本发明涉及抗肿瘤化合物的研究领域，更具体的涉及二苯并萘啶酮类化合物，及其制备方法和在制备抗肿瘤药物方面的应用。
背景技术：
二苯并萘啶酮类化合物是一类非常重要的拓扑异构酶I的毒化剂，具有很强的抗肿瘤活性，具有很好的靶向拓扑异构酶I的抗肿瘤新药研发前景，最早报道这类化合物的合成及抗肿瘤活性的的美国新泽西州立大学的Lavoie,Edmond J.课题组,他们自2002年就开始报道这类化合物的合成及抗肿瘤活性研究，相关研究成果已经发表了许多论文，并申请了许多专利(Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters(2002),12(22),3333-3336；Bioorganic&Medicinal Chemistry(2003),11(9),2061-2073；Journal of Medicinal Chemistry(2003),46(11),2254-2257；Bioorganic&Medicinal Chemistry(2004),12(13),3731-3742；Journal of Medicinal Chemistry(2005),48(3),792-804；Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters(2008),18(12),3570-3572；Bioorganic&Medicinal Chemistry(2008),16(20),9295-9301；European Journal of Medicinal Chemistry(2009),44(4),1471-1476；European Journal of Medicinal Chemistry(2009),44(9),3433-3438.WO 2003041653；WO 2003041660；WO 2004014906；WO 2004014918；WO 2010088544；WO 2010127360；WO 2010127363；WO 2012015875；WO 2012015901)。
现有的二苯并萘啶酮类化合物的合成路线(Scheme 1)为：
2013年，法国Desbois,Nicolas课题组又报道了这类化合物与铂离子的配合物的制备及其抗肿瘤活性(European Journal of Medicinal Chemistry(2013),69,719-727)。
虽然目前为止已经有以上文献这类化合物的合成及抗肿瘤活性研究报道，但他们采用的合成路线都是是从中间体2开始(Scheme 1)，中间体2的合成一般以芳醛为原料，经硝化、醛基与甲基格氏试剂的反应、醇的氧化、硝基的还原、邻氨基芳乙酮跟甲酸酯环化成喹啉酮及喹啉酮与三氯氧磷的作用等5-6步反应，步骤非常繁琐。另外其合成所需要的另一个原料邻碘(溴)芳甲酸4也不太容易得到，限制了产物的取代基R1,R2及R3多样化。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种具有抗肿瘤功效的二苯并萘啶酮类化合物，及其制备方法和应用。
为实现上述目的，本发明的技术方案为：
具有通式(I)的二苯并萘啶酮类化合物：
其中，其中，R1a独立地选自-H、-CH3O，R1b为-CH3O；
当R2a为-Cl时，R2b和R2c均为-H；当R2b为-Cl时，R2a和R2c均为-H；当R2c独立地选自-F、-Cl、-Br、-CH3、-CH3O、-CF3时，R2a和R2b为-H；
R3为(CH2)2N(CH3)2或(CH2)3N(CH3)2。
制备具有通式(I)的二苯并萘啶酮类化合物的方法，包括以下步骤：
(1)依次加入苯乙酸、无水乙醇、环己烷以及浓硫酸，回流反应至不再有水分，除去环己烷和剩余的乙醇，加入冰水，萃取，合并有机层，有机层干燥，除去溶剂，经柱层析得化合物A；
(2)依次加入化合物A、二甲基甲酰胺、N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛，在氮气或惰性气体保护下反应，反应温度为70～90℃，反应完成后除去二甲基甲酰胺和剩余的N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛，得到化合物B的粗产物；再依次加入甲苯、对甲苯磺酸和苯胺，在氮气或惰性气体保护下，进行加热回流反应，反应完成后，除去溶剂，经柱层析得化合物C；
(3)依次加入化合物C和二苯醚，在氮气或惰性气体保护下，进行加热回流反应，反应完成后，冷却，加入溶剂，搅拌均匀后抽滤，滤渣经洗涤后得到化合物D；
(4)化合物D在氮气或惰性气体保护下，进行氯代反应，得到化合物E；
