本发明属于有机合成领域，具体涉及一种具有抑制肿瘤细胞的黄酮衍生物及其制备方法与应用。
背景技术：
癌症被认为是21世纪人口死亡的主要原因，也是提高预期寿命的最重要障碍。据估计，2018年全世界有1810万新病例和960万癌症死亡。这个数字随着时间的推移还将提高。目前的癌症治疗主要是手术、化疗和放射治疗，不能减少术后复发和转移，并显示出其局限性和缺点，如严重的副作用、不耐受性和耐药性增加。因此，开发一系列新的抗癌药物的需求正在增加。
黄酮类化合物是从植物和真菌中提取的多酚类次生代谢产物，具有多种生物活性，尤其是通过调节不同的靶点而具有抗癌活性。例如，一些研究报告黄酮靶向蛋白激酶(pkc)、坦克酶(tnks)、酪氨酸激酶和环依赖性激酶。因此我们以黄酮为母体研究其抗肿瘤活性。专利wo2018112037a1报道以黄酮4’位羟基与各种烷烃反应生成醚类化合物对蛋白质(brd4)具有很好的调控作用。而brd4的一个显著特征是它与有丝分裂染色体的常染色区域有关。通过这种结合，该蛋白发挥其作为细胞周期从g2向m进展的调节器的作用，但也在g1向s转变的过程中发挥作用。也有人认为brd4与染色质的联系对于细胞分裂过程中转录记忆的传递是重要的。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种具有抑制肿瘤细胞的黄酮衍生物及其制备方法与应用。发明人通过应用偶联反应,以氨基取代物取代4’-oh，在黄酮骨架上合成具有含氮衍生物，通过引入氨基取代物调节黄酮衍生物与靶向蛋白的氢键作用，同时也可以调节其酯水分配系数，从而可以让黄酮衍生物具有相对较好的通过血脑屏障，起到制抑肿瘤细胞的作用。为实现上述目的所采用的具体的实验方案如下：
一种具有抑制肿瘤细胞的黄酮衍生物,是应用偶联反应,以氨基取代物取代4’-oh，在黄酮骨架上合成具有含氮的衍生物，所述的黄酮衍生物的结构式为(i)：
其结构式(i)中r为c1-c6的烷烃亚胺、氨基酸甲酯、氨基酸乙酯、取代苯亚胺、三氟甲磺酯基、苄氧基其中的一种，具体结构式为式(6-1)～式(6-14)所示化合物中的任意一种：
上述具有抑制肿瘤细胞的黄酮衍生物的制备方法，合成路线包括步骤：
合成步骤中首先对2,4,6-三羟基苯乙酮用甲基保护2和4位羟基得到化合物1a，用溴苄保护3,5-二甲基对羟基苯甲醛得合物2b；化合物1a和化合物2b在naoh为碱的条件下通过羟醛缩合反应得查尔酮3；接着在i2催化的条件下氧化关环得到黄酮4；接着脱苄基保护得5，与三氟甲磺酰氯反应得到化合物6，然后以pd化合物为催化剂、无水无氧的条件下与胺类化合物反应生成黄酮衍生物。
所述黄酮衍生物应用到制备抗肿瘤的药物。
有益效果：采用mtt法对该黄酮衍生物进行肿瘤细胞hel和pc3的抗增殖活性研究，结果表明该黄酮衍生物对肿瘤细胞hel和pc3的抗增殖活性好，比天然黄酮芹黄素的抗肿瘤活性高；与临床抗肿瘤药物顺铂抗增殖作用相近，抗肿瘤活性数据具体见表1。
表1：黄酮衍生物对肿瘤细胞hel和pc3的抗增殖活性对比数据
具体实施方式
实施例1
(1)化合物1a的合成：在室温下，将2,4,6-三羟基苯乙酮1(1.0当量)和k2co3(2.0当量)溶于丙酮中并在氮气保护下滴入me2so4(2.0eq)，升温至40℃，用tlc监测反应结束约4h，过滤反应，用丙酮洗涤3次。蒸发有机相得到1a，产率98％。
(2)化合物2b的合成：把3,5-二甲基对羟基苯甲醛(6mmol,1.0eq),k2co3(12mmol,2.0eq)溶于无水dmf(40ml)中，降温到0度。然后滴加brbn(6.6mmol,1.1eq),滴完后，缓慢升温到室温。tlc监控反应，反应完后加入50ml水，ea20ml×3萃取,合并有机层，50ml水洗三次，饱和食盐水洗20ml洗三次，无水na2so4干燥，过虑，减压除去ea得化合物2b，产率95％。
(3)化合物3的合成：把1a(5mmol,1eq)和2b(5mmol,1eq)溶于40ml乙醇中，保持温度在室温，滴加40％naoh(50mmol,10eq)水溶液。滴加完后，升温到40度，tlc监测反应，反应完后以1nhcl调节ph到酸性。过虑得固体，烘干，用乙醇重结晶得化合物3，产率70％。m.p.:120.6-121.4℃；1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:(ppm)14.40(s,1h,oh),7.82(d,j＝15.6hz,1h,c＝c-h),7.73(d,j＝15.6hz,1h,c＝c-h),7.50(d,j＝6.8hz,2h,ar-h),7.37-7.45(m,3h,ar-h),7.30(s,2h,ar-h),6.12(d,j＝2.4hz,1h,ar-h),5.98(d,j＝2.4hz,1h,ar-h),4.85(s,2h,arch2),3.93(s,3h,och3),3.84(s,3h,och3),2.34(s,6h,arch3).13cnmr(100mhz,cdcl3)δ:(ppm)192.6,168.30,166.0,162.4,157.6,142.4,137.2,131.7,131.2,129.2,128.5,128.1,127.8,126.3,106.3,93.7,91.2,74.1,55.9,55.6,16.6.hrms(esi)calcd.c26h27o5,[m+h]+m/z:419.1853,found:417.1850。
