本发明涉及一种从芒果叶提取芒果苷的绿色化学工艺技术，尤指一种先采用超微粉碎、食用乙醇提取芒果苷，然后以d101大孔树脂、d296阴离子树脂分离纯化芒果苷的绿色分离纯化方法。
背景技术：
芒果苷，又称莞知母宁，淡灰黄色针状结晶（50%乙醇）。芒果苷对于治疗慢性支气管炎有较好疗效，是藏茵陈治疗肝炎的主要有效成分，是知母根茎中抗病毒的活性成分。芒果苷具有抑制中枢神经系统、抗炎、抑菌、抗单纯疱疹病毒hsv-2，利胆和免疫作用，能缓解hsv-2病毒引起的骶骨神经根病，对模拟高原急性低氧肝损伤有保护作用。
芒果苷存在于漆树科植物芒果(mangiferaindical.)的果实、叶、树皮中。芒果叶含有多种类型的化合物，其性质差异很大(从极性到非极性)；同一类型化合物中异构体多，其差异性又很小，难以分离，且其中一些化合物热敏感性强，又极易氧化、异构、分解。
现有技术中已有许多从芒果叶中提取分离芒果苷的方法，如cn201710057903.7是以乙酸乙酯提取芒果叶粉除杂后再以甲醇提取，所得滤液浓缩洗涤，干燥得芒果苷粗品，或进一步结晶纯化得芒果苷纯品；cn200910194672.x是用碱性水溶液对芒果叶粉进行提取后，滤液用稀矿酸酸化、浓缩、加醇离心，采用sephadexlh-20凝胶柱分离，洗脱液蒸干后用醇重结晶得到芒果苷；cn201610965106.4是采用乙醇和抗氧化剂提取芒果叶粉，再采用凝胶柱和大孔吸附树脂层析联用制得芒果苷；cn200910175781.7是将芒果叶粉酶解后用石油醚脱脂，用乙醇提取、干燥，再用乙醇水溶液溶解、离心过滤干燥制得芒果苷；cn201010292465.0是用醇提取后滤液浓缩，再用有机溶剂萃取，水相结晶，晶体用丙酮和水的混合溶液重结晶制得芒果苷等，虽然该些方法皆能从芒果叶中分离提取芒果苷，但是并没有将d101大孔树脂和d296阴离子树脂联用来分离纯化芒果苷。而cn200610079234.5，虽然提及采用单一的大孔型树脂，优选d101、d301、d318或d296，但是该方法是在醇提取后采用该些树脂进行脱色，而不是进行分离纯化。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是：针对上述现有技术的不足，提供一种以芒果叶提取芒果苷的方法，该方法以d101大孔树脂联用d296阴离子树脂从芒果叶中提取芒果苷，高效、绿色安全、低成本、高得率、高纯度，适用于工业生产。
为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：一种以芒果叶提取芒果苷的方法，其特征在于，该方法是先将芒果叶粉碎为300目以下的超微粉体，采用食用乙醇从芒果叶粉中提取芒果苷粗提物，再将芒果苷粗提物以d101大孔树脂联用d296阴离子树脂进行分离纯化，即得芒果苷。
上述提及的将芒果苷粗提物以d101大孔树脂联用d296阴离子树脂进行分离纯化是指将芒果苷粗提物以2.0bv/h～4.0bv/h的流速通过d101大孔树脂的层析柱吸附至饱和，用1bv～3bv的50%体积浓度的乙醇溶液以1bv/h～3bv/h的流速冲洗至无色，收集洗脱液；将洗脱液上d296阴离子树脂层析柱，用1bv～3bv的50%体积浓度的乙醇溶液以1bv/h～3bv/h流速冲洗至无色，收集洗脱液，将洗脱液在-0.05mpa～-0.09mpa、45℃～55℃条件下浓缩，回收食用乙醇，-0.05mpa～-0.09mpa、40℃～60℃真空冷冻干燥，即得。
