心萃取机(购自张家港市中沃机械有限公司，CTL50型离心萃取机)，同时泵入等体积的乙酸甲酯溶液，开启离心转速为2000rpm，进行3级串联离心萃取，收集有机溶剂相；在离心反萃取单元时，泵入与有机溶剂相等体积的去离子水，开启离心转速为2000rpm，进行离心反萃取，收集反萃取除杂质后的乙酸甲酯溶液，减压回收溶剂至干，所得干燥物进一步在50°C减压干燥完全，即得。
[0027]采用《中华人民共和国药典》2010版一部规定HPLC分析方法测定产品总黄酮的纯度；测定结果:产品总黄酮的纯度为87.4%。
[0028]实施例5
[0029]称取柿叶粗粉(30目)100g，加水1000ml，微沸煎煮60min，滤出煎煮液；滤渣加水800ml微沸煎煮35min，合并煎煮液，减压浓缩至比重1.06的浸膏，得柿叶粗提液；将柿叶粗提液泵入多级串联离心萃取机(购自张家港市中沃机械有限公司，CTL50型离心萃取机)，同时泵入等体积的乙酸丁酯溶液，开启离心转速为5000rpm，进行5级串联离心萃取，收集有机溶剂相；在离心反萃取单元时，泵入与有机溶剂相等体积的去离子水，开启离心转速为5000rpm，进行离心反萃取，收集反萃取除杂质后的乙酸丁酯溶液，减压回收溶剂至干，所得干燥物进一步在50°C减压干燥完全，即得。
[0030]采用《中华人民共和国药典》2010版一部规定HPLC分析方法测定产品总黄酮的纯度；测定结果:产品总黄酮的纯度为96.3%。
[0031]实施例6
[0032]称取柿叶粗粉(30目)100g，加水800ml，微沸煎煮120min，滤出煎煮液；滤渣加水800ml微沸煎煮30min，合并煎煮液，减压浓缩至比重1.09的浸膏，得柿叶粗提液；将柿叶粗提液泵入多级串联离心萃取机(购自张家港市中沃机械有限公司，CTL50型离心萃取机)，同时泵入有机溶剂相0.3倍体积的乙酸丁酯溶液，开启离心转速为2000rpm，进行4级串联离心萃取，收集有机溶剂相；在离心反萃取单元时，泵入与有机溶剂相等体积的去离子水，开启离心转速为2000rpm，进行离心反萃取，收集反萃取除杂质后的乙酸甲酯溶液，减压回收溶剂至干，所得干燥物进一步在50°C减压干燥完全，即得。
[0033]采用《中华人民共和国药典》2010版一部规定HPLC分析方法测定产品总黄酮的纯度；测定结果:产品总黄酮的纯度为84.1%。
[0034]实施例7
[0035]称取柿叶粗粉(30目)100g，加水800ml，微沸煎煮120min，滤出煎煮液；滤渣加水800ml微沸煎煮30min，合并煎煮液，减压浓缩至比重1.01的浸膏，得柿叶粗提液；将柿叶粗提液泵入多级串联离心萃取机(购自张家港市中沃机械有限公司，CTL50型离心萃取机)，同时泵入有机溶剂相0.3倍体积的乙酸甲酯溶液，开启离心转速为2500rpm，进行5级串联离心萃取，收集有机溶剂相；在离心反萃取单元时，泵入与有机溶剂相等体积的去离子水，开启离心转速为2500rpm，进行离心反萃取，收集反萃取除杂质后的乙酸甲酯溶液，减压回收溶剂至干，所得干燥物进一步在50°C减压干燥完全，即得。
[0036]采用《中华人民共和国药典》2010版一部规定HPLC分析方法测定产品总黄酮的纯度；测定结果:产品总黄酮的纯度为97.9%。
[0037]实施例8