(5)加入化合物E、乙二醇和链状二胺，加热至140～160℃反应，反应完成后获得混合物A，将混合物A倒入水中，调节pH，搅拌均匀，萃取，合并有机层，有机层干燥，除去溶剂，经柱层析得到化合物F；
(6)依次加入化合物F、四氢呋喃和三乙胺，搅拌均匀后，搅拌加入氯甲酸乙酯，搅拌反应至反应完成，除去溶剂，冷却，调节pH，萃取，合并有机层，有机层干燥，除去溶剂，经柱层析得到化合物G；
(7)依次加入二甲苯、三氯氧磷和五氧化二磷，搅拌均匀后，加入已预溶于二甲苯的化合物G，在氮气或惰性气体保护下，加热回流至反应结束，除去溶剂及三氯氧磷，冷却，调节pH＞7，萃取，合并有机层，有机层干燥，除去溶剂，经柱层析得到通式(I)的二苯并萘啶酮类化合物。
进一步的，所述步骤(1)中，依次加入苯乙酸、无水乙醇、环己烷以及浓硫酸，回流反应至不再有水分，除去环己烷和剩余的乙醇，加入溶剂，依次用冰水和饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，萃取，合并有机层，有机层干燥，除去溶剂，经柱层析得化合物A；
进一步的，所述步骤(2)中，依次加入化合物A、二甲基甲酰胺、N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛，在氮气或惰性气体保护下反应，反应温度为75～85℃，反应时间为5～8h，反应完成后除去二甲基甲酰胺和剩余的N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛，得到化合物B的粗产物；再依次加入甲苯、对甲苯磺酸和苯胺，在氮气或惰性气体保护下进行加热回流反应，反应温度为120～130℃，反应时间为5～8h，反应完成后，除去溶剂，经柱层析得化合物C。
进一步的，所述步骤(4)中，依次加入化合物D和三氯氧磷，搅拌均匀，在氮气或惰性气体保护下进行加热回流反应，反应温度为100～120℃，反应时间为1.5～3h，反应完成后，除去三氯氧磷，然后加入冰水，并调节pH至碱性，用有机溶剂萃取后，合并有机层，有机层用去除水分的干燥剂干燥，除去溶剂，经柱层析得到化合物E。
进一步的，所述步骤(5)中，加入化合物E、乙二醇和链状二胺，混匀后，搅拌加热反应，反应温度为140～160℃，反应时间为23～26h，反应完成后获得混合物A，将混合物A倒入水中，加入质量分数为8～12％的氢氧化钠水溶液，搅拌均匀，萃取，合并有机层，有机层用去除水分的干燥剂干燥，除去溶剂，经柱层析得到化合物F。
进一步的，所述步骤(6)中，依次加入化合物F、四氢呋喃和三乙胺，搅拌均匀后，室温下搅拌加入氯甲酸乙酯，搅拌反应0.4～1h至反应完成，除去溶剂，加入冰水和饱和碳酸氢钠溶液，用有机溶剂萃取，合并有机层，有机层用去除水分的干燥剂干燥，除去溶剂，经柱层析得到化合物G。
进一步的，所述步骤(7)中，向反应容器依次加入二甲苯、三氯氧磷和五氧化二磷，搅拌均匀后，加入已预溶于二甲苯的化合物G，在氮气或惰性气体保护下进行加热回流反应，反应温度为130～160℃，反应时间为23～26h，除去溶剂及三氯氧磷，加入冰水，调节反应容器中混合物的pH＞7，用有机溶剂萃取，合并有机层，有机层用去除水分的干燥剂干燥，除去溶剂，经柱层析得到通式(I)的二苯并萘啶酮类化合物。
本发明进一步提供了通式(I)的二苯并萘啶酮类化合物和药学上可接受的辅料组成的药物组合物。
本发明进一步提供了通式(I)的二苯并萘啶酮类化合物或权利要求8所述的药物组合物在制备抗肿瘤药物方面的应用；药物的剂型可为颗粒剂、胶囊剂、喷雾剂、滴剂、注射剂和冲剂等；所述的肿瘤特别是指人胃癌、人肺癌、人肝癌引发的肿瘤。
本发明合成了具有通式(I)的化合物，并提供了其制备方法，通过对人胃癌细胞(MGC-803)、人肺癌细胞(NCI-H460)、人肝癌细胞(HepG-2)、人肝癌细胞(BEL-7404)的细胞体外抑制试验，证实通式(I)的新化合物对这四种肿瘤细胞均具有很好的抑制活性。
将通式(I)的化合物与药学上可接受的辅料组成药物组合物，由于该药物组合物添加了对肿瘤细胞具有很好抑制活性的通式(I)化合物，对肿瘤细胞尤其是人胃癌细胞(MGC-803)、人肺癌细胞(NCI-H460)、人肝癌细胞(HepG-2)、人肝癌细胞(BEL-7404)的细胞具有很好地抑制活性的作用，将在抗肿瘤药物方面具有较好的应用前景。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明作进一步说明，但本发明的保护范围不限于以下实施例。
制备实施例1：化合物H1的制备：5H-8,9-dimethoxy-5-(2-N,N-dimethylaminoethyl)-3-chlorodibenzo[c,h][1,6]-naphthyridin-6-one
