，放入40 0C水浴锅中加热反应12 h后，将温度升高到70 °(3继续加热12 h;
实验中保持VI3B与DB的质量总和为40 mg，改变VI3B与DB配比分别为2:1(柱A)、l: 1(柱B)、1:2(柱C)和1:3(柱D)，单体的总量、致孔剂等其他物质含量保持不变，考察了 VPB与DB的比例对柱子的影响，结果如图1所示。我们可以看出，整体柱中的颗粒随着DB比重的增加而变细，致密性也逐渐变好，当逐渐发现该柱C的柱效先增高后降低，当DB所占比重较小时，柱子较为通透，当DB所占比重较大时，柱子太过致密，都不易实验分离的效果。故选择VPB与DB配比为1:2时为最佳。
[0012]实施例2
在pCEC中，栗压的施加以及不同极性流动相的使用均要求整体柱固定相具有良好的机械稳定性，实验考察了整体柱在三种极性不同的流动相(乙腈、甲醇和二次水)中，流速的变化对背压的影响，实验结果如图2所示。
[0013]从图中可以看出，在三种流动相中，整体柱背压与流速均呈现良好的线性关系，且相关系数R都达到0.998以上，表明该硼酸杂化整体柱具有良好的机械稳定性。
[0014]实施例3
以实施例1制得的硼酸亲和有机-硅胶杂化整体柱，测定不同乙腈含量与3种中性化合物(甲苯、DMF、硫脲)迀移时间的关系，结果如图3，其中磷酸盐缓冲液为P H 7.0、1.0 mmo I /L，乙腈含量为50 %-100 %，栗压为0.710^，分离电压-10 kV，检测波长为214 nm。
[0015]从图中可以看出，在乙腈含量大于80%(v/v)时，洗脱顺序为甲苯、DMF、硫脲，此顺序与它们的极性大小保持一致，这说明酰胺类化合物的分离过程是典型的亲水作用色谱保留机制。随着乙腈含量的继续增大，中性小分子在该整体柱上的分离度愈来愈大，当乙腈含量为95%时，三种小分子实现了基线分尚。
[0016]实施例4
以实施例1制得的硼酸亲和有机-硅胶杂化整体柱，测定富集液在不同pH值时，对邻苯二酚与对苯二酚分离的影响，结果如图4;其中磷酸盐缓冲液为10.0 mmol/L，乙腈含量为50%，分离电压-10 kV，其余测定条件同实施例3。
[0017]从图中可以看出，在富集缓冲盐的pH为6.5的条件下，当切换到酸性条件下后，邻苯二酚几乎没有被洗脱下来，随着富集缓冲盐的pH升高到7.5时，切换到酸性条件下后，邻苯二酚在10 min左右被洗脱出来，当富集缓冲盐的pH升高到8.5时，切换到酸性条件下后，邻苯二酚洗脱时间提前，且响应变大，这一结果表明了该硼酸亲和杂化整体柱在碱性条件下更有利于顺式二醇化合物的特定的分离和富集。
[0018]实施例5 以实施例1制得的硼酸亲和有机-硅胶杂化整体柱，测定富集液在不同乙腈条件下，对邻苯二酚与对苯二酚分离的影响，结果如图5;其中磷酸盐缓冲液为10.0 mmol/L，pH8.5保持不变，分离电压-10 kV，其余测定条件同实施例3。
[0019]从图中可以看出，当乙腈含量较低时，对苯二酚的响应值较低，切换为酸性条件后，邻苯二酚的保留时间较长。当乙腈含量较高时，对苯二酚的响应值较高，切换为酸性条件后，邻苯二酚的保留时间缩短。由此可以看出，ACN的含量对硼酸亲和杂化整体柱有着较大的影响作用。
[0020]以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。
【主权项】
