制剂：将步骤2)制得的含菌根真菌孢子的土壤与高岭土（购买于南京栖霞区 大理花丼销售中心）混合，烘干后粉碎，粉碎过程中加入1 %的阿拉伯胶，并添加磷酸二氢 钠将pH调整至7. 0,过300目筛，再次烘干至含水量为3%，最终制成浓度为40 -60个孢子 /g的粉剂；或者经造粒制成颗粒剂或经压片制成片剂。
[0043] 实施例3木本植物病害的田间生防试验
[0044] 方法：将健康的一年生的苹果苗、葡萄苗移栽至果园（位于太仓现代农业园区，江 苏太仓），该果园林间湿度较大，地貌平坦，往年发生过白纹羽病和炭疽病，在移栽时将2g AM真菌丽21粉剂（实施例2制备）均匀撒在根上，每个处理48棵苗，3次重复。然后浇 足量的水保证湿度，并以普通土壤拌基质处理作为对照，按照常规管理方法统一管理。白 纹羽病、炭疽病为自然发病，4个月后，统计病害严重度以及防治效果。白纹羽病发病症状： 病根表现覆盖一层白色至灰白色的菌丝层，被害根部皮层组织逐渐变褐腐烂后，外部的栓 皮层如鞘状套于木质部外面；根部被害严重时，根际表层土壤亦可见灰白色菌丝层，有时 可形成黑色小粒点，受害严重的植株，地上部生长衰弱，最后导致全株死亡。炭疽病发病症 状：叶片发病初为褐色小圆斑，稍凹陷，当小病斑密布全叶，病斑相连时，往往使叶片枯黄 脱落；新梢受害时呈现淡黄褐色病斑，被害部易脱落，残痕处有绯红色粘质物。处理组中，只 有部分苹果苗、葡萄苗表现出白纹羽病与炭疽病，MW21对白纹羽病防治效果达到73. 50%、 65. 18%，对炭疽病的防治效果达到52. 29%、67. 26 %，显著高于对照组。可见生防菌MW21 效果较好。
[0045] 表1丽21处理对白纹羽病的防效
[0047] 注：同列数据后标不同小写字母者表示在5%水平上差异显著。
[0048] 表2 MW21处理对炭疽病的防效
[0050] 注：同列数据后标不同小写字母者表示在5%水平上差异显著。
[0051] 实施例4木本植物幼苗移栽存活率试验
[0052] 方法：将健康的一年生的苹果苗、葡萄苗移栽至果园，在移栽时将2gAM真菌MW21 粉剂均匀撒在根上，每个处理48棵苗，3次重复。然后浇足量的水保证湿度，并以普通土壤 拌基质处理作为对照。
[0053] 将鹅掌楸组培苗从组培瓶中苗取出，尽量不损伤植株根系。随后用清水洗去基部 的培养基，不待其晾干，即移栽至苗圃中。在移栽时将2gAM真菌MW21粉剂均匀撒在根 上，每个处理48棵苗，3次重复。然后浇足量的水保证湿度，并以普通土壤拌基质处理作为 对照。
[0054] 银杏树苗移栽利用萌蘖繁殖苗木方法，从壮龄雌株母树根蘖苗中挖取基部半边带 根的萌枝条，栽在苗圃里，在移栽时将2gAM真菌MW21粉剂均匀撒在根上。每个处理48棵 苗，3次重复。然后浇足量的水保证湿度，并以普通土壤拌基质处理作为对照。
[0055] 按照常规管理方法统一管理，30d后统计移栽存活率。如表3,在温室条件下鹅掌 楸、苹果、葡萄、银杏的移栽存活率高达92. 36%、94. 44%、93. 03%、95. 23%，显著高于空白 对照。
[0056] 表3MW21处理对移栽存活率的影响
[0058] 注：同列数据后标不同小写字母者表示在5%水平上差异显著。
[0059] 实施例5木本植物促生试验
[0060] 方法：将健康的一年生的苹果苗、葡萄苗移栽至果园，在移栽时将2gAM真菌MW21 粉剂均匀撒在根上，每个处理48棵苗，3次重复。
[0061] 将鹅掌楸组培苗从组培瓶中苗取出，尽量不损伤植株根系。随后用清水洗去基部 的培养基，不待其晾干，即移栽至苗圃中。在移栽时将2gAM真菌MW21粉剂均匀撒在根上， 每个处理48棵苗，3次重复。
