mol)，DI阳A(204g，1.58mol)，DMAP(20.8g，0.17mol)溶解 于己腊800mL中，在0~5°C下，缓慢滴加 PyBOP (910g，1. 75mol)的DMF溶液1200血，0. 5h 滴完，升至室温揽拌比，依次加入碳酸倭固体（192g，2mol)和DMF溶剂20〇111以揽拌均匀，室 温揽拌反应2h，TLC监控反应完全后，减压旋蒸去除大部分有机溶剂，加入水500mL和己酸 己醋600mU萃取分液，取有机层干燥后，浓缩至干，得到式III化合物244g，收率90%。
[0025] 实施例3氯基四氨化咯的制备 将式III化合物（244g，1. 31mol)溶于干燥的DMF1000血中，在温度5~10°C下，分批 加入Η聚氯氯（723g，3. 93mol )，加完，升温至37~42°C揽拌反应3~地，反应液降温至0~ 5°C，缓慢滴加饱和食盐水220血，滴完，维持0~5°C揽拌比，自然升温反应比，TLC监测反 应完全，将反应液缓慢倒入水800血和己酸己醋1000血中，用己酸己醋萃取水相多次，收集 有机层，用饱和碳酸氨钢溶液500mL洗涂两次，无水硫酸钢干燥，过滤，浓缩滤液得到黄色 油状物，35~45°C浓缩至干，得到式IV化合物lOOg，收率79%。
[0026] 实施例4维格列汀的制备 将式1￥化合物（100邑，1.05111〇1)，？780口（520邑，1111〇1)，01口64(116邑，0.9111〇1)，0嫩？ (12. 2g，0.1mol)加入无水四氨巧喃1000血中，揽拌溶解，降温至5~10。滴加式V化合 物（225g，Imol)的DMF溶液，（其中，式V化合物的合成详见专利申请W02011101861说明书 第17页的Example 1~3)严格控制滴加速度，使得内温不超过1(TC，滴加持续时间为比， 滴完，升至室温揽拌反应沈，TLC监控反应完全后，取少量反应液进行HPLC纯度检查，剩余 0. 2%金刚焼胺駿基物式V化合物没有反应完全，反应液中目标产物的纯度为96% ;反应液中 未检出两种相关杂质，也即：由于反应试剂与条件的优化，金刚焼胺二聚物(杂质B)和金刚 焼胺的醜脈物(杂质C)几乎未产生。向反应液中加入冰水浑灭，旋蒸除去大部分有机溶剂， 加入正了醇萃取两遍，合并有机层，干燥，浓缩至干，残余物中加入体积比2:1的了丽/异丙 醇1000血混合溶剂，升温至70~75°C溶解，加入娃藻± 80g，热过滤，滤液揽拌降温至5~ 1(TC析晶3~地，过滤，45~5(TC真空干燥3~地，得式I化合物267g，收率85%，HPLC纯 度为99. 7%。
[0027] 实施例5 (仅用PyBOP) 将式II化合物（lOOg，0. 46mol)溶解于DMF 250血中，在0~5°C下，缓慢滴加 PyBOP (332g，0. 64mol)的己腊400mL溶液，0. 5h滴完，升至室温揽拌比，依次加入碳酸倭固体 (57. 6g，0. 6mol)和DMF溶剂80mL，揽拌均匀，室温揽拌反应化，TLC监控反应完全后，旋蒸 除去大部分有机溶剂，加入水400mL和己酸己醋400mU萃取分液，取有机层干燥后，浓缩至 干，得到式III化合物75. 7g，收率89%。
[002引将式III化合物（75. 7g，0. 40m0U溶于干燥的DMF400血中，在温度5~1(TC下， 分批加入Η聚氯氯（220g，1. 2mol )，加完，升温至37~42°C揽拌反应3~地，反应液降温至 0~5°C，缓慢滴加饱和食盐水llOmL，滴完，维持0~5°C揽拌比，自然升温反应山TLC监 测反应完全，将反应液缓慢倒入水800mL和己酸己醋800mL中，收集有机层，用饱和碳酸氨 钢溶液500mL洗涂两次，无水硫酸钢干燥，过滤，浓缩滤液得到黄色油状物，35~45°C浓缩 至干，得到式IV化合物29g，收率75%。
