试验设计如下：实验采用随机区组设计，设置3个重复区，每个重复区随机设 置五个处理区，分别为VdAL处理1区、VdAL处理2区、VdAL处理3区、VdAL处理4区和对 照处理区，每个处理区的面积均为0. 1亩。
[0225]在VdAL处理1区的黄瓜品种津杂1号的开花初期和第一次处理后第15天分别按 照下述方式喷施VdAL:采用顶喷（人工喷施）的方式对黄瓜叶片喷施实施例1的稀释300 倍的VdAL每亩喷施45-50kg，得到稀释300倍的VdAL处理的黄瓜，将第1次喷施维达利安 喷施当天记为喷施第0天。喷施时间在早晨或傍晚，最好避开正午高溫时段；喷施时严禁与 药物及肥料混合；喷施后若2小时内下雨需要补喷施一次。 阳226] 按照VdAL处理1区的处理方法，将稀释300倍的VdAL替换为稀释600倍的VdAL 对VdAL处理2区进行处理，其他步骤均不变，得到稀释600倍的VdAL处理的黄瓜。 阳227] 按照VdAL处理1区的处理方法，将稀释300倍的VdAL替换为稀释900倍的VdAL 对VdAL处理3区进行处理，其他步骤均不变，得到稀释900倍的VdAL处理的黄瓜。 阳22引按照VdAL处理1区的处理方法，将稀释300倍的VdAL替换为稀释2000倍的VdAL对VdAL处理4区进行处理，其他步骤均不变，得到稀释2000倍的VdAL处理的黄瓜。 阳229] 按照VdAL处理1区的处理方法，将稀释300倍的VdAL替换为清水对对照处理区 进行处理，其他步骤均不变，得到未处理的黄瓜。 阳230] 在喷施第20天，统计黄瓜的结果情况，结果发现，维达利安可W提高黄瓜的座果 率、促进黄瓜的膨大，提高黄瓜产量（图3)，表明，维达利安可W促进黄瓜的营养生长和生 殖生长。在喷施第20天，观察黄瓜的长势，结果发现，维达利安处理的黄瓜的长势好于未处 理的黄瓜的长势（图4)，表明，维达利安可W促进黄瓜的营养生长。在喷施第45天，观察黄 瓜的衰老情况，结果发现，未处理的黄瓜的衰老情况比维达利安处理的黄瓜的衰老情况严 重（图5)，表明，维达利安可W延缓黄瓜的衰老。 阳231] 2、维达利安可W提高圣女果的座果率、提高产量 阳232] 田间试验设计如下：实验采用随机区组设计，设置3个重复区，每个重复区随机设 置两个处理区，分别为VdAL处理区和对照处理区，每个处理区的面积均为1亩。
[023引在VdAL处理区的圣女果品种京丹2号的开花期按照下述方式VdAL喷施1次：采 用顶喷（人工喷施）的方式对圣女果叶片喷施实施例1的稀释2000倍的VdAL每亩喷施 45-50kg，得到稀释2000倍的VdAL处理的圣女果，将维达利安喷施当天记为处理第0天。喷 施时间在早晨或傍晚，最好避开正午高溫时段；喷施时严禁与药物及肥料混合；喷施后若2 小时内下雨需要补喷施一次。
[0234] 按照VdAL处理区的处理方法，将稀释2000倍的VdAL替换为清水对对照处理区进 行处理，其他步骤均不变，得到未处理的圣女果。 阳235] 在处理第7-10天，观察圣女果的结果情况，结果发现，维达利安可W提高圣女果 的座果率，提高圣女果产量（图6)，表明，维达利安可W促进圣女果的生长。
[0236] 3、维达利安可W促进草替的生长 阳237] 田间试验设计如下：实验采用随机区组设计，设置3个重复区，每个重复区随机设 置两个处理区，分别为VdAL处理区和对照处理区，每个处理区的面积均为1亩。 阳23引在VdAL处理区的草替品种为丰香的开花期期按照下述方式VdAL喷施1次：采 用顶喷（人工喷施）的方式对草替叶片喷施实施例1的稀释2000倍的VdAL每亩喷施 45-50kg，得到稀释2000倍的VdAL处理的草替，将维达利安喷施当天记为处理第0天。喷 施时间在早晨或傍晚，最好避开正午高溫时段；喷施时严禁与药物及肥料混合；喷施后若2 小时内下雨需要补喷施一次。
[0239] 按照VdAL处理区的处理方法，将稀释2000倍的VdAL替换为清水对对照处理区进 行处理，其他步骤均不变，得到未处理的草替。
