专利名称：精制卵黄抗体的制备工艺的制作方法
技术领域：
本发明属自卵黄中提取抗体的方法。
高免卵黄液已被广泛用于鸡传染性法氏囊炎、鸡新城疫及鸭瘟等疾病的治疗和紧急预防，也可以从卵黄中提取高纯度的诊断试剂。但是，由于卵黄中含有大量的脂类和色素，大大增加了卵黄液的粘稠度，使从卵黄抗体中提取抗体的应用受到限制，且注射部位往往留下卵黄遗迹。目前去除卵黄中脂类物质的常用试剂为聚乙二醇、氯仿、和甲醛等，前者受环境因素影响大，操做不方便，氯仿使用量较大，对环境污染严重，甲醛使卵黄抗体丢失较多。
本发明寻找了一种价格廉、用量少且效能高的卵黄破乳剂——苯酚。
本发明的要点是，利用某种抗原强化免疫产蛋鸡群，经2-3次免疫后，收集所产鸡蛋，分离卵黄，用含3-5％苯酚的生理盐水与上述卵黄3-5∶1搅拌混匀，4,000转/分，离心10分钟，去除其中的脂类物质，即可获得比较单纯的卵黄蛋白。经抗体活性检验和γ-球蛋白定量分析证明，用苯酚处理稀释卵黄液对卵黄蛋白成份及含量的影响较聚乙二醇为小。初步纯化的卵黄液可直接用于治疗，也可用于自高免卵黄中提取免疫球蛋白。
本方法对卵黄蛋白成分及抗体滴度的影响较小，利用苯酚提纯卵黄抗体，采用新的破乳方法，效果可靠，简单易行，对环境污染少，且使精制卵黄抗体的制做成本大为降低。
简要过程为2-3％苯酚溶液3-4份与卵黄1份混合均匀→室温静置10分钟→离心去除沉淀。
实施例用传染性法氏囊炎病毒抗原免疫产蛋鸡群，1毫升/只，间隔两周后，再注射一次，两周后收集鸡蛋，分离卵黄，利用4份含3％苯酚的生理盐水与1份卵黄混合，用搅拌机搅拌混匀，静置10分钟，使卵黄破乳。4,000转/分，离心10分钟，去除沉淀，再用等量50％冷乙醇沉淀与上清液混合，4,000转/分，离心15分钟取沉淀，真空冻干，包装制成成品。
权利要求
1.一种提取卵黄中抗体的新工艺，其特征在于利用含苯酚的生理盐水与卵黄混合，离心后获得含卵黄抗体的无色透明的上清液。
2.权利要求1所述的一种提取卵黄中抗体的新工艺，其特征在于苯酚占稀释卵黄液总量的1.8％-3％。
3.权利要求1所述的一种提取卵黄中抗体的新工艺，其特征在于含苯酚的生理盐水与卵黄的混合比例为3-5∶1。
全文摘要
本发明利用苯酚使卵黄溶液破乳,此技术可用于自高免卵黄中制备精制卵黄抗体的制作过程。使用含2—3%的化学纯苯酚溶液与卵黄3—5∶1混合均匀,室温静置10分钟,离心后可使卵黄液分为含脂类物质的沉淀和含抗体的上清液,此上清液可作为精制卵黄抗体的初产品,利用50%冷乙醇可自初产品中制备精制冻干卵黄抗体。
文档编号C07K16/04GK1202496SQ9811021
公开日1998年12月23日 申请日期1998年5月21日 优先权日1998年5月21日
发明者常维山 申请人:山东农业大学