专利名称：黑曲霉麸曲培养基及其制备方法和黑曲霉麸曲的培养方法
技术领域：
本发明涉及黑曲霉麸曲培养基及其制备方法和黑曲霉麸曲的培养方法。
背景技术：
目前制备黑曲霉麸曲的培养基采用单一的小麦麸皮，其培养基水分大约控制在65-70重量％左右，pH值大约在6. 3-6. 5之间。然而使用这样的麸皮培养基在灭菌过程中存在培养基易结块、灭菌效果不够高的问题。
发明内容
本发明的目的在于克服现有的黑曲霉麸曲培养基在灭菌过程中存在培养基易结 块、灭菌效果不够高的问题，提供一种新的黑曲霉麸曲培养基及其制备方法。本发明所提供的新的黑曲霉麸曲培养基，其在灭菌过程中不易结块、灭菌效果高。本发明的目的还在于提供一种黑曲霉麸曲的培养方法。即，本发明提供了一种黑曲霉麸曲培养基，其中，该培养基含有麸皮，以及稻壳和/或玉米芯颗粒，其中，麸皮，与稻壳和玉米芯颗粒的总量的重量比为I :0. 2-0.3，且该培养基的pH值为5. 5-6。本发明还提供了一种黑曲霉麸曲培养基的制备方法，其中，该方法包括将麸皮，与稻壳和/或玉米芯颗粒按照麸皮，与稻壳和玉米芯颗粒的总量的重量比I :0. 2-0. 3进行混合，并通过添加酸调节剂使得到的混合物的PH值为5. 5-6 ;然后，进行灭菌。本发明还提供了一种黑曲霉麸曲的培养方法，该方法包括在灭菌后的培养基中接入黑曲霉菌种进行麸曲培养，其中，所述灭菌后的培养基为本发明方法所得到的培养基。根据本发明所提供的新的黑曲霉麸曲培养基，在灭菌过程中灭菌效果高，推测其灭菌效果高的原因可能为1)由于麸皮培养基中包括麸皮、稻壳和/或玉米芯颗粒，通过这样的组合，使得在灭菌过程中，培养基不易结块，提高了灭菌效果；2)通过控制麸皮培养基的PH值，降低了微生物耐热性能，提高了灭菌效果。此外，通过使用上述黑曲霉麸曲培养基进行黑曲霉麸曲的培养，还能够提高黑曲霉麸曲的质量和稳定性。
具体实施例方式以下对本发明的具体实施方式
进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式
仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。本发明提供的黑曲霉麸曲培养基含有麸皮，以及稻壳和/或玉米芯颗粒，其中，麸皮，与稻壳和玉米芯颗粒的总量的重量比为I :0. 2-0. 3，且该培养基的pH值为5. 5-6。根据本发明，主要通过将麸皮、稻壳和/或玉米芯颗粒进行配合，并控制培养基的PH值来提高黑曲霉麸曲培养基在灭菌中的灭菌效果。其本身对麸皮、稻壳和玉米芯颗粒没有特别的要求，可以为本领域所常用的麸皮、稻壳和玉米芯颗粒。
如上所述，在本发明中，所述麸皮可以为现有技术中用于黑曲霉麸曲培养基的麸皮(例如小麦麸皮)，优选情况下，所述麸皮的淀粉含量为3-5重量％，水含量为65-70重量％，其颗粒大小为O. 4-2_;所述稻壳为稻谷外面的一层壳，通过将稻谷除去内部的米颗粒而得到，优选情况下，所述稻壳的颗粒大小为2-4mm ;所述玉米芯颗粒为剥离掉玉米粒后得到的玉米芯颗粒棒再经过粉碎而得到的颗粒，优选情况下，所述玉米芯颗粒的颗粒大小为l_3mm，优选为I. 5-2. 5mm。所述颗粒大小是指颗粒尺寸，是指颗粒上的两个不同点之间的最大直线距离。根据本发明，由于主要通过将在麸皮中配合稻壳和/或玉米芯颗粒来防止培养基在灭菌过程中进行结块，从而提高灭菌过程中的灭菌效果。因此对稻壳和玉米芯颗粒的成分以及成分的含量没有特别的要求，只要是通过上述方法得到的稻壳和玉米芯颗粒即可。根据本发明，所述麸皮，与稻壳和玉米芯颗粒的总量的重量比只要满足在灭菌过程中培养基不结块，且适合黑曲霉麸曲培养即可。一般情况下，所述麸皮，与稻壳和玉米芯颗粒的总量的重量比在I :0. 2-0. 3的范围内，即可满足上述要求。但从进一步提高得到的培养基在灭菌过程中的灭菌效果来考虑，更优选所述麸皮，与稻壳和玉米芯颗粒的总量的 重量比为I :0. 2-0. 25。