人造双向植物启动子的制作方法

文档序号:12701149阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子,其包含来自玉米泛素-1启动子及稻泛素-3启动子的多个启动子元件。

2.权利要求1的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子,其中所述启动子元件包括最小核心启动子。

3.权利要求2的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子,其中所述最小核心启动子包含与SEQ ID NO:2具有至少90%序列同一性的多核苷酸序列。

4.权利要求1的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子,其中所述启动子元件包括内含子。

5.权利要求4的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子,其中所述内含子包含与SEQ ID NO:4具有至少90%序列同一性的多核苷酸序列。

6.权利要求4的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子,其中所述内含子包含与SEQ ID NO:6具有至少90%序列同一性的多核苷酸序列。

7.权利要求1的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子,其中所述启动子元件包括5'-UTR。

8.权利要求7的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子,其中所述5'-UTR包含与SEQ ID NO:3具有至少90%序列同一性的多核苷酸序列。

9.权利要求7的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子,其中所述5'-UTR包含与SEQ ID NO:5具有至少90%序列同一性的多核苷酸序列。

10.权利要求1的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子,其中所述启动子元件包括上游启动子元件。

11.权利要求10的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子,其中所述上游启动子元件包含与SEQ ID NO:7具有至少90%序列同一性的多核苷酸序列。

12.权利要求1的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子,其中所述玉米泛素-1启动子包含与SEQ ID NO:8具有至少90%序列同一性的多核苷酸序列。

13.权利要求1的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子,其中稻泛素-3启动子包含与SEQ ID NO:9具有至少90%序列同一性的多核苷酸序列。

14.权利要求1的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子,该人造双向多核苷酸启动子包含与SEQ ID NO:1具有至少90%序列同一性的多核苷酸序列。

15.权利要求14的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子,其包含第一目的多核苷酸序列,所述第一目的多核苷酸序列可操作地连接于所述包含与SEQ ID NO:1具有至少90%序列同一性的多核苷酸序列的人造双向多核苷酸启动子的3’末端。

16.权利要求14的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子,其包含第二目的多核苷酸序列,所述第二目的多核苷酸序列可操作地连接于所述包含与SEQ ID NO:1具有至少90%序列同一性的多核苷酸序列的人造双向多核苷酸启动子的5’末端。

17.权利要求15或16的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子,其中所述目的多核苷酸序列包含性状。

18.权利要求17的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子,其中所述性状选自杀虫剂抗性性状、除草剂耐性性状、氮利用效率性状、水分利用效率性状、营养品质性状、DNA结合性状、选择标志物性状、及其任何组合。

19.一种用于产生转基因植物细胞的方法,所述方法包括:

a)用包含与至少一个目的多核苷酸序列可操作地连接的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子的基因表达盒转化植物细胞;

b)分离包含所述基因表达盒的经转化的植物细胞;和,

c)产生转基因植物细胞,其包含所述与至少一个目的多核苷酸序列可操作地连接的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子。

20.权利要求19的方法,其中转化植物细胞是用植物转化方法进行的。

21.权利要求20的方法,其中所述植物转化方法选自:土壤杆菌介导的转化法、生物射弹转化法、碳化硅转化法、原生质体转化法、和脂质体转化法。

22.权利要求19的方法,其中所述目的核苷酸序列在整个转基因植物细胞中组成型表达。

23.权利要求19的方法,其中所述目的核苷酸序列稳定整合到转基因植物细胞的基因组中。

24.权利要求19的方法,所述方法还包括以下步骤:

e)将转基因植物细胞再生成转基因植物;和

f)获得所述转基因植物,其中所述转基因植物含有所述包含与至少一个目的多核苷酸序列可操作地连接的所述人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子的基因表达盒。

