菌性 和稳定性，并能够在即将使用之前进行再给药(re-administration)而无需pH调节。
[0016] 最终，由于所述组合物的安全性和协同效应特别适合于治疗或预防耐药生物体的 感染，因此本发明包括耐药生物体(如多重抗药革兰氏阴性菌和MRSA)的测试，以及调节抗 生素的组合剂量以治疗这种感染，优选随后进行额外的测试或处理以证实已消除感染。
【附图说明】
[0017] 图1为氨基糖苷类物质溶液(尤其是阿米卡星氯化物溶液)的制造步骤的流程图。
[0018] 图2为磷霉素钠溶液的制造步骤的流程图。
【具体实施方式】
[0019] 第一组分为特别配制的氨基糖苷类物质溶液阿米卡星氯化物，其pH值为约6.5至 约7.5。尽管硫酸阿米卡星是公知且广泛使用的具有针对革兰氏阴性生物体的抗菌活性的 氨基糖苷类物质，但是尚未有关于阿米卡星氯化物的气溶胶应用的记载。下述阿米卡星氯 化物溶液使用氯离子作为对阴离子，以获得与磷霉素溶液间的PH相容性和持久的离子浓 度，从而提高气溶胶化时的耐受性和功效。用于气溶胶给药而配制的另一氨基糖苷类物质 为硫酸妥布霉素(TOB膽XTOBI已经多年被用于囊性纤维化患者，并且被公认为铜绿假单 胞菌感染的治疗选择。氨基糖苷类物质具有类似的PKa(例如，正大霉素为8.2,阿米卡星为 8.1，阿贝卡星为10.2，妥布霉素具有三个pKa值:6.7、8.3和9.2)，并且所描述的阿米卡星的 生产和配制方法可应用于所有氨基糖苷类物质。
[0020] 第二组分为磷霉素溶液。磷霉素是同时具有革兰氏阳性活性和革兰氏阴性活性的 广谱膦酸抗生素。然而，磷霉素在较低的pH值下会发生环氧化物开环水解降解反应。基于此 原因，通常将磷霉素配制为相对较高的pH值，即，pH值为8至13。本发明的磷霉素溶液配制为 二钠盐，其PH值更接近中性，通常为7.5至8.5,同时保持了长期储存稳定性。在储存两年后， 磷霉素溶液的杂质小于5%，优选小于3%。为了减少杂质，尤其是减少环氧化物开环水解的 副产物，在5°C以下生产和/或储存该制剂。
[0021] 氨基糖苷类物质和磷霉素溶液的组合制剂为具有中性pH值的高渗溶液，其包含： 具有氯离子作为对阴离子的至少约50mg/mL的阿米卡星；以及至少约20mg/mL的磷霉素，其 具有至少30毫克当量/L的氯阴离子。该制剂的渗透压浓度为约700mi 11 iosm/L，最终氯离子 浓度为约175毫克当量/L至约275毫克当量/L，优选为约225毫克当量/L。如果将该组合气溶 胶化并与潮湿空气组合，最终渗透压浓度为约425milli 〇sm/L。渗透阴离子可抑制患有轻微 哮喘的患者的咳嗽。
[0022] 具有所述氯阴离子的渗透离子浓度的阿米卡星氯化物实施方案以及各溶液的近 生理pH值使得避免了需要额外使用HCl以达到重构之后的合并溶液pH值的pH值平衡一这一 在医院药房中进行的步骤引入潜在的医院误差，并且当此药物是用在必须进行立即治疗的 重症患者时，可能无法在数小时之后获得该药物。
[0023] 在临床应用中，所递送的氨基糖苷类物质和磷霉素的浓度在肺部中会产生为目标 生物体的MIC90的浓度。对于阿米卡星，利用喷雾器以预计为15%的递送效率向肺部递送约 45mg的阿米卡星氯化物和约30mg的磷霉素钠(位于溶液中的50mg的阿米卡星氯化物和20mg 的磷霉素）。递送至肺部的阿米卡星氯化物的预测浓度为约13,500ug/mL-这大于具有最高 耐药性的革兰氏阴性生物体的MIC90的25倍。预测的磷霉素的峰浓度为约5400ug/mL-基于 沉积药物(mg)与痰菌浓度的类似比值，这大于金黄色葡萄球菌的MIC90的25倍。气溶胶化抗 生素的给药通常为BID(每日两次)或TID(每日三次），这是因为在5个半衰期或约10小时之 后，几乎不存在治疗药物。沉积药物的全身吸收为约10%，因此，即使平均痰菌浓度大于静 脉药物所获得浓度的100倍，气溶胶抗生素的全身暴露量仅为治疗静脉剂量的10%的级别。