[0062] 然后浇足量的水保证湿度，并以普通土壤拌基质处理作为对照，按照常规管理方 法统一管理，70d后，统计鹅掌楸、苹果幼苗的株高、茎粗、上下部的鲜干重、叶绿素a、叶绿 素b、以及总叶绿素含量；并统计葡萄叶绿素、株高、上下部的鲜干重。研宄发现，处理组的 叶绿素a、叶绿素b、以及总叶绿素含量均显著高于对照组。且对株高、上下部鲜干重有明显 的增加作用，说明AM真菌MW21粉剂对鹅掌楸、苹果、葡萄有较好的促生效果（如表4、表5、 表6)。
[0063]表4丽21处理对鹅掌楸生物量的影响
[0065] 注：同列数据后标不同小写字母者表示在5%水平上差异显著。
[0066] 表5丽21处理对苹果生物量的影响
[0068] 注：同列数据后标不同小写字母者表示在5%水平上差异显著。
[0069] 表6丽21处理对葡萄生物量的影响
[0070]
[0071] 注：同列数据后标不同小写字母者表示在5%水平上差异显著。
[0072] 实施例6木本植物温室耐旱能力试验
[0073] 方法：将鹅掌楸组培苗从组培瓶中苗取出，尽量不损伤植株根系。随后用清水洗去 基部的培养基，不待其晾干，即移栽至盆钵中（直径9cm，高13cm)，每个盆钵4颗苗。在移 栽时将2gAM真菌MW21粉剂均匀撒在根上。然后浇足量的水保证湿度，并以普通土壤拌基 质处理作为对照，按照常规管理方法统一管理，30天后，每个处理挑选48棵生长一致的苗 进行干旱实验，停止浇水，进行干旱胁迫，4周后，浇水使其恢复，1周后再统计存活率，以清 水处理的组培苗作为对照。3次重复。
[0074] 如表7所示，丽21处理后，可显著提高鹅掌楸苗的耐旱性，干旱4周后存活率达 55. 56%，而对照组只有0. 69%。
[0075] 表7丽21处理对耐旱能力的影响
[0077] 注：同列数据后标不同小写字母者表示在5%水平上差异显著。
【主权项】
1. 一种丛枝菌根真菌MW21，该菌株为微白巨孢囊霉（Gigaspora albida)，于2014年 11月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCC No.10058。2. 权利要求1所述的丛枝菌根真菌MW21在制备防治木本植物病害、促进木本植物生 长、提高果实产量和质量、提高木本植物抗逆性的制剂中的应用；所述的病害优选真菌、细 菌、病毒病害；所述的抗逆能力优选抗寒、抗寒、耐热或耐涝能力。3. 根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的木本植物选自鹅掌楸、苹果树、葡 萄树、银杏；所述的病害选自白纹羽病、炭疽病等；所述的促进生长包括提高种子发芽率、 幼苗移栽存活率，或促进地上部枝叶、根部生长；所述的抗逆能力为抗旱能力。4. 用权利要求1所述的丛枝菌根真菌MW21制备的生防菌剂。5. 根据权利要求4所述的生防菌剂，其特征在于将含有权利要求1所述的丛枝菌根真 菌MW21孢子的土按照一定比例与高岭土混合，烘干后粉碎，并加入1 %的阿拉伯胶，添加磷 酸二氢钠将pH调整至7. 0,过300目筛，并烘干至3%的含水量，制成浓度为40 -60个孢子 /g的粉剂；或者经造粒制成颗粒剂或经压片制成片剂。6. 权利要求4所述的生防菌剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤： 1) 将含有权利要求1所述的菌株MW21孢子的土按体积比1:80 - 120的比例与培养基 质均勾混合，所述培养基质为泥炭土与经过至少2h热气蒸过的粗砂体积比1:0. 