(1)在搅拌下依次向50mL圆底烧瓶中加入3,4-二甲氧基苯乙酸(1.96g，10mmol)、无水乙醇(5mL)、环己烷(5mL)以及浓硫酸(1mL)，装上分水器和直型冷凝管后,在100℃下回流直至分水器中不再有水分出；反应完成后，减压除去环己烷和多余的乙醇，向烧瓶中加入乙酸乙酯(30mL)，混合物用冰水洗涤2次，每次30mL，再用饱和碳酸氢钠溶液洗涤2次，每次30mL，有机溶剂萃取3次，合并有机层，有机层用无水硫酸镁干燥，过滤，减压除去溶剂，用硅胶柱层析(洗脱剂：V石油醚:V乙酸乙酯＝8:1)提纯，得到1.85g淡黄色油状酯化产物，即化合物A。
(2)在搅拌下依次向50mL圆底烧瓶中加入上述化合物A(0.90g，4mmol)、DMF(3mL)和DMF-DMA(1.1mL，4.4mmol)，在氮气保护下于80℃油浴加热反应6h，采用TLC监测反应进程，展开剂为V石油醚:V乙酸乙酯＝3:1，反应完成后减压除去DMF及剩余的DMF-DMA，得到化合物B的粗产物；在搅拌下依次向上述烧瓶中加入甲苯(20mL)、对甲苯磺酸(0.05g，0.3mmol)和对氯苯胺(0.41g，3.2mmol)，在氮气保护下于125℃油浴加热回流6h，采用TLC监控反应进程，展开剂为V石油醚:V乙酸乙酯＝3:1)，反应完成后，减压除去溶剂,用硅胶柱层析分离(洗脱剂：V石油醚:V乙酸乙酯＝6:1)，得到0.90g淡黄绿色油状化合物C，产率63％。
(3)依次向100mL圆底烧瓶中加入上述合成的化合物C(5.46g，15.1mmol)和二苯醚(20mL)，搅拌均匀后，在氮气保护下用电热套加热回流2h，采用TLC监控反应进程，展开剂为V石油醚:V乙酸乙酯＝1:1；反应完成后，自然冷却至室温，烧瓶中析出大量固体，向烧瓶中加入石油醚(20mL)，搅拌均匀后抽滤，滤渣用混合溶剂(V石油醚:V乙酸乙酯＝1:1)(10mL)洗涤后，得到4.05g白色固体化合物D，产率85％。
(4)依次向50mL圆底烧瓶中加入上述合成的化合物D(4.05g，12.9mmol)和三氯氧磷(20mL)，搅拌均匀后，在氮气保护下于110℃油浴加热回流2h，采用TLC监控反应进程，展开剂为V石油醚:V乙酸乙酯＝3:1，反应完成后，减压除去大部分三氯氧磷，在搅拌下向烧瓶中缓慢加入饱和碳酸氢钠溶液至pH＞7，然后用二氯甲烷萃取3次，每次20mL；合并有机层，有机层用饱和食盐水洗涤2次，每次20mL，洗涤后有机层用无水硫酸镁干燥，过滤，减压除去溶剂，用硅胶柱层析(洗脱剂：V石油醚:V乙酸乙酯＝6:1)，得到3.55g白色固体化合物E，产率83％。
(5)依次向20mL反应釜中加入上述合成的白色化合物E(0.30g，1mmol)、乙二醇(10mL)和N,N-二甲基乙二胺(0.33mL,3mmol)，混匀后封闭反应釜，置于150℃油浴搅拌加热24h，采用TLC监控反应进程，展开剂为V石油醚:V乙酸乙酯＝3:1，反应完成后，将反应混合物倒入水(30mL)中，然后向其中加入10％氢氧化钠水溶液(10mL)，搅拌均匀后用二氯甲烷萃取3次，每次20mL，合并有机层，有机层用饱和食盐水洗涤2次，每次20mL，洗涤后用无水硫酸镁干燥，过滤，减压除去溶剂，用硅胶柱层析(洗脱剂：V石油醚:V乙酸乙酯＝4:1)，得到0.30g淡黄色油状化合物F，产率78％。
(6)依次向50mL圆底烧瓶中加入上述合成的化合物(0.80g，2.09mmol)、四氢呋喃(10mL)和三乙胺(0.87mL,6.27mmol)，搅拌均匀后，在室温下搅拌加入氯甲酸乙酯(0.59mL，6.27mmol)，加完后在室温下搅拌反应0.5h，采用TLC监控反应进程，展开剂为V石油醚:V乙酸乙酯＝3:1)，反应完成后，减压除去溶剂，依次向烧瓶中加入冰水(20mL)以及饱和碳酸氢钠溶液(20mL)，搅拌均匀后用二氯甲烷萃取3次，每次15mL，合并有机层，有机层用饱和食盐水洗涤2次，每次20mL，洗涤后有机层用无水硫酸镁干燥，过滤，减压除去溶剂，用硅胶柱层析(洗脱剂：V石油醚:V乙酸乙酯＝4:1)，得到0.84g淡黄色油状化合物G，产率88％。
(7)在搅拌下依次向25mL圆底烧瓶中加入二甲苯(5mL)、三氯氧磷(1mL)以及五氧化二磷(约0.20g)，在室温下搅拌0.5h后，向烧瓶中加入预溶于10mL二甲苯的上述合成的化合物G(0.20g，0.44mmol)，搅拌均匀后，在氮气保护下于150℃油浴加热回流24h，采用TLC监控反应进程，展开剂为V石油醚:V乙酸乙酯＝1:1，原料依然反应不完，停止加热，减压除去溶剂及三氯氧磷，然后向烧瓶中加入15mL冰水，将混合物倒入100mL烧杯中，在搅拌下向烧杯中缓慢加入饱和碳酸氢钠溶液至溶液pH＞7，然后用二氯甲烷萃取3次，每次20mL，合并有机层，有机层用饱和食盐水洗涤2次，每次20mL，洗涤后有机层用无水硫酸镁干燥，过滤，减压除去溶剂，粗产物经柱层析得到0.07g白色目标化合物H1,产率37％。
