定性测试的样品进行分析，以测定测试之前和之后三种活性成分(黄芩 苷、白藜芦醇和维生素 E)的水平。下表中提供的结果表明，实施例4的组合物是非常稳定的 (即，在稳定性测试期间活性成分很少降解）。含有约1重量％白藜芦醇、约0.5重量%黄芩苷和 约 1重量%维生素 E的稳定组合物非常理想作为用于施用到人皮肤的化妆品组合物。
【主权项】
1. 一种组合物，优选化妆品组合物，进一步优选用于施用到人皮肤的化妆品组合物，所 述组合物包含：（a)至少两种酚类化合物(一种类黄酮和一种非类黄酮），优选其中所述至少 两种酚类化合物包含至少一种多酚，进一步优选其中所述至少一种多酚是黄芩苷或黄芩苷 和白藜芦醇；（b)至少一种助水溶物，优选化妆品可接受的助水溶物，进一步优选其中所述 至少一种助水溶物选自烟酰胺、咖啡因、PCA钠、水杨酸钠、尿素和羟乙基尿素；（c)至少一种 乳化剂；（d)脂溶性抗氧化剂，优选维生素E;以及(e)水。2. 根据权利要求1所述的组合物，其中，所述至少一种助水溶物是烟酰胺和咖啡因。3. 根据权利要求1所述的组合物，其中，所述至少一种助水溶物以基于所述组合物的总 重量约0.1%到约15%的量存在于所述组合物中。4. 根据权利要求1所述的组合物，其中，所述至少两种酚类化合物以基于所述组合物的 总重量0.01%到约10%的量存在于所述组合物中。5. -种用于制备组合物的方法，所述方法包括在所述组合物中包含：（i)水；（ii)至少 两种酚类化合物(一种类黄酮和一种非类黄酮脂溶性抗氧化剂；（iv)至少一种助水 溶物，其量将所述至少两种酚类化合物有效溶解在所述组合物的水相中；以及(v)至少一种 乳化剂，其量足以产生有效溶解所述脂溶性抗氧化剂的油包水或水包油乳剂。6. -种包括将组合物施用到皮肤的方法，所述组合物包含：（i)水；（ii)至少两种酚类 化合物(一种类黄酮和一种非类黄酮），优选其中所述至少两种酚类化合物包含至少一种多 酚，进一步优选其中所述至少一种多酚是黄芩苷或黄芩苷和白藜芦醇；（iii)脂溶性抗氧化 剂；（iv)至少一种助水溶物，其量将所述至少两种酚类化合物有效溶解在所述组合物的水 相中；以及(v)至少一种乳化剂，其量足以产生有效溶解所述脂溶性抗氧化剂的油包水或水 包油乳剂。7. 根据权利要求1所述的组合物，其中：（i)所述至少两种酚类化合物是黄芩苷，优选以 所述组合物的0.001-10重量％的量存在，和白藜芦醇，优选以所述组合物的0. 〇〇〇 1-2重量％ 的量存在；（ii)所述至少一种助水溶物是咖啡因，优选以所述组合物的〇. 05-5重量%的量存 在，和烟酰胺，优选以所述组合物的1-5重量％的量存在；（iii)所述至少一种乳化剂包含硅 酮乳化剂，优选以所述组合物的4-50重量％的量存在，其基本上由聚二甲基硅氧烷(0.65-1000cst)和聚二甲基硅氧烷交联聚合物组成；（iv)所述脂溶性抗氧化剂是维生素E，优选 以所述组合物的0. 〇〇〇 1 -3重量%的量存在;并且(v)所述水优选以所述组合物的30-60重量％ 的量存在。8. 根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物是用于施用到人皮肤的化妆品组合 物并且存在于所述组合物中的水的量为所述组合物的40-60重量％。
【专利摘要】本发明涉及组合物，其包含：(a)至少两种酚类化合物(一种类黄酮和一种非类黄酮)；(b)至少一种助水溶物；(c)至少一种乳化剂；(d)脂溶性抗氧化剂；以及(e)水。所述至少一种助水溶物应以将所述至少两种酚类化合物有效溶解在所述组合物的水相中的量存在。所述至少一种乳化剂应以足以产生有效溶解所述脂溶性抗氧化剂的油包水或水包油乳剂的量存在。所述组合物可用于化妆品目的和其它用途。
【IPC分类】A61K8/49, A61K8/60
【公开号】CN105473126
【申请号】CN201480048272
【发明人】N.陈, P.布里瓦, D.麦肯, A.波坦
【申请人】莱雅公司
【公开日】2016年4月6日
【申请日】2014年6月30日
【公告号】EP3019148A1, EP3019148A4, US20150005247, WO2015002872A1