5 - 3混合 而成； 2) 将混合好含MW21孢子的基质装入灭菌后的盆钵，并种上寄主植物，保证孢子能很充 分的跟高粱接触到，4个月后，将盆钵内的土壤和寄主植物根系一块取出，烘干，粉碎，保持 干燥，制得含菌根真菌MW21孢子的土壤，备用；所述的寄主植物优选高粱或三叶草； 3) 制剂：将步骤2)制得的含菌根真菌MW21孢子的土壤与高岭土混合，烘干后粉碎，粉 碎过程中加入质量比1 %的阿拉伯胶，并添加磷酸二氢钠将pH调整至7. 0,过300目筛，再 次烘干至含水量为3%，最终制成浓度为40 - 60个孢子/g的生防菌MW21粉剂；或者经造 粒制成颗粒剂或经压片制成片剂。7. 根据权利要求6所述的生防菌剂的制备方法，其特征在于包含以下步骤： 1) 将含有权利要求1所述的菌株MW21孢子的土按体积比1:80 - 120的比例与培养基 质均匀混合，所述培养基质配方：泥炭土与经过至少2h热气蒸过的粗砂体积比1:0. 5 -3混 合； 2) 将混合好含孢子的基质装入灭菌后地盆钵，并种上高粱，每个盆钵50-60颗种子，保 证孢子能很充分的跟高粱接触到，4个月后，将盆钵内的土壤和高粱根系一块取出，烘干， 粉碎至800目，保持干燥，制得含菌根真菌孢子的土壤，备用； 3) 制剂：将步骤2)制得的含菌根真菌孢子的土壤与高岭土混合，烘干后粉碎至300 目，粉碎过程中加入质量比1 %的阿拉伯胶，并添加磷酸二氢钠将pH调整至7. 0,过300目 筛，再次烘干至含水量为3%，最终制成浓度为40 - 60个孢子/g的生防菌MW21粉剂；；或 者经造粒制成颗粒剂或经压片制成片剂。8. 权利要求4或5所述生防菌剂丽21在防治木本植物病害、促进木本植物生长、提 高果实产量和质量、提高木本植物抗逆性中的应用；所述的病害优选真菌、细菌、病毒病害； 所述的抗逆能力优选抗寒、抗寒、耐热或耐涝能力。9. 根据权利要求8所述的应用，所述的木本植物选自鹅掌楸、苹果树、银杏或葡萄树； 所述的病害选自白纹羽病或炭疽病；所述的促进生长包括提高种子发芽率、幼苗移栽存活 率，或促进地上部枝叶、根部生长；所述的抗逆能力为抗旱能力。10. 根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述的生防菌剂撒在移栽苗木根部，按 照每株2g的用量进行处理。
【专利摘要】本发明公开了一种AM菌根真菌MW21及其生防菌剂及应用。丛枝菌根真菌MW21粉剂主要成分为微白巨孢囊霉(Gigaspora albida)MW21。将含有以上菌根真菌孢子的土按照一定比例与高岭土混合，烘干后粉碎，并加入1％的阿拉伯胶，以及添加磷酸二氢钠将pH调整至7.0，过300目筛，并烘干至3％的含水量，制成浓度为40‐60个孢子/g的粉剂。按2g/株的用量将粉剂撒在木本植物的根围，对木本植物病害的防效达52.29％以上，促生效果30.60％以上，可提高无病的木本植株移栽存活率26.66％以上，以及提高木本植物的抗逆能力，且促生效果达10％以上。CGMCC NO. 1005820141125
【IPC分类】A01P21/00, C12R1/645, A01N63/04, A01P3/00, C12N1/14, A01P1/00
【公开号】CN104962482
【申请号】CN201510359817
【发明人】朱剑
【申请人】无锡本元生物科技有限公司
【公开日】2015年10月7日
【申请日】2015年6月25日