专利名称：一种制备桂附地黄制剂的新工艺方法
技术领域：
本发明属于一种中药成方制剂，特别涉及一种制备桂附地黄制剂的新工艺方法。
背景技术：
桂附地黄丸源于医圣张仲景的金匮肾气丸，是补肾的祖方，方由肉桂I 2份、附子(制)I 2份、熟地黄8 16份、酒萸肉4 8份、牡丹皮3 6份、山药4 8份、茯苓3 6份、泽泻3 6份组成。具有温补肾阳的功效。用于肾阳不足，腰膝痠冷，肢体浮肿，小便不利或反多，痰饮喘咳，消渴。该方问世近两千年，由于疗效确切，久用不衰。肾气阳虚是人的自然规律，随着年龄的增长，肾气阳虚日益加重，特别是中老年之后肾气阳虚的证候日趋明显。故日本人对汉方制剂的崇尚首推金匮肾气丸(日本人称为八味丸)。日本人认为人过四十就应服用八味丸，可以预防很多老年性疾病的发生，如白内障、前列腺增生、糖尿病以及心脑血管疾病等。对于老年性白内障、前列腺增生也有显著疗效。这就是中医经典的“治未病为上医”的理论。所谓治未病，就是未病先防，已病防变。桂附地·黄制剂正是“上医治未病”这一经典理论的最佳成方制剂。中国老龄化的速度、规模堪称全球第一。据权威预测，二 O五O年中国老年人口将达到3. 3亿，占全国人口总数的近四分之一。因此预防和治疗老年性疾病的药物具有庞大的市场，而这些药物首推桂附地黄类。原方法制备的桂附地黄胶囊，每次服7粒，日服2次，老年人很难接受，一方面吞咽困难，一方面太多的胶囊漂浮于胃中引起胀满感。因此，减少服用量是必由之路。本发明正是采用先进的药学技术制备的新剂型使其服用量分别减少了 40%、85%、75%和85%，成功地克服了原方制备的桂附地黄胶囊的服用太多的缺陷，不仅改变了桂附地黄丸采用生药制备的许多弊端与缺点，而且使服用量分别减少了 87^^96^^93%和96%，大大方便了患者，会创造极好的社会经济效益。
发明内容
本发明根据组成桂附地黄制剂的八味中药的有效成分及其理化性质，设计并完成了桂附地黄制剂新的工艺方法的实验研究，成功地使服用量大幅度下降，且其主要有效成分的含量指标不低于原方法制备的桂附地黄胶囊，并增加了薄层色谱鉴别其余药材的方法，总体成品质量标准有了明显的提高。动物实验表明，对于改善肾阳虚证候，本发明制备的桂附地黄制剂与原法制备的桂附地黄胶囊7粒效果相当或偏高。表明本发明所制备的桂附地黄制剂完全可代替原方法制备的桂附地黄胶囊7粒使用。本发明首先是采用了不同于原方法的提取工艺，应用DlOl大孔吸附树脂的柱分离技术提纯除杂，既减少了服用量，又极大程度的保留了有效成分。这种制备桂附地黄制剂的新工艺方法包括以下的不同提取工艺取牡丹皮3 6份，加10 20倍水及O. 05 O. I倍量的氯化钠，浸泡12 36小时，进行水蒸汽蒸馏，于2 4小时内收集8 10倍量的蒸馏液，置冰箱冷藏12 36小时，析出结晶，滤过，用冷水洗涤，于低温(40°C以下)干燥，得结晶(I)或将其溶于95%乙醇中包合，包合材料为β_环糊精，将6 8倍β-环糊精溶于8 10倍纯净水中进行包合，减压蒸干，得到干燥物(I)，其药渣(I)备用；取药渣⑴、酒萸肉4 8份、熟地黄8 16份、泽泻3 6份、肉桂I 2份、附子(制)I 2份，加4 6倍量80%乙醇回流提取2 4次，每次提取I 2小时，提取液合并，滤过，减压(70°C以下，0.09MPa)回收乙醇至无醇味，得清膏(I)，其药渣(II)备用；将药渣(II)加入4 6倍水，回流提取2 4次，每次I 2小时，提取液合并，滤过，减压(70°C以下，O. 09MPa)浓缩至全处方(8味)药材量的O. 