一种富硒蜜环菌粉的制备方法
【专利摘要】本发明涉及蜜环菌粉的制备方法，更具体而言，涉及一种富硒蜜环菌粉的制备方法；该方法是以蜜环菌作为富硒元素载体，采用液体深层培养技术在较短时间内通过蜜环菌培养代谢而得到富硒产品；斜面蜜环菌种培养：将麸皮煮汁加入亚硒酸钠，使培养基中硒含量达到30μg/ml?50μg/ml；摇瓶培养：将麸皮煮汁、蔗糖、蚕蛹粉、磷酸二氢钾、硫酸镁加入到亚硒酸钠的培养基中，使硒含量达到30μg/ml?50μg/ml；发酵培养：将葡萄糖、豆粉、蔗糖、蛋白胨、蚕蛹粉、硫酸镁、磷酸二氢钾加入亚硒酸钠的培养基中，使硒含量达到40μg/ml；发酵液分离：菌丝干燥粉碎，菌液减压浓缩浸膏，然后将两部分混合干燥，得到富硒蜜环菌粉。
【专利说明】
一种富砸蜜环菌粉的制备方法
技术领域
[0001] 本发明涉及蜜环菌粉的制备方法，更具体而言，涉及一种富硒蜜环菌粉的制备方 法。
【背景技术】
[0002] 蜜环菌(Armillaria mellea(vane exfr)Quel)属真菌门，担子菌纲、伞菌目，白蘑 科，蜜环菌属。蜜环菌是一种珍贵的食药用菌，在上世纪七十年代已由中国科学院药物研究 所纯种分离成功并工业化发酵培养生产。它具有定惊、息风的功能，对眩晕、头痛、惊风、癫 痫、肢体麻木、腰膝酸痛具有很高疗效。特别是它能够与中药天麻共生和自生的特性，人们 发现野生天麻的生长环境中必须有蜜环菌的存在，否则天麻就不会生长，因而现在人工栽 培天麻首先培养蜜环菌然后再将箭麻进行种植才能成功。硒是一种人体必须的微量元素， 广泛地存在于人体除了脂肪的所有器官中，人体内硒元素的缺乏，将会导致心血管疾病、肝 病、糖尿病、肿瘤呼吸系统、骨关节、胃肠道等各种疾病的发生，而补硒可以预防甚至治疗这 些疾病。目前硒对人体六大功效的研究已明确，资料表明硒对癌细胞有抑制作用，能降低 放、化疗的毒副作用，能清除肝炎病毒，保护肝脏，能增强血红蛋白的携氧能力，保障大脑、 心肌及全身各内腑脏器中氧的供应，稳定血脂、血压、预防心肌缺氧造成的突发性心肌梗 死。能够在血管中形成硒蛋白溶栓系统，降低血液粘稠度，减少心梗、脑梗、中风、脑溢血的 发生。营养心肌能有效降低糖尿病人并发症，保护胰岛不受损伤。目前市场上硒产品大部分 为在食品药品中直接加入无机硒盐，其生物活性不但难以吸收，而且还有毒性，使用效果也 不理想。据权威机构调查发现我国三分之二的地区属于缺硒地区，膳食结构中硒含量偏低。 鉴于此，有必要对其进行改进。
【发明内容】
[0003] 为了克服现有技术中所存在的不足，提供一种富硒蜜环菌粉的制备方法，该方法 是以蜜环菌作为富硒元素载体，采用液体深层培养技术在较短时间内通过蜜环菌培养代谢 而得到富硒产品。
[0004] 为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案为：
[0005] -种富硒蜜环菌粉的制备方法，按照以下步骤进行：
[0006] 斜面蜜环菌种培养:将麸皮煮汁加入亚硒酸钠，使培养基中硒含量达到30μg/ml- 50μg/ml；
[0007] 摇瓶培养:将麸皮煮汁、蔗糖、蚕蛹粉、磷酸二氢钾、硫酸镁加入到亚硒酸钠的培养 基中，使硒含量达到30μg/ml-50μg/ml;
[0008] 发酵培养:将葡萄糖、豆粉、鹿糖、蛋白胨、蚕蛹粉、硫酸镁、磷酸二氢钾加入亚硒酸 钠的培养基中，使硒含量达到40μg/ml;
[0009] 发酵液分离：菌丝干燥粉碎，菌液减压浓缩浸膏，然后将两部分混合干燥，得到富 硒蜜环菌粉。
[0010] 所述斜面蜜环菌种培养步骤中，将5%麸皮煮汁加入到3-5mg/100ml的亚硒酸钠， 培养条件为26 ± 1°C恒温条件培养13-15天，斜面长满菌丝。
[0011] 所述摇瓶培养步骤中，将5 %麸皮煮汁、2 %蔗糖、0.5 %蚕蛹粉、0.15 %磷酸二氢 钾、0.075%硫酸镁加入到3-511^/1001111亚硒酸钠的培养基中，硒含量达到3(^8/1111-5(^8/ ml，培养条件为750ml摇瓶装料200ml，转速120转/分，温度26±1°C在旋转摇床上培养至菌 丝浓度90 %以上，停止培养。
