双重刺激响应型胶原蛋白多肽聚合物及其制备方法与流程

技术特征：

1.一种双重刺激响应型胶原蛋白多肽聚合物，其特征在于该聚合物是以胶原蛋白多肽为主链，该胶原蛋白多肽侧链上的氨基通过动态键联反应接枝烷氧醚树枝化基元侧链，从而得到双重刺激响应型胶原蛋白多肽聚合物，

其结构式为：n＝60～80；

所述的胶原蛋白多肽的结构式为：

其烷氧醚树枝化基元侧链G1的结构式为：

2.根据权利要求1所述的双重刺激响应型胶原蛋白多肽聚合物，其特征在于所述的动态键联反应为：肟键、烯胺键或酰腙键。

3.一种制备根据权利要求1或2所述的双重刺激响应型胶原蛋白多肽聚合物的方法，其特征在于该方法的具体步骤为：

a. 在冰浴和惰性气氛下，将N-(叔丁氧羰基)-4-羟基-L-脯氨酸和NaH 按 1:（1.5~2.5）的摩尔比溶于四氢呋喃中，搅拌反应15~30分钟后，然后回复至室温，逐滴滴加自制的TsOH保护的2-叠氮基乙醇的THF溶液；滴加完毕后，搅拌反应20~24小时，而后滴加甲醇终止反应；将溶剂通过旋转蒸发仪蒸出，残留物溶于二氯甲烷DCM，先经10wt%KHSO₄水溶液洗涤，再用饱和食盐水洗涤，DCM萃取分液后，干燥，有机相并过滤；再经分离提纯即得化合物A；所述的N-(叔丁氧羰基)-4-羟基-L-脯氨酸与2-叠氮基乙醇：1：（1.5~2）；

b. 在冰盐浴和惰性气体保护下，将步骤a所得化合物A和1-羟基苯并三唑按1：（1.1~1.2）的摩尔比溶于N，N-二甲基甲酰胺DMF中，然后搅拌10~15分钟，再加入溶有甘氨酸甲酯盐酸盐HCl-Gly-OMe与N,N-二异丙基乙胺DiEA的DCM溶液，然后继续搅拌5~7分钟，最后缓慢滴加1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳化二亚胺盐酸盐EDC·HCl的DCM溶液；在冰浴下搅拌4~6小时后，室温继续搅拌6~8小时至反应完全；蒸干溶剂后残留物用DCM溶解，先后用10wt%KHSO₄水溶液和饱和食盐水洗涤，萃取分液后，干燥有机相并过滤；再经分离提纯得淡黄色油状的化合物B；所述的化合物A、甘氨酸甲酯盐酸盐、N,N-二异丙基乙胺和1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳化二亚胺盐酸盐的摩尔比为：1：（1.5~2）：（2.5~3）：（1.2~1.5）；

c. 将步骤b所得化合物B溶于二氯甲烷DCM中，在冰浴下缓慢滴加三氟乙酸TFA的DCM溶液，搅拌至反应完全，加入甲醇蒸干溶剂得到化合物C；所述的化合物B与三氟乙酸的摩尔比为： 1：（6~10）；

d. 在惰性气氛和冰盐浴下，将步骤c所得化合物C和N，N-二异丙基乙胺DiEA按 1：（1.2~1.5）的摩尔比溶于二氯甲烷DCM溶液中，再缓慢滴加溶有脯氨酸活性酯的DCM溶液；在室温下搅拌至反应完全；蒸干溶剂后残留物用DCM溶解，先后用10wt%KHSO₄水溶液和饱和食盐水洗涤DCM相，萃取分液后，干燥有机相并过滤；再经分离提纯即得淡黄色结晶化合物D；所述的化合物C和脯氨酸活性酯的摩尔比为：1：（1.5~2）；

e. 将步骤d所得化合物D溶于甲醇和水以3 :1的体积比的混合溶剂中，冰浴下加入一水合氢氧化锂，搅拌0.5~1 h后，在室温下，再反应2~3 h，在室温下蒸干溶剂，残留物溶于乙酸乙酯后，用10 wt%KHSO₄水溶液调节pH至5～6，用饱和食盐水洗涤有机相后，萃取，干燥，过滤，再经分离提纯，即得淡黄色结晶化合物E；所述的化合物D和一水合氢氧化锂的摩尔比为：1：（2~2.5）；

f. 将步骤e所得化合物E与五氯苯酚按1：（1~1.2）的摩尔比溶于DMF中，在冰盐浴和惰性气体保护下，加入溶有（1.2~1.5）倍量的EDC·HCl 的DMF，室温下继续搅拌至反应完全，蒸干溶剂，分离提纯，即得淡黄色结晶化合物F；

g. 将步骤f所得化合物F溶于乙酸乙酯EA中，在冰浴下缓慢滴加2 mol/L (8~10)倍量的氯化氢的乙酸乙酯溶液HCl/EA溶液，搅拌反应完全，室温下蒸出溶剂后即得大单体G；

h. 在惰性气体保护下，将步骤g所得大单体G溶于DMF中，加入N,N-二异丙基乙胺DiEA后，搅拌反应至粘度不再增加后，再加入三苯基膦PPh₃的DMF溶液，在48~50 ℃，反应24~30小时后，用乙醚沉淀得到目标聚合物P；

i. 将步骤h所得聚合物P在酸性水溶液中溶解，加入（0.6~2）倍量的烷氧醚树枝化基元G1，然后将其pH值用1 mol/L的NaOH水溶液调至10.5~12.1，常温下搅拌10~15分钟即得双重刺激响应型胶原蛋白肽。