[0240] 在处理第7-10天，观察草替的生长情况，结果发现，维达利安可W促进草替的营 养生长（图7)。 阳241] 4、维达利安可W促进甜瓜的生长 阳242] 田间试验设计如下：实验采用随机区组设计，设置3个重复区，每个重复区随机设 置两个处理区，分别为VdAL处理区和对照处理区，每个处理区的面积均为1亩。 阳243] 在VdAL处理区的超级翠宝香甜瓜品种的苗期按照下述方式VdAL喷施1次：采 用顶喷（人工喷施）的方式对甜瓜叶片喷施实施例1的稀释2000倍的VdAL每亩喷施45-50kg，得到稀释2000倍的VdAL处理的甜瓜，将维达利安喷施当天记为处理第0天。喷 施时间在早晨或傍晚，最好避开正午高溫时段；喷施时严禁与药物及肥料混合；喷施后若2 小时内下雨需要补喷施一次。
[0244] 按照VdAL处理区的处理方法，将稀释2000倍的VdAL替换为清水对对照处理区进 行处理，其他步骤均不变，得到未处理的甜瓜。
[0245] 在处理第30天，观察甜瓜的生长情况，结果发现，维达利安可W促进甜瓜的营养 生长（图8)。 阳246] 5、维达利安可W促进甜椒的生长 阳247] 田间试验设计如下：实验采用随机区组设计，设置3个重复区，每个重复区随机设 置两个处理区，分别为VdAL处理区和对照处理区，每个处理区的面积均为1亩。 阳248] 在VdAL处理区的甜椒品种眷优816的开花期按照下述方式VdAL喷施1次：采用顶 喷（人工喷施）的方式对甜椒叶片喷施实施例1的稀释1000倍的VdAL每亩喷施45-50kg，得到稀释1000倍的VdAL处理的甜椒，将维达利安喷施当天记为处理第0天。喷施时间在 早晨或傍晚，最好避开正午高溫时段；喷施时严禁与药物及肥料混合；喷施后若2小时内下 雨需要补喷施一次。
[0249] 按照VdAL处理区的处理方法，将稀释1000倍的VdAL替换为清水对对照处理区进 行处理，其他步骤均不变，得到未处理的甜椒。 阳巧0] 在处理第7-10天，观察甜椒的生长情况，结果发现，喷施维达利安后，甜椒长势巧 壮、叶片深绿（图9)，表明维达利安可W促进甜椒的营养生长。 阳251] 6、维达利安可W促进大豆的出苗与生长 阳巧2] 将大豆品种中华大豆王种子分别在实施例1的稀释1000倍的VdAL稀释3000倍 的VdAL稀释5000倍的VdAL稀释10000倍的VdAL稀释20000倍的VdAL和清水中浸种24小时，然后在托盘（托盘中铺有两层用无菌水浸湿的无菌滤纸）中于25°C下催芽72小 时，统计大豆种子发芽率。每种处理100粒种子，实验重复=次。 阳巧3] 结果显示（图10)，稀释3000倍的VdAL和稀释5000倍的VdAL大豆种子后，发芽 率均有提高。表明，维达利安可W促进大豆种子的发芽。 阳巧4] 实验二： 阳巧5] 将大豆品种中华大豆王种子分别在实施例1的稀释5000倍的VdAL和清水中浸种 24小时，然后播种于±壤中，将播种当天记为播种第1天，在播种第20天将大豆幼苗从±壤 中取出，称量大豆幼苗鲜重（图11)。 阳巧6] 结果显示，用稀释5000倍的VdAL和清水处理的大豆的单株鲜重分别为 1. 59 + 0. 3g和1. 36 + 0. 3g，稀释5000倍的VdAL浸种后，大豆单株鲜重提高了 16. 91 % ; 用稀释5000倍的VdAL和清水处理的大豆的地上部分单株鲜重分别为1. 36 + 0. 3g和 1. 06 + 0. 3g，稀释5000倍的VdAL浸种后，大豆地上部分单株鲜重提高了 28. 30%，显著高于 清水处理的大豆的地上部分单株鲜重。表明，维达利安可W促进大豆的营养生长。
【主权项】
1.蛋白质在提尚植物广品品质中的应用；所述蛋白质为如下Al)或A2)或A3): Al)氨基酸序列为序列1的蛋白质； A2)在序列1的氨基酸序列中经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基 得到的具有相同功能的由Al)衍生的蛋白质； A3)在Al)或A2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。2. 