在此，需要指出的是当仅使用稻壳和玉米芯颗粒中的一种时，所述麸皮，与稻壳和玉米芯颗粒的总量的重量比为麸皮与使用的物质(稻壳或玉米芯颗粒)的重量比；当同时使用稻壳和玉米芯颗粒时，所述麸皮，与稻壳和玉米芯颗粒的总量的重量比为麸皮重量与稻壳和玉米芯颗粒的总量的重量比。根据本发明，为了进一步提高得到的培养基在灭菌过程中的灭菌效果，优选所述培养基的PH值为5. 5-6 ;更优选所述培养基的pH值为5. 5-5. 8。根据本发明，可以通过添加酸调节剂来使所述培养基的pH值达到上述范围内。所述酸调节剂可以为本领域所常用的各种酸。例如，可以为盐酸、硫酸、醋酸和硫酸氢钠中的一种或多种。本发明还提供了黑曲霉麸曲培养基的制备方法，该方法包括将麸皮，与稻壳和/或玉米芯颗粒按照麸皮，与稻壳和玉米芯颗粒的总量的重量比I :0. 2-0. 3进行混合，并通过添加酸调节剂使得到的混合物的PH值为5. 5-6 ;然后，进行灭菌。在本发明的黑曲霉麸曲培养基的制备方法中，所述麸皮可以为现有技术中用于黑曲霉麸曲培养基的麸皮(例如小麦麸皮)，优选情况下，所述麸皮的淀粉含量为3-5重量％，水含量为65-70重量％，其颗粒大小为O. 4-2mm ;所述稻壳为稻谷外面的一层壳，通过将稻谷除去内部的米颗粒而得到，优选情况下，所述稻壳的颗粒大小为2-4_ ;所述玉米芯颗粒为剥离掉玉米粒后得到的玉米芯颗粒棒再经过粉碎而得到的颗粒，优选情况下，所述玉米芯颗粒的颗粒大小为优选为I. 5-2. 5mm。根据本发明的黑曲霉麸曲培养基的制备方法，所述麸皮，与稻壳和玉米芯颗粒的总量的重量比只要满足在灭菌过程中培养基不结块，且适合黑曲霉麸曲培养即可。一般情况下，所述麸皮，与稻壳和玉米芯颗粒的总量的重量比在I :0. 2-0. 3的范围内，即可满足上述要求。但从进一步提高得到的培养基在灭菌过程中的灭菌效果来考虑，更优选所述麸皮，与稻壳和玉米芯颗粒的总量的重量比为I :0. 2-0. 25。根据本发明的黑曲霉麸曲培养基的制备方法，为了进一步提高得到的培养基在灭菌过程中的灭菌效果，优选添加酸调节剂使得到的混合物的PH值为5. 5-6 ;更优选添加酸调节剂使得到的混合物的PH值为5. 5-5. 8。上述酸调节剂可以为本领域所常用的各种酸。例如，可以为盐酸、硫酸、醋酸和硫酸氢钠中的一种或多种。根据本发明的黑曲霉麸曲培养基的制备方法，该方法包括将得到的混合物进行灭菌，所述灭菌的条件可以本领域所常用的各种条件。例如，所述灭菌的条件包括在压力为
O.1-0. 13MPa、温度为 121_123°C下，灭菌 40-50 分钟。本发明提供的黑曲霉麸曲的培养方法包括在灭菌后的培养基中接入黑曲霉菌种进行麸曲培养，其特征在于，所述灭菌后的培养基为上述黑曲霉麸曲培养基的制备方法所得到的培养基。
根据本发明的黑曲霉麸曲的培养方法，黑曲霉菌种的接入量可以为本领域在培养黑曲霉麸曲时的常规接入量。例如，以每克培养基为基准，所述黑曲霉菌种的接入量为5 X IO5 9 X IO5个黑曲霉孢子；优选情况下，以每克培养基为基准，所述黑曲霉菌种的接入量为6 X IO5 8 X IO5个黑曲霉孢子。根据本发明的黑曲霉麸曲的培养方法，进行麸曲培养的条件可以为本领域在培养黑曲霉麸曲时常用的条件。例如，该培养的条件包括温度为30-37°C，水份63-68重量％，培养时间为7-11天；更优选温度为32-35°C，水份65-67重量％，培养时间为8_10天。以下将通过实施例对本发明进行详细描述，但本发明并不仅限于下述实施例。以下实施例中，无菌检测的方法为在每瓶灭菌后的培养基中加入IOOml无菌水，充分混合均匀后，将培养基中的水倒入至细菌培养基(LB培养基)中培养两天，然后通过目测以及镜检的方式方法进行无菌检测。无菌检测的结果按照以下公式进行计算得到无菌检测的结果=培养后有菌的瓶数/无菌检测的总瓶数X 100%。以下实施例中，黑曲霉麸曲中的黑曲霉孢子数可以按照血球平板计数法测得。