5 2倍(W/V)，加95%乙醇醇沉，使含醇量达到80%，静置过夜，过滤，收集沉淀物，干燥，得干燥物(II)；取山药4 8份、茯苓3 6份，加4 6倍量水回流提取2 4次，每次提取I 2小时，提取液合并，滤过，减压(70°C以下，0.09MPa)浓缩，得清膏(II)；将预处理好的DlOl大孔吸附树脂湿法装柱，树脂体积为全处方(8味)药材量的 2 3倍(W/V)，将清膏(I)用水稀释至I. 5 2倍柱体积，上树脂柱，吸附速度为I倍树脂体积/小时，用2 3倍树脂体积蒸馏水冲柱，用3 4倍树脂体积的70%乙醇解吸，解吸速度为O. 8倍树脂体积/小时，得到的解吸液减压(70°C以下，O. 09MPa)回收乙醇至无醇味，与清膏(II)合并，继续减压浓缩，真空干燥至干，得干燥物(III)；合并结晶⑴与干燥物(II)、(III)及适量辅料，粉碎，过20 40目筛，混勻，装入硬胶囊中，胶囊每粒重O. 35g。一次口服I粒，日服二次。这些辅料包括微晶纤维素、羟丙纤维素、微粉硅胶、淀粉中的一种或多种的混合物。较原工艺胶囊或丸剂减少了服用量85%和 96%。将干燥物(I)、(II)、(III)及适量的基质混匀，基质包括聚乙二醇4000、6000中的一种或两种混合物，在85°C水浴中熔融混匀，用滴丸机将混合物滴入予冷的二甲基硅油中，二甲基硅油粘度200，冷却剂的温度10 15°C，油浴温度85 95°C，药液温度85°C，管口温度15 20°C，管中温度10 15°C，滴头气压O. 4MPa，滴管气压O. 02MPa,间隔时间30秒，滴制时间O. 03秒，滴距2 3cm，2粒滴丸之间距离3 5cm。主药与基质之比I : I. 4 I I. 8，制成滴丸，每丸重200mg，每次服6粒，日服2次。该滴丸溶散时限极短，主药溶散于脂-水互溶的基质中，极易溶出，体外溶出度检测表明，滴丸在10分钟已溶出65%以上，溶出速度较原工艺胶囊快2倍多，大大提高了生物利用度。将主药结晶(I)、干燥物(II)、(III)与基质经胶体磨研匀，过120目筛，主药与基质比例为I : 1，基质包括色拉油、棕榈油、蜂蜡，在软胶囊压制机上压制成软胶囊，囊壳为明胶，每粒软胶囊O. 6g，每次口服I粒，日服2次。由于主药中的脂溶性成分分散于脂溶性基质中，有利于吸收，提闻了生物利用度，有利于提闻疗效。将主药干燥物(I)、(II)、(III)与辅料粉碎过筛混匀，辅料包括预胶化淀粉、硬脂酸、滑石粉、羧甲基淀粉钠、糊精，主药与辅料比为100 3 5，压片，每片重O. 35g，每次口月艮I片，日服2次。较原工艺的胶囊和丸剂减少服用量85%和96%。为新工艺方法制备的成品桂附地黄制剂制定了较高的、可控的质量标准，以确保广品质量的稳定和疗效的稳定。采用高效液相色谱法测定了硬胶囊、软胶囊、片剂每粒(片)含酒萸肉以马钱苷(C17H26O10)计，不低于2. 24mg，每粒(片)含牡丹皮以丹皮酚(C9H10O3)计不低于4. 20mg ;滴丸每粒含酒萸肉以马钱苷(C17H26Oltl)计，不低于O. 37mg，每粒含牡丹皮以丹皮酚(C9HltlO3)计不低于O. 70mg采用薄层色谱法定性鉴别处方中各味中药以齐墩果酸为对照品定性鉴别酒萸肉；以梓醇为对照品定性鉴别熟地黄；以23-乙酰泽泻醇B为对照品定性鉴别泽泻；以桂皮醛为对照品定性鉴别肉桂；以芍药苷为对照品定性鉴别牡丹皮；
