含恶二唑杂环类化合物及其制备方法和应用与流程

本发明涉及含恶二唑杂环类化合物及其制备方法和应用。

背景技术：

白血病，亦称作血癌，是一类造血干细胞异常的克隆性恶性疾病。其克隆中的白血病细胞失去进一步分化成熟的能力而停滞在细胞发育的不同阶段。在骨髓和其他造血组织中白血病细胞大量增生积聚并浸润其他器官和组织，同时使正常造血受抑制，临床表现为贫血、出血、感染及各器官浸润症状。

白血病通常分为:1)急性白血病；2)慢性白血病；3)特殊类型白血病。

急性白血病是一种造血干细胞异常的克隆性恶性疾病。其克隆中的白血病细胞失去进一步分化成熟的能力而停滞在细胞发育的不同阶段。在骨髓和其他造血组织中白血病细胞大量增生积聚并浸润其他器官和组织，同时使正常造血受抑制，临床表现为贫血、出血、感染及各器官浸润症状。急性白血病大体上可以分为淋巴细胞白血病或粒细胞白血病，它们可以从表型和基因上鉴别，其特点是病程进展快速，需要立即治疗。急性白血病来源于早期造血祖细胞。急性淋巴细胞白血病是比较少见的恶性肿瘤。每年急性淋巴细胞白血病(ALL)的总发病率为1.1/100,000。该发病率在童年时期达到高峰，并随着年龄逐渐增大而不断降低。35岁之后该发病率又再次上升，并从80岁开始观察到第二个高峰。

急性淋巴细胞白血病(ALL)成人患者的治疗变得日益复杂，因为针对不同的疾病亚型引入了多种多样的治疗方案，体现出根据适应于特定风险的病种最佳地调整治疗的意图。已通过引入新治疗方案完成最新的改进，如针对Ph-阳性(Ph+)ALL而在早期加入酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼或针 对B-系ALL的CD20+病例使用抗-CD20抗体利妥昔单抗(Rituximab)。但是这些药对复发性急性淋巴细胞白血病(ALL)患者的疗效极差，约30％的患者将最终复发。

特征类型白血病又可包括早幼粒细胞白血病、浆细胞白血病、淋巴瘤白血病以及中枢性白血病。这种特殊类型白血病，除了具有一般白血病临床表现(发热、出血、贫血)、浸润症状、肝脾淋巴结肿大)外，主要有如下特点：发病急，进展快，出血明显，可发生致命性脑出血或合并弥散性血管内凝血，如未能及时诊断和治疗，在短时间内可因出血导致死亡。因此，是人类健康的隐形杀手。

其中，慢性粒细胞白血病(chronic myelocytic leukemia，CML)又叫慢性髓细胞白血病，它是血液系统的造血干细胞恶性克隆增殖性疾病，导致病人出现贫血、出血、感染等症状。CML占成人白血病的20％左右，大约每年的发病率为五万分之一，其在任何年龄段都有可能发病，尤其是在老年人中发病率更高，且男性比女性发病率高。根据CML患者的疾病进展状况和严重程度分为慢性期(CP)、加速期(AP)和急变期(BP)。大约85％～90％的慢性粒细胞白血病患者在慢性期被诊断发现，这个阶段症状并不明显，或者仅有乏力、关节疼痛或腹胀，如果药物治疗及时，慢性期就会变长，在没有及时治疗的情况下，疾病会进入到加速期。CML形成的主要原因是9号和22号染色体发生异位t(9:22)(q34:q11)(费城染色体Ph)形成一种融合基因即BCR-ABL融合基因，该基因能够编码BCR-ABL蛋白，是一种活性酪氨酸激酶。这种BCR-ABL激酶能使下游的一些底物磷酸化，进而激活与细胞增殖有关的信号转导通路，造成成熟粒细胞无限增殖而导致CML的发生。

目前，临床上对CML的治疗方法主要是传统的药物治疗、造血干细胞移植和新兴的分子靶向治疗。普通的药物治疗包括烷化剂白消安、羟基脲、干扰素(IFN-α)、阿糖胞苷及高三尖杉酯碱。其中，由于白消安副反应比较大，目前在临床上已经停止使用；羟基脲虽然价格低廉，治疗成本低，毒副作用小，但是其对于处于加速期的CML病人作用效果差，而且对于急变期的CML患者基本没有效果；α-干扰素较前两者毒副作用更小，病人耐 受性也好，能够产生持续的细胞遗传学缓解使CML病患者的生存期延长，但是其对加速期和急变期的CML患者效果很差。这种普通药物治疗的一个很大弊端是在对肿瘤细胞产生杀伤作用的同时也能对正常的机体细胞产生损伤。造血干细胞移植是目前理论上唯一可以治愈CML的方法，它是通过先用大剂量放化疗将CML患者体内的肿瘤细胞清除，再将自体或异体的造血干细胞移植给患者，使其重新建立正常的的造血免疫系统。但是这种方法在实际操作起来存在很多困难，比如对患者的年龄有一定的要求，手术复杂，成功率低，耗费高，且必须要有合适的骨髓捐献者，而且移植后期有可能发生感染，会使CML患者和家人面临很大的风险，所以造血干细胞移植在实际应用过程中很受限制。直到2001年全球第一个与肿瘤发生相关的信号转导抑制剂伊马替尼的上市，使CML的治疗看到的希望，开创CML分子靶向治疗的新时代。

伊马替尼是全球第一个获得批准的与肿瘤发生相关的信号传导抑制剂，主要用于治疗急性和慢性白血病，近年来，随着伊马替尼作为治疗慢性粒细胞白血病的一线用药被大量使用，其耐药性现象也逐渐凸显，且多发生在CML加速期或急变期的患者。所以寻找一种对白血病干细胞有杀伤力并且能够克服伊马替尼耐药的化合物迫在眉睫，而且这也将开启CML治疗的新方向和改变抗CML药物的临床评估标准。

上述数据表明，白血病对大多数患者而言仍然是爆发性且无法治愈的疾病。因而，迫切需要改进的治疗白血病的药物。

技术实现要素：

为了解决现有技术中用于治疗白血病的药物疗效不佳的问题，根据本发明的一个方面，提供了一种含恶二唑杂环类化合物，所述含恶二唑杂环类化合物具有以下结构通式：

在上述含恶二唑杂环类化合物中，所述通式中R包括以下基团：

根据本发明的另一方面，还提供了一种含恶二唑杂环类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下合成路线：使N-酰基-4-甲基-3-((4-(吡啶-3-)嘧啶-2-)氨基)苯甲酰肼化合物发生重排反应，转化为所述含恶二唑杂环类化合物；其中，所述N-酰基-4-甲基-3-((4-(吡啶-3-)嘧啶-2-)氨基)苯甲酰肼化合物具有以下结构通式：

并且

所述含恶二唑杂环类化合物具有以下结构通式：

在上述制备方法中，所述N-酰基-4-甲基-3-((4-(吡啶-3-)嘧啶-2-)氨基)苯甲酰肼化合物的结构通式和所述含恶二唑杂环类化合物的结构通式中，R包括以下基团：