[0012] 所述发酵培养步骤中，将1 %葡萄糖、2 %豆粉、2 %蔗糖、0.5 %蛋白胨、0.5 %蚕蛹 粉、0.075 %硫酸镁、0.15%磷酸二氢钾加入到4mg/100ml亚硒酸钠的培养基中，硒含量达到 40μg/ml，培养条件为750ml摇瓶装料200ml，转速120转/分，温度26± 1°C在旋转摇床上培养 至菌丝浓度95%以上，停止培养。
[0013] 所述发酵液分离步骤中，菌丝在80°C以下干燥，菌液减压浓缩至比重1.30,两部分 混合后在80 °C以下干燥。
[0014] 与现有技术相比本发明所具有的有益效果为：
[0015] 本发明利用蜜环菌的特性，在蜜环菌深层培养时，培养基中加入无机硒盐，通过蜜 环菌生长过程中吸收代谢后得到生物源有机硒产品。本发明富硒蜜环菌粉生产投入成本 少、产量不受影响，质量方面增加有益人体所需的硒产品，给人们健康带来不可预计的社会 效应。
【具体实施方式】
[0016] 下面通过具体实施例对本发明作进一步详细的描述。
[0017] 菌种：选择蜜环菌(Armillaria mellea(vane exfr)Quel) 〇
[0018] 斜面培养：
[0019] 5%麸皮煮汁加入3~5mg/100ml的亚硒酸钠 (NaSe02 · 5H20)的培养基中，硒含量达 到30~50μg/ml (硒含量大于50μg/ml蜜环菌生长受影响，生长缓慢）。
[0020] 培养条件:26 ± 1°C恒温条件下培养13~15天。斜面长满菌丝。
[0021] 上述的5%是指本批配料时，所配体积(在操作中比重视为1)的5%，如:本次需配 2000毫升，操作如下:先称量100克麸皮放入有刻度的配料容器中，加水至刻度，搅拌均匀后 煮沸30分钟，用药用精制纱布两层过滤，滤液补水至刻度得到5%的麸皮液。下述的百分比 均此相同，均是先称量固形物然后再加入经煮沸后的滤液至刻度，搅拌均匀后分装于摇瓶 中。
[0022]摇瓶培养基：
[0023] 5%麸皮煮汁、2%蔗糖、0.5%蚕蛹粉、0.15%磷酸二氢钾、0.075%硫酸镁加入 3mg/100ml~5mg/100ml的亚硒酸钠 (NaSe〇2 · 5H2〇)的培养基中，硒含量达到30~50μg/ml。 [0024]培养条件:750ml摇瓶装料200ml，转速120转/分，温度26±1°C在旋转摇床上培养6 ~8天。
[0025]发酵培养基：
[0026]葡萄糖1 %、豆粉2 %、蔗糖2 %、蛋白胨0.5 %、蚕蛹粉0.5 %、硫酸镁0.075 %、磷酸 二氢钾0.15%、加入4mg/100ml的亚硒酸钠(NaSe〇2 · 5H20)的培养基中，硒含量达到40yg/ ml〇
[0027]培养条件：750ml摇瓶装料200ml，26 ±1°C转速120转/分在旋转摇床上培养5~7 天。
[0028]发酵液分离:菌丝体干燥，菌液减压浓缩至比重1.30，为浸膏，在60°C测定浸膏，测 定硒含量，菌丝与浸膏混合、干燥、粉碎，最后混合得到富硒蜜环菌粉。
[0029]实施过程：
[0030] 菌种的确认：
[0031 ]菌种来源:天麻蜜环菌原料生产菌，经国家批准的生产蜜环菌原料的菌种，蜜环菌 批准文号为：国药准字H14023100,执行标准为化学药品地方标准上升国家标准第十三册 WS-10001-(HD-1224)-2002〇
[0032] 斜面培养：5 % 麸皮煮汁每 100ml 加入 lmg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg 的亚硒 酸钠。每个加入量做5支，观察生长及记录，结果：
[0033]
[0035] 生长速度测量方法：以斜面接种点为中心向培养基边缘长出新菌丝的外缘直径， 当斜面横向长满后，以纵向边缘为测量点。
[0036] 结论:经测量生长速度1、2、3、4基本无大的差异，5稍有影响，6、7、8抑制菌丝生长。 选择3mg~5mg/100ml对斜面生长速度较为合理。特别是每100ml加8mg后菌丝不生长。