以尿囊素为对照品定性鉴别山药；以茯苓为对照药材定性鉴别茯苓；以乌头碱为对照品鉴别附子(制)并进行乌头碱限量的检查，规定硬胶囊、软胶囊、片剂每粒(片)含乌头碱(C34H47NO11)不得过28ppm，滴丸每粒含乌头碱(C34H47NO11)不得过 4. 7ppm。这一质量标准极大地提高了现行的工艺制备的桂附地黄丸和胶囊的标准。采用气相色谱法检测如下有机溶媒残留量不得超过正己烷lOppm、苯2ppm、甲苯lOppm、二甲苯20ppm、苯乙烯lOppm、二乙烯苯60ppm,确保了新工艺生产的成品服用安全。动物实验的表明采用氢化可的松肌肉注射和腹腔给药造成肾阳虚模型，上述桂附地黄制剂的主药均能明显改善肾阳虚的典型症状，且优于原工艺(中国药典2010版一部981页)制备的桂附地黄胶囊。急性毒性试验表明该制剂毒性极低，为临床应用的有效性和安全性提供了动物实验的科学依据。实施实例I :主药的制备制备工艺原料(单位克)肉桂155. 54 附子(制)155. 54 熟地黄1244. 39 酒萸肉622. 16牡丹皮466. 62 山药 622. 16茯苓 466. 62泽泻 466. 62操作取牡丹皮466. 62g，加15倍水及O. 05倍量的氯化钠，浸泡24小时，进行水蒸汽蒸馏，于3小时内收集8 9倍量的蒸馏液，置冰箱冷藏24小时，析出结晶，滤过，用冷水洗涤，于40°C以下低温或冷风吹风机干燥，得结晶(I)，其药渣(I)备用；取药渣(I)、酒萸肉622. 16g、熟地黄1244. 39g、泽泻466. 62g、肉桂155. 54g、附子(制)155. 54g，加5倍量80%乙醇回流提取3次，每次提取I. 5小时，提取液合并，滤过，减压(70°C以下，0.09MPa)回收乙醇至无醇味，得清膏(I)，其药渣(II)备用；将药渣(II)加入5倍水，回流提取3次，每次I. 5小时，提取液合并，滤过，减压(700C以下，O. 09MPa)浓缩至全处方(8味)药材量的I I. 2倍(W/V)，加95%乙醇醇沉，使含醇量达到80%，静置过夜，过滤，收集沉淀物，干燥，得干燥物(II)；取山药622. 16g、茯苓466. 62g份，加5倍量水回流提取3次，每次提取I. 5小时，提取液合并，滤过，减压(70°C以下，0.09MPa)浓缩，得清膏(II)；将预处理好的DlOl大孔吸附树脂湿法装柱，树脂体积为全处方(8味)药材量的
2.5倍(W/V)，将清膏(I)用水稀释至I. 8倍柱体积，上树脂柱，吸附速度为I倍树脂体积/小时，用2 3倍树脂体积蒸馏水冲柱，用3 4倍树脂体积的70%乙醇解吸，解吸速度为O. 8倍树脂体积/小时，合并解吸液，减压(70°C以下，0.09MPa)回收乙醇至无醇味，与清膏
