异槲皮苷、槲皮素为研究对象，经过响应面 分析法对黄蜀葵花中黄酮类化合物提取工艺进行优化。由Design-Expert8.0.6软件进行 Box-Benhnken中心组合设计分析，得到黄蜀葵花中黄酮类化合物的最佳提取工艺参数为： 超声功率340W、提取时间60min、乙醇浓度60%、料液比0.1:15g/mL、提取温度50°C。三次工 艺验证得到黄蜀葵花中金丝桃苷平均得率为4.9711^/8，1?0 = 0.20%;异槲皮苷平均得率为 4 · 84mg/g，RSD= 2 · 07 % ;以及槲皮素平均得率为2 · 02mg/g，RSD= 4 · 46 %。
[0081]本发明的有益之处在于：本发明提供的一种黄蜀葵花中黄酮类化合物的提取工 艺，是在综合考虑了超声功率、乙醇浓度、提取时间、提取温度以及料液比等多个因素对黄 蜀葵花中黄酮类化合物提取的影响，并通过响应面模型对提取条件进行优化，得到的一种 新的提取工艺，能够简便、准确、高效的对黄蜀葵花中黄酮类化合物进行提取，为进一步分 离纯化和开发利用黄蜀葵花奠定了基础。与现有提取工艺相比较，本发明的提取工艺科学 合理、操作简便易实现，提取耗时时间短，提取条件温和、易控制，成本低廉，易于工业化大 生产，提取物黄酮类化合物得率高。本发明的提取工艺所采用溶剂安全无毒，避免对环境造 成污染。
【附图说明】
[0082]图1是本发明的样品(A)和对照品(B)的HPLC色谱图；
[0083]图2是超声功率对金丝桃苷、异槲皮苷、槲皮素得率的影响图；
[0084]图3是提取时间对金丝桃苷、异槲皮苷、槲皮素得率的影响图；
[0085]图4是乙醇浓度对金丝桃苷、异槲皮苷、槲皮素得率的影响图；
[0086]图5是提取温度对金丝桃苷、异槲皮苷、槲皮素得率的影响图；
[0087]图6是料液比对金丝桃苷、异槲皮苷、槲皮素得率的影响图；
[0088]图7是提取时间和超声功率对金丝桃苷得率交互影响的响应面3D图；
[0089]图8是乙醇浓度和超声功率对金丝桃苷得率交互影响的响应面3D图；
[0090]图9是乙醇浓度和提取时间对金丝桃苷得率交互影响的响应面3D图；
[0091]图10是乙醇浓度和超声功率对异槲皮苷得率交互影响的响应面3D图；
[0092]图11是提取时间和超声功率对异槲皮苷得率交互影响的响应面3D图；
[0093]图12是乙醇浓度和提取时间对异槲皮苷得率交互影响的响应面3D图；
[0094]图13是提取时间和超声功率对槲皮素得率交互影响的响应面3D图；
[0095]图14是乙醇浓度和超声功率对槲皮素得率交互影响的响应面3D图；
[0096]图15是乙醇浓度和提取时间对槲皮素得率交互影响的响应面3D图；
[0097]图中附图标记的含义：图1:1-金丝桃苷对照品，2-异槲皮苷对照品，3-槲皮素对照 品。
【具体实施方式】
[0098]以下结合具体实施例对本发明作进一步的介绍。
[0099]实施例1
[0100]黄蜀葵花中黄酮类化合物(金丝桃苷、异槲皮苷和槲皮素）的提取工艺，具体包括 以下步骤:将黄蜀葵花干燥后粉碎，过药典4号筛，取黄蜀葵花粉末，加入40 %乙醇，称重后， 在200W条件下超声提取60min，冷却至室温后加入乙醇补重，随后进行离心，取上清液过滤 即得。
[0101] 实施例2
[0102] 黄蜀葵花中黄酮类化合物(金丝桃苷、异槲皮苷和槲皮素）的提取工艺，具体包括 以下步骤:将黄蜀葵花干燥后粉碎，过药典4号筛，取黄蜀葵花粉末，加入70 %乙醇，称重后， 在400W和30°C条件下超声提取40min，冷却至室温后加入乙醇补重，随后进行离心，取上清 液过滤即得。
[0103] 实施例3
[0104] 黄蜀葵花中黄酮类化合物(金丝桃苷、异槲皮苷和槲皮素）的提取工艺，具体包括 以下步骤:将黄蜀葵花干燥后粉碎，过药典4号筛，取黄蜀葵花粉末，加入50 %乙醇，称重后， 在300W条件下超声提取50min，冷却至室温后加入乙醇补重，随后进行离心，取上清液过 0.45μπι微孔滤膜即得。其中，黄蜀葵花粉末与乙醇的料液比为:黄蜀葵花粉末的质量：乙醇 的体积=〇· 1:15g/mL。
[0105] 实施例4