[0038]称取柿叶粗粉(30目)1000g，加水12000ml，微沸煎煮50min，滤出煎煮液；滤渣加水8000ml微沸煎煮30min，合并煎煮液，减压浓缩至比重1.02，得柿叶粗提液；将柿叶粗提液泵入多级串联离心萃取机(购自张家港市中沃机械有限公司，CTL50型离心萃取机)，同时泵入等体积的乙酸丁酯溶液，开启离心转速为3000rpm，进行6级串联离心萃取，收集有机溶剂相；在离心反萃取单元时，泵入与有机溶剂相等体积的去离子水，开启离心转速为3000rpm，进行离心反萃取，收集反萃取除杂质后的乙酸丁酯溶液，减压回收溶剂至干，所得干燥物进一步在50°C减压干燥完全，即得。
[0039]采用《中华人民共和国药典》2010版一部规定HPLC分析方法测定产品总黄酮的纯度；测定结果:产品总黄酮的纯度为90.8%。
【主权项】
1.一种柿叶总黄酮的提取和纯化方法，其特征在于，包括以下步骤: (I)柿叶用水提取，得到柿叶粗提液；(2)柿叶粗提液中加入萃取有机溶剂，在多级离心萃取装置中进行多级离心萃取，获得有机溶剂相；(3)采用单级离心反萃取的方式除去有机溶剂相中的杂质，收集去除杂质后的有机溶剂相，浓缩、干燥，即得。
2.按照权利要求1所述的提取和纯化方法，其特征在于:步骤(I)中将干燥柿叶加8-12倍质量水，煎煮2次，每次煎煮0.5-2h，合并煎煮液，减压浓缩至比重1.01-1.15的浸膏，得到柿叶粗提液。
3.按照权利要求2所述的提取和纯化方法，其特征在于:步骤(I)中将干燥柿叶加10倍质量水，煎煮2次，每次煎煮35-60min，合并煎煮液，减压浓缩至比重1.06的浸膏，得到柿叶粗提液。
4.按照权利要求1所述的提取和纯化方法，其特征在于:步骤(2)中，按体积比计，柿叶粗提液与萃取溶剂的比例为1:0.3-1.2。
5.按照权利要求1所述的提取和纯化方法，其特征在于:所述的萃取溶剂包括但不限于乙酸乙酯、乙酸甲酯、乙酸丁酯、正丁醇或二氯甲烷中的任何一种或多种按照任意比例组成的混合物；优选为乙酸乙酯。
6.按照权利要求1所述的提取和纯化方法，其特征在于:步骤(2)中所述的多级离心萃取为2-10级离心萃取；优选为3-6级离心萃取；最优选为5级离心萃取；。
7.按照权利要求1所述的提取和纯化方法，其特征在于:步骤(2)中所述的离心转速为 lOOO-lOOOOrpm，优选为 1500_8000rpm，最优为 2000_3000rpm。
8.按照权利要求1所述的提取和纯化方法，其特征在于:步骤(3)中向有机溶剂相中加入去离子水进行离心反萃取。
9.按照权利要求8所述的提取和纯化方法，其特征在于:按体积比计，有机溶剂相与水相的比例为1:0.3-1.2。
10.按照权利要求1所述的提取和纯化方法，其特征在于:步骤(2)中所述的单级离心反萃取的离心转速为lOOO-lOOOOrpm，优选为1500_8000rpm，最优选为2000_3000rpm。
【专利摘要】本发明公开了一种柿叶总黄酮的提取和纯化方法，包括以下步骤：(1)柿叶用水提取，得到柿叶粗提液；(2)柿叶粗提液中加入萃取溶剂，在多级离心萃取装置中进行多级离心萃取，获得有机溶剂相；(3)采用单级离心反萃取的方式除去有机溶剂相中的杂质，收集去除杂质后的有机溶剂相，浓缩、干燥，即得高纯度的柿叶总黄酮。本发明的提取和纯化方法克服了现有的柿叶总黄酮萃取过程中所存在的乳化效应，显著减少了有机溶剂的用量，有效降低了生产成本，缩短了生产周期，生产效能高。经过HPLC法检测，本发明方法能够获得高纯度的柿叶总黄酮，产品总黄酮纯度最高可达99.3％。
【IPC分类】B01D11-04, B01D11-02
【公开号】CN104689600
【申请号】CN201510104876
【发明人】唐星, 刘东春, 李红岩, 王东, 王芳, 王凤玉
【申请人】沈阳东新药业有限公司
【公开日】2015年6月10日
【申请日】2015年3月10日