与权利要求1所述蛋白质相关的生物材料在提尚植物广品品质中的应用； 所述生物材料，为下述BI)至B20)中的任一种： BI)编码权利要求1所述蛋白质的核酸分子； B2)含有BI)所述核酸分子的表达盒； B3)含有BI)所述核酸分子的重组载体； B4)含有B2)所述表达盒的重组载体； B5)含有BI)所述核酸分子的重组微生物； B6)含有B2)所述表达盒的重组微生物； B7)含有B3)所述重组载体的重组微生物； B8)含有B4)所述重组载体的重组微生物； B9)含有BI)所述核酸分子的转基因植物细胞系； B10)含有B2)所述表达盒的转基因植物细胞系； B11)含有B3)所述重组载体的转基因植物细胞系； B12)含有B4)所述重组载体的转基因植物细胞系； B13)含有BI)所述核酸分子的转基因植物组织； B14)含有B2)所述表达盒的转基因植物组织； B15)含有B3)所述重组载体的转基因植物组织； B16)含有B4)所述重组载体的转基因植物组织； B17)含有BI)所述核酸分子的转基因植物器官； B18)含有B2)所述表达盒的转基因植物器官； B19)含有B3)所述重组载体的转基因植物器官； B20)含有B4)所述重组载体的转基因植物器官。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：B1)所述核酸分子为如下bl)或b2)或 b3)的基因： bl)核苷酸序列是序列表中序列2的cDNA分子或DNA分子； b2)与bl)限定的核苷酸序列具有75%或75%以上同一性，且编码权利要求1所述蛋 白质的cDNA分子或基因组DNA分子； b3)在严格条件下与bl)限定的核苷酸序列杂交，且编码权利要求1所述蛋白质的cDNA分子或基因组DNA分子。4. 一种提高植物产品品质的方法，包括对目的植物施用权利要求1中所述蛋白质、权 利要求2或3中所述生物材料或生物制剂；所述生物制剂的活性成分为权利要求1中所述 蛋白质或权利要求2或3中所述生物材料。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述生物制剂按照方法1)制备，所述方 法1)为：培养权利要求2或3中B5)-B8)中任一所述重组微生物，使所述蛋白质的编码基 因表达，得到所述生物制剂。6. 根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于：所述方法1)为如下11)和12): 11) 培养权利要求2或3中B5)-B8)中任一所述重组微生物，使所述编码基因表达，得 到表达所述蛋白质的重组微生物培养物； 12) 破碎所述微生物培养物中的菌体，得到所述生物制剂。7. 权利要求4-5中任一所述生物制剂在提高植物产品品质中的应用。8. 根据权利要求1-3任一所述的应用、权利要求4-6中任一所述方法或权利要求7所 述应用，其特征在于：所述提高植物产品品质为下述Hl和/或H2 : H1、提高所述植物产品营养成分的含量和/或提高所述植物产品中微量元素的含量；H2、通过促进所述植物产品的成熟而提高所述植物产品的品质。9. 根据权利要求1、2、3、7或8所述的应用或权利要求4-6中任一所述方法，其特征在 于：所述植物为双子叶植物或单子叶植物。10. 根据权利要求9所述的应用或方法，其特征在于：所述双子叶植物为下述a)、b)、 c)或d): a) 萌芦科植物； b) 西瓜； c) 锦葵科植物； d) 棉花。
【专利摘要】本发明公开了蛋白质VdAL在提高植物产品品质中的应用。本发明所提供的应用中，蛋白质VdAL为下述A1)或A2)或A3)：A1)氨基酸序列为序列1的蛋白质；A2)在序列1的氨基酸序列中经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基得到的具有相同功能的由A1)衍生的蛋白质；A3)在A1)或A2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。实验证明，本发明的蛋白质VdAL及其生物制剂可以提高植物产品品质。
【IPC分类】C07K14/00, C12N5/10, A01H5/00, C12N15/11
【公开号】CN105198967
【申请号】CN201510691295
【发明人】齐俊生, 巩志忠, 洪旭辉, 张定朋
【申请人】中国农业大学
【公开日】2015年12月30日
【申请日】2015年10月22日