小分子化合物的用途及其组合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物技术和医学领域，具体涉及一种基于生物信息学和计算机技术， 经虚拟筛选得到的特异性抑制NAC1蛋白的小分子化合物。本发明还涉及含有该小分子化合 物的药物组合物，并公开了将该化合物药物用于疾病治疗的方法，特别是在恶性肿瘤的治 疗中的用途。
【背景技术】
[0002] 恶性肿瘤是危害人类健康的一类疾病。随着肿瘤分子生物学、基因组学、蛋白组学 的发展，大量在肿瘤发生发展中起关键作用的调控因子被揭示。在此基础上，抗肿瘤药物研 发理念的重大转变。研发焦点正从传统细胞毒药物向针对肿瘤发生发展过程中关键调控因 子方向发展，这些靶点新药针对正常细胞和肿瘤细胞之间的差异，可达到高选择性、低毒性 的治疗效果，从而克服传统细胞毒药物的选择性差、毒副作用强、易产生耐药性等缺点，为 此，肿瘤靶向治疗学进入了一个崭新的研发阶段。近年来，随着分子生物学、X射线晶体学的 发展，大量与肿瘤相关的生物大分子的三维结构被确定;计算科学的快速发展，计算机辅助 药物设计应运而生，并渗透到新药研发的各个环节，极大地提高药物研发的成功率，降低研 发成本，缩短研发周期，目前已成为创新药物研究的核心技术之一。
[0003] ΒΤΒ/Ρ0Ζ家族基因 NACC1基因编码细胞转录因子NACl(nucleus accumbens-1，伏隔 核1)的表达，其定位于人染色体区Chl9pl3.2,是新近发现的一个新的致癌因子。NAC1在多 种妇科肿瘤中（例如卵巢癌、宫颈癌、子宫内膜癌、乳腺癌等)普遍高表达，而在正常组织未 见表达。BTB结构域(也称为Ρ0Ζ结构域)是介导蛋白相互作用的重要结构域，NAC1的BZB结构 域（1-129氨基酸序列）是形成NAC1二聚体复合物所必需的，形成的NAC1二聚体复合物可以 参与多种生物功能调控:例如抗凋亡、促增殖、促侵袭转移、抗衰老等。
[0004] 有实验表明，NAC1参与抑制顺铂、紫杉醇引起的卵巢癌细胞凋亡，而凋亡信号的逃 逸与肿瘤的发生发展密切相关。既然NAC1只是特异性地在肿瘤细胞高表达，而且参与了肿 瘤对凋亡信号的抵抗，因此针对该分子的小分子化合物可能能够取消其凋亡抑制功能，并 将有可能和顺铂、紫杉醇等化疗药物联用，开辟一条肿瘤治疗新策略。
[0005] 目前，虽然已经开发了一些抑制肿瘤生长的化合物，然而人们仍需要开发新的具 有抑制肿瘤生长或诱导肿瘤细胞凋亡的化合物。
【发明内容】
[0006] 本发明目的是：提供一种具有抑制肿瘤细胞生长或诱导肿瘤细胞凋亡的化合物， 本发明的另一目的是提供由所述化合物制成的药物组合物。
[0007] 本发明的技术方案是：
[0008] 2-(4-叔丁基苯氧基)-Ν-(2-{[ (4-叔丁基苯氧基）乙酰基]氨基}乙基）乙酰胺、或 其药学、保健品学或食品学上可接受的盐或酯或衍生物、或它们的混合物的用途，其特征在 于：用于制备治疗肿瘤、抑制肿瘤细胞生长、和/或诱导肿瘤细胞凋亡的物质。
[0009] 进一步的，所述的用途在于制备人伏膈核1的抑制剂。
[0010] 进一步的，所述的肿瘤或肿瘤细胞是表达人伏膈核1的肿瘤或肿瘤细胞。
[0011] 进一步的，所述肿瘤或肿瘤细胞的人伏膈核1表达量高于正常细胞30%~50%。
[0012] 进一步的，所述肿瘤选自下组:乳腺癌、肺癌、胃癌、前列腺癌、卵巢癌、结肠癌、肝 癌、宫颈癌、子宫内膜癌或B淋巴系肿瘤，较佳的肿瘤选自下组:卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌、子 宫内膜癌;更佳的肿瘤选自下组:卵巢癌。
[0013] 本发明的另一技术方案是：
[0014] 提供一种组合物，所述的组合物含有：
[0015] (1)化合物2-(4-叔丁基苯氧基)-N-(2-{[(4-叔丁基苯氧基）乙酰基]氨基}乙基） 乙酰胺、或其药学、保健品学或食品学上可接受的盐或酯或衍生物、或它们的混合物；
[0016] (2)致凋亡药物或肿瘤血管抑制药物；
[0017] (3)药学、保健品学、或食品学上可接受的载体或赋形剂。