[0024] 在本发明的方法和组合物中，在两种单独的无菌溶液中提供所述组合溶液，其中 这两种无菌溶液的PH值之差小于2.0个单位，使得各溶液具有生理耐受的pH值。如本文所述 将该组合中的各抗生素组分溶解在无菌的高渗溶液中并分别储存，但是优选储存在同一包 装中。优选的是，利用一次性溶液包装在即将给药之前将这两种组合物合并，这种一次性溶 液包装被设计为可将所包装的各溶液的内容物完全合并，从而有利于合并溶液到喷雾器的 定量递送。
[0025] 为了预防或治疗呼吸机相关感染，喷雾器优选为位于机械呼吸机的气道内的内置 式喷雾器（in-line nebulizer)。或者，可由独立式喷雾器的药物储槽给药该组合。在呼吸 机设备外，可通过任何常规喷雾器向患有coro、肺炎或哮喘的患者递送所述抗生素组合。在 这种情况中，可保持本文所述的给药抗生素的总组成、配制参数、以及杀菌处理方案的全部 其他特征。
[0026]为了在呼吸机设备中给药所述抗生素组合，将内置式喷雾器连接至位于三通末端 的呼吸机气道，并启动喷雾器以产生气溶胶雾。在递送时，喷雾器通过设置于其中的振动装 置产生气溶胶雾，其通常为其中形成有多个孔的振动网或膜，以由溶液中产生微细尺寸的 颗粒。启动加湿器，并且在由组合溶液形成的气溶胶雾的各输送过程中保持加湿器的运行， 以降低渗透压负荷。本文所述的内置式喷雾器的优点是:其能够使通气气道中的加湿空气 通过喷雾器，并与PH均衡的高渗透抗生素组合溶液的气溶胶化部分合并。
[0027]在输送时，如下面实施例中所述，氨基糖苷类物质和磷霉素溶液的组合具有产生 自独立的无菌氨基糖苷类物质和磷霉素组分的量、浓度、pH值和配方的平衡的、接近中性的 PH值。
[0028]临床有效剂量的阿米卡星氯化物以用于50mg/ml的阿米卡星氯化物溶液以及 20mg/ml的磷霉素溶液被递送至内置式喷雾器。通过检测耐药性细菌的存在可证明降低剂 量是可行的，这是因为如果未检测到耐药性细菌，则可能更低的剂量是有效的。输送至肺部 的磷霉素的最佳有效剂量可能至少为15mg，根据喷雾器效率的不同，喷雾器剂量在50mg至 200mg之间。以约20mg递送到肺，实现了共感染患者组中的假单胞菌和金黄色葡萄球菌的细 菌密度均降低(Trapnel 1等人，supra)。在该试验中，40mg的磷霉素估算递送剂量比20mg的 估算剂量能够更有效地杀灭葡萄球菌，这表明更高剂量是更好的。溶解性最高的磷霉素盐 为二钠盐，优选二钠盐，尽管其他盐也可以，如钙盐和氨基丁三醇盐。
[0029] 含有IOOmg至300mg磷霉素和300mg至600mg阿米卡星的IOmL制剂提供的金黄色葡 萄球菌和假单胞菌的充分杀灭有效率为15%。理想的制剂在稀释之后将包含至少20meq/L 的氯阴离子。50mg/mL的阿米卡星和20mg/mL的磷霉素以及氯阴离子合并而获得的pH值为 6.5至8.5的溶液，其预计的渗透压浓度为约750-850osm/L。如果通过加湿将其稀释，当在气 道中沉积时，其渗透压浓度将接近等渗范围。为了改变输送剂量，可使用更小或更大的体 积，可供选择的另一种方式或可与之组合的是，提高呼吸中的吸气阶段的输送量，以提高沉 积量。
[0030] 近年来研制出的振动板喷雾器(尤其是PARI公司的一种振动板喷雾器)能够获得 尺寸小于5微米的颗粒。参见专利文献WO 2005/048982A2。其中具有多个小孔的膜能够产生 小于5微米的平均粒径，其平均粒径范围在3.5微米范围内。这是通过在激光钻孔工艺中使 多孔更小而实现的。PARI公司的其他振动板膜的平均粒径为4.5微米，这与由Aerogen/ Nektar公司研制的振动板喷雾器相同。类似地，有这样的小颗粒喷射喷雾器，其能够产生尺 寸为2微米至3微米的颗粒。目前的超声喷雾器通过利用2.7MHtz的驱动频率可产生5微米的 平均粒径。
[0031] 如上所述，本发明包括利用加湿作为提高以气溶胶形式输送的高渗溶液的耐受性 的技术。由高渗溶液产生具有小粒径的气溶胶会得到这样的小颗粒组合物，该组合物可担 载所期望的治疗剂量，但是由于其具有高渗透压浓度，即，其渗透压浓度为正常渗透压浓度 的三倍以上（例如，2 930m0sm/kg)，因此耐受性差。通过对气溶胶进行加湿，会