25.权利要求19的方法,其中所述转基因植物细胞是单子叶植物转基因植物细胞或双子叶植物转基因植物细胞。

26.权利要求25的方法,其中所述双子叶植物转基因植物细胞选自下组:拟南芥属植物细胞、烟草植物细胞、大豆植物细胞、卡诺拉油菜植物细胞、和棉花植物细胞。

27.权利要求25的方法,其中所述单子叶转基因植物细胞选自下组:玉米植物细胞、水稻植物细胞、短柄草属植物细胞、和小麦植物细胞。

28.权利要求19的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子,该人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子包含SEQ ID NO:1。

29.权利要求19的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子,其包含第一目的多核苷酸序列,所述第一目的多核苷酸序列可操作地连接于所述包含SEQ ID NO:1的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子的3'末端。

30.权利要求19的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子,其包含第二目的多核苷酸序列,所述第二目的多核苷酸序列可操作地连接于所述包含SEQ ID NO:1的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子的5'末端。

31.一种用于在植物细胞中表达目的多核苷酸序列的方法,该方法包括向植物细胞中引入可操作地连接于人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子的目的多核苷酸序列。

32.权利要求31的方法,其中可操作地连接于人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子的目的多核苷酸序列是通过植物转化方法引入植物细胞的。

33.权利要求32的方法,其中所述植物转化方法选自:土壤杆菌介导的转化法,生物射弹转化法、碳化硅转化法、原生质体转化法、和脂质体转化法。

34.权利要求31的方法,其中所述目的多核苷酸序列在整个植物细胞中组成型表达。

35.权利要求31的方法,其中所述目的多核苷酸序列稳定整合到植物细胞的基因组中。

36.权利要求31的方法,其中所述转基因植物细胞是单子叶植物细胞或双子叶植物细胞。

37.权利要求36的方法,其中所述双子叶植物细胞选自拟南芥属植物细胞,烟草植物细胞,大豆植物细胞,卡诺拉油菜植物细胞和棉花植物细胞。

38.权利要求36的方法,其中所述单子叶植物细胞选自玉米植物细胞、水稻植物细胞、短柄草属植物细胞、和小麦植物细胞。

39.权利要求31的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子,所述人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子包含与SEQ ID NO:1的至少90%序列同一性。

40.权利要求31的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子,其包含第一目的多核苷酸序列,所述第一目的多核苷酸序列可操作地连接于所述包含SEQ ID NO:1的多核苷酸序列的人造双向多核苷酸启动子的3’末端。

41.权利要求31的人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子,其包含第二目的多核苷酸序列,所述第二目的多核苷酸序列可操作地连接于所述包含SEQ ID NO:1的多核苷酸序列的人造双向多核苷酸启动子的5’末端。

42.转基因植物细胞,其包含人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子。

43.权利要求42的转基因植物细胞,其中所述转基因植物细胞包含转基因事件。

44.权利要求43的转基因植物细胞,其中所述转基因事件包括农学性状。

45.权利要求44的转基因植物细胞,其中所述农学性状选自下组:杀虫剂抗性性状,除草剂耐性性状,氮利用效率性状,水分利用效率性状,营养品质性状,DNA结合性状,选择标志物性状,或其任何组合。

46.权利要求44的转基因植物细胞,其中所述农学性状包含除草剂耐性性状。

47.权利要求46的转基因植物细胞,其中所述除草剂耐性性状包含aad-1编码序列。

48.权利要求42的转基因植物细胞,其中所述转基因植物细胞产生商业产品。

49.权利要求48的转基因植物细胞,其中所述商业产品选自下组:蛋白质浓缩物、蛋白质分离物、谷物、粕、面粉、油、或纤维。

50.权利要求42的转基因植物细胞,其中所述转基因植物细胞选自双子叶植物细胞或单子叶植物细胞。

51.权利要求50的转基因植物细胞,其中所述单子叶植物细胞是玉米植物细胞。

52.权利要求42的转基因植物细胞,所述人造稻泛素-3双向多核苷酸启动子包含与SEQ ID NO:1的至少90%的序列同一性。

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