具体地，该方法为称取Ig黑曲霉麸曲5组，每组中加入含吐蒽4重量％的无菌生理盐水，经过磁力搅拌器和超声波使孢子成为游离状态，分别在显微镜下进行孢子计数，取5组得到的数据的平均值。以下实施例中小麦麸皮通过以下方法获得将小麦经过除杂后，用水润麦，使水份均匀，达到14-15重量％，然后经过机械研磨过筛，然后再把麸皮通过打麸机强力打击与摩擦，把麸片上粘附的粉粒与麸皮分离，再经过刷粉机把麸片上的粉粒刷下，最后经过圆筛处理、多次淘洗得到小麦麸皮。小麦麸皮中水含量的测定称取IOg小麦麸皮,在90°C下烘干,烘干后的重量与称取的小麦麸皮的重量的百分比即为小麦麸皮中的水的含量。小麦麸皮中淀粉含量的测定根据GB/T 5009. 9-2008测定小麦麸皮中淀粉含量。实施例II)黑曲霉麸曲培养基的制备将小麦麸皮(颗粒大小为O. 4-2mm,水含量为68重量％、淀粉含量为4重量％)与稻壳(颗粒大小为2-3mm)按照重量比为I :0. 2进行混合均匀，并通过加入盐酸调节其pH值为5. 6-5. 7。将上述混合物分装为12瓶(每瓶50g)，然后在压力为O. 13MPa、温度为121°C下，灭菌40分钟，得到黑曲霉麸曲培养基。待冷却后随机选取10瓶进行无菌检测，其结果见表
I。另外，通过目视发现得到的培养基均无结块现象。2 )黑曲霉麸曲的培养在剩下的两瓶培养基中接入黑曲霉菌种(斜面菌种)，以每克培养基为基准，所述黑曲霉菌种的接入量为8 X IO5个孢子。培养的条件包括温度为32°C，水份65重量％，培养时间为9天，且每隔12小时进行翻麸一次，得到黑曲霉麸曲，通过目测发现其生长状态为孢子生长分布均匀，色黑，无杂色孢子，每克得到的黑曲霉麸曲中含有的孢子数如表2所示。实施例2I)黑曲霉麸曲培养基的制备 将小麦麸皮(颗粒大小为O. 4-1. 8_，水含量为70重量％、淀粉含量为3重量％)与稻壳(颗粒大小为2-4mm)按照重量比为I :0. 25进行混合均匀，并通过加入30重量％的硫酸水溶液调节其PH值为5. 5-5.6。将上述混合物分装为12瓶(每瓶50g)，然后在压力为O. 13MPa、温度为121°C下，灭菌40分钟，得到黑曲霉麸曲培养基。待冷却后随机选取10瓶进行无菌检测，其结果见表I。另外，通过目视发现得到的培养基均无结块现象。2)黑曲霉麸曲的培养在剩下的两瓶培养基中接入黑曲霉菌种(斜面菌种)，以每克培养基为基准，所述黑曲霉菌种的接入量为7X IO5个孢子。培养的条件包括温度为35°C，水份68重量％，培养时间为10天，且每隔12小时进行翻麸一次，得到黑曲霉麸曲，通过目测发现其生长状态为孢子生长分布均匀，色黑，无杂色孢子，每克得到的黑曲霉麸曲中含有的孢子数如表2所
/Jn ο实施例3I)黑曲霉麸曲培养基的制备将小麦麸皮(颗粒大小为O. 8-2. Omm,水含量为65重量％、淀粉含量为5重量％)与玉米芯颗粒(颗粒大小为1.5-2. 5mm)按照重量比为I :0. 2进行混合均匀，并通过加入硫酸氢钠调节其pH值为5. 7-5.8。将上述混合物分装为12瓶(每瓶50g)，然后在压力为
O.13MPa、温度为121°C下，灭菌40分钟，得到黑曲霉麸曲培养基。待冷却后随机选取10瓶进行无菌检测，其结果见表I。另外，通过目视发现得到的培养基均无结块现象。2)黑曲霉麸曲的培养在剩下的两瓶培养基中接入黑曲霉菌种(斜面菌种)，以每克培养基为基准，所述黑曲霉菌种的接入量为9X IO5个孢子。培养的条件包括温度为34°C，水份63重量％，培养时间为10天，且每隔12小时进行翻麸一次。得到黑曲霉麸曲，通过目测发现其生长状态为孢子生长分布均匀，色黑，无杂色孢子，每克得到的黑曲霉麸曲中含有的孢子数如表2所
/Jn ο实施例4按照实施例3的方法进行，不同的是，小麦麸皮与玉米芯颗粒的重量比为I :0. 28。待冷却后随机选取10瓶进行无菌检测，其结果见表I。另外，通过目视发现得到的培养基均无结块现象。此外，每克得到的黑曲霉麸曲中含有的孢子数如表2所示。对比例I
