CZ5、节杆菌Arthrobacter sp. WH16、链 霉菌Streptomyces sp.WH36和小单抱菌Micromonospora sp.WH13四株菌分别进行发酵， 获得发酵菌液。
[0095] 枯草芽孢杆菌采用LBG培养基（0.5%葡萄糖，1%蛋白胨，0.5%酵母膏，1%氯化 钠）培养；2%接种量接种于1^6液体培养基中，200印111，培养3611。
[0096] 栗褐链霉菌采用SCP培养基（1.0 %蔗糖，2.0 %玉米粉，蛋白胨0.3%，豆饼粉 3. 0%，0. 1 %磷酸二氢钾，硫酸铵0.5%，0. 1 %氯化钠，0.3%碳酸钙）培养；2%接种量接种 于SCP液体培养基中，200rpm，培养36h。
[0097] 节杆菌和橙黄小单孢菌均采用LB培养基（1 %胰蛋白胨，0. 5%酵母膏，1 %氯化 钠）培养。分别以2 %接种量接种于LB液体培养基中，200rpm，培养36h。
[0098] 4)高浓度单株菌粉制备：上述各单菌株发酵结束后，分别向各菌株发酵液中加入 载体（30%，质量比），进行板框压滤，得到菌泥；随后，按菌泥的质量比10%加入上述保护 剂，经乳化均匀后，通过喷雾干燥方法（进风温度l〇〇±l°C、排风温度50土1°C、塔壁温度 50±1°(：、进样流速70〇111171^11)，制备成高浓度菌粉；
[0099] 5)将制备得到的四种单株菌粉按8:30:20:5质量比混和，使最终菌粉中的活 菌数为：芽抱杆菌Bacillussp.CZ5 为 8. 0X109cfu/g;节杆菌Arthrobactersp.WH16 为 6.0X109cfu/g、链霉菌Streptomycessp.WH36 为S.OXICdfu/g、小单抱菌 Micromonosporasp.WH13 为 5.OX108cfu/g〇
[0100] 小麦秸杆直接还田中应用实施例3制备的复合菌剂的试验效果研究
[0101] 实验地点：安徽省亳州市涡阳县楚店镇农田
[0102] 实验材料：小麦秸杆，实施例3制备的秸杆还田复合菌剂，玉米（科玉186)
[0103] 实验设计：设置两个实验点，每个实验点设两个处理，每个处理面积不小于0. 5 亩，处理随机排列，保证实验条件基本相同。
[0104] 处理1 :不加菌剂，小麦秸杆直接还田。
[0105] 处理2 :使用实施例3制备的秸杆还田复合菌剂，小麦秸杆直接还田。
[0106] 施用方法：将小麦秸杆粉碎（粒径为10-15cm)后，按每亩秸杆还田复合菌剂2公 斤均匀撒入，之后将其轻翻于地表下2-lOcm层。
[0107] 秸杆降解速率测定
[0108] 在处理后的第7天和第21天，采用灰分示踪法，测定小麦秸杆中纤维素、半纤维素 的分解率，以及秸杆的总分解率。实验重复3次，结果取平均值。
[0109] 土传病害防治效果测定
[0110] 采用人工接种病原菌，菌种为3种常见玉米土传病原菌（大斑凸脐蠕 抱Exserohilumturcicum(Pass.)LeonardetSuggs、玉蜀泰平脐懦抱Bipolaris maydis(NisikadoetMiyake)Shoem和PucciniasorghiSchw)。玉米播种前，将本发明的 复合菌剂、3种病原菌以及还田小麦秸杆一起均匀翻埋至耕层土壤，以只接种3种病原菌但 未施加复合菌剂的田块为对照。每处理3次重复，随机排列，实验条件基本相同。分别于玉 米拔节期、灌浆期在每小区5点取样，每点调查25株玉米发病情况，并计算病情指数及防 效。
[0111] 试验结果：
[0112] 如表5所示，处理2中，在施用实施例3制备的秸杆还田复合菌剂后第7天，小麦 猜杆的纤维素和半纤维素的分解率分别达到16. 44%和15. 31%，猜杆结构有松散迹象。施 用21天后，纤维素和半纤维素的分解率分别达到71. 41%和65. 38%，秸杆出现明显降解 迹象，总重分解率达54%以上。由表6中的试验结果可知，处理2中，玉米各病害发生症 状明显减轻。本发明的复合菌剂对玉米大斑病、玉米小斑病和玉米锈病的防治效果可达 38. 6% -45. 4%。
[0113] 试验结果表明，施用本发明的复合菌剂，能大大提高秸杆还田中秸杆的腐解速度 和效率，提升土壤肥力，同时减轻病害发生，改善农产品品质，具有无毒无公害特点。
