一种改进的杏鲍菇液体菌种发酵培养基的制作方法_4

文档序号:9270929阅读:来源:国知局
原料,首先取黄豆 饼粉质量6倍的水,用乳酸调节抑值为6,加入加/g黄豆饼粉的耐高温a-淀粉酶,边揽 拌边加入黄豆饼粉,升温至95°C,保温,液化15min,然后降温至60°C,保温,边揽拌边加入 40u/g黄豆饼粉的糖化酶和30u/g黄豆饼粉的蛋白酶水解30min,边揽拌边加入剩余水和其 它原料,均匀混合,调整抑值为6. 0,121°C灭菌30min即得发酵罐培养基。
[0093] 经上述方法制备的高密度杏鲍茹液体菌种菌丝球密度为4. 8XlO5个/I,菌丝球 直径为0. 5mm,菌丝球干重为92g/l,胞外多糖为3.Ig/L。
[0094] 实施例5
[0095] -种利用发酵培养基制备高密度杏鲍茹液体菌种的方法,包括如下步骤:
[0096] 步骤1)至4)同实施例2 ;
[0097] 5)首先将种子罐种子W8%接种量接种于3化发酵罐,发酵罐培养基装液量15L 于32°C、通气量化/min恒温发酵2化,然后W0. 3°C/min的速率降温至22°C,向发酵罐中 加入lOg包被壳聚糖和900mL种子罐种子,在通气量化/min条件下恒温发酵lOh,最后W 0. 4°C/min的速率升温至24°C,在通气量化/min条件下恒温发酵4化即得高密度改进的杏 鲍茹液体菌种;
[009引所述平板培养基组成同实施例2 ;
[0099] 所述液体种子培养基组成为;葡萄糖30g/l,酵母浸出汁5g/l,蛋白腺2g/l,琼脂 2g/l,中草药提取物0. 3g/l,磯酸二氨钟0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/l,木屑粉0. 3g/L,VBi〇.Olg/ L,余量为水,抑值6.0 ;
[0100] 所述摇瓶培养基组成为:黄豆饼粉60g/l,葡萄糖lOg/l,蛋白腺5g/l,中草药提取 物0. 5g/l,磯酸二氨钟0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/l,木屑粉0. 4g/L,VBi〇.Olg/l,余量为水,抑值 6. 0 ;
[0101] 所述种子罐培养基组成为;黄豆饼粉60g/l,葡萄糖lOg/l,蛋白腺5g/l,中草药提 取物0. 8g/l,磯酸二氨钟0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/l,木屑粉0. 5g/L,VBi〇.Olg/l,余量为水,pH 值 6. 0 ;
[0102] 所述发酵罐培养基的组成为:黄豆饼粉60g/l,葡萄糖lOg/l,蛋白腺5g/l,中草药 提取物1. 5g/l,木屑粉1.Og/l,磯酸二氨钟0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/L,VBi〇.Olg/l,余量为水, 抑值6. 0 ;
[0103] 所述发酵罐培养基的制备方法为;按照培养基配方准确称量各原料,首先取黄豆 饼粉质量4倍的水,用乳酸调节抑值为6,加入加/g黄豆饼粉的耐高温a-淀粉酶,边揽 拌边加入黄豆饼粉,升温至90°C,保温,液化15min,然后降温至50°C,保温,边揽拌边加入 40u/g黄豆饼粉的糖化酶和30u/g黄豆饼粉的蛋白酶水解30min,边揽拌边加入剩余水和其 它原料,均匀混合,调整抑值为6. 0,121°C灭菌40min即得发酵罐培养基。
[0104] 经上述方法制备的高密度杏鲍茹液体菌种菌丝球密度为4. 6X105个/I,菌丝球 直径为0. 7mm,菌丝球干重为90g/l,胞外多糖为3.Ig/L。
[0105] 实施例6
[0106] 一种利用发酵培养基制备高密度杏鲍茹液体菌种的方法,包括如下步骤:
[0107] 步骤1)至4)同实施例2 ;
[0108] 5)首先将种子罐种子W8%接种量接种于3化发酵罐,发酵罐培养基装液量15L 于30°C、通气量化/min恒温发酵12h,然后W0. 5°C/min的速率降温至18°C,向发酵罐中 加入12g包被壳聚糖和900mL种子罐种子,在通气量化/min条件下恒温发酵16h,最后W 0. 2°C/min的速率升温至26°C,在通气量化/min条件下恒温发酵5化即得高密度杏鲍茹液 体菌种;
[0109] 所述平板培养基组成同实施例2 ;
[0110] 所述液体种子培养基组成为;葡萄糖30g/l,酵母浸出汁5g/l,蛋白腺2g/l,琼脂 2g/l,中草药提取物0. 5g/l,磯酸二氨钟0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/l,木屑粉0.Ig/L,VBi〇.Olg/ L,余量为水,抑值6.0 ;
[0111] 所述摇瓶培养基组成为:黄豆饼粉60g/l,葡萄糖lOg/l,蛋白腺5g/l,中草药提取 物1.Og/l,磯酸二氨钟0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/l,木屑粉0. 2g/L,VBi〇.Olg/l,余量为水,抑值 6. 0 ;
