硫酸锭120g，加水混合溶解，溶解后定容化。将化营养液均匀地混入8kg玉米 忍中，待玉米忍将营养液完全吸附后，置于低溫烘干箱中烘干，溫度不超过60°C。烘干后即 为培养基成品。
[00巧]采用中国工业微生物菌种保藏管理中屯、(CICC)保藏的黑曲霉CICC40021作为菌种 源。将培养基成品1.9kg装入20L的培养容器中，加入3.化水，121°C灭菌90min，冷却后接种 培养。培养条件为：前=天通风量为1:0.25体积：（体积?分钟），后屯天通风量为1:0.5体 积：（体积?分钟），前四天每隔8小时翻曲一次，后六天每隔24小时翻曲一次。培养10天结 束。教曲培养结束后每个容器取少量的教曲抱子进行摇瓶检验，合格后备用。
[00%] 300立方发酵罐生产应用： 取4个20L检验合格的教曲加入无菌水制成抱子悬浮液，直接接入30立方种子罐中培 养，种子成熟后接入发酵罐进行发酵，发酵结果与传统制曲的发酵结果对比如表一。
[0027]实施例二 玉米忍载体的选取和豆巧水解液的制备如前所述，营养液的配制如下；取玉米浆粉和 葡萄糖各200g，硫酸锭30g，豆巧酶解过滤液化，加水混合溶解，溶解后定容化。将化营养液 均匀地混入8kg玉米忍中，待玉米忍将营养液完全吸附后，置于低溫烘干箱中烘干，溫度不 超过60°C。烘干后即为培养基成品。
[002引将培养基成品1.9kg装入20L的培养容器中，加入3.化水，121°C灭菌90min，冷却后 接种培养。培养条件为:前=天通风量为1:0.25体积：（体积?分钟），后屯天通风量为1:0.5 体积:（体积?分钟），前四天每隔8小时翻曲一次，后六天每隔24小时翻曲一次。培养10天结 束。教曲培养结束后每个容器取少量的教曲抱子进行摇瓶检验，合格后备用。
[00巧]300立方发酵罐生产应用： 取4个20L检验合格的教曲加入无菌水制成抱子悬浮液，直接接入30立方种子罐中培 养，种子成熟后接入发酵罐进行发酵，发酵结果与传统制曲的发酵结果对比如表一。
[0030] 实施例S 玉米忍载体的选取和豆巧水解液的制备如前所述，营养液的配制如下；取玉米浆粉和 葡萄糖各400g，硫酸锭60g，豆巧酶解过滤液化，加水混合溶解，溶解后定容化。将化营养液 均匀地混入8kg玉米忍中，待玉米忍将营养液完全吸附后，置于低溫烘干箱中烘干，溫度不 超过60°C。烘干后即为培养基成品。
[0031] 将培养基成品3kg装入30L的培养容器中，加入4.8L水，121°C灭菌90min，冷却后接 种培养。培养条件为:前=天通风量为1:0.25体积:（体积?分钟），后屯天通风量为1:0.5体 积：（体积?分钟），前四天每隔8小时翻曲一次，后六天每隔24小时翻曲一次。培养10天结 束。教曲培养结束后每个容器取少量的教曲抱子进行摇瓶检验，合格后备用。
[0032] 300立方发酵罐生产应用： 取3个30L检验合格的教曲加入无菌水制成抱子悬浮液，直接接入30立方种子罐中培 养，种子成熟后接入发酵罐进行发酵，发酵结果与传统制曲的发酵结果对比如表一。
[0033] 实施例四 玉米忍载体的选取和豆巧水解液的制备如前所述，营养液的配制如下；取玉米浆粉和 葡萄糖各800g，硫酸锭120g，豆巧酶解过滤液1L，加水混合溶解，溶解后定容化。将化营养液 均匀地混入8kg玉米忍中，待玉米忍将营养液完全吸附后，置于低溫烘干箱中烘干，溫度不 超过60°C。烘干后即为培养基成品。
[0034] 将培养基成品1.9kg装入2化的培养容器中，加入3.化水，121°C灭菌90min，冷却后 接种培养。培养条件为:前=天通风量为1:0.25体积：（体积?分钟），后屯天通风量为1:0.5 体积:（体积?分钟），前四天每隔8小时翻曲一次，后六天每隔24小时翻曲一次。培养10天结 束。教曲培养结束后每个容器取少量的教曲抱子进行摇瓶检验，合格后备用。
[0(X3日]300立方发酵罐生产应用： 取4个20L检验合格的教曲加入无菌水制成抱子悬浮液，直接接入30立方种子罐中培 养，种子成熟后接入发酵罐进行发酵，发酵结果与传统制曲的发酵结果对比如表一。
[0036]表一