化合物H1：m.p.240～241℃；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ:2.38(s,6H,N(CH3)2),3.09(t,J＝7.05Hz,2H,CH2),4.05(s,3H,OCH3),4.12(s,3H,OCH3),4.61(t,J＝7.05Hz,2H,CH2),7.66(dd,J＝8.85Hz,1.70Hz,1H,ArH),7.69(s,1H,ArH),7.89(s,1H,ArH),8.10(d,J＝8.85Hz,1H,ArH),8.68(d,J＝1.70Hz,1H,ArH),9.51(s,1H,CH＝N)；13C NMR(125MHz,CDCl3)δ:45.97,49.29,56.44,56.48,57.86,102.26,108.90,112.43,119.76,119.89,124.10,127.27,129.97,131.99,132.18,140.15,145.94,147.19,150.93,154.43,163.75；HRMS(ESI):m/z计算值[M+H]+412.1428(C22H22ClN3O3),实验值412.1430。
制备实施例2：化合物H2的制备5H-8,9-dimethoxy-5-(2-N,N-dimethylaminoethyl)-1-chlorodibenzo[c,h][1,6]-naphthyridin-6-one
以邻氯苯胺代替对氯苯胺，其他制备方法同制备实施例1，得到白色粉末状目标化合物H2。
化合物H2：产率36％,m.p.222～223℃；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ:2.26(s,6H,N(CH3)2),2.94(t,J＝7.10Hz,2H,CH2),4.05(s,3H,OCH3),4.11(s,3H,OCH3),4.67(t,J＝7.10Hz,2H,CH2),7.49(dd,J＝8.70Hz,7.45Hz,1H,ArH),7.69(s,1H,ArH),7.85(dd,J＝7.45Hz,0.95Hz,1H,ArH),7.89(s,1H,ArH),8.41(d,J＝8.70Hz,1H,ArH),9.65(s,1H,CH＝N)；13C NMR(125MHz,CDCl3)δ:45.89,49.47,56.38,56.43,57.77,102.16,108.87,112.63,119.91,120.13,120.50,123.78,125.55,127.08,129.52,134.52,141.26,144.89,146.09,150.91,154.42,163.89；HRMS(ESI):m/z计算值[M+H]+412.1428(C22H22ClN3O3),实验值412.1443。
制备实施例3:化合物H3的制备5H-8,9-dimethoxy-5-(2-N,N-dimethylaminoethyl)-2-chlorodibenzo[c,h][1,6]-naphthyridin-6-one
以间氯苯胺代替对氯苯胺，其他制备方法同制备实施例1，得到白色粉末状固体目标化合物H3。
化合物H3：产率14％,m.p.235～236℃；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ:2.31(s,6H,N(CH3)2),2.99(t,J＝7.25Hz,2H,CH2),4.03(s,3H,OCH3),4.10(s,3H,OCH3),4.61(t,J＝7.25Hz,2H,CH2),7.52(dd,J＝9.25Hz,2.30Hz,1H,ArH),7.63(s,1H,ArH),7.84(s,1H,ArH),8.10(d,J＝2.30Hz,1H,ArH),8.45(d,J＝9.25Hz,1H,ArH),9.48(s,1H,CH＝N)；13C NMR(125MHz,CDCl3)δ:45.87,49.01,56.38,56.43,57.68,102.02,108.73,111.91,117.32,119.53,126.15,126.75,127.27,129.34,135.06,140.78,146.71,149.32,150.71,154.35,163.59；HRMS(ESI):m/z计算值[M+H]+412.1428(C22H22ClN3O3),实验值412.1434。