(4)化合物4的合成：取化合物3(2.4mmol,1eq)和碘(0.024mmol,0.01eq)于30mldmso中，加热到160度反应4h，降温到室温，把dmso反应液到入冰水浴中，过滤得固体，因体用ea重结晶得到化合物4。产率72％,m.p.:208.1-209.2℃；1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:(ppm)7.56(s,2h,ar-h),7.50(d,j＝4.0hz,2h,ar-h),7.43(t,j＝4.0hz,2h,ar-h),7.39(t,j＝4.0hz,1h,ar-h),6.62(s,1h,c＝c-h),6.58(d,j＝1.2hz,1h,ar-h),6.37(d,j＝1.2hz,1h,ar-h),4.87(s,2h,arch2),3.96(s,3h,och3),3.93(s,3h,och3),2.37(s,6h,arch3).13cnmr(151mhz,cdcl3)δ:(ppm)177.7,164.0,160.9,160.7,159.9,158.5,137.1,132.0,128.6,128.2,127.9,127.0,126.7,109.2,108.5,96.1,92.8,74.2,56.4,55.8,16.7.hrms(esi)calcd.c26h25o5,[m+h]+m/z:417.1697,found:417.1695。
(5)化合物5的合成：取化合物4(2.4mmol,1.0eq)和pd/c10％(0.24mmol,0.1eq)于50ml甲醇中，用氢所转换，通入氢气于室温下反应5h,补加50ml甲醇加热加回流后，趁热过滤得目标化合物5。产率95％，m.p.:185.3-186.2℃,1hnmr(600mhz,dmso-d6)δ:(ppm)9.03(s,1h,oh),7.64(s,2h,ar-h),6.84(d,j＝0.4hz,1h,ar-h),6.57(s,1h,c＝c-h),6.48(d,j＝1.2hz,1h,ar-h),3.9(s,3h,och3),3.82(s,3h,och3),2.24(s,6h,arch3).13cnmr(151mhz,dmso-d6)δ:(ppm)176.1,164.0,160.8,160.6,159.6,157.0,126.7,125.2,121.7,108.7,106.6,96.7,93.7,56.5,56.4,17.1.hrms(esi)calcd.c19h19o5n,[m+h]+m/z:327.1227,found:327.1226。
(6)化合物6的合成：取化合物5(3mmol,1eq)和k2co3(30mmol,10eq)于无水dmf中，氮气保护，加入过量的三氟甲磺酰氯，反应5h后，加入冰水50ml,20ml二氯甲烷萃取三次，合并有机层，20ml水洗有机层3次，饱和食盐水洗一次，有机层无水硫酸钠干燥，过滤减压除二氯甲烷得粗产品，粗产品经柱层析得纯品化合物6，产率60％，m.p.265.5-266.2℃:1hnmr(600mhz,cdcl3)δ:(ppm)7.60(s,2h,ar-h),6.62(s,1h,c＝c-h),6.57(d,j＝2.4hz,1h,ar-h),6.37(d,j＝1.8hz,1h,ar-h),3.95(s,3h,och3),3.92(s,3h,och3),2.47(s,6h,ch3).13cnmr(151mhz,cdcl3)δ:(ppm)177.2,164.2,160.9,159.8,159.0,148.4,132.5,131.2,127.4,118.6(dd,j＝320.12,640.24,cf3)109.7,109.2,96.3,92.8,56.4,55.8,17.4.hrms(esi)calcd.c20h18o7f3s,[m+h]+m/z:459.0720,found:459.0721。
(7)化合物6-1～6-14的合成：取化合物乙酸钯(0.02mmol,0,01eq),binap(0.04mmol,0.2eq)，cs2co3,6(0.22mmol,2.2eq)和胺类(0.2mmol,1eq)于10ml无水甲苯中，在无水无氧条件下反应回流反应12h,降温到室温，直接柱层析得目标产物6-1～6-14。
实施例2
为了进一步确认化合物结构的准确性，采用核磁共振对目标产物6-1-6-14化合物的进行核磁共振检测得出如下结果：
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化合物6-14:70％yield,m.p.:125.9-130.1℃；1hnmr(600mhz,cdcl3)δ:(ppm)7.61(s,2h,ar-h),7.05-7.08(m,1h,ar-h),6.87(t,j＝4.2hz,1h),6.70-6.73(m,1h,ar-h),6.63(s,1h,c＝ch),6.57(d,j＝2.4hz,ar-h),6.36(d,j＝2.4hz,ar-h),6.23-6.26(m,1h,ar-h),5.45(s,1h,nh),3.94(s,3h,och3),3.91(s,3h,och3),2.26(s,6h,arch3),13cnmr(151mhz,cdcl3)δ:(ppm)177.7,164.1,160.9,160.6,159.9,151.8(d,j＝293.64hz),140.5,136.0,133.5(d,j＝11.02hz),128.5,126.3,124.4(d,j＝3.47hz),118.6(d,j＝6.64hz),115.0(d,j＝18.42hz),113.9(d,j＝1.96hz),109.2,108.6,96.2,92.8,56.4,55.8,18.6.hrms(esi)calcd.c25h23o4nf,[m+h]+m/z:420.1606,found:420.1603。
上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。