血沉棕黄层提取试剂盒的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种血沉棕黄层提取试剂盒，更详细而言，涉及为了进行PRP皮肤再生术及细胞再生术，通过采血来提取血沉棕黄层时使用的血沉棕黄层提取试剂盒。
【背景技术】
[0002]生物化学物质的分离是在所有生物遗传学、医学不但分析细胞物质，对培养细胞，确认及增幅DNA的最基本的作业。目前，在医学界全世界都在研宄利用干细胞的再生医学。为了获取干细胞有从发生初期的囊胚(Blstocyst)获取的胚胎干细胞(embryonic stemcell)与从结束发生过程的成人或胎盘上获取的成体干细胞(adult stem cell) ο
[0003]其中，获取成体干细胞(adult stem cell)的方法有3种，第一从骨髓(bonemarrow)获取，第二从脐带血(umbilical cord blood)获取，第三从末梢血(mesenchymalblood)获取。这些方法首先分离经过离心分离过程而大致分为血液中的红细胞、白细胞、血小板血浆的成分后，进行分离作为单核细胞的干细胞的工作。
[0004]在此过程观察现有的离心分离过程为如下。若在混合有多种物质的溶液上采取人或动物的血液后进行离心分离，则包含在血液中的红细胞、白细胞、血小板等其他血浆成分由于各自的固有比重差从离心分离器的容器的下侧到上侧由重到轻的顺序叠层。
[0005]首先，在将利用注射针采取的末梢血搬到离心分离器容器的过程中，打开离心分离器容器的盖将注射器的针位于离心分离器容器的内侧后，将末梢血移动至离心分离器容器，然后，从离心分离器容器取出针后盖好盖，在离心分离器的料斗上插入离心分离容器，设定驱动所需的时间与旋转速度(rpm)或重力加速度(g)。
[0006]通常，红细胞在血液中的比重最重，因此，形成于下方，男性的全体血液中占47%，女性占42%。其上方位有白细胞与血小板，占全体血液中的1%左右，其中含有作为末梢血干细胞的单核细胞(monocyte)。
[0007]剩余的血楽(serum)与纤维蛋白原(fibrinogen)位于其上层。拿出结束离心分离的容器打开盖后，通过吸管或毛细管或针从根据各构成物质的比重而分离的物质中提取所需的物质后，保存或废弃或再回收剩余的成分。
[0008]并且，最近富血小板血浆术(〃PRP( (Platelet Rich Plasma，富血小板血浆，以下称为PRP)受瞩目，从自己的血液中按所述分离方法提取PRP后注射到损伤细胞组织的部位，从而再生细胞组织来治愈伤口。PRP术应用于再生损伤的软骨的治疗与再生如青春痘等疤痕的损伤的皮肤组织，从而，改善皮肤状态。
[0009]血液的血小板上含有丰富的成长因子，该血小板在人体内增殖细胞及生成胶原蛋白，从而，再生新生血管，治疗伤口。
[0010]在人体的血液中I微升含有10万至20万的血小板，若要有效地进行PRP术，则将血小板浓缩成在I微升含有100万以上的血小板。浓缩血小板的方法采用利用离心分离器按层状分离采取的血液的方法，若利用离心分离器按层状分离通常的血液，则最下层形成红色的红细胞层，在红细胞上形成由白细胞与血小板形成的深黄色的血沉棕黄层(buffycoat)，位于血沉棕黄层的上部的最上层分为由血浆形成的浅黄色的血浆层。
[0011]按所述方法分离的血液的各层体积比率为平均红细胞层约占45%，血沉棕黄层占1%，血浆层占54%。PRP术用于在按所述方法分离的血液中提取血小板丰富的血沉棕黄层，其比率仅占I %，因此，用通常的血液提取试剂盒是很难准确地只提取血沉棕黄层。
[0012]韩国公开专利第10—2010—0116106号的血小板浓缩血浆组合体、试剂盒以及其方法公开了离心分离试验管，从患者身上提取全血浓缩血小板来分离，该离心分离试验管为内部直径均匀的圆筒形，但也很难准确地仅提取血沉棕黄层。