制备实施例4:化合物H4的制备5H-8,9-dimethoxy-5-(2-N,N-dimethylaminoethyl)-3-fluorodibenzo[c,h][1,6]-naphthyridin-6-one
以对氟苯胺代替对氯苯胺，其他制备方法同制备实施例1，得到白色粉末状固体目标化合物H4。
化合物H4：产率42％,m.p.223～224℃；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ:2.35(s,6H,N(CH3)2),3.04(t,J＝7.10Hz,2H,CH2),4.05(s,3H,OCH3),4.12(s,3H,OCH3),4.64(t,J＝7.10Hz,2H,CH2),7.67(br,1H,ArH),7.70(s,1H,ArH),7.89(s,1H,ArH),8.15(dd,J＝9.15Hz,2.60Hz,1H,ArH),8.34(dd,J＝11.80Hz,2.60Hz,1H,ArH),9.51(s,1H,CH＝N)；13C NMR(125MHz,CDCl3)δ:45.91,48.79,56.43,57.79,102.25,108.85,109.40,109.61,112.33,118.87,119.07,119.61,119.68,119.90,127.31,132.85,132.92,140.39,145.14,145.86,150.85,154.35,159.18,161.14,163.74；HRMS(ESI):m/z计算值[M+H]+396.1723(C22H22FN3O3),实验值396.1733。
制备实施例5:化合物H5的制备5H-8,9-dimethoxy-5-(2-N,N-dimethylaminoethyl)-3-brominedibenzo[c,h][1,6]-naphthyridin-6-one
以对溴苯胺代替对氯苯胺，其他制备方法同制备实施例1，得到白色粉末状固体状目标化合物H5。
化合物H5：产率39％,m.p.246～247℃；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ:2.38(s,6H,N(CH3)2),3.08(t,J＝7.05Hz,2H,CH2),4.05(s,3H,OCH3),4.12(s,3H,OCH3),4.58(t,J＝7.05Hz,2H,CH2),7.67(s,1H,ArH),7.77(dd,J＝8.85Hz,1.95Hz,1H,ArH),7.88(s,1H,ArH),8.00(d,J＝8.85Hz,1H,ArH),8.86(d,J＝1.95Hz,1H,ArH),9.50(s,1H,CH＝N)；13C NMR(125MHz,CDCl3)δ:46.04,49.41,56.43,56.46,57.89,102.16,108.79,112.30,119.80,120.13,120.17,120.27,127.19,132.04,132.57,139.95,145.99,147.36,150.86,154.35,163.67；HRMS(ESI):m/z计算值[M+H]+456.0923(C22H22BrN3O3),实验值456.0933。
制备实施例6:化合物H6的制备5H-8,9-dimethoxy-5-(2-N,N-dimethylaminoethyl)-3-methyldibenzo[c,h][1,6]-naphthyridin-6-one
以对甲基苯胺代替对氯苯胺，其他制备方法同制备实施例1，得到白色粉末状固体目标化合物H6。
化合物H6：产率18％,m.p.198～199℃；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ:2.38(s,6H,N(CH3)2),2.60(s,3H,CH3),3.08(t,J＝7.23Hz,2H,CH2),4.05(s,3H,OCH3),4.12(s,3H,OCH3),4.70(t,J＝7.23Hz,2H,CH2),7.56(dd,J＝8.45Hz,1.55Hz,1H,ArH),7.70(s,1H,ArH),7.90(s,1H,ArH),8.06(d,J＝8.45Hz,1H,ArH),8.31(s,1H,ArH),9.48(s,1H,CH＝N)；13C NMR(125MHz,CDCl3)δ:22.08,45.87,49.13,56.40,56.45,57.84,102.16,108.77,111.98,118.94,119.59,123.89,127.73,130.20,131.32,136.13,140.47,144.81,147.31,150.55,154.29,163.96；HRMS(ESI):m/z计算值[M+H]+392.1974(C23H25N3O3),实验值392.1982。