上述提及的采用食用乙醇从芒果叶粉中提取芒果苷粗提物是指用50%～80%体积浓度且ph为5～8的食用乙醇于70℃～90℃从芒果叶粉中提取芒果苷粗提物。进一步地，是指采用50%～80%体积浓度且ph为5～8的食用乙醇，按1g芒果叶粉加8～12ml食用乙醇的比例，于芒果叶粉中加入食用乙醇在70℃～90℃下提取2次，每次提取时间为1～2h，将提取液过滤，合并滤液，即得芒果苷粗提物。
上述的提及的将芒果叶粉碎是以气流粉碎机进行粉碎至300目以下的超微粉体，以提高破壁率。
本发明方法中，采用经静态吸附与解吸筛选出来的d101大孔吸附树脂和d296阴离子树脂吸附芒果苷，对未被大孔吸附树脂吸附部分，经减压浓缩回收食用乙醇。对上述步骤中吸附在大孔吸附树脂的芒果叶芒果苷进行洗脱回收时，先用蒸馏水洗至无色，再用食用乙醇洗脱芒果苷，得到的芒果苷的纯度和得率都较高。
本方法中使用的d101大孔树脂和d296阴离子树脂的处理：新树脂采用95%乙醇浸泡48h，之后用乙醇洗到无混浊，然后用蒸馏水洗至无醇味。用过的树脂先用95%洗至无色，然后用蒸馏水洗至无醇味；用5%盐酸洗至无色，再用水洗至中性；用5%naoh洗至无色后，用水洗至中性，备用。
与现有技术相比，本发明的优点是：
1、本发明采用超微粉碎芒果叶，采用超微粉体能有效的提高利用率。
2、集成采用食用乙醇安全无毒地提取芒果叶活性成分、d101大孔树脂、d296阴离子树脂分离纯化芒果苷等方法，不仅能工业化生产安全有效的不同纯度规格的芒果苷提取物以用于后续的保肝护肝、抗炎、抗氧化等功能产品的研发，而且真正地实现了安全、简便、合理、经济的芒果叶资源的高值化利用和系列产品的工业化生产，充分体现出绿色化学生产的理念和循环经济的策略。因而，本发明具有理论新颖、技术科学、操作及产品安全、工艺简便、经济可行、环境友好等特点。
3、采用天然产物化学及现代化生产技术提取、分离纯化芒果叶主要活性成分芒果苷，将其制成国际通行的各种纯度规格的芒果苷提取物，较好地顺应和满足现代功能食品、保健品、药品、日化用品等健康领域，对其天然、安全、有效、方便的需求。
具体实施方式
实施例1
取芒果叶，将芒果叶以气流粉碎机粉碎为300目以下的超微粉体，以50%体积浓度且ph为8的食用乙醇为提取溶剂，按1g芒果叶粉加12ml食用乙醇的比例，于芒果叶粉中加入食用乙醇在70℃下浸提2h，提取2次，将提取液过滤，合并滤液，即得芒果苷粗提物。
选用已处理的d101大孔吸附树脂和d296阴离子树脂作为芒果苷的分离纯化树脂。将芒果苷粗提物以2.0bv/h的流速先通过d101大孔树脂的层析柱吸附至饱和，用1bv的50%体积浓度的乙醇溶液以1bv/h的流速冲洗至无色，收集洗脱液；再将洗脱液上d296阴离子树脂层析柱，用1bv的50%体积浓度的乙醇溶液以1bv/h流速冲洗至无色，收集洗脱液，将洗脱液在-0.05mpa、55℃条件下浓缩，回收食用乙醇，-0.05mpa、60℃真空冷冻干燥，即得纯化的芒果苷提取物，测得芒果苷得率为85%，纯度为94%。
