一种联产丙酮酸和α‑酮戊二酸的重组光滑球拟酵母的制作方法

技术特征：

1.一种联产丙酮酸和α-酮戊二酸的重组菌，其特征在于，所述重组菌是以光滑球拟酵母为宿主，以pY26-TEF-GPD为载体，过表达丙酮酸激酶CDC19基因。

2.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述CDC19基因是NCBI上Gene ID为851193的CDC19基因。

3.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述重组菌是以缺失了URA3基因的光滑球拟酵母T.glabrata CCTCC M202019为宿主，表达NCBI上Gene ID:851193的CDC19。

4.权利要求3所述重组菌的构建方法，其特征在于，是以缺失了URA3基因的光滑球拟酵母T.glabrata CCTCC M202019为宿主，以pY26-TEF-GPD为载体，表达NCBI上Gene ID为851193的CDC19基因。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述重组菌按如下方法构建：

(1)将目的片段CDC19经过限制性内切酶Not I和Pac I双酶切消化后，定向克隆到表达质粒pY26-TEF-GPD中，得到重组酵母表达质粒pY26-CDC19；

(2)将重组质粒pY26-CDC19电转化至受体菌T.glabrata CCTCC M202019，在不含尿嘧啶的培养基中进行筛选，得到重组菌。

6.一种联产丙酮酸和α-酮戊二酸的方法，其特征在于，是将权利要求1-3任一所述的重组菌应用于丙酮酸和α-酮戊二酸的生产。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，将权利要求1-3任一所述的重组菌接种至发酵培养基，在30℃，200～220rpm条件下进行发酵培养。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基每L中含有：葡萄糖50-120g，尿素0-5g，MgSO₄.7H₂O 0-1g，KH₂PO₄ 0-5g，CH₃COONa 0-5g，微量元素液10ml，维生素液10ml，初始pH＝5.5；所述微量元素液每L含有MnCl₂·4H₂O 0-12g，FeSO₄·7H₂O 0-2g，CaCl₂·2H₂O 0-2g，CuSO₄·5H₂O 0-0.1g，ZnCl₂ 0-1g；所述维生素液每L含有：生物素0-0.01g，硫胺素0-2mg，吡哆醇0-0.2g，烟酸0-2g。

9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述接种的接种量按体积比为5-10％。

10.权利要求6-9任一所述方法在日化、食品、医药、农业领域生产含丙酮酸和/或α-酮戊二酸的产品中的应用。