[0114] 表5秸杆还田复合菌剂应用于小麦秸杆直接还田的效果（单位：％ )
[0115]
[0116] 表6复合菌剂对玉米土传病害的防治效果（单位：％ )
[0117]
[0118] 以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精 神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 一种賴杆还田复合菌剂，其特征在于：其构成为：2. 如权利要求1所述的一种賴杆还田复合菌剂，其特征在于：其构成为：3. -种制备权利要求1或2所述的賴杆还田复合菌剂的方法，其特征在于：包括下述 步骤： 1) 载体制备：将200-400目的凹凸棒±、200-400目的草炭和200-400目的赔石按照质 量比2. 5:0. 5-1:1均匀混合得到载体，备用； 2) 保护剂制备：将200-400目的海藻糖和200-400目的谷氨酸钢按照质量比1:1. 5-2 均匀混合得到保护剂，备用； 3) 单株菌发酵：将芽抱杆菌Bacillussp.CZ5、节杆菌Art虹obactersp.WH16、链霉菌 Str巧tomycessp.W册6和小单抱菌Micromonosporasp.WH13四株菌分别进行发酵，获得发 酵菌液； 4) 高浓度单株菌粉制备：上述各单菌株发酵结束后，分别向各菌株发酵液中加入载 体，载体的质量比占20 % -30 %，进行板框压滤，得到菌泥；随后，按菌泥的质量比5-10 %加 入上述保护剂，经乳化均匀后，通过喷雾干燥方法，制备成高浓度菌粉； 5) 将制备得到的四种单株菌粉按8-10:5-30:10-20:1-5质量比混和。4. 如权利要求3所述的制备賴杆还田复合菌剂的方法，其特征在于： 所述步骤3)中单株菌发酵的具体方法为： 枯草芽抱杆菌采用LBG培养基培养；1 % -2 %接种量接种于LBG液体培养基中， 180-200巧m，培养 24-3化； 链霉菌采用8〔？培养基培养；1%-2%接种量接种于5〔？液体培养基中，180-200巧111， 培养24-3化； 节杆菌和澄黄小单抱菌均采用LB培养基培养，分别W1 % -2 %接种量接种于LB液体 培养基中，180-200巧m，培养24-3化。5. 如权利要求4所述的制备賴杆还田复合菌剂的方法，其特征在于：所述LBG培养基 成分为：0. 5%葡萄糖，1%蛋白腺，0. 5%酵母膏，1%氯化钢； 所述SCP培养基成分为：1.ο%薦糖，2.ο%玉米粉，蛋白腺0.3%，豆饼粉3.ο%，0.1% 憐酸二氨钟，硫酸锭0. 5%，0. 1%氯化钢，0. 3%碳酸巧； 所述LB培养基成分为：1 %膜蛋白腺，0. 5 %酵母膏，1 %氯化钢。6.如权利要求4所述的制备賴杆还田复合菌剂的方法，其特征在于：所述步骤4)中喷 雾干燥的具体条件为：进风溫度100 ± 5 °C、排风溫度50 ± 5 °C、塔壁溫度50 ± 3 °C、进样流速 600-700血/min。
【专利摘要】本发明公开了一种秸秆还田复合菌剂，其构成为：芽孢杆菌Bacillus？sp.CZ5：1.0×109cfu/g～8.0×109cfu/g；节杆菌Arthrobacter？sp.WH16：1.0×108cfu/g～6.0×109cfu/g；链霉菌Streptomyces？sp.WH36：1.0×109cfu/g～2.0×1010cfu/g；小单孢菌Micromonospora？sp.WH13？1.0×107cfu/g～5.0×108cfu/g。本发明还提供了一种上述秸秆还田复合菌剂的制备方法。本发明相比现有技术具有以下优点：多种秸秆降解菌/生防菌的协同作用，达到快速分解秸秆、抑制土壤病原菌，达到增加作物产量的目的。
【IPC分类】C12R1/29, C12R1/07, C12R1/465, C12R1/06, C12N1/20
【公开号】CN105238714
【申请号】CN201510650719
【发明人】吴丽芳, 黄胜威, 蔡冬清, 李明浩, 吴正岩, 赵薇薇, 熊世权
【申请人】中国科学院合肥物质科学研究院
【公开日】2016年1月13日
【申请日】2015年9月30日