在上述制备方法中，在三氟甲烷磺酸酐和三苯基氧化膦存在的条件下或者在碳酸钾和对甲苯磺酰氯存在的条件下，发生所述重排反应。

在上述制备方法中，所述N-酰基-4-甲基-3-((4-(吡啶-3-)嘧啶-2-)氨基)苯甲酰肼化合物的制备方法进一步包括：在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCl)、1-羟基苯并三唑(HOBT)和N-甲基吗啡啉(NMM)存在下，使4-甲基-3-{[4-(吡啶基-3-基)嘧啶基-2-基]氨基}苯甲酰肼与羧酸化合物(R-CH3COOH)反应，生成所述N-酰基-4-甲基-3-((4-(吡啶-3-)嘧啶-2-)氨基)苯甲酰肼化合物；

其中，R包括以下基团：

根据本发明的又一方面，还提供了上述的含恶二唑杂环类化合物在用于治 疗白血病的药物中的应用。

在上述应用中，所述用于治疗白血病的药物包含所述含恶二唑杂环类化合物、所述含恶二唑杂环类化合物在药学上可接受的盐、酯、水合物或它们的组合以及辅料。

在上述应用中，所述治疗白血病的药物的剂型选自片剂、胶囊剂、丸剂、栓剂、气雾剂、口服液体制剂、颗粒剂、散剂、注射剂、糖浆剂、酒剂、酊剂、露剂、膜剂或它们的组合。

在上述应用中，所述治疗白血病的药物的给药方式包括口服、注射、植入、外用、喷雾、吸入或它们的组合。

从而，本发明提供了一类新的含恶二唑杂环类化合物及其制备方法和应用，通过细胞水平实验发现，本发明提供的含恶二唑杂环类化合物均可以抑制K562-3d、HL60、KG1a细胞的增殖，通过测定IC₅₀和IC₉₀值发现，本发明提供的含恶二唑杂环类化合物对K562-3d、HL60、KG1a细胞的增殖的抑制作用均可达到90％，并且特别是本发明提供的实例11化合物(化合物10c)在药物浓度低于阳性对照药物伊马替尼的情况下，可以同样实现抑制K562-3d、HL60、KG1a细胞增殖的效果，因此本发明提供的含恶二唑杂环类化合物可以用于治疗白血病。

附图说明

图1是化合物6a的¹H NMR。

图2是化合物6a的¹³C NMR。

图3是化合物6a的HR-MS。

图4是化合物6b的¹H NMR。

图5是化合物6b的¹³C NMR。

图6是化合物6b的HR-MS。

图7是化合物6c的¹H NMR。

图8是化合物6c的¹³C NMR。

图9是化合物6c的HR-MS。

图10是化合物6d的¹H NMR。

图11是化合物6d的¹³C NMR

图12是化合物6d的HR-MS。

图13是化合物6e的¹H NMR。

图14是化合物6e的¹³C NMR。

图15是化合物6e的HR-MS。

图16是化合物6f的¹H NMR。

图17是化合物6f的¹³C NMR。

图18是化合物6f的HR-MS。

图19是化合物6g的¹H NMR。

图20是化合物6g的¹³C NMR。

图21是化合物6g的HR-MS。

图22是化合物6h的¹H NMR。

图23是化合物6h的¹³C NMR。

图24是化合物6h的HR-MS。

图25是化合物10a的¹H NMR。

图26是化合物10a的¹³C NMR。

图27是化合物10a的HR-MS。

图28是化合物10b的¹H NMR。

图29是化合物10b的¹³C NMR。

图30是化合物10b的HR-MS。

图31是化合物10c的¹H NMR。

图32是化合物10c的¹³C NMR。

图33是化合物10c的HR-MS。

图34是化合物10d的¹H NMR。

图35是化合物10d的¹³C NMR。

图36是化合物10d的HR-MS。

图37是化合物10e的¹H NMR。

图38是化合物10e的¹³C NMR。

图39是化合物10e的HR-MS。

图40是化合物10f的¹H NMR。

图41是化合物10f的¹³C NMR。

图42是化合物10f的HR-MS。

图43是化合物10g的¹H NMR。

图44是化合物10g的¹³C NMR。

图45是化合物10g的HR-MS。

图46是化合物10h的¹H NMR。

图47是化合物10h的¹³C NMR。

图48是化合物10h的HR-MS。

图49是化合物10i的¹H NMR。

图50是化合物10i的¹³C NMR。

图51是化合物10i的HR-MS。

图52示出了伊马替尼、实例1-9化合物对K562细胞的抑制。

图53示出了实例10-17化合物对K562细胞的抑制。

图54示出了伊马替尼、实例1-9化合物对HL60的抑制。

图55示出了实例10-17化合物对HL60的抑制。

图56示出了伊马替尼、实例1-9化合物对KG1a细胞的抑制。

图57示出了实例10-17化合物对KG1a细胞的抑制。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1本发明提供的含恶二唑杂环类化合物的化学合成和结构鉴定

1.本发明提供的含恶二唑杂环类化合物具有以下结构通式：

在上述结构通式中，取代基-R包括以下基团:

2.本发明提供的含恶二唑杂环类化合物的化学合成实验步骤：

2.1通用合成路线为:

2.2.1化合物5a-5h的合成

2.2.1.1化合物2：4-甲基-3-[4-(吡啶基-3-基)嘧啶基-2-基]氨基苯甲酸甲酯的合成

在三口烧瓶中加入30mL的无水甲醇，化合物1(1g，3.26mmol)，向其中缓慢滴加2mL的浓硫酸，滴加完毕后，反应液在65℃下加热回流3小时，旋除甲醇，加入饱和碳酸钠水溶液，过滤，滤饼水洗，干燥得棕黄色固体955mg，产率：91.32％。

MS(ESI⁺)：321.6

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δppm 9.32(s,1H),9.01(s,1H),8.74(d,J＝3.6Hz,1H),8.53(d,J＝5.2Hz,1H),8.45(d,J＝8.0Hz,1H),7.73(dd,J＝1.2,7.6Hz,1H),7.45(dd,J＝4.8,8.0Hz,1H),7.30(d,J＝8.0Hz,1H),7.23(d,J＝5.2 Hz,1H),7.15(s,1H),3.97(s,3H),2.42(s,3H)。

2.2.1.2化合物3：4-甲基-3-{[4-(吡啶基-3-基)嘧啶基-2-基]氨基}苯甲酰肼的合成

在三口烧瓶中，加入化合物2(700mg,2.185mmol)，10mL乙醇和30mL水合肼，加热至78℃回流3小时，冷却，抽滤，水洗两次，冷乙醇洗2次，获得乳黄色固体650mg，产率：92.86％。

MS(ESI⁺)：321.1

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)：δppm9.69(s,1H),9.26(d,J＝1.6Hz,1H),9.05(s,1H),8.69-8.70(m,1H),8.53(d,J＝4.8Hz,1H),8.44(d,J＝8.0Hz,1H),8.10(s,1H),7.52-7.56(m,2H),7.46(d,J＝5.2Hz,1H),7.31(d,J＝7.6Hz,1H),2.29(s,3H)

2.2.1.3化合物5a-5h合成

化合物5a：4-甲基-N'-[3-(4-甲基-1H-咪唑基-1-基)-5-(三氟甲基)苯甲酰基]-3-{[4-(吡啶基-3-基)嘧啶基-2-基]氨基}苯甲酰肼的合成