实施例2
取芒果叶，将芒果叶以气流粉碎机粉碎为300目以下的超微粉体，以70%体积浓度且ph为7的食用乙醇为提取溶剂，按1g芒果叶粉加10ml食用乙醇的比例，于芒果叶粉中加入食用乙醇在80℃下浸提1.5h，提取2次，将提取液过滤，合并滤液，即得芒果苷粗提物。
选用已处理的d101大孔吸附树脂和d296阴离子树脂作为芒果苷的分离纯化树脂。将芒果苷粗提物以3.0bv/h的流速先通过d101大孔树脂的层析柱吸附至饱和，用2bv的50%体积浓度的乙醇溶液以2bv/h的流速冲洗至无色，收集洗脱液；再将洗脱液上d296阴离子树脂层析柱，用2bv的50%体积浓度的乙醇溶液以2bv/h流速冲洗至无色，收集洗脱液，将洗脱液在-0.07mpa、50℃条件下浓缩，回收食用乙醇，-0.07mpa、50℃真空冷冻干燥，即得纯化的芒果苷提取物，测得芒果苷得率为83%，纯度为93%。
对比实施例1
取芒果叶粉碎，以70%体积浓度且ph为7的食用乙醇为提取溶剂，按1g芒果叶粉加10ml食用乙醇的比例，于芒果叶粉中加入食用乙醇在80℃下浸提1.5h，提取2次，将提取液过滤，合并滤液，即得芒果苷粗提物。
选用已处理的d101大孔吸附树脂作为芒果苷的分离纯化树脂。将芒果苷粗提物以3.0bv/h的流速先通过d101大孔树脂的层析柱吸附至饱和，用2bv的50%体积浓度的乙醇溶液以2bv/h的流速冲洗至无色，收集洗脱液；将洗脱液在-0.07mpa、50℃条件下浓缩，回收食用乙醇，-0.07mpa、50℃真空冷冻干燥，即得纯化的芒果苷提取物，测得芒果苷得率为67%，纯度为50%。
对比实施例2
取芒果叶粉碎，以70%体积浓度且ph为7的食用乙醇为提取溶剂，按1g芒果叶粉加10ml食用乙醇的比例，于芒果叶粉中加入食用乙醇在80℃下浸提1.5h，提取2次，将提取液过滤，合并滤液，即得芒果苷粗提物。
选用已处理的d296阴离子树脂作为芒果苷的分离纯化树脂。将芒果苷粗提物以3.0bv/h的流速先通过d296阴离子树脂的层析柱吸附至饱和，用2bv的50%体积浓度的乙醇溶液以2bv/h的流速冲洗至无色，收集洗脱液；将洗脱液在-0.07mpa、50℃条件下浓缩，回收食用乙醇，-0.07mpa、50℃真空冷冻干燥，即得纯化的芒果苷提取物，测得芒果苷得率为55%，纯度为32%。
实施例3
取芒果叶，将芒果叶以气流粉碎机粉碎为300目以下的超微粉体，以80%体积浓度且ph为5的食用乙醇为提取溶剂，按1g芒果叶粉加8ml食用乙醇的比例，于芒果叶粉中加入食用乙醇在90℃下浸提1h，提取2次，将提取液过滤，合并滤液，即得芒果苷粗提物。
选用已处理的d101大孔吸附树脂和d296阴离子树脂作为芒果苷的分离纯化树脂。将芒果苷粗提物以4.0bv/h的流速先通过d101大孔树脂的层析柱吸附至饱和，用3bv的50%体积浓度的乙醇溶液以3bv/h的流速冲洗至无色，收集洗脱液；再将洗脱液上d296阴离子树脂层析柱，用3bv的50%体积浓度的乙醇溶液以3bv/h流速冲洗至无色，收集洗脱液，将洗脱液在-0.09mpa、45℃条件下浓缩，回收食用乙醇，-0.09mpa、40℃真空冷冻干燥，即得纯化的芒果苷提取物，测得芒果苷得率为82%，纯度为91%。