[0112] 所述种子罐培养基组成为;黄豆饼粉60g/l,葡萄糖lOg/l,蛋白腺5g/l,中草药提 取物1. 2g/l,磯酸二氨钟0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/l,木屑粉0. 3g/L,VBi〇.Olg/l,余量为水,pH 值 6. 0 ;
[0113] 所述发酵罐培养基的组成为:黄豆饼粉60g/l,葡萄糖lOg/l,蛋白腺5g/l,中草药 提取物2g/l,木屑粉0. 6g/l,磯酸二氨钟0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/L,VBi〇.Olg/l,余量为水,pH 值 6. 0 ;
[0114] 所述发酵罐培养基的制备方法为;按照培养基配方准确称量各原料,首先取黄豆 饼粉质量6倍的水,用乳酸调节抑值为5,加入加/g黄豆饼粉的耐高温a-淀粉酶,边揽 拌边加入黄豆饼粉,升温至95°C,保温,液化lOmin,然后降温至60°C,保温,边揽拌边加入 40u/g黄豆饼粉的糖化酶和30u/g黄豆饼粉的蛋白酶水解20min,边揽拌边加入剩余水和其 它原料,均匀混合,调整抑值为6. 0,123°C灭菌30min即得发酵罐培养基。
[0115] 经上述方法制备的高密度杏鲍茹液体菌种菌丝球密度为5. 2X105个/I,菌丝球 直径为0. 6mm,菌丝球干重为98g/l,胞外多糖为3. 4g/L。
[0116] 实施例7
[0117] 一种利用发酵培养基制备高密度杏鲍茹液体菌种的方法,包括如下步骤:
[011引步骤1)至4)同实施例2 ;
[0119] 5)首先将种子罐种子W8%接种量接种于3化发酵罐,发酵罐培养基装液量15L 于31°C、通气量化/min恒温发酵1她,然后W0. 4°C/min速率降温至20°C,向发酵罐中加入 1Ig包被壳聚糖和900血种子罐种子,在通气量化/min条件下恒温发酵13h,最后W0. 3°C/ min速率升温至25°C,在通气量化/min条件下恒温发酵4她即得高密度杏鲍茹液体菌种;
[0120] 所述平板培养基组成为;马铃馨200g/l,葡萄糖20g/l,蛋白腺5g/l,磯酸二氨钟 3g/L,硫酸儀 1. 5g/l,琼脂 20g/L,VBi〇. 02g/L,余量为水,抑值 6. 0 ;
[0121] 所述液体种子培养基组成为;葡萄糖30g/l,酵母浸出汁5g/l,蛋白腺2g/l,琼脂 2g/l,中草药提取物0. 4g/l,磯酸二氨钟0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/l,木屑粉0. 2g/L,VBi〇.Olg/ L,余量为水,抑值6.0 ;
[0122] 所述摇瓶培养基组成为:黄豆饼粉60g/l,葡萄糖lOg/l,蛋白腺5g/l,中草药提取 物0. 8g/l,磯酸二氨钟0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/l,木屑粉0. 3g/L,VBi〇.Olg/l,余量为水,抑值 6. 0 ;
[0123] 所述种子罐培养基组成为;黄豆饼粉60g/l,葡萄糖lOg/l,蛋白腺5g/l,中草药提 取物1.Og/l,磯酸二氨钟0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/l,木屑粉0. 4g/L,VBi〇.Olg/l,余量为水,pH 值 6. 0 ;
[0124]所述发酵罐培养基的组成为:黄豆饼粉60g/l,葡萄糖lOg/l,蛋白腺5g/l,中草药 提取物1. 8g/l,木屑粉0. 8g/l,磯酸二氨钟0. 5g/l,硫酸儀0. 5g/L,VBi〇.Olg/l,余量为水, 抑值6.0。
[0125] 所述发酵罐培养基的制备方法为;按照培养基配方准确称量各原料,首先取黄豆 饼粉质量6倍的水,用乳酸调节抑值为5,加入加/g黄豆饼粉的耐高温a-淀粉酶,边揽 拌边加入黄豆饼粉,升温至95°C,保温,液化lOmin,然后降温至60°C,保温,边揽拌边加入 40u/g黄豆饼粉的糖化酶和30u/g黄豆饼粉的蛋白酶水解20min,边揽拌边加入剩余水和其 它原料,均匀混合,调整抑值为6. 0,123°C灭菌30min即得发酵罐培养基。
[01%] 经上述方法制备的高密度杏鲍茹液体菌种菌丝球密度为4. 5X105个/I,菌丝球 直径为0. 7mm,菌丝球干重为90g/l,胞外多糖为3.Og/L。
[0127] 实施例8本发明制备的高密度杏鲍茹液体菌种的栽培试验
[0128] 1.试验菌种;W本发明实施例2制备的液体菌种和市售的"龙海3号"液体菌种为 试验菌种,分为试验组和对照组;
[0129] 2.接种方法:试验组和对照组W相同的接种量和接种密度采用常规方法接种,分 别接种2000瓶;
[0130] 3.生产管理:试验组和对照组采用同样的管理方法
[0131] 3.1发菌管理
[0132] 接种后将菌瓶放在恒温培养室内,避光培养。温度控制在23°C,相对湿度70%~ 75%。此阶段用于栽
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