在室温下，三口烧瓶中加入化合物4a:3-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯甲酸(50mg，0.185mmol)，EDCI(42.6mg,0.222mmol)，HOBT·H₂O(34mg,0.222mmol)，NMM(30.5uL，0.277mmol)和二氯甲烷5mL，搅拌20分钟后，加入化合物3(59.3mg,0.185mmol)，室温搅拌24h，用饱和碳酸钠调节pH至碱性，二氯甲烷萃取，二氯甲烷层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液旋除溶剂，残余物柱层析纯化，用CH₂Cl₂：MeOH＝30:1至CH₂Cl₂：MeOH＝15:1洗脱，获得白色固体67.2mg，产率：63.43％。

MS(ESI^-)：571.05

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)：δppm 10.71(s,2H),9.27(s,1H),9.14(s,1H),8.70(d,J＝4.8Hz,1H),8.55(d,J＝5.2Hz,1H),8.45(d,J＝8.0Hz,1H),8.42(s,1H),8.39(s,1H),8.28(s,1H),8.23(s,1H),8.16(s,1H),7.70(s,1H),7.69(s,1H),7.55(dd,J＝5.2,8.0Hz,1H),7.47(d,J＝5.2Hz,1H),7.41(d,J＝4Hz,1H),2.35(s,3H),2.19(s,3H)

按照上述路线和方法得到了5b-5h。

化合物5b：4-氟-N'-(4-甲基-3-{[4-(吡啶基-3-基)嘧啶基-2-基]氨基}苯基)-3-(三氟甲基)苯甲酰肼

白色固体700mg，产率：87.9％。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.68(s,2H),9.27(d,J＝1.2Hz,1H),9.13(s,1H),8.70(dd,J＝1.6,4.8Hz,1H),8.54(d,J＝4.82Hz,1H),8.44-8.66(m,1H),8.31-8.35(m,2H),8.21(s,1H),7.66-7.74(m,2H),7.55(dd,J＝4.8,7.2Hz,3H),7.47(d,J＝5.2Hz,1H),7.40(s,J＝8.0Hz,1H),2.34(s,3H)。

化合物5c：N'-[3,5-二(三氟甲基)苯基]-4-甲基-3-{[4-(吡啶基-3-基)嘧啶基-2-基]氨基}苯甲酰肼

白色固体,产率：73.7％。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)：δppm 11.05(m,1H),10.66(s,1H),9.27(d,J＝1.6Hz,1H),9.14(s,1H),8.70(d,J＝1.2,4.4Hz,1H),8.58(s,2H),8.55(d,J＝5.2Hz,1H),8.43-8.46(m,2H),8.12(s,1H),8.15(s,1H),7.68(dd,1H),8.16(s,1H),7.70(s,J＝1.6,8.0Hz,1H),7.54(dd,J＝4.8,8.0Hz,1H),7.48(d,J＝5.2Hz,1H),7.42(d,J＝8.0Hz,1H),2.35(s,3H)。

化合物5d：4-甲基-N'-(4-甲基-3-{[4-(吡啶基-3-基)嘧啶基-2-基]氨基}苯基)-3-(三氟甲基)苯甲酰肼

得白色固体，产率：56％。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)：δppm 9.28(s,1H),8.66(d,J＝4.4Hz,1H),8.58(d,J＝7.6Hz,1H),8.51(d,J＝5.2Hz,1H),8.45(s,1H),8.26(s,1H),8.08 (d,J＝8.0Hz,1H),7.69(d,,J＝7.6Hz,1H),7.55-7.62(m,2H),7.41-7.44(m,2H),2.57(s,3H),2.43(s,3H)。

化合物5e：4-甲基-N'-[3-(2-甲基-1H-咪唑基-1-基)-5-(三氟甲基)苯甲酰基]-3-{[4-(吡啶基-3-基)嘧啶基-2-基]氨基}苯甲酰肼

白色固体，产率：56％。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)：δppm 10.91(s,1H),10.65(s,1H),9.27(d,J＝1.6Hz,1H),9.14(s,1H),8.69-8.70(m,1H),8.55(d,J＝5.2Hz,1H),8.44(d,J＝8.0Hz,1H),8.34(s,1H),8.26(s,1H),8.24(s,1H),8.17(s,1H),7.69(d,J＝8.0Hz,1H),7.69(s,1H),7.53-7.56(m,1H),7.50(s,1H),7.47(d,J＝5.2Hz,1H),7.41(d,J＝8.0Hz,1H),6.99(s,1H),2.37(s,3H),2.35(s,3H)。

化合物5f:4-甲基-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-)甲基)苯甲酰基)-3-((4-(吡啶-3-)嘧啶-2-)氨基)苯甲酰肼

白色固体，产率84.5％。ESI-MS：[M+H]⁺537.3；¹HNMR(400MHz,MeOD-d₄)：δppm 9.25(s,1H),8.63(d,J＝4.0Hz,1H),8.55(d,J＝8.0Hz),8.48(d,J＝5.2Hz,1H),8.43(s,1H),7.91(d,J＝8.0Hz,2H),7.67(d,J＝8.0Hz,1H),7.57(dd,J＝5.2Hz,8.0Hz,1H),7.48(d,J＝8.0Hz,2H),7.39(d,J＝8.8Hz,1H),7.38(d,J＝5.6Hz,1H),3.60(s,2H),2.54(br s,8H),2.40(s,3H),2.32(s,3H)。

化合物5g：N-(4-甲基-3-((4-(吡啶-3-)嘧啶-2-)氨基)苯甲酰基)烟酰肼

淡黄色固体，产率76％。

该化合物的MS：[M+H]⁺:426.01；¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δppm 10.71(s,1H),10.53(s,1H),9.27(d,J＝1.6Hz,1H),9.13(s,1H),9.08(d,J＝1.6Hz,1H),8.78(dd,J＝1.2,4.8Hz,1H),8.55(d,J＝5.2Hz,1H),8.47–8.43(m,1H),8.32–8.22(m,2H),7.68(dd,J＝1.6,8Hz,1H),7.60-7.54(m,2H),7.47(d,J＝5.2Hz,1H),7.40(d,J＝8Hz,1H),2.34(s,1H)。

化合物5h：N-乙酰基-4-甲基-3-((4-(吡啶-3-)嘧啶-2-)氨基)苯甲酰肼

灰白色固体，产率87％。

该化合物的ESI-MS：[M+H]⁺:363.06；¹H NMR:10.21(s,1H),9.85(s,1H),9.26(d,J＝4Hz,1H),9.10(s,1H),8.70(dd,J＝1.6,4.8Hz,1H),8.53(d,J＝5.2Hz,1H),8.43(d,J＝8Hz,1H),8.15(s,1H),7.61(dd,J＝1.6,8Hz,1H),7.54(dd,J＝4.8,8Hz,1H),7.46(d,J＝5.2Hz,1H),7.36(d,J＝8Hz,1H),2.32(s,3H),1.92(s,3H)。

实例1-8化合物6a-6h的合成

实例1化合物6a：N-(2-甲基-5-{5-[3-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基]-1,3,4-噁二唑-2-基}苯基)-4-(3-吡啶基)-嘧啶-2-胺的合成和结构鉴定

在三口瓶中加入167mg的三苯氧膦和干燥的二氯甲烷2mL，在0℃下缓慢加入50μL的三氟甲磺酸酐，在0℃下搅拌5min，并缓慢升至室温,有白色固体生成，加入化合物5a(114.5mg，0.2mmol)，溶液变成亮黄色，室温搅拌反应3h后用10％NaHCO₃水溶液淬灭，水层用二氯甲烷萃取，二氯甲烷层用无水Na₂SO₄干燥，过滤，滤液旋除溶剂，残余物柱层析纯化，用CH₂Cl₂：MeOH＝50:1,CH₂Cl₂：MeOH＝30:1梯度洗脱,获得白色固体65mg，产率：58.61％。