[0037]摇瓶培养：
[0038] 5 %麸皮煮汁、2 %蔗糖、0 · 5 %蚕蛹粉、0 · 15 %磷酸二氢钾、0 · 075 %硫酸镁加入 4mg/100ml的亚硒酸钠（NaSe〇2 · 5H2〇)使培养基中硒含量达到摇瓶装料 200ml，转速120转/分，温度26 ± 1°C在旋转摇床上培养至菌丝浓度90 %以上，停止培养。 [0039]发酵培养：
[0040] 葡萄糖1 %、豆粉2 %、蔗糖2 %、蛋白胨0.5 %、蚕蛹粉0.5 %、硫酸镁0.075 %、磷酸 二氢钾0.15%、亚硒酸钠 (恥36〇2.5!12〇)411^/10〇1111。75〇1111摇瓶装料20〇1111，转速120转/分， 温度26± 1°C，在旋转摇床上培养至菌丝浓度95%以上，时间146小时停止培养。
[0041] -配料表：
[0042]
[0043] 操作:按配料表依次准确称取(称量时一人称、一人复核)加饮用水至刻度，搅拌加 热至60°C分装于10个摇瓶中。120°C30分钟高压灭菌，冷却后移至菌种室。百级环境下接种 15~20ml，旋转摇床培养转速120转/分，温度26±1°C，培养126小时，菌丝浓度已长95%以 上，停止培养。连续三个批次，每个批次10个。用90目筛过滤分离，菌丝干燥粉碎，菌液浓缩 至比重1.30(温度60°C)与菌丝粉混合干燥，得到富硒蜜环菌粉，进行检验。
[0044] 检验结果：
[0045]
[0046] 结论:在整个实施过程中按照蜜环菌生产工艺执行与对照未发现差异，经检测数 据分析，符合蜜环菌粉标准要求，硒测定结果表明硒含量在预定范围中，在原产品基础上增 加硒含量及功能为一新功能产品，即富硒蜜环菌粉。
【主权项】
1. 一种富硒蜜环菌粉的制备方法，其特征在于，按照以下步骤进行： 斜面蜜环菌种培养:将麸皮煮汁加入亚硒酸钠，使培养基中硒含量达到30μg/ml-50yg/ ml; 摇瓶培养：将麸皮煮汁、蔗糖、蚕蛹粉、磷酸二氢钾、硫酸镁加入到亚硒酸钠的培养基 中，使硒含量达到30μg/ml-50μg/ml; 发酵培养:将葡萄糖、豆粉、蔗糖、蛋白胨、蚕蛹粉、硫酸镁、磷酸二氢钾加入亚硒酸钠的 培养基中，使硒含量达到40μg/ml; 发酵液分离:菌丝干燥粉碎，菌液减压浓缩浸膏，然后将两部分混合干燥，得到富硒蜜 环菌粉。2. 根据权利要求1所述的一种富硒蜜环菌粉的制备方法，其特征在于:所述斜面蜜环菌 种培养步骤中，将5 %麸皮煮汁加入到3-5mg/100ml的亚硒酸钠，培养条件为26 ± 1°C恒温条 件培养13-15天，斜面长满菌丝。3. 根据权利要求1所述的一种富硒蜜环菌粉的制备方法，其特征在于:所述摇瓶培养步 骤中，将5%麸皮煮汁、2%蔗糖、0 · 5 %蚕蛹粉、0 · 15%磷酸二氢钾、0 · 075%硫酸镁加入到3-5mg/100ml亚硒酸钠的培养基中，硒含量达到30μg/ml-50μg/ml，培养条件为750ml摇瓶装料 200ml，转速120转/分，温度26 ± 1°C在旋转摇床上培养至菌丝浓度90 %以上，停止培养。4. 根据权利要求1所述的一种富硒蜜环菌粉的制备方法，其特征在于:所述发酵培养步 骤中，将1 %葡萄糖、2%豆粉、2%蔗糖、0.5%蛋白胨、0.5%蚕蛹粉、0.075%硫酸镁、0.15% 磷酸二氢钾加入到4mg/100ml亚硒酸钠的培养基中，硒含量达到40μg/ml，培养条件为750ml 摇瓶装料200ml，转速120转/分，温度26± 1°C在旋转摇床上培养至菌丝浓度95%以上，停止 培养。5. 根据权利要求1所述的一种富硒蜜环菌粉的制备方法，其特征在于:所述发酵液分离 步骤中，菌丝在80°C以下干燥，菌液减压浓缩至比重1.30，两部分混合后在80°C以下干燥。
【文档编号】C12R1/645GK105838623SQ201610237063
【公开日】2016年8月10日
【申请日】2016年4月15日
【发明人】郭战平, 郭秉其, 张经国, 韩丽敏
【申请人】山西康欣药业有限公司