S解于灭菌后蒸馏水。中，用灭菌过滤器过滤溶解的FeSO4，用无菌移液管吸取过滤后的FeSO4溶液加入该培养基内；
(3)发酵将本实验室所分离筛选出来的蜡质芽孢杆菌接种至装有50mL培养基的250mL摇瓶，放在转速为180r/min的摇床内，于35°C条件下振荡培养48h后，再接种至装有10mL培养基的250mL的锥形瓶，然后于35°C条件下振荡培养24h。
[0045](4)生物絮凝剂的提取
将发酵液放入转速为8000r/min的离心机中，离心lOmin，收集上清液。然后在上清液中加入3倍体积的预冷乙醇(4°C )，所得混合物在4°C下静置6h。将混合物放入转速为10000r/min的离心机中，离心lOmin，收集沉淀。用适量的蒸馏水溶解3h，将混合物放入转速为8000r/min的离心机中，离心lOmin，所得沉淀物再用蒸馈水溶解3h，反复透析I次，至鼻子闻不到乙醇味为止，以去除小分子和残留的有机溶剂。最后将离心的沉淀物置于真空冷冻干燥机中冷冻干燥，可得到生物絮凝剂成品。
[0046](5)废水处理:将0.4?1.2g生物絮凝剂加入装有10mL制革废水的烧杯中，然后将烧杯置于磁力搅拌器中搅拌，先以200r/min的速度搅拌2min，再以50r/min的速度搅拌lOmin，静置20min后过滤，测定废水处理前后的COD值。
[0047]当制革废水中初始COD值为1200mg/L时，该生物絮凝剂能去除其中C0D873.6mg/L，去除效率达到72.8%，降解速度快，没有二次污染。
[0048]实施例3 蜡质芽孢杆菌的筛选
(I)菌种的富集培养:
采集制革厂的活性污泥接种至已灭菌并冷却的LB培养基中，污泥与培养基的培养比例是体积比约1:8，于28°C摇床培养46h，LB培养基配制如下:蛋白胨8g，酵母膏4g，NaCl8g，加蒸饱水到lOOOmL，pH6.8，115°C灭菌25min ;摇床转速是100r/min。
[0049](2)菌种的驯化:
将5mL富集培养菌液接种于10mL含有制革废水的LB培养基中28°C振荡培养50h，并逐渐增加制革废水的量至40 mL、60 mL、80 mL，逐级驯化；逐级驯化，其目的是为了使培养的菌种能够适应制革废水的高浓度COD。
[0050]通过步骤(I)培养后的活性污泥，即为富集培养菌液。
[0051]③菌种的分离:
通过稀释平板法，以固体LB培养基为分离培养基，从已驯化的菌液中分离出各种细菌，并对各菌株进行纯化。
[0052]生物絮凝剂产生菌的筛选
(I)初筛
将分离纯化出的蜡质芽孢杆菌菌株接种于絮凝培养基中进行培养，将培养液离心，取上清液进行絮凝活性的初筛，即:取2 mL培养液加入100 mL 4 g/L高岭土悬浮液中，同时以不加培养液的高岭土悬浮液进行对照，观察，以是否出现絮凝来判断是否具有絮凝活性从而进行初筛，若絮凝，则初步判定有产生物絮凝剂的能力，需进一步检测培养液中絮凝剂的絮凝活性大小；絮凝培养基配制如下=NaNO3 I g，KCl O g，K2HPO4 0.5 g，MgSO4 0.3g，FeSO4 0.01 g，鹿糖27 g和蒸馈水1L，除FeSO4外，其余原料均在115°C灭菌25 min，待灭完菌冷却后，将FeSO4溶解于灭菌后的蒸馏水中，过滤，再将过滤后的FeSO4S液加入该培养基内，絮凝培养基PH 6.7 ; (2)复筛
将初筛出的具有絮凝能力的菌株分别接种于絮凝培养基中培养，45-50h后，以絮凝率的大小作为衡量菌株产絮凝剂能力的大小，从中选出具有生物絮凝剂产生的蜡质芽孢杆菌。筛选出的蜡质芽孢杆菌既能产絮凝剂，有去除污染物的能力。
[0053]利用蜡质芽孢杆菌处理制革废水COD的方法包括以下步骤:
(1)培养基配制=NaNO31.5g，KCl Og，K2HPO4 0.6 g，MgSO4 0.3 g，FeSO4 0.01 g，蔗糖28 g和蒸馏水1L，除FeSO4外，其余原料均在115°C灭菌25 min，待灭完菌冷却后，将FeSO4溶解于灭菌后的蒸馏水中，用灭菌过滤器过滤溶解的FeSO4，用无菌移液管吸取过滤后的FeSO4溶液加入该培养基内，培养基pH 6.7 ;
(2)发酵:将蜡质芽孢杆菌菌种接种至装有50mL培养基的250mL摇瓶，放在转速为180r/min的摇床内，于32-38°C条件下振荡培养45h ;培养后的菌种再接种至装有10mL培养基的250mL锥形瓶，然后于32°C条件下振荡培养24h得发酵液，菌种与培养基的接种量比例是体积比1:8 ;发酵液是指步骤(2)经过培养24h的培养液。
[0054](3 )生物絮凝剂的提取:将发酵液放入转速为10000r/min的离心机中，离心1min,收集上清液，然后在上清液中加入4倍体积的预冷乙醇，温度4°C，所得混合物在5°C下静置5h后再将混合物放入转速为lOOOOr/min的离心机中，离心12min，收集沉淀，用蒸馏水溶解3h，将溶解液放入转速为10000r/min的离心机中，离心12min，所得沉淀物再用蒸馏水溶解3h，反复透析2次，至鼻子闻不到乙醇味为止，以去除小分子和残留的有机溶剂，最后将离心的沉淀物置于真空冷冻干燥机中冷冻干燥，可得到生物絮凝剂成品；
(4)废水处理:将生物絮凝剂加入装有制革废水的烧杯中，于磁力搅拌器上进行反应；将0.4?1.2g生物絮凝剂加入装有10mL制革废水的烧杯中，然后将烧杯置于磁力搅拌器中搅拌，先以200r/min的速度搅拌2min，再以50r/min的速度搅拌lOmin，静置20min后过滤，测定废水处理前后的COD值。
[0055]当制革废水中初始COD值为1500mg/L时，该生物絮凝剂能去除其中C0D1102.5mg/L，去除效率达到73.5%，降解速度快，没有二次污染。
[0056]实施例4 蜡质芽孢杆菌的筛选
(I)菌种的富集培养:
采集制革厂的活性污泥接种至已灭菌并冷却的LB培养基中，污泥与培养基的培养比例是体积比约1:12，于32°(:摇床培养4611，LB培养基配制如下:蛋白胨12g，酵母膏7g，NaC12g，加蒸馏水到 lOOOmL，pH7.2，125°C灭菌 25min ;摇床转速是 100r/min。
[0057](2)菌种的驯化:
将5mL富集培养菌液接种于10mL含有制革废水的LB培养基中28_32°C振荡培养45-50h，并逐渐增加制革废水的量至40 mL、60 mL、80 mL，逐级驯化；逐级驯化，其目的是为了使培养的菌种能够适应制革废水的高浓度COD。
[0058]通过步骤(I)培养后的活性污泥，即为富集培养菌液。
[0059]③菌种的分离:
通过稀释平板法，以固体LB培养基为分离培养基，从已驯化的菌液中分离出各种细菌，并对各菌株进行纯化。
[0060]生物絮凝剂产生菌的筛选
(1)初筛
将分离纯化出的蜡质芽孢杆菌菌株接种于絮凝培养基中进行培养，将培养液离心，取上清液进行絮凝活性的初筛，即:取2 mL培养液加入100 mL 4 g/L高岭土悬浮液中，同时以不加培养液的高岭土悬浮液进行对照，观察，以是否出现絮凝来判断是否具有絮凝活性从而进行初筛，若絮凝，则初步判定有产生物絮凝剂的能力，需进一步检测培养液中絮凝剂的絮凝活性大小；絮凝培养基配制如下=NaNO3 3 g，KCl I g，K2HPO4 1.5 g，MgSO4 0.7 g，FeSO4 0.01 g，鹿糖32 g和蒸馈水1L，除FeSO4外，其余原料均在125°C灭菌25 min，待灭完菌冷却后，将FeSO4溶解于灭菌后的蒸馏水中，过滤，再将过滤后的FeSO4S液加入该培养基内，絮凝培养基PH 7.2 ;
(2)复筛
将初筛出的具有絮凝能力的菌株分别接种于絮凝培养基中培养，50h后，以絮凝率的大小作为衡量菌株产絮凝剂能力的大小，从中选出具有生物絮凝剂产生的