MS(ESI⁺)：554.98；HRMS-ESI(+)：C₂₉H₂₁F₃N₈OH计算值555.1869，实测值555.1854；

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δppm 9.38(d,J＝1.2Hz,1H),9.22(d,J＝1.2Hz,1H),8.65-8.66(m,1H),8.59(d,J＝5.2Hz,1H),8.49-8.52(m,1H),8.33-8.34(m,2H),7.93(s,1H),7.85(dd,J＝1.6,7.6Hz,1H),7.78(s,1H),7.41-7.44(m,2H),7.30(d,J＝5.2Hz,1H),7.19(s,1H),7.14(s,1H),2.50(s,3H),2.35(s,3H)；

¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)δppm165.8,162.6,162.4,160.3,159.3,151.7,148.5,140.7,138.7,138.4,134.5,134.4,133.8,133.5,132.3,132.1,131.4,126.9,124.2,123.8,121.7,121.7,121.7,120.0,119.3,114.2,108.8,18.4,13.6。

按照上述路线和方法得到6b-6h。

实例2化合物6b：N-(5-{5-[4-氟-3-(三氟甲基)]苯基}-1,3,4-噁二唑-2-甲基苯基)-4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-胺的结构鉴定

微黄白色固体，产率：89.2％。

MS(ESI⁺)：493.33；HRMS-ESI(+)：C₂₅H₁₆F₄N₆OH计算值493.1400，实测值493.1389；

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δppm9.37(s,1H),9.20(s,1H),8.73(d,J＝4Hz,1H),8.59(d,J＝5.2Hz,1H),8.52(d,J＝8.0Hz,1H),8.35-8.41(m,2H),7.83(d,J＝7.6Hz,1H),7.37-7.47(m,3H),7.17(s,1H),2.49(s,3H)；

¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)δppm 165.4,162.6,162.5,160.3,159.3,151.7,148.5,138.3,134.7,132.7,132.6,132.4,131.8,131.3,126.2,126.1,123.8,121.9,121.6,120.8,120.7,119.0,118.2,118.0,108.8,18.4。

实例3化合物6c：N-(5-{5-[3,5-二(三氟甲基)苯基]-1,3,4-噁二唑-2-基}-2-甲基苯基)-4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-胺的结构鉴定

白色固体，产率：64.9％。

MS(ESI⁺)：543.96；HRMS-ESI(+)：C₂₆H₁₆F₆N₆OH计算值543.1368，实测值543.1354；

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δppm9.35(s,1H),9.21(s,1H),8.71(s,1H), 8.57(s,2H),8.54(s,1H),8.51(d,J＝7.6Hz,1H),8.05(s,1H),7.81(d,J＝7.6Hz,1H),7.40-7.46(m,2H),7.29(m,1H),7.22(s,1H),2.48(s,3H)；

¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)δppm 165.8,162.6,162.1,160.3,159.3,151.7,148.5,138.4,134.6,133.3,133.0,132.7,132.3,131.3,126.8,126.1,124.9,124.8,124.1,123.8,121.7,121.6,121.4,119.4,108.8,18.4。

实例4化合物6d:N-{2-甲基-5-[5-(4-甲基-3-三氟甲基苯基)-1,3,4-噁二唑-2-基]苯基}-4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-胺的结构鉴定

得白色固体，产率＝62％。

HRMS-ESI(+)：C₂₆H₁₉F₃N₆OH计算值489.1651，实测值489.1644；

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δppm9.33(s,1H),9.12(s,1H),8.73(d,J＝0.4Hz,1H),8.58(d,J＝5.2Hz,1H),8.54(d,J＝8.0Hz,1H),8.35(s,1H),8.18(d,J＝7.6Hz,1H),7.82(dd,J＝1.6,8.0Hz,1H),7.39-7.46(m,3H),7.18(s,1H),2.58(s,3H),2.47(s,3H)；

¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)：δppm 165.0,163.4,162.6,160.3,159.3,151.7,148.4,140.6,138.2,134.7,132.8,132.5,131.7,131.3,130.1,129.8,124.4,124.3,123.9,122.1,122.0,121.6,119.2,108.7,19.6,18.3。

实例5化合物6e：N-(2-甲基-5-{5-[3-(2-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基]-1,3,4-噁二唑-2-基}苯基)-4-(3-吡啶基)-嘧啶-2-胺的结构鉴定

微黄白色固体，产率：60.6％。

MS(ESI⁺)：555.09；HRMS-ESI(+)：C₂₉H₂₁F₃N₈OH计算值555.1869，实测值555.1857；

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δppm9.38(d,J＝1.6Hz,1H),9.21(d,J＝1.2Hz,1H),8.65-8.66(m,1H),8.59(d,J＝5.2Hz,1H),8.47-8.50(m,1H),8.46(s,1H),8.32(s,1H),7.85(dd,J＝1.6,8.0Hz,1H),7.75(s,1H),7.43-7.45(m,2H),7.30(d,J＝5.2Hz,1H),7.17(s,1),2.50(s,3H),2.47(s,3H)

¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)δppm 165.8,162.6,162.3,160.3,159.3,151.7,148.5,144.6,139.5,138.4,134.5,133.6,133.3,132.2,131.4,128.5,126.7,126.6,124.8,124.7,124.1,123.8,123.2,121.7,121.7,121.4,120.4,119.3,108.8,18.4,13.9。

实例6化合物6f:N-(2-甲基-5-(5-(4-((4-甲基哌嗪-1-)甲基)哌嗪)-1,3,4-噁二唑-2-)苯基)-4-(吡啶-3-)嘧啶-2-胺的结构鉴定

白色固体，产率63.3％。ESI-MS：[M+H]⁺:519.4；¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δppm 9.30(d,1H,J＝1.2Hz),9.13(s,1H),8.70(dd,1H,J＝1.2Hz,4.8Hz), 8.56(d,1H,J＝5.2Hz)8.53(d,1H,J＝8Hz),8.05(d,2H,J＝8.4Hz),7.80(dd,1H,J＝1.6,8.0Hz),7.46(d,2H,J＝8.0Hz),7.41(dd,1H,J＝4.8,7.6Hz)7.38(d,1H,J＝8.4Hz),7.16(s,1H),3.58(s,2H),2.54(br,8H),2.45(s,3H),2.34(s,3H)。¹³C NMR(100MHz,CDCl₃):164.7,164.4,162.6,160.4,159.3,151.6,148.5,142.4,134.7,132.6,131.6,131.2,129.6,126.9,123.9,122.8,122.4,121.6,119.1,108.7,62.5,55.0,52.8,45.8,18.3。HR-MS(ESI)[M+H]⁺,计算值：519.2615,实测值：519.2560。

实例7化合物6g:N-(2-甲基-5-(5-(吡啶-3-)-1,3,4-噁二唑-2-)苯基)-4-(吡啶-3-)嘧啶-2-胺的结构鉴定

得白色固体，产率64％。

该化合物的ESI-MS：[M+H]⁺:408.08；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δppm9.33(d,J＝6.8Hz,2H),9.16(d,J＝1.2Hz,1H),8.75(dd,J＝2.4,24.4Hz,2H),8.56(d,J＝5.2Hz,1H),8.50(d,J＝8.4Hz,1H),8.41(d,J＝8Hz,1H),7.81(dd,J＝1.6,8Hz,1H),7.48–7.42(m,2H),7.39(d,J＝8Hz,1H),7.18(s,1H),2.46(s,3H).¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)：165.3,162.7,162.4,160.3,159.3,152.3,152.3,151.7,148.5,147.9,138.3,134.7,134.2,132.5,131.8,131.3,123.9,123.8,122.0,121.6,119.1,108.8,18.4。HR-MS(ESI)[M+H]⁺:计算值：408.1573,实测值：408.1541。