[0018] 进一步的，所述的致凋亡药物如卡铂、阿霉素、三苯氧胺、5-氟尿嘧啶、双呋喃氟尿 嘧啶、三尖杉酯碱、阿糖胞苷、氟他胺、异环磷酰胺、脱氧氟尿苷、洛波钼、来屈唑、替尼泊甙、 血管他丁、内皮他丁或阿瓦斯丁等，更优选顺铂或紫杉醇。
[0019] 进一步的，所述的2-(4-叔丁基苯氧基)-N-(2-{[(4-叔丁基苯氧基）乙酰基]氨基} 乙基）乙酰胺和致凋亡药物之间重量比为1:1000至1000:1，优选重量比为1:500-500:1，更 优选重量比为1:100-100:1，再优选重量比为1:50-50:1。
[0020] 进一步的，所述的2-(4-叔丁基苯氧基)-N-(2-{[(4-叔丁基苯氧基）乙酰基]氨基} 乙基）乙酰胺占组合物总重量的l -95wt%，优选5_90wt%，更优选10_80wt% 10_80wt%。 [0021 ]进一步的，所述组合物的剂型是片剂、胶囊、粉末剂、颗粒剂、混悬剂或注射剂。在 所述组合物为单位剂型或多剂型时，其中所述化合物、其药学上或保健品学上可接受的盐 或酯、或它们的混合物的含量为〇 . 〇5_50000mg/剂，优选0 . l-10000mg/剂，更优选0.5-5000mg/剂。
[0022]本发明的优点是：
[0023] (a)本发明针对人NAC1蛋白所设计的小分子化合物，可有效靶向抑制抗凋亡分 子----NAC1蛋白，从而用于癌症治疗；
[0024] (b)本发明的小分子化合物还可以与其它药物和治疗手段联合，用于恶性肿瘤的 治疗；
[0025] (c)本发明的小分子化合物具有渗透性好，毒副作用小，结构简单，易于合成等优 点。
【附图说明】
[0026] 图1显示了化合物AN3294110可抑制NAC1蛋白二聚体的形成；
[0027]图2显示了化合物AN3294110增强顺铂的细胞生长抑制，其中所用化合物浓度为10 μΜ，顺铂浓度为20μΜ;
[0028]图3显示了 ΑΝ3 294110增强顺铂诱导的细胞凋亡，其中所用化合物浓度为1 ΟμΜ，顺 铂浓度为20μΜ。
【具体实施方式】
[0029] 经过广泛而深入的研究，发现部分肿瘤细胞内NAC1的表达往往升高，抑制NAC1的 表达和功能可以抑制肿瘤细胞的增殖和体内外的致瘤活性。为此，本发明人借助计算机辅 助药物设计从数十万个侯选化合物中筛出了若干个可能会和NAC1结合的小分子化合物，随 后运用体外结合实验和MTT的方法对这些化合物进行了第二轮筛选，首次得到一个可以强 烈增强顺铂对卵巢癌细胞系SK0V3增殖抑制作用的化合物AN3294110,即小分子化合物2-(4-叔丁基苯氧基)-N-(2_{ [ (4-叔丁基苯氧基）乙酰基]氨基}乙基）乙酰胺。
[0030] 具体而言，本发明人的研究表明，NAC1在卵巢癌肿瘤组织中的选择性高表达，而在 正常卵巢上皮组织中未见表达，提示NAC1可能与肿瘤发生及生长密切相关。在低表达NAC1 的ES2卵巢癌细胞系内，NAC1的过表达可明显抵抗顺铂诱导的凋亡，促进细胞生长，提示其 可能是一个具有抗凋亡作用的分子。在高表达NAC1的卵巢癌肿瘤细胞内，抑制NAC1的表达 可增强卵巢癌细胞对顺铂诱导凋亡的敏感性，抑制肿瘤细胞的克隆形成能力。提示NAC1很 可能是治疗卵巢癌的作用靶点。本发明人的研究表明，抗凋亡作用的的NAC1分子在细胞生 长调控、细胞凋亡、肿瘤发生发展等过程中发挥重要的作用。因此，NAC1很可能在临床肿瘤 的诊断和治疗中作为潜在的候选靶标。
[0031] 在此基础上，本发明人筛选了大量的化合物，从而获得了一种可有效抑制肿瘤的 小分子化合物，所述的小分子化合物特异性地在蛋白水平靶向抗凋亡分子一NAC1蛋白，对 表达NAC1的肿瘤细胞的生物学行为进行干预，从而有效抑制NAC1的功能，达到抗肿瘤效果。 [0032]下面具体介绍：
[0033]如本文所用，术语"本发明的小分子化合物"、"化合物AN3294110"或"本发明化合 物"、"本发明的乙二胺的酰胺衍生物"可互换使用，都指出小分子化合物2-(4-叔丁基苯氧 基)-N_(2-{[ (4-叔丁基苯氧基）乙酰基]氨基}乙基）乙酰胺及其药学上可接受的盐和活性 衍生物。
[0034] 2-(4-叔丁基苯氧基)-N-(2- {[ (4-叔丁基苯氧基）乙酰基]氨基}乙基）乙酰胺是一 种靶向于人伏隔核1蛋白（NAC1)的先导化合物，其结构