[002引实施例6维格列汀的制备(仅用PyBOP) 将式IV化合物（29g，0. 3mol)，PyB0P(146g，0. 28mol)，加入无水四氨巧喃350血中，揽 拌溶解，降温至5~1(TC，滴加式V化合物（63g，0. 28mol)的DMF 150血溶液，严格控制滴 加速度，使得内温不超过l0°C，滴加持续时间为比，滴完，升至室温揽拌反应化，TLC监控反 应完全后，加入冰水浑灭，旋蒸除去大部分有机溶剂后，加入正了醇400mL萃取两次，合并 有机层，干燥，浓缩至干，残余物中加入体积比2:1的了丽/异丙醇lOOOmL混合溶剂，升温 至70~75°C溶解，加入娃藻± 60g，热过滤，滤液揽拌降温至5~10°C析晶3~地，过滤， 45~50°C真空干燥3~地，得式I化合物200g，收率82%。HPLC纯度为99. 5%。
[0030] 实施例7结构确证 W本发明实施例4的制备方法为例，所得维格列汀的理化性质和结构确证信息如下。
[0031] 烙点 149 ~150°C。
[0032] ESI-MS (m/z) : 304 [M+H]" 核磁氨谱iH-NMR (500MHz，CDCI3,附图2所示）；
δ 卵m ;1. 52 ~1. 67 (m，12Η，10, 12, 14, 16, 17, 18-Η) ; 1. 88 (s，IH，-ΝΗ-) ;2. 09 ~ 2. 37 (m，6H，3,4，ll，15-H);3. 37 ~3. 67 (m，甜，5,8-H，-OH);4. 75 ~4. 89 (dd，lH，2-H)。
[0033] 对比实施例8重复W02011101861实施例4的方法W及投料比试验，考察醜胺转化率。
[0034] 将k脯氨酸甲醋盐酸盐lOg悬浮于正了醇120血中揽拌lOmin，加入氨水65血， 室温揽拌lOh，分液，有机层干燥，浓缩后，加入30mL环己焼揽拌30min，收集所得固体，制得 k脯氨醜胺约4. 8g，收率69%。
[0035] 对比实施例9参照W02011101861实施例9的方法及投料比，将式V化合物和式IV化 合物进行缩合反应，考察醜胺转化率和杂质生成情况。
[0036] 将金刚焼胺駿基物式V化合物5g和氯基四氨化咯式IV化合物2. 2g溶解在二氯 甲焼50血中，再加入DCC 4. 5g和DMAP 2.8g，将该反应混合物室温揽拌化，此时，取少量反 应液进行HPLC纯度检查，剩余8%的金刚焼胺駿基物没有反应完全，反应液中目标产物的纯 度为85%;反应液中两种相关杂质较多，采用面积归一化法，发现金刚焼胺二聚物(杂质B) 液相纯度为3%，金刚焼胺的醜脈物(杂质C)液相纯度为2%。反应液中加水和正了醇萃取分 液，取有机层浓缩，加入甲基叔了基離lOOmU收集析出的固体，即得维格列汀粗品。将该粗 品采用了丽约120mL重结晶后，检测液相纯度为97. 5%。将重结晶产物进行核磁共振氨谱的 检测，得到如附图3所示的氨谱。
[0037] 将其与经本发明实施4方法制得的维格列汀的核磁氨谱(附图2)相比，不难发现， 附图3中在ppml. 52~1.67送个主要的多重峰两侧出现了较多的小杂峰。据分析，由于 DCC的使用，反应产物中很有可能残余少量DCU，导致二环己基脈DCU中的环己基在送些位 置出峰，影响目标产物的纯度。
[0038] W上实施例，仅是对本发明技术的进一步阐述，本发明技术并不限于此，本领域的 人员根据本发明所作的显而易见的改变和修饰同样包含在本发明范围之内。
【主权项】