实例8化合物6h:N-(2-甲基-5-(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-)苯基)-4-(吡啶-3-)嘧啶-2-胺的结构鉴定

淡黄色固体，产率65.3％。该化合物的ESI-MS：[M+H]⁺345.48；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δppm 9.33(s,1H),9.11(d,J＝1.2Hz,1H),8.73(d,J＝3.6Hz,1H),8.55(d,J＝5.2Hz,1H),8.48(m,1H),7.70(dd,J＝1.6,8Hz,1H)7.46(dd,J＝4.4,7.6Hz,1H),7.35(d,J＝8Hz,1H),7.25(d,J＝5.2Hz,1H),7.13(s,1H),2.65(s,1H),2.44(s,1H)。¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)：δppm 165.1,163.5,162.6,160.3,159.2,151.6,148.6,138.1,134.7,132.5,131.2,131.0,123.7,122.5,121.3,118.8,108.7,18.2,11.2。HR-MS(ESI)[M+H]⁺,计算值：345.1464,实测值：345.1446。

2.2.3.1化合物8a-8d的合成

路线和方法类似于化合物3的合成。

2.2.3.1.1化合物8a：4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯甲酰肼的结构鉴定：

淡黄色固体，产率：93.7％。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δppm 8.04(s,1H),7.95(d,J＝8.4Hz,1H),7.90(d,J＝8.0Hz,1H),7.47(s,1H),4.14(s,3H),3.72(s,2H),2.50-2.54(m,8H),2.33(s,2H)。

2.2.3.1.2化合物8b：4-{[4-(2-叔丁基二苯基硅氧基乙基)哌嗪-1-基]甲基}-3-(三氟甲基)苯甲酰肼的结构鉴定

淡黄色固体，产率：98％。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δppm 8.06(s,1H),7.90-7.95(m，2H),7.69-7.71(m，4H),7.38-7.48(m，6H),4.16(s,2H),3.84(t,J＝6.0Hz,2H),3.69(s,2H),2.51-2.65(m,10H),1.07(s,9H)。

2.2.3.1.3化合物8c：4-[(N-叔丁氧羰基氨乙基)-4H-哌嗪]甲基-3-(三氟甲基)苯甲酰肼的结构鉴定

淡黄色固体，产率：79.3％。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 8.06(s,1H),7.90-7.95(m,2H),7.78(s,1H),5.03(s,1H),4.17(s,2H),3.70(s,2H),3.24(d,J＝4.8Hz,2H),2.48-2.51(m,11H),1.47(s,9H)。

2.2.3.1.4化合物8d:4-((4-(2-(叔丁基二苯基硅氧乙基)哌嗪-1-)甲基)苯甲酰肼的结构鉴定

淡黄色油状液体，产率92％。ESI-MS：[M+H]⁺:518.37.¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 7.70–7.65(m,6H),7.43–7.33(m,9H),4.09(s,2H),3.80(t,J＝6Hz,2H),3.52(s,2H),2.59–2.45(m,10H),1.03(s,9H)。

2.2.3.1化合物9a-9d的合成

通用路线

2.2.3.2化合物9a-9d的合成

路线和方法类似于5a-5h。

2.2.3.2.1化合物9a：4-甲基-N'-{4-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]-3-(三氟甲基)苯基}-3-{[4-(吡啶基-3-基)嘧啶基-2-基]氨基}苯甲酰肼的结构鉴定：

白色固体，产率：78.3％。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δppm 11.36(s,1H),9.45(d,J＝1.6Hz,1H),9.17(s,1H),8.82(dd,J＝1.6,4.8Hz,1H),8.51(d,J＝5.2Hz,1H),8.29(dd,J＝1.6,6.4Hz,1H),8.23(s,1H),8.19(d,J＝8.0Hz,1H),7.71(d,J＝8.0Hz,1H),7.47(dd,J＝1.2,8.0Hz,1H),7.19-7.22(m,2H),7.13(s,1H),3.55(s,3H),2.42(m,8H),2.38(s,3H),2.29(s,3H)。

2.2.3.2.2化合物9b：4-{4-(2-叔丁基二苯基硅氧基乙基)哌嗪-1-基]甲基}-N'-(4-甲基-3-{[4-(吡啶基-3-基)嘧啶基-2-基]氨基}苯基)-3-(三氟甲基)苯甲酰肼的结构鉴定

白色固体，产率：70.2％。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δppm 11.55(s,1H),11.34(d,J＝0.8Hz,1H),9.42(d,J＝1.6Hz,1H),9.10(s,1H),8.77(dd,J＝1.2,4.8Hz,1H),8.48(d,J＝5.2Hz,1H),8.23(t,J＝8.8Hz,1H),7.67-7.72(m,6H),7.36-7.48(m,7H),7.21(s,1H),8.15-7.18(m,2H),3.80(s,2H),3.52(s,2H),2.34-2.57(m,13H),1.05(s,9H)。

2.2.3.2.3化合物9c：4-[(N-叔丁氧羰基氨乙基)-4H-哌嗪]甲基-N'-(4-甲基-3-{[4-(吡啶基-3-基)嘧啶基-2-基]氨基}苯基)-3-(三氟甲基)苯酰肼的结构鉴定

白色固体，产率：96.1％。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 10.74(s,1H),10.53(s,1H),9.27(s,1H), 9.17(s,1H),8.69(d,J＝2.4Hz,1H),8.54(d,J＝4.8Hz,1H),8.44(d,J＝8.4Hz,1H),8.19-8.24(m,3H),7.93(d,J＝7.6Hz,1H),7.67(d,J＝7.2Hz,1H),7.55(m,1H),7.46(d,J＝4.4Hz,1H),7.40(d,J＝8.0Hz,1H),3.54(s,2H),3.20(d,J＝1.2Hz,2H),2.33-2.42(m,13H),1.46(s,9H)。

2.2.3.2.4化合物9d:N-(4-((4-(2-(叔丁基二苯基硅氧乙基)哌嗪-1-)甲基)苯甲酰基)-4-甲基-3-((4-(吡啶-3-)嘧啶-2-)氨基)苯甲酰肼的结构鉴定

灰白色固体，产率89％。ESI-MS：[M+H]⁺:805.29.¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆):10.43(s,3H),9.27(s,1H),9.12(s,1H),8.70(dd,J＝1.2,4.4Hz,1H),8.54(d,J＝5.2Hz,1H),8.46(dd,J＝1.6,8Hz,1H),8.22(s,1H),7.89(d,J＝8Hz,2H),7.69–7.64(m,5H),7.55(dd,J＝4.8,7.8Hz,1H),7.48–7.38(m,10H),3.73(t,J＝6Hz,2H),3.52(s,2H),2.43–2.34(m,10H),0.99(s,9H)。

2.2.4化合物10a-10i的合成

实例9化合物10a：N-(2-甲基-5-{5-(4-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]-3-(三氟甲基)苯基}-1,3,4-噁二唑-2-基)苯基-4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-胺的合成和结构鉴定