按照实施例I的方法进行，不同的是，培养基中未加入稻壳，且未调节pH值(pH值为6. 4)。得到黑曲霉麸曲培养基。待冷却后随机选取10瓶进行无菌检测，其结果见表I。另外，通过目视发现得到的培养基中有结块现象，且结块的瓶数的比例占到总瓶数的40%。此外，每克得到的黑曲霉麸曲中含有的孢子数如表2所示。对比例2按照实施例2的方法进行，不同的是，培养基中未加入稻壳，且未调节pH值(pH值为6. 3)。得到黑曲霉麸曲培养基。待冷却后随机选取10瓶进行无菌检测，其结果见表I。另外，通过目视发现得到的培养基中有结块现象，且结块的瓶数的比例占到总瓶数的20%。此外，每克得到的黑曲霉麸曲中含有的孢子数如表2所示。对比例3按照实施例3的方法进行，不同的是，培养基中未加入玉米芯颗粒，且未调节pH值(pH值为6. 3)。得到黑曲霉麸曲培养基。待冷却后随机选取10瓶进行无菌检测，其结果见表I。另外，通过目视发现得到的培养基中有结块现象，且结块的瓶数的比例占到总瓶数的30%。此外，每克得到的黑曲霉麸曲中含有的孢子数如表2所示。表I
权利要求
1.一种黑曲霉麸曲培养基，其特征在于，该培养基含有麸皮，以及稻壳和/或玉米芯颗粒，其中，麸皮，与稻壳和玉米芯颗粒的总量的重量比为I : O. 2-0. 3，且该培养基的pH值为.5.5-6。
2.根据权利要求I所述的培养基，其中，所述麸皮，与稻壳和玉米芯颗粒的总量的重量比为I O. 2-0. 25，培养基的pH值为5. 5-5. 8。
3.根据权利要求I或2所述的培养基，其中，所述麸皮的淀粉含量为3-5重量％，水含量为65-70重量％。
4.根据权利要求I或2所述的培养基，其中，所述麸皮的颗粒大小为O.4-2mm ;所述稻壳的颗粒大小为2-4mm ;所述玉米芯颗粒的颗粒大小为l_3mm。
5.一种黑曲霉麸曲培养基的制备方法，其特征在于，该方法包括将麸皮，与稻壳和/或玉米芯颗粒按照麸皮，与稻壳和玉米芯颗粒的总量的重量比I : O. 2-0. 3进行混合，并通过添加酸调节剂使得到的混合物的PH值为5. 5-6 ;然后，进行灭菌。
6.根据权利要求5所述的方法，其中，所述麸皮，与稻壳和玉米芯颗粒的总量的重量比为I : O. 2-0. 25 ;添加酸调节剂使得到的混合物的pH值为5. 5-5. 8。
7.根据权利要求5或6所述的方法，其中，所述麸皮的淀粉含量为3-5重量％，水含量为65-70重量％。
8.根据权利要求5或6所述的方法，其中，所述酸调节剂为盐酸、硫酸、醋酸和硫酸氢钠中的一种或多种。
9.根据权利要求5或6所述的方法，其中，所述麸皮的颗粒大小为O.4-2mm ;所述稻壳的颗粒大小为2-4_ ;所述玉米芯颗粒的颗粒大小为1-3_。
10.根据权利要求5所述的方法，其中，所述灭菌的条件包括在压力为O.1-0. 13MPa、温度为121-123°C下，灭菌40-50分钟。
11.一种黑曲霉麸曲的培养方法，该方法包括在灭菌后的培养基中接入黑曲霉菌种进行麸曲培养，其特征在于，所述灭菌后的培养基为权利要求5-10中任意一项所述方法所得到的培养基。
12.根据权利要求11所述的培养方法，其中，以每克培养基为基准，所述黑曲霉菌种的接入量为5 X IO5 9 X IO5个黑曲霉孢子。
全文摘要
本发明公开了一种黑曲霉麸曲培养基及其制备方法，该培养基含有麸皮，以及稻壳和/或玉米芯颗粒，其中，麸皮，与稻壳和玉米芯颗粒的总量的重量比为10.2-0.3，且该培养基的pH值为5.5-6。本发明所提供的新的黑曲霉麸曲培养基，其在灭菌过程中不易结块、灭菌效果高；并且通过使用上述黑曲霉麸曲培养基进行黑曲霉麸曲的培养，还能够提高黑曲霉麸曲的质量和稳定性。
文档编号C12N1/14GK102839132SQ201210358968
公开日2012年12月26日 申请日期2012年9月21日 优先权日2012年9月21日
发明者夏令和, 熊结青, 鲁小云, 钟华, 章辉平 申请人:中粮生物化学(安徽)股份有限公司