[0013]韩国公开专利第10—2011—0045980号公开了离心分离试剂盒及利用该离心分离试剂盒的离心分离方法(申请人:Glotech.C0.LTD)，采取全血或体液后，在离心分离管上设置注射器后将通过离心分离分离的对象物质(血小板浓缩血浆或干细胞)直接采集到注射器内，从而，容易地提取对象物质的离心分离试剂盒，该离心分离试剂盒也是离心分离管的内部直径均衡的圆筒形状，因此，存在在采取血沉棕黄层时除了血沉棕黄层外还会采取到分离凝胶或红细胞的问题。
[0014]由本申请人申请并公开的韩国公开专利第10—2012—0089723号公开了在离心分离容器上形成直径窄的腔室，在此处形成血沉棕黄层进行分离的装置，并且，在上部腔室及中间腔室的侧面形成一个以上的肋，从而防止从内凹角形状的离心分离中进行离心分离时左右游动的现象，能准确分离装入在离心分离器容器内的物质的血沉棕黄层提取试剂盒，但，若血沉棕黄层被收容到下部腔室时缺乏调整血沉棕黄层的单元。
[0015]并且，现有的试剂盒具有如下问题，即由于形成盖要直接用手打开盖后，用注射器注入血液，然后重新用手盖好盖，此过程中，血液接触到外部的空气后被感染等导致卫生上的问题。
【发明内容】
[0016]本发明为了解决所述问题而提出的，其目的在于，提供一种血沉棕黄层提取试剂盒，为了分离生物细胞物质及进行PRP术，用离心分离器分离的血液中能容易提取浓缩血小板的血沉棕黄层(buffy coat)。
[0017]并且，本发明的目的在于，提供一种血沉棕黄层提取试剂盒，血沉棕黄层提取试剂盒在离心分离的血液中能容易地识别血沉棕黄层，并用注射器能准确地提取。
[0018]并且，本发明的目的在于，提供一种血沉棕黄层提取试剂盒，血液是根据人，即便是同样的人也根据采血当时的健康状态红细胞与血沉棕黄层及血浆的组成比不同，通过本发明即便血液中的组成比不同，也能调整血沉棕黄层的位置，能准确地提取。
[0019]并且，本发明的目的在于，提供一种血沉棕黄层提取试剂盒，防止在提取过程中由于手直接开闭盖而接触到空气或接触到手的血液被感染等卫生上的问题。
[0020]并且，本发明的目的在于，提供一种血沉棕黄层提取试剂盒，最大限度地抑制离心旋转时的试剂盒的左右游动，防止因左右游动而发生的血沉棕黄层被散乱，从而，进行准确的离心分离。
[0021]为了实现所述目的，本发明提供一种血沉棕黄层提取试剂盒，其中，包括:试剂盒，具备:血浆部，形成为圆筒形，具有形成血浆层的内部体积；血沉棕黄层部，形成为圆筒形，直径小于所述血浆部的直径，与所述血浆部的下部连通，并朝长度方向延长，具备形成血沉棕黄层的内部体积；红细胞部，形成为圆筒形，直径大于所述血沉棕黄层部的直径，与所述血沉棕黄层的下部连通，并朝长度方向延长，具备形成红细胞层的内部体积，所述血浆部的自由端部及所述红细胞部的自由端部分别开口 ；下部密封垫，与所述红细胞部保持气密，并可移动地被收容；推料，用于移动所述下部密封垫。
[0022]进一步包括上部密封垫与上部盖，上部密封垫设置于所述血浆部，用于密封所述血浆部的开口 ；以及上部盖，结合于所述血浆部的开口。
[0023]进一步包括下部盖，在下部盖形成有供所述推料出入的出入孔，并结合于所述红细胞部的开口防止所述下部密封垫从所述红细胞部脱离。
[0024]所述下部密封垫与所述推料相螺丝结合或插入结合。
[0025]所述下部密封垫，包括:连接器，与所述推料可拆装地结合；以及封口构件，与所述连接器相结合，并紧贴于所述红细胞部的内周面，气密地保持所述红细胞。
[0026]所述连接器进一步包括安装槽，所述安装槽在所述连接器的外周面沿着圆周方向凹陷形成，用于安装所述封口构件。
[0027]在所述血浆部与血沉棕黄层中的一个形成有支撑肋，所述支撑肋，从所述试剂盒主体的外周面朝所述试剂盒主体的长度方向或对试剂盒主体的长度方向的横方向突出形成。
[00