通过实施实例可W看出，本发明的制曲方法在生产中应用结果与传统制曲方式的结果 一致，发酵液中的菌球数量优于传统制曲，每罐接入教曲的单位数量减少了40-50倍，大大 降低了操作人员的工作量，并且由于数量少，用于生产的教曲能做到100%检验，保证了教曲 的可靠性。本发明的使用使教曲培养容器可扩性增强，容器容积已没有限制，但是在实际生 产中体积太大不利于人员的操作，故20-2化的培养容器为最佳。
【主权项】
1. 一种用于黑曲霉扩大培养的麸曲培养基，所述培养基以玉米芯颗粒为载体，并添加 黑曲霉生长所需的营养液;所述营养液由豆柏水解液、玉米浆粉、硫酸铵、葡萄糖组成。2. 如权利要求1所述的麸曲培养基，其特征在于，所述玉米芯颗粒是挑选吸水性好，干 净的玉米芯为原料，水分含量< 10%，用粉碎机粉碎，过筛，选出直径为5-10mm的颗粒。3. 如权利要求1所述的麸曲培养基，其特征在于，所述豆柏水解液是通过下述方法制备 的： 1) 将蛋白含量为46%的豆柏粉碎，过40目筛网； 2) 加水调浆，豆柏与水的重量比为1:6; 3 )用40%氢氧化钠调pH至6.5,然后加热至60 °C; 4) 加入碱性蛋白酶粉，酶粉加量为2000酶活力单位每克豆柏粉，保温酶解3小时； 5) 酶解后将酶解液加温至100°C，趁热过滤，将过滤液的固形物含量加水调至10%备用。4. 如权利要求1所述的麸曲培养基，其特征在于，所述营养液中各组分的份数为:玉米 浆粉和葡萄糖各200-800重量份，硫酸铵30-120重量份，豆柏酶解过滤液0-5体积份，所述豆 柏酶解过滤液的体积份为玉米浆粉、葡萄糖和硫酸铵每克对应豆柏酶解过滤液1L。5. 如权利要求1-4任一项所述的麸曲培养基的制备方法，其特征在于，所述制备方法包 括以下步骤： 1) 取玉米浆粉和葡萄糖各200-800g，硫酸铵30-120g，豆柏酶解过滤液0-5L，加水溶解， 溶解后定容6L; 2) 将上述步骤获得的6L营养液均匀地混入8kg玉米芯中，待玉米芯将营养液完全吸附 后，置于低温烘干箱中烘干，温度不超过60°C ;烘干后即为培养基成品。6. -种用于黑曲霉扩大培养方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤： 1) 按权利要求1-3所述的配方和权利要求4所述的方法制备培养基； 2) 将上述步骤制备的培养基装入培养容器中，按照培养基与水的重量比1:1.6~1.8的 比例加水，灭菌处理后冷却备用； 3) 向上述备用的培养容器中接种并置于28-32Γ培养室培养，通入无菌空气进行通风 培养，通气量为1 :〇. 1-1 .〇,培养过程中进行翻曲，培养前4天每8-12小时翻曲一次，其后每 12-24小时翻曲一次，培养8-12天结束； 4) 培养结束后，取水量麸曲孢子进行摇瓶检验，合格后供发酵使用。7. 如权利要求6所述的培养方法，其特征在于，所述步骤2)中的灭菌处理条件为121°C 灭菌90min。8. 如权利要求6所述的培养方法，其特征在于，所述步骤3)中的通风条件为：前三天通 风量为1:0.25体积，后七天通风量为1:0.5体积。9. 如权利要求6-8任一项所述的培养方法，其特征在于，所述步骤3)中的前四天每隔8 小时翻曲一次，后六天每隔2 4小时翻曲一次；培养10天结束。10. 如权利要求6-8任一项所述的培养方法，其特征在于，所述步骤3)中的培养容器为 20-25L。
【专利摘要】本发明提供了一种用于黑曲霉扩大培养的麸曲培养基及培养方法，针对现有技术中的黑曲霉菌种麸曲装填厚度不能过厚而导致的瓶数过多以及抽检率不高而导致的菌种污染等问题，通过采用玉米芯颗粒为培养基的载体并添加黑曲霉生长所需的营养液而制备出专用的培养基，并且对培养方式、制曲方法都进行了革新，很好地解决了现有技术的不足。使麸曲的检验率达到100%，排出了因麸曲问题造成的种子罐染菌，每个独立的培养单位的扩大及操作工艺流程的简化使操作人员减少80%，这不仅降低了企业的人员成本，而且有利于专业技术人员的培养，同时操作人员的减少也利于麸曲品质的波动，生产调度更加灵活，对企业的产量调整能快速及时的反馈。
【IPC分类】C12R1/685, C12N1/14
【公开号】CN105695341
【申请号】CN201610148706
【发明人】胡志杰, 刘桂芳, 刘振强, 高金宝, 蒋小东, 李小晔, 彭艳红, 孙福新, 高超
【申请人】江苏国信协联能源有限公司
【公开日】2016年6月22日
【申请日】2016年3月16日