合成方法和路线与6a-6h相似。

微黄白色固体，产率：85.3％。

MS(ESI⁺)：587.19；HRMS-ESI(+)：C31H29F3N8OH计算值587.2495，实测值587.2476；

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δppm 9.33(s,1H),9.18(d,J＝1.2Hz,1H),8.72(d,J＝3.6Hz,1H),8.59(d,J＝5.2Hz,1H),8.53(d,J＝4Hz,1H),8.37(s,1H),8.28(d,J＝8.4Hz,1H),8.01(d,J＝8.0Hz,1H),7.82-7.85(m,1H),7.41-7.46(m,2H),7.12(s,1H),3.76(s,2H),2.54-2.59(m,8H),2.49(s,3H),2.36(s,3H)；

¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)δppm 165.1,163.4,162.7,160.4,159.3,151.7,148.5,141.8,138.3,134.6,132.4,131.8,131.3,131.2,129.9,129.7,124.4,124.3,123.8,122.8,122.1,121.6,119.2,108.8,58.0,55.2,53.1,46.0,18.4。

实例10化合物10b：2-(4-{4-[5-(4-甲基-3-{[4-(吡啶基-3-基)嘧啶基-2-基]氨基}苯基]-1,3,4-噁二唑-2-基}-2-(三氟甲基)苯基-1-哌嗪基)乙醇的合成和结构鉴定

化合物11合成：合成路线和方法同6a-6h相似。

微黄白色固体363mg，产率：70.2％

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δppm 9.34(d,J＝1.2Hz,1H),9.19(d,J＝1.2Hz,1H),8.72(d,J＝3.6Hz,1H),8.53-8.55(m,1H),8.37(s,1H),8.29(d,J＝8.0Hz,1H),8.00(d,J＝8.0Hz,1H),),7.84(dd,J＝1.6,7.6Hz,1H),7.69-7.71(m, 4H),7.38-7.45(m,8H),7.29(d,J＝5.2Hz,1H),7.17(s,2H),3.87(s,2H),3.75(s,2H),2.41-2.66(m,13H),1.07(s,9H)。

化合物10b合成：

在25mL三口瓶中加入化合物11(363mg，0.425mmol)和THF10mL室温搅拌滴加入TBAF(543.6mg，2.123mmol)，室温反应3小时后，加入饱和碳酸氢钠水溶液，用二氯甲烷萃取，二氯甲烷层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液用旋转蒸发仪旋除溶剂，残余物柱层析纯化，获得白色固体34b，240mg，产率：91.7％。

MS(ESI⁺)：617.12；HRMS-ESI(+)：C₃₂H₃₁F₃N₈O₂H计算值617.2600，实测值617.2548；

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δppm9.32(s,1H),9.16(s,1H),8.71(d,J＝4Hz,1H),8.57(d,J＝5.2Hz,1H),8.52(d,J＝8.0Hz,1H),8.36(s,1H),8.28(s,1H),8.27(d,J＝4.4Hz,1H),7.98(d,J＝8.4Hz,3H),7.82(d,J＝8.0Hz,1H),7.39-7.44(m,2H),7.28(s,1H),7.22(s,1H),3.75(s,3H),3.69(t,J＝5.2Hz,3H),2.61-2.66(m,10H),2.47(s,3H)；

¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)δppm 165.1,163.3,162.6,160.3,159.3,151.7,148.5,141.6,138.3,134.6,132.4,131.9,131.3,131.2,129.9,129.8,129.4,125.1,124.4,124.3,123.8,122.9,122.4,122.0,121.609,119.226,108.7,59.4,57.6,53.4,53.0,18.4。

实例11化合物10c：N-(2-甲基-5-{5-(4-[(4-氨乙基哌嗪-1-基)甲基]-3-(三氟甲基)苯基}-1,3,4-噁二唑-2-基)苯基-4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-胺的合成和结构鉴定

化合物12：N-(2-甲基-5-{5-(4-[(N-叔丁氧羰基氨乙基)-4H-哌嗪甲基]-3-(三氟甲基)苯基}-1,3,4-噁二唑-2-基)苯基-4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-胺

合成路线和方法同6a-6h相似。

微黄白色，产率：74.9％。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 9.31(s,1H),9.13(s,1H),8.69(d,J＝2.8Hz,1H),8.55(d,J＝4.8Hz,1H),8.50(d,J＝8.0Hz,1H),8.34(s,1H),8.24(d,J＝8.0Hz,3H),7.96(d,J＝8.0Hz,1H),7.79(d,J＝7.6Hz,1H),7.36-7.42(m,2H),7.24-7.28(m,2H),5.18(s,1H),3.73(s,2H),3.29(s,2H),2.59(m,10H),2.44 (s,3H),1.46(s,9H)。

化合物10c：N-(2-甲基-5-{5-(4-[(4-氨乙基哌嗪-1-基)甲基]-3-(三氟甲基)苯基}-1,3,4-噁二唑-2-基)苯基-4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-胺

在25mL三口瓶中加入化合物12(738.9mg，1.03mmol)，CHCl₃(3mL)和CH₃OH(3mL)，在室温下搅拌，滴加浓盐酸4mL，继续搅拌30分钟，用饱和碳酸钠调节ph至11，用二氯甲烷和甲醇(10:1)混合液萃取，有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液旋除溶剂，残余物柱层析纯化，得黄白色固体482.1mg，产率：75.86％。

MS(ESI⁺)：616.71；HRMS-ESI(+)：C₃₂H₃₂F₃N₉OH计算值616.2760，实测值616.2746；

¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 9.33(d,J＝1.6Hz,1H),9.18(s,1H),8.72-8.73(m,1H),8.59(d,J＝5.2Hz,1H),8.54(d,J＝8.0Hz,1H),8.37(s,1H),8.28(d,J＝8.0Hz,1H),8.02(d,J＝8.0Hz,1H),7.83(d,J＝8.0Hz,1H),7.41-7.45(m,2H),7.28(s,1H),7.17(s,1H),3.75(s,2H),2.83(t,J＝6.0Hz,2H),2.56(br,8H),2.47-2.50(m,5H)；

¹³C NMR(100MHz,CD₃OD)δppm 165.10,163.19,161.87,160.51,159.14,150.51,147.53,141.72,138.54,135.19,134.03,132.62,131.38,131.06,129.76,128.99,129.76,129.30(q,J＝30.9Hz),124.04,108.02,59.69,57.67,53.01,52.69,37.54,17.01。

实例12化合物10d：N-(5-{5-(4-[(4-(2-异硫氰酸脂基)乙基哌嗪-1-基)甲基]-3-(三氟甲基)苯基}-1,3,4-噁二唑-2-甲基苯基-4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-胺的合成和结构鉴定

在氮气保护下，25mL三口瓶放入0℃下加入二氯甲烷10mL，搅拌5分钟，然后加入化合物10c(200mg，0.325mml)，DCC(73.7mg，0.357mmol)和CS₂(196.3uL，3.25mmol)，投料完毕后从0℃移至室温，反应3h后，用旋转蒸发仪旋除反应液溶剂，残余物柱层析纯化(CH₂Cl₂：MeOH＝30:1)得乳白色固体192.6mg，产率：90.1％。