1. PyBOP在维格列汀合成方法中的应用，其特征在于，在如下所示的合成路线中，应用 PyBOP将式II化合物的羧基转变为酰胺基；并且，应用PyBOP将式V化合物与式IV化合物 缩合反应形成酰胺；其中，PyBOP是"六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基"的缩写。2. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于，与PyBOP配合使用的还有二异丙基乙胺 DIPEA和二甲氨基吡啶DMAP。3. 根据权利要求2所述的应用，其特征在于，PyBOP :DIPEA :DMAP的摩尔比为1 :0. 9~ 1. 4 :0. 05 ~0. 2。4. 根据权利要求3所述的应用，其特征在于，PyBOP :DIPEA :DMAP的摩尔比为1 :0. 9 : 0.1。5. 根据权利要求4所述的应用，其特征在于，在应用PyBOP将式II化合物的羧基转变 为酰胺基的反应中，PyBOP :式II化合物的摩尔比为1. 2~1. 4 :1，反应温度为室温。6. 根据权利要求4所述的应用，其特征在于，在应用PyBOP将式IV化合物与式V化合 物缩合反应形成酰胺的反应中，PyBOP :式V化合物的摩尔比为1 :1，反应温度为室温。7. 根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述维格列汀合成方法按照如下步骤进 行： (1) 将L-脯氨酸溶解于氢氧化钠溶液中，加入（Boc) 20的四氢呋喃溶液，搅拌反应，制 得式II化合物，即Boc保护的L-脯氨酸； (2) 将式II化合物在PyBOP，DIPEA，DMAP的存在下，在乙腈与DMF的混合溶剂中与碳 酸铵反应，将式II化合物的羧基转变为酰胺基，制得式III化合物； (3) 将式III化合物在三聚氯氰TCT和溶剂DMF的条件下，脱水反应制得式IV化合物； 反应液不经处理，降温后缓慢滴加适量的水溶液，形成酸性反应液，原位脱除Boc保护基， 制得式IV化合物； (4) 将式IV化合物，PyBOP，DIPEA，DMAP加入DMF中，搅拌溶解，降温至5~1(TC，滴加 式V化合物的DMF溶液，严格控制滴加速度，使得内温不超过1(TC，且滴加持续时间为lh， 滴完，升至室温搅拌反应lh，TLC监控反应完全后，经后处理得到式I化合物，即维格列汀粗 品；向粗品中加入体积比2:1的丁酮/异丙醇混合溶剂，升温至70~75°C溶解，加入硅藻 土，热过滤，滤液搅拌降温至5~10°C析晶3~4h，过滤，45~50°C真空干燥3~4h，得到 维格列汀精制品。8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，步骤（3)中，三聚氯氰：式III化合物的 摩尔比为3 :1，且所述的"水"选自饱和食盐水，水的加入重量为三聚氯氰重量的0. 3~0. 5 倍，加水时需等到溶液降温至〇~5°C才能缓慢滴加，滴加过程控制反应溶液温度在5~ 10°C之间。
【专利摘要】本发明公开了一种维格列汀的新合成路线，主要是以廉价易得的L-脯氨酸为起始原料，经Boc保护，酰胺化，脱水反应，以及脱去Boc保护等步骤得到关键中间体氰基四氢吡咯，最后与金刚烷胺羧基物之间进行酰胺缩合反应，精制后得到维格列汀纯品。值得注意的是，本路线中两次用到高效的酰胺缩合剂PyBOP，使得式II化合物的羧基转变为酰胺基和最后一步缩合的反应均能够迅速高效的完成，反应时间大大缩短，降低了金刚烷胺羧基二聚物杂质的生成，方便后续的纯化和精制步骤。本发明工艺所用的原料和试剂价廉易得，成本降低，酰胺反应的效率高，杂质减少，十分符合工业化大生产的要求。
【IPC分类】C07D207/16
【公开号】CN105712919
【申请号】CN201410729026
【发明人】闵涛, 车晓明, 李上, 薛峪泉, 朱素华, 张峰
【申请人】南京优科生物医药研究有限公司, 南京优科制药有限公司, 南京优科生物医药集团股份有限公司
【公开日】2016年6月29日
【申请日】2014年12月4日