制备实施例7:化合物H7的制备5H-8,9-dimethoxy-5-(2-N,N-dimethylaminoethyl)-3-methoxydibenzo[c,h][1,6]-naphthyridin-6-one
以对甲氧基苯胺代替对氯苯胺，其他制备方法同制备实施例1，得到白色粉末状固体目标化合物H7。
化合物H7：产率18％,m.p.209～210℃；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ:2.29(s,6H,N(CH3)2),3.05(t,J＝7.25Hz,2H,CH2),4.03(s,3H,OCH3),4.04(s,3H,OCH3),4.11(s,3H,OCH3),4.69(t,J＝7.25Hz,2H,CH2),7.37(dd,J＝9.10Hz,2.55Hz,1H,ArH),7.67(s,1H,ArH),7.75(d,J＝2.55Hz,1H,ArH),7.87(s,1H,ArH),8.05(d,J＝9.10Hz,1H,ArH),9.39(s,1H,CH＝N)；13C NMR(125MHz,CDCl3)δ:45.88,49.00,55.99,56.37,56.42,58.02,102.24,104.36,108.74,112.38,119.67,119.81,121.02,127.63,131.36,131.94,140.02,143.30,144.68,150.57,154.24,157.54,164.00；HRMS(ESI):m/z计算值[M+H]+408.1923(C23H25N3O4),实验值408.1929。
制备实施例8:化合物H8的制备5H-8,9-dimethoxy-5-(2-N,N-dimethylaminoethyl)-3-trifluoromethyldi-benzo[c,h][1,6]-naphthyridin-6-one
以对三氟甲基苯胺代替对氯苯胺，其他制备方法同制备实施例1，得到白色粉末状固体状目标化合物H8。
化合物H8：产率26％,m.p.227～228℃；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ:2.32(s,6H,N(CH3)2),3.08(t,J＝7.05,2H,CH2),4.06(s,3H,OCH3),4.13(s,3H,OCH3),4.63(t,J＝7.05Hz,2H,CH2),7.70(s,1H,ArH),7.88～7.91(m,2H,ArH),8.26(d,J＝8.70Hz,1H,ArH),9.02(s,1H,ArH),9.62(s,1H,CH＝N)；13C NMR(125MHz,CDCl3)δ:45.86,49.69,56.46,56.50,57.81,102.18,108.88,112.55,118.35,119.87,123.19,124.95,127.11,131.59,141.40,147.71,149.81,151.03,154.50,163.64；HRMS(ESI):m/z计算值[M+H]+446.1692(C23H22F3N3O3),实验值446.1699。
制备实施例9:化合物H9的制备5H-8-methoxy-5-(2-N,N-dimethylaminoethyl)-3-chlorodibenzo[c,h][1,6]-naphthyridin-6-one
以对甲氧基苯乙酸代替3,4-二甲氧基苯乙酸，其他制备方法同制备实施例1，得到白色粉末状固体目标化合物H9。
化合物H9：产率38％,m.p.170～171℃；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ:2.38(s,6H,N(CH3)2),3.09(t,J＝7.05Hz,2H,CH2),3.98(s,3H,OCH3),4.64(t,J＝7.05Hz,2H,CH2),7.45(dd,J＝8.90Hz,2.80Hz,1H,ArH),7.66(dd,J＝8.90Hz,2.10Hz,1H,ArH),7.94(d,J＝2.80Hz,1H,ArH),8.10(d,J＝8.95Hz,1H,ArH),8.33(d,J＝8.95Hz,1H,ArH),8.88(d,J＝2.10Hz,1H,ArH),9.59(s,1H,CH＝N)；13C NMR(125MHz,CDCl3)δ:45.81,49.24,55.78,57.57,109.00,112.68,119.63,123.28,123.59,123.81,125.73,126.99,129.76,131.90,132.08,139.19,145.89,146.99,160.34,164.01；HRMS(ESI):m/z计算值[M+H]+382.1322(C21H20ClN3O2),实验值382.1330。
