一步法实时定量荧光PCR检测香石竹斑驳病毒的方法与流程

文档序号:12413192阅读:来源:国知局
技术总结
本发明公开一步法实时定量荧光PCR检测香石竹斑驳病毒的方法。其主要特征在于靶基因为CarMV分离物CP基因经过克隆后,构建质粒载体,选取正确的质粒载体经线性化体外转录后,计算提纯后ssRNA用10倍梯度稀释,配制拷贝数为2×102‑2×106copies阳性ssRNA制作标准曲线,并设计香石竹斑驳病毒特异性检测的引物对和Taqman荧光探针,设计实验找到最优化条件下引物的退火温度、引物浓度、探针浓度,并采用一步实时定量RT‑PCR检测方法进行定量检测。本发明方法能快速、可靠的检测出香石竹斑驳病毒,并可对所含病毒进行定量。

技术研发人员:刘冠泽;王丽花;张艺萍;杨秀梅;瞿素萍;许凤;王继华;苏艳;张丽芳
受保护的技术使用者:云南省农业科学院花卉研究所
文档号码:201611255119
技术研发日:2016.12.30
技术公布日:2017.05.31

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