MS(ESI⁺)658.41；HRMS-ESI(+)：C₃₃H₃₀F₃N₉OSH计算值658.2324，实测值658.2317；

¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 9.33(d,J＝1.2Hz,1H),9.18(d,J＝1.2Hz,1H),8.72(d,J＝3.6Hz,1H),8.59(d,J＝5.2Hz,1H),8.53-8.55(m,1H),8.37(s,1H),8.28(d,J＝8.0Hz,1H),8.00(d,J＝8.0Hz,1H),7.83(dd,J＝2.4,8.0Hz,1H),7.40-7.45(m,2H),7.30(s,1H),7.17(s,1H),3.76(s,2H),3.63(t,J＝6.0Hz,2H),2.73(t,J＝6.0Hz,2H),2.60(br,8H),2.8(s,3H)；

¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)δppm 165.14,163.34,162.65,160.35,159.30151.72,148.52,141.73,138.28,134.63,132.43,131.82,131.30,131.17,129.94,129.61(q,J＝30.5Hz),124.38,124.32,123.83,123.78(q,J＝272.4Hz), 122.87,122.10,121.62,119.21,108.78,57.93,57.21,53.12,52.99,43.07,18.36。

实例13化合物10e：N-(5-{5-(4-[(4-(2-丙烯酰胺乙基哌嗪-1-基)甲基]-3-(三氟甲基)苯基}-1,3,4-噁二唑-2-甲基苯基-4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-胺的合成和结构鉴定

在室温下，10mL三口烧瓶中加入化合物10c(50mg，0.081mmol)，EDCI(31.3mg，0.163mmol)，HOBT·H₂O(24.9mg，0.163mmol)，NMM(27.5uL，0.244mmol)和二氯甲烷5mL搅拌20分钟后，加入丙烯酸(8.5ul，0.122mmol)，反应24小时候用饱和碳酸氢钠调至碱性，用二氯甲烷萃取，二氯甲烷层用无水硫酸钠干燥，过滤，用旋转蒸发仪旋除滤液溶剂，残余物柱层析纯化，获得白色固体22.5mg，产率：41％。

HRMS-ESI(+)：C₃₅H₃₄F₃N₉O₂H计算值670.2866，实测值670.2869；

¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δppm 9.29(s,1H),9.12(s,1H),8.67(d,J＝4.0Hz,1H),8.54(d,J＝5.2Hz,1H),8.49(d,J＝8.0Hz,1H),8.33(s,1H),8.23(d,J＝8.0Hz,1H),7.96(d,J＝8.4Hz,1H),7.78(d,J＝7.6Hz,1H),7.35-7.41(m,2H),7.25(d,J＝5.2Hz,1H),7.21(s,1H),6.38(s,1H),6.24(d,J＝16.8Hz,1H),6.13(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H),5.62(d,J＝10.0Hz,1H),3.71(s,2H),3.45(dd,J＝5.2,10.8Hz,2H),2.55-2.58(br,10H),2.43(s,3H)；

¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)δ165.54,165.13,163.30,162.61,160.37,159.25,151.64,148.49,141.62,138.30,134.62,132.44,131.94,131.26,131.18,130.98,129.93,129.71,129.40,126.12,125.15,124.35,124.29,123.80,122.90,122.43,122.05,121.62,119.29,108.71,57.92,56.42,53.04,52.90,35.89,18.31。

实例14化合物10f:2-(4-(4-(5-(4-甲基-3-((4-(吡啶-3-)嘧啶-2-)氨基)苯基)-1,3,4-噁二唑-2-)苄基)哌嗪-1-)乙醇(A15)的合成和结构鉴定

化合物13合成：合成路线和方法同6a-6h相似。

淡黄色固体，产率67％。ESI-MS：[M+H]⁺:786.91.¹H NMR(400MHz,CDCl₃):9.32(s,1H),9.12(s,1H),8.72(s,1H),8.56(d,J＝4.8Hz,1H),8.51(d,J＝8Hz,1H),8.08(d,J＝8Hz,2H),7.80(dd,J＝1.2,7.6Hz,1H),7.64–7.62(m,5H),7.48–7.38(m,11H),7.18(s,1H),4.04(s,2H),3.68(s,2H),3.12–2.82(m,11H),2.46(s,3H),1.04(s,9H)。

化合物10f合成：合成路线和方法同10b相似。

淡黄色固体，产率94％。ESI-MS:[M+H]⁺:549.08；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δppm 9.28(s,1H),9.11(s,1H),8.70(d,J＝3.6Hz,1H),8.55(d,J＝5.2Hz,1H),8.52(d,J＝8Hz,1H),8.05(d,J＝8Hz,2H),7.80(d,J＝8Hz,1H),7.45(d,J＝8Hz,2H),7.39(m,2H),7.17(s,1H),3.66(t,J＝5.2Hz,2H),3.58(s,2H),2.63-2.55(m,10H),2.44(s,3H)。¹³C NMR(100MHz,CDCl₃):δppm 164.7,164.4,162.6,160.3,159.3,151.6,148.5,142.2,138.2,134.7,132.6,131.6,131.2,129.6,127.0,123.9,122.8,122.4,121.6,119.2,108.7,62.5,59.4,57.6,52.9,18.3。HR-MS(ESI)[M+H]⁺,计算值：549.2726,实测值：549.2715。

实例15化合物10g:N-(5-(5-(4-((4-(2-氨乙基)哌嗪-1-)甲基)苯基)-1,3,4-噁二唑-2-)-2甲基苯基)-4-(吡啶-3-)嘧啶-2-胺的合成和结构鉴定

化合物14的合成

在25mL两口烧瓶中，加入化合物10f(50mg，0.09mmol)，邻苯二甲酰亚胺(17.4mg，0.11mmol)，三苯基膦(31mg，0.11mmol)，5mL干燥的四氢呋喃。 将上述混合物放置冰浴中降温至-5℃，向上述溶液中缓慢滴加DEAD(19μL，0.11mmol)。滴加完毕后，将反应液移至室温，搅拌过夜，并通过TLC对反应进行监测。反应完全后，减压浓缩，加入20mL二氯甲烷，有机相用碳酸钠溶液和饱和食盐水洗涤，并用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，并通过硅胶柱层析(二氯甲烷：甲醇＝40：1)进行分离纯化，获得白色固体，产率74％。

该化合物的MS：[M+H]⁺:678.21.¹HNMR:(400MHz,CDCl₃)δppm 9.30(s,1H),9.14(s,1H),8.72(s,1H),8.58(d,J＝5.2Hz,1H),8.55(d,J＝8Hz,1H),8.05(d,J＝6.8Hz,2H),7.86–7.81(m,3H),7.73–7.71(m,2H),7.44–7.39(m,4H),7.10(s,1H),3.82(t,2H,J＝6.4Hz),3.55(s,2H),2.66–2.47(m,13H)。