(II)合并，减压浓缩，真空(70°C以下，0.09MPa)干燥至干，与结晶⑴合并，粉碎，过筛，混匀，即得；实施实例2:主药的制备制备工艺原料同实施实例I操作同实施实例I得结晶(I)，将结晶(I)溶于95%乙醇中包合，包合材料为β -环糊精，将7倍β -环糊精溶于9倍纯净水中进行包合，包合毕，减压蒸干，得到干燥物， 以下操作同实施实例1，得干燥物，与上述干燥物合并，粉碎，过筛，混匀即得；实施实例3 :滴丸制备主药由实施实例2制备而得制备工艺操作将主药与基质聚乙二醇4000按I : I. 5比例在85°C水浴中熔融混匀，用滴丸机将此混合物滴入予冷的粘度为200的二甲基硅油中，冷却剂的温度10 15°C，油浴温度85 95°C，药液温度85°C，管口温度15 20°C，管中温度10 15°C，滴头气压O. 4MPa，滴管气压O. 02MPa,间隔时间30秒，滴制时间O. 03秒，滴距2 3cm, 2粒滴丸之间距离3 5cm。每丸重200mg，每次服6粒，日服2次。
权利要求
1.一种制备桂附地黄制剂的新工艺方法，其特征在于用这种新工艺方法制成滴丸剂或硬胶囊剂或软胶囊剂或片剂。采用这种新工艺方法制成的上述制剂较原工艺制成的桂附地黄胶囊(载中国药典2010年版一部981页)服用量分别减少了 40 %、85 %、75 %和85 %，较桂附地黄丸(载中国药典2010年版一部980页)服用量分别减少了 87%、96%、93%和96%，不仅大大方便了服用，提高了生物利用度，提高了疗效，而且克服了服用后的胃部不适感。
2.根据权利要求I所述的新工艺方法，其特征在于桂附地黄制剂由下列中药按重量组成 肉桂I 2份附子(制)1 2 份熟地黄8 16 份酒萸肉4 8份 牡丹皮3 6 份山药4 8份获茶3 6份泽湾3 6份。
3.根据权利要求I所述的新工艺方法，其特征在于对权利要求2所述的各味中药进行不同方法的提取，其提取方法如下 取牡丹皮3 6份，加10 20倍水及O. 05 O. I倍量的氯化钠，浸泡12 36小时，进行水蒸汽蒸馏，于2 4小时内收集8 10倍量的蒸馏液，置冰箱冷藏12 36小时，析出结晶，滤过，用冷水洗涤，于低温(40°C以下)干燥，得结晶⑴或将其溶于95%乙醇中包合，包合材料为环糊精，将6 8倍β-环糊精溶于8 10倍纯净水中进行包合，减压蒸干，得到干燥物(I)，其药渣(I)备用； 取药渣(I)、酒萸肉4 8份、熟地黄8 16份、泽泻3 6份、肉桂I 2份、附子(制)I 2份，加4 6倍量80%乙醇回流提取2 4次，每次提取I 2小时，提取液合并，滤过，减压(70°C以下，0.09MPa)回收乙醇至无醇味，得清膏(I)，其药渣(II)备用； 将药渣(II)加入4 6倍水，回流提取2 4次，每次I 2小时，提取液合并，滤过，减压(70°C以下，O. 09MPa)浓缩至全处方(8味)药材量的O. 5 2倍(W/V)，加95%乙醇醇沉，使含醇量达到80%，静置过夜，过滤，收集沉淀物，干燥，得干燥物(II)； 取山药4 8份、茯苓3 6份，加4 6倍量水回流提取2 4次，每次提取I 2小时，提取液合并，滤过，减压(70°C以下，0.09MPa)浓缩，得清膏(II)。
4.根据权利要求I所述的新工艺方法，其特征在于将清膏(I)经DlOl大孔吸附树脂提纯除杂，其方法为将预处理好的DlOl大孔吸附树脂湿法装柱，树脂体积为全处方(8味)药材量的2 3倍(W/V)，将清膏(I)用水稀释至I. 5 2倍柱体积，上树脂柱，吸附速度为I倍树脂体积/小时，用2 3倍树脂体积蒸馏水冲柱，用3 4倍树脂体积的70%乙醇解吸，解吸速度为O. 8倍树脂体积/小时，得到的解吸液减压(70°C以下，0.09MPa)回收乙醇至无醇味，与清膏(II)合并，继续减压浓缩，真空干燥至干，得干燥物(III)。
