一种利用芽孢杆菌HS17发酵生产壳聚糖酶的方法及其应用与流程

文档序号:12411688阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种利用芽孢杆菌HS17发酵生产壳聚糖酶的方法及其应用,其特征在于包括如下具体步骤:

(1)菌种活化:取试管斜面保存的芽孢杆菌HS17菌种接种于活化培养基中,在30℃、200 rpm下培养至菌体浑浊,制得活化种子液;所述的活化培养基(g/L):酵母粉3~6,蛋白胨8~12,磷酸二氢钾1~3,硫酸镁0.5~1.5,pH 7.0~7.5;

(2)发酵生产壳聚糖酶:灭菌后的优选发酵培养基,按照7~10%(v/v)的接种量接入活化的种子培养液,在180 rpm的旋转摇床中培养,控制温度为28~30℃,发酵2~4 d后培养完毕,经离心过滤除菌后即可作为酶液使用;或者采用发酵罐培养,以65%比例装入优选发酵培养基,经118℃蒸汽灭菌20 min后,按照7~10%(v/v)的比例接入活化的菌种,控制发酵过程中的pH维持在pH 6~7,调节培养温度在28~30℃,溶解氧维持在10%以上,经发酵2~4 d后发酵完毕,经离心过滤除菌后即可作为酶液使用。

2.如权利要求1所述的一种利用芽孢杆菌HS17发酵生产壳聚糖酶的方法及其应用,其特征在于所述的优选培养基为:55~70 g/L甘露醇,3~6 g/L大豆蛋白胨,3~6 g/L牛肉膏,0.8~1.2 g/L NH4NO3,1.5~2.5 g/L (NH4)2SO4,1.5~2.5 g/L MnSO4,3~5 g/L MgSO4,0.4~0.8 g/L NaH2PO4,2~4 g/L K2HPO4,2.5~5 g/L粉末壳聚糖。

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