制备实施例10:化合物H10的制备5H-8-methoxy-5-(2-N,N-dimethylaminoethyl)-3-methyldibenzo[c,h][1,6]-naphthyridin-6-one
以对甲氧基苯乙酸代替3,4-二甲氧基苯乙酸，以对甲基苯胺代替对氯苯胺，其他制备方法同制备实施例1，得到白色粉末状固体状目标化合物H10。
化合物H10：产率33％,m.p.209～210℃；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ:2.34(s,6H,N(CH3)2),2.60(s,3H,CH3),3.05(t,J＝7.20Hz,2H,CH2),3.97(s,3H,OCH3),4.68(t,J＝7.20Hz,2H,CH2),7.42(dd,J＝8.90Hz,2.85Hz,1H,ArH),7.54(dd,J＝8.45Hz,1.55Hz,1H,ArH),7.94(d,J＝2.85Hz,1H,ArH),8.05(d,J＝8.45Hz,1H,ArH),8.31～8.33(m,2H,ArH),9.54(s,1H,CH＝N)；13C NMR(125MHz,CDCl3)δ:21.91,45.85,49.37,55.73,57.75,108.88,112.17,118.85,123.15,123.40,123.69,126.21,126.75,130.13,131.03,135.91,139.57,144.79,147.19,159.98,164.20；HRMS(ESI):m/z计算值[M+H]+362.1869(C22H23N3O2),实验值362.1878。
制备实施例11:化合物H11的制备5H-8-methoxy-5-(2-N,N-dimethylaminoethyl)-3-methoxy dibenzo[c,h][1,6]-naphthyridin-6-one
以对甲氧基苯乙酸代替3,4-二甲氧基苯乙酸，以对甲氧基苯胺代替对氯苯胺，其他制备方法同制备实施例1，得到白色粉末状固体状目标化合物H11。
化合物H11：产率38％,m.p.169～170℃；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ:2.28(s,6H,N(CH3)2),3.04(t,J＝7.25Hz,2H,CH2),3.98(s,3H,OCH3),4.04(t,J＝7.25Hz,2H,CH2),7.38(dd,J＝9.15Hz,2.65Hz,1H,ArH),7.43(dd,J＝8.95Hz,2.70Hz,1H,ArH),7.78(d,J＝2.70Hz,1H,ArH),7.94(d,J＝2.80Hz,1H,ArH),8.07(d,J＝9.15Hz,1H,ArH),8.33(d,J＝8.95Hz,1H,ArH),9.48(s,1H,CH＝N)；13C NMR(125MHz,CDCl3)δ:45.94,49.25,55.88,55.99,57.98,104.28,109.05,112.81,119.89,120.96,123.43,123.54,126.31,127.00,132.02,139.31,143.44,144.68,157.58,160.21,164.45；HRMS(ESI):m/z计算值[M+H]+378.1818(C22H23N3O3),实验值378.1793。
制备实施例12:化合物H12的制备5H-8-methoxy-5-(2-N,N-dimethylaminopropyl)-3-chlorodibenzo[c,h][1,6]-naphthayridin-6-one
以N,N-二甲基丙二胺代替N,N-二甲基乙二胺，其他制备方法同制备实施例1，得到白色粉末状固体目标化合物H12。
化合物H12：产率30％,m.p.211～213℃；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ:2.35(s,6H,N(CH3)2),2.42(m,2H,CH2),2.60(t,J＝7.10Hz,2H,CH2),4.06(s,3H,OCH3),4.13(s,3H,OCH3),4.51(t,J＝7.10Hz,2H,CH2),7.65(dd,J＝8.90Hz,2.15Hz,1H,ArH),7.69(s,1H,ArH),7.89(s,1H,ArH),8.09(d,J＝8.90Hz,1H,ArH),8.30(d,J＝2.15Hz,1H,ArH),9.52(s,1H,CH＝N)；13C NMR(125MHz,CDCl3)δ:26.87,45.36,49.14,56.46,56.49,56.81,102.19,108.83,112.40,119.70,119.73,123.58,127.14,129.85,131.87,132.11,140.10,146.00,147.11,150.92,154.39,163.64；HRMS(ESI):m/z计算值[M+H]+426.1584(C23H24ClN3O3),实验值426.1595。