化合物10g的合成

在25mL两口烧瓶中，加入化合物14(80mg，0.12mmol)，1mL水合肼和5mL乙醇，反应液在室温下搅拌过夜，并通过TLC进行监测。反应完成后减压浓缩，加入20mL 5％碳酸钠溶液，水相用二氯甲烷进行萃取，合并有机相，并用无水硫酸钠进行干燥，减压浓缩，并通过硅胶柱层析进行分离纯化(二氯甲烷：甲醇＝10:1至5:1+5‰氨水)，获得淡黄色固体，产率35％。ESI-MS：[M+H]⁺:547.77.¹HNMR:(400MHz,DMSO-d₆)δppm 9.33(d,1H,J＝2Hz),8.68(dd,1H,J＝1.6,4.8Hz),8.60(d,1H,J＝5.2Hz),8.55(s,1H),8.50(d,1H,J＝8Hz),8.03(d,2H,J＝8Hz),7.82(d,1H,J＝8Hz),7.55–7.50(m,5H),3.55(s,2H),2.64(t,2H,J＝6.8Hz),2.40(m,8H),2.32(t,2H,J＝7.2Hz)。¹³C NMR(100MHz,DMSO-d₆):δppm 164.5,164.3,162.0,161.2,160.2,151.9,148.6,143.2,139.3,136.2,134.8,132.6,132.5,131.9,130.0,128.4,127.0,125.7,124.3,122.4,122.3,121.6,108.8,62.04,59.50,53.27,53.10,38.20,18.79。HR-MS(ESI)[M+H]⁺,计算值：548.2886,实测值：548.2886。

实例16化合物10h:(1E,6E)-1-(羟基-3-甲氧苯基)-7-(3-甲氧基-4-(2-(4-4-(5-4-甲基-3-((4-吡啶-3-)嘧啶-2-)氨基)苯基)-1,3,4-噁二唑-2-)苄基)哌嗪-1-)乙氧基)苯基1,6-庚二烯-3,5-二酮的合成和结构鉴定

在25mL干燥的三口烧瓶中加入50mg化合物10f(50mg，0.1mmol)，化合物39(43.7mg，0.12mmol)，三苯基膦(31.1mg，0.14mmol)和四氢呋喃(5mL)，上述溶液冰浴降温至-5℃，在搅拌下将DEAD(19μL，0.14mmol)滴加到上述溶液中，滴加完毕后反应液升温至室温，搅拌过夜并通过TLC对反应进行监测，反应结束后减压浓缩并通过硅胶柱层析进行分离纯化(二氯甲烷：甲醇＝40：1至15：1)，获得橙色固体，产率24％。ESI-MS:[M+H]⁺:899.38.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)：δppm 9.66(s,1H),9.32(s,1H),9.15(s,1H),8.68(s,1H),8.59(d,J＝2.8Hz,1H),8.55(s,1H),9.45(d,J＝6.4Hz,1H),8.03(d,J＝6.8Hz,2H),7.81(d,J＝6.4Hz,1H),7.58–7.49(m,7H),7.33(d,J＝2Hz,2H),7.23(d,J＝6.4Hz,1H),7.15(d,J＝6.8Hz,1H),7.02(dd,J＝0.4,6.4Hz,1H),6.83–6.74(m,3H),6.07(s,1H),4.11(s,2H),3.84(s,3H),3.82(s,3H),3.55(s,2H),2.72 (s,2H),2.39(s,7H)。¹³C-NMR(100MHz,DMSO-d₆)：δppm 184.2,183.3,183.2,164.5,164.3,162.1,161.2,160.2,152.0,150.6,149.9,149.7148.6,148.5,143.3,141.4,140.6,139.3,136.2,134.8,132.6,132.0,130.0,128.2,127.1,126.8,124.3,123.6,123.3,122.6,122.5,122.4,121.6,121.6,116.2,113.4,111.9,111.3,108.8,101.4,66.8,62.0,57.0,56.2,53.6,53.1,18.8。HR-MS(ESI)[M+H]⁺,计算值：899.3881,实测值：899.3793。

实例17化合物10i:N-(5-(5-(4-((4-(2-异硫氰酸乙基)哌嗪-1-)甲基)苯基)-1,3,4-噁二唑-2-)-2-甲基苯基)-4-(吡啶-3-)嘧啶-2-胺的合成和结构鉴定

合成路线和方法和10d类似。

淡黄色固体，产率20％。该化合物的ESI-MS：[M+H]⁺：590.18,¹HNMR:(400MHz,CDCl₃)：δppm 9.28(d,J＝2Hz,1H),9.11(d,J＝0.8Hz,1H),8.70(d,J＝1.6,4.8Hz,1H),8.56(d,J＝5.2Hz,1H),8.53(d,J＝8Hz,1H),8.15(d,J＝8Hz,2H),7.81(dd,J＝1.2,7.6Hz,1H),7.46(d,J＝8Hz,2H),7.42–7.38(m,2H),7.25(s,1H),7.14(s,1H),3.59(t,J＝6.4Hz,4H),2.69(t,J＝6.4Hz,2H),2.57–2.53(m,8H),2.44(s,3H).¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)：δppm 164.7,164.4,162.6,160.4,159.3,151.6,148.5,138.2,134.7,132.6,131.6,131.2,129.6,126.9,123.9,122.9,122.4,121.6,119.2,108.7,62.5,57.2,53.1,52.8,43.1,29.7,18.3.HR-MS(ESI)[M+H]⁺,计算值：590.2451,实测值：590.2438。

实施例2在实施例1中制备得到的实例1至实例17化合物的活性测试

MTT粉末购买于Sigma公司，用磷酸缓冲液(PBS)将其配制成浓度为5毫克/毫升的溶液，选取0.22μm滤膜进行过滤，然后于4℃下避光保存。K562细胞(慢性粒细胞白血病细胞系)购于自北京金紫晶生物科技有限公司。实验中所使用的细胞培养基为改良型RPMI-1640(Hyclone)基础培养基，添加10％的胎牛血清(Hyclone)。

MTT比色法测定细胞活性包括下面几个步骤(以K562细胞的测试方法为例，KG1a HL60细胞的测试方法与K562细胞的方法一致)：

(1)选取处于对数生长期的K562细胞，按每孔3×10³接种于96孔板，5％CO₂，37℃孵育培养过夜。

(2)加药，本实验中设置了9个浓度梯度，体系中药物终浓度梯度为：30μM，15μM，7.5μM，3.7μM，1.8μM，0.9μM，0.5μM，0.2μM，0.1μM。每个浓度5个复孔，同时设置对照组(不加药仅接种细胞)及空白孔(未接种细胞仅加培养基)，5％CO₂，37℃培养箱孵育72小时。

(3)每孔再加入20μL MTT溶液(5mg/ml，即0.5％MTT)，继续培养4小时。若药物与MTT能够反应，可先离心后弃去培养液，小心用PBS冲洗2-3遍后，再加入含MTT的培养液。

(4)4小时后终止培养，小心地吸去孔内的液体。并向每孔加入150μL的二甲基亚砜。然后置于摇床上低速振荡15min左右，使结晶物充分溶解。采用酶联免疫检测仪MULTISKAN FC(Thermo scientific)测定490nm处及570nm各孔的吸光度值，测量时以空白孔作为调零孔。

(5)处理数据。以药物浓度为横坐标，细胞数为纵坐标，用数据处理软件SPSS软件(IBM公司)进行几率单位加权回归法(Bliss法)进行数据处理，作图，得到IC₅₀和IC₉₀值，IC₅₀和IC₉₀见表1。

表1实例1-17化合物对K562-3d、HL60、KG1a细胞的IC₅₀和IC₉₀值

通过表1，可以看出在实施例中制备的实例1至实例17化合物(分别对应于化合物6a-6h和10a-10i)均可以有效地抑制K562-3d、HL60、KG1a细胞的增殖，特别是实例11化合物(化合物10c)在药物浓度低于阳性对照药物伊马替尼的情况下，仍可以同样实现有效抑制K562-3d、HL60、KG1a细胞增殖的效果，因此，本发明提供的实例1至实例17化合物可以用于治疗白血病。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。