[0106] 黄蜀葵花中黄酮类化合物(金丝桃苷、异槲皮苷和槲皮素）的提取工艺，具体包括 以下步骤:将黄蜀葵花干燥后粉碎，过药典4号筛，取黄蜀葵花粉末，加入90 %乙醇，称重后， 在350W和40°C条件下超声提取55min，冷却至室温后加入乙醇补重，随后以3500r/min的速 度离心20min，取上清液过0.45μπι微孔滤膜即得。其中，黄蜀葵花粉末与乙醇的料液比为:黄 蜀葵花粉末的质量:乙醇的体积=〇. 1:25g/mL。
[0107] 实施例5
[0108] 黄蜀葵花中黄酮类化合物(金丝桃苷、异槲皮苷和槲皮素）的提取工艺，具体包括 以下步骤:将黄蜀葵花干燥后粉碎，过药典4号筛，取黄蜀葵花粉末，加入80 %乙醇，称重后， 在250W和60°C条件下超声提取45min，冷却至室温后补重，随后以5000r/min的速度离心 lOmin，取上清液过0.45μπι微孔滤膜即得。其中，黄蜀葵花粉末与乙醇的料液比为:黄蜀葵花 粉末的质量:乙醇的体积=〇. 1:5g/mL。
[0109] 实施例6
[0110] 黄蜀葵花中黄酮类化合物(金丝桃苷、异槲皮苷和槲皮素）的提取工艺，具体包括 以下步骤:将黄蜀葵花干燥后粉碎，过药典4号筛，取黄蜀葵花粉末，加入60 %乙醇，称重后， 在340W和50°C条件下超声提取60min，冷却至室温后加入乙醇补重，随后以4000r/min的速 度离心15min，取上清液过0.45μπι微孔滤膜即得。其中，黄蜀葵花粉末与乙醇的料液比为:黄 蜀葵花粉末的质量:乙醇的体积=〇. 1:15g/mL。
【主权项】
1. 黄蜀葵花中黄酮类化合物的提取工艺，其特征在于:所述黄酮类化合物为金丝桃苷、 异槲皮苷和槲皮素。2. 根据权利要求1所述的黄蜀葵花中黄酮类化合物的提取工艺，其特征在于:包括以下 步骤:将黄蜀葵花干燥后粉碎，过筛，取黄蜀葵花粉末，加入乙醇后，超声提取，随后进行离 心，取上清液过滤即得。3. 根据权利要求2所述的黄蜀葵花中黄酮类化合物的提取工艺，其特征在于:包括以下 步骤:将黄蜀葵花干燥后粉碎，过药典4号筛，取黄蜀葵花粉末，加入40%~90 %乙醇，称重 后，在200W~400W条件下超声提取40min~60min，冷却至室温后加入乙醇补重，随后进行离 心，取上清液过〇. 45μπι微孔滤膜即得。4. 根据权利要求3所述的黄蜀葵花中黄酮类化合物的提取工艺，其特征在于:包括以下 步骤:将黄蜀葵花干燥后粉碎，过药典4号筛，取黄蜀葵花粉末，加入60 %乙醇，称重后，在 340W条件下超声提取60min，冷却至室温后加入乙醇补重，随后进行离心，取上清液过0.45μ m微孔滤膜即得。5. 根据权利要求2~4任一项所述的黄蜀葵花中黄酮类化合物的提取工艺，其特征在 于:所述超声提取在30°C~60°C条件下进行。6. 根据权利要求5所述的黄蜀葵花中黄酮类化合物的提取工艺，其特征在于:所述超声 提取在50°C条件下进行。7. 根据权利要求2~4任一项所述的黄蜀葵花中黄酮类化合物的提取工艺，其特征在 于:所述离心操作是以3500r/min~5000r/min的速度离心lOmin~20min。8. 根据权利要求7所述的黄蜀葵花中黄酮类化合物的提取工艺，其特征在于:所述离心 操作是以4000r/min的速度离心15min。9. 根据权利要求2~4任一项所述的黄蜀葵花中黄酮类化合物的提取工艺，其特征在 于：所述黄蜀葵花粉末与乙醇的料液比为：黄蜀葵花粉末的质量：乙醇的体积= 0.1: 5~ 25g/mL〇10. 根据权利要求9所述的黄蜀葵花中黄酮类化合物的提取工艺，其特征在于:所述黄 蜀葵花粉末与乙醇的料液比为:黄蜀葵花粉末的质量:乙醇的体积=〇. 1:15g/mL。
【专利摘要】本发明公开了一种黄蜀葵花中黄酮类化合物的提取工艺，本发明通过试验综合考察了超声功率、乙醇浓度、提取时间、提取温度以及料液比等多个因素对黄蜀葵花中黄酮类化合物提取的影响，并通过响应面模型对提取条件进行优化，得到的提取工艺能够简便、准确、高效的对黄蜀葵花中黄酮类化合物进行提取。与现有提取工艺相比较，本发明的提取工艺科学合理、操作简便易实现，提取耗时时间短，提取条件温和、易控制，成本低廉，易于工业化大生产，提取物黄酮类化合物得率高。
【IPC分类】C07H1/08, C07D311/40, C07H17/07, C07D311/30
【公开号】CN105440002
【申请号】CN201510916167
【发明人】江帆, 陈海龙, 李明
【申请人】贵州师范大学
【公开日】2016年3月30日
【申请日】2015年12月11日