1.一种硼酸亲和有机-硅胶杂化整体柱的制备方法，其特征在于:以四甲氧基硅烷和乙烯基三乙氧基硅烷作为硅烷化试剂，以4-乙烯基苯硼酸作为功能单体、二乙烯基苯为交联剂、聚乙二醇为致孔剂、偶氮二异丁腈为引发剂，采用一锅法，通过酸碱两步催化在毛细管中进行自由基聚合反应，制得硼酸亲和有机-硅胶杂化整体柱。2.根据权利要求1所述的硼酸亲和有机-硅胶杂化整体柱的制备方法，其特征在于:具体步骤为: (1)毛细管预处理:取总长50cm的毛细管柱，依次通水0.5 h、l M盐酸I 11、水0.5 h、lM氢氧化钠0.5 h后，塞住两端于100°C反应3 h;再通水0.5 h、0.1 M盐酸0.5 11、水0.5 h、甲110.25 h、丙酮0.25 h，然后 180 °C氮吹3 h； (2)预聚合溶液的制备:准确称取270mg聚乙二醇溶解在2.5 mL 0.01 mol/L的醋酸溶液中，完全溶解后，再加入由900 yL四甲氧基硅烷和300 yL乙烯基三乙氧基硅烷组成预聚合溶液，然后在0°C下搅拌反应I h，使之形成均匀透明的水解液； (3)柱子的制备:准确称取13.4mg 4-乙稀基苯硼酸和26.8 mg二乙稀基苯以及4 mg偶氮二异丁腈，加入至I mL步骤(2)制得的水解液中，冰浴超声10 min溶解脱气;将混合溶液用注射器手动推入预处理好的毛细管柱中至30 cm处，用橡胶将毛细管两端封住，放入400C水浴锅中加热反应12 h后，将温度升高到70 1继续加热12 h;分别用甲醇、水冲洗柱子以除去未完全反应的致孔剂和其它残留物，制得硼酸亲和有机-硅胶杂化整体柱。3.—种如权利要求1或2所述制备方法制得的硼酸亲和有机-硅胶杂化整体柱的应用，其特征在于:通过调节流动相、缓冲盐的浓度和PH值来改变其电渗流大小，实现对中性小分子、苯胺类物质或者顺式二醇物质的分离。4.根据权利要求3所述的硼酸亲和有机-硅胶杂化整体柱的应用，其特征在于:整体柱所用流动相为乙腈、甲醇、二次水中的一种或多种。5.根据权利要求4所述的硼酸亲和有机-硅胶杂化整体柱的应用，其特征在于:所述流动相中乙腈体积含量为50%-100%。6.根据权利要求1所述的硼酸亲和有机-硅胶杂化整体柱的应用，其特征在于:在pH为2.0?9.0使用。7.根据权利要求1所述的硼酸亲和有机-硅胶杂化整体柱的应用，其特征在于:缓冲盐的浓度为10 mmol/Lo
【专利摘要】本发明公开了一种硼酸亲和有机-硅胶杂化整体柱及其制备方法，主要以四甲氧基硅烷和乙烯基三乙氧基硅烷作为硅烷化试剂，以4-乙烯基苯硼酸作为功能单体、二乙烯基苯为交联剂、聚乙二醇为致孔剂、偶氮二异丁腈为引发剂，采用一锅法，通过酸碱两步催化在毛细管中进行自由基聚合反应，制得硼酸亲和有机-硅胶杂化整体柱。本发明制备的整体柱既免去了传统填充柱装填等繁琐操作，及烧结塞子导致的气泡产生等问题，又克服了开管柱容量低、相比小的缺点，其性质稳定，重现性好，可在较大pH范围内使用，其电渗流大小可以通过调节流动相的pH来控制。
【IPC分类】C08F212/36, B01J20/286, C08F230/06, C08F230/08, B01J20/30, B01D15/20
【公开号】CN105536293
【申请号】CN201610025939
【发明人】吕海霞, 刘凯, 秦文菲, 谢增鸿
【申请人】福州大学
【公开日】2016年5月4日
【申请日】2016年1月15日