效果验证实施例1：目标化合物的体外抗肿瘤活性研究
采用MTT[3-(4,5)-双甲基-2-噻唑-(2,5)-苯基溴化四氮唑蓝]法来测定苯并啡啶类N-杂衍生物对人胃癌细胞(MGC-803)、人肺癌细胞(NCI-H460)、人肝癌细胞(HepG-2)、人肝癌细胞(BEL-7404)的半数抑制浓度(IC50)。
(1)培养液(每升)的配制：①悬浮细胞：RPMI-1640培养粉一袋(10.4g)，新生牛血清100mL，青霉素溶液(20万U/mL)0.5mL，链霉素溶液(20万U/mL)0.5mL，加三蒸水溶解后，用5.6％的NaHCO3溶液调pH值至7.2～7.4，最后定容至1000mL，过滤灭菌；②贴壁细胞：同上，再加入NaHCO3 2.00g，HEPES 2.38g。
(2)D-Hanks缓冲液(每升)的配制：NaCl 8.00g，KCl 0.40g，Na2HPO4·12H2O 0.06g，KH2PO4 0.06g，NaHCO3 0.35g，高压灭菌。
(3)胰蛋白酶液的配制：利用D-Hanks缓冲液配成浓度为0.5％胰蛋白酶液，过滤除菌。
(4)实验药液的配制：将测试样品用少量的三蒸水溶解配成储备液，一般按实验最高浓度的10倍配制储备液.根据化合物溶解性不同，可用三蒸水直接溶解，或用少量DMSO助溶，再加三蒸水溶解；DMSO在培养液中的浓度不宜过大，加药后的每孔细胞悬液中DMSO的终浓度一般不超过0.05％-0.1％，储备液保存于-20℃冰箱中备用。
(5)人肿瘤细胞的培养：为悬浮生长细胞，常规培养于RPMI-1640培养液内(含10％小牛血清、100U/mL链霉素)，置于37℃、5％CO2培养箱中培养，每隔3-4天传代一次；传代时将原瓶中培养液转移至离心管中，1000rpm离心5min，弃去原培养液，加入等量新鲜培养液，吹打均匀，移取适量至新鲜培养瓶中，再补充新鲜培养液至原体积(培养液体积约为培养瓶容量的1/10)。
(6)细胞孵育：取对数生长期的肿瘤细胞，调细胞悬液浓度为1～1.5×105个mL-1；在96孔培养板中每孔加细胞悬液100μL，置37℃、5％CO2培养箱中培养24h，然后分别按设计加入药液。
(7)加药：将测试药液按照最终浓度的浓度梯度分别加入到各个孔中，每个浓度设6个平行孔；实验分为药物试验组(分别加入不同浓度的测试药)、对照组(只加培养液和细胞，不加测试药)和空白组(只加培养液，不加细胞和测试药)；将加药后的96孔板置于37℃，5％CO2培养箱中培养48h；阳性对照药物的活性按照测试样品的方法测定。
(8)存活细胞的测定：在培养了48h后的96孔板中，每孔加MTT 40μL(用D-Hanks缓冲液配成4mg/mL)；在37℃放置4h后，移去上清液；每孔加150μLDMSO，振荡5min，使formazan结晶溶解；最后，利用自动酶标仪在490nm波长处检测各孔的光密度(OD值)。
抑制率的计算：细胞生长的抑制率按照下列公式计算：
生长抑制率＝(1-存活率)×100％＝[1-(OD实验-OD空白)/(OD对照-OD空白)]×100％(OD实验表示测试药物组的平均光密度，OD对照表示对照组的平均光密度，OD空白表示对照组的平均光密度)。
半数抑制浓度(IC50)定义为当50％的肿瘤细胞存活时的药物浓度；根据测定的光密度(OD值)，制作细胞生长抑制率的标准曲线，在标准曲线上求得其对应的药物浓度。
以喜树碱为阳性对照，测得的IC50见表1所示。
表1本发明所列二苯并萘啶酮类化合物对肿瘤细胞的抑制IC50值(μmol/L)
在化合物的抗肿瘤活性测试部分，利用MTT法测试了目标化合物对MGC-803(人胃癌细胞)、NCI-H460(人肺癌细胞)、HepG-2(人肝癌细胞)以及7404(人肝癌细胞)的体外抗肿瘤活性，结果显示所合成的目标化合物对这四种肿瘤细胞均具有很好的抑制活性，其中，化合物H6对肿瘤细胞系NCI-H460、BEL-7404和HepG-2具有最高的抑制活性，IC50值分别为0.477、0.577和0.022μmol/L，而化合物H7对肿瘤细胞系MGC-803具有最高的抑制活性，IC50值为1.547μmol/L。