5.根据权利要求I所述的新工艺方法，其特征在于采用上述提取物制成滴丸或软胶囊或硬胶囊或片剂等多种剂型。将结晶(I)与干燥物(II)、(III)及适量辅料合并，粉碎，混匀，装入胶囊中，制成硬胶囊剂，胶囊每粒重O. 35g。一次口服I粒，日服二次。这些辅料包括微晶纤维素、羟丙纤维素、微粉硅胶、淀粉中的一种或多种。
将主药干燥物(I)、(II)、(III)及适量的基质混匀，基质包括聚乙二醇4000、6000中的一种或两种混合物，在85°C水浴中熔融混匀，用滴丸机将混合物滴入予冷的二甲基硅油中，滴制的参数为冷却剂的温度10 15°C，油浴温度85 95°C，药液温度85°C，管口温度15 20°C，管中温度10 15°C，滴头气压O. 4MPa，滴管气压O. 02MPa,间隔时间30秒，滴制时间O. 03秒，滴距2 3cm，冷却剂二甲基硅油粘度200，2粒滴丸之间距离3 5cm，主药与基质之比I : 1.4 I : I. 8，制成滴丸，每丸重200mg，次服6粒，日服2次。
将主药结晶(I)、干燥物(II)、(III)与基质经胶体磨研匀，过120目筛，主药与基质比例为I : 1，基质包括色拉油、棕榈油、蜂蜡，在软胶囊压制机上压制成软胶囊，0.6g/粒，每次口服I粒，一日服2次。
将主药干燥物(I)、(II)、(III)与辅料粉碎过筛混匀，辅料包括预胶化淀粉、硬脂酸、滑石粉、羧甲基淀粉钠、糊精，主药与辅料比为100 4，压片，每片重O. 35g，每次口服I片，I曰服2次。
6.根据权利要求I所述的新工艺方法，其特征在于所制得的制剂其主要有效成分均采用高效液相色谱法测定，其中硬胶囊、软胶囊、片剂每粒(片)含酒萸肉以马钱苷(C17H26O10)计，不低于2. 24mg,每粒(片)含牡丹皮以丹皮酚(C9H10O3)计不低于4. 20mg ；滴丸每粒含酒萸肉以马钱苷(C17H26Oltl)计，不低于O. 37mg，每粒(片)含牡丹皮以丹皮酚(C9H10O3)计不低于 O. 70mg。
7.根据权利要求I所述的新工艺方法，其特征在于所制成的桂附地黄制剂均采用薄层色谱法定性鉴别处方中各味药材，以齐墩果酸为对照品鉴别酒萸肉；以梓醇为对照品鉴别熟地黄；以23-乙酰泽泻醇B为对照品鉴别泽泻；以桂皮醛为对照品鉴别肉桂；以芍药苷为对照品鉴别牡丹皮；以尿囊素为对照品鉴别山药；以茯苓为对照药材鉴别茯苓；以乌头碱为对照品鉴别附子(制)并进行乌头碱限量的检查，规定硬胶囊、软胶囊、片剂每粒(片)含乌头碱(C34H47NO11)不得过28ppm，滴丸每粒含乌头碱(C34H47NO11)不得过4. 7ppm，极大的提1 了成品的质量标准。
8.根据权利要求I所述的新工艺方法，其特征在于釆用气相色谱法检测下列有机溶媒残留量不得过正己焼lOppm、苯2ppm、甲苯lOppm、二甲苯20ppm、苯乙烯lOppm、二乙烯苯60ppm，确保成品服用的安全。
全文摘要
一种制备桂附地黄制剂的新工艺方法，桂附地黄制剂由肉桂1～2份、附子(制)1～2份、熟地黄8～16份、酒萸肉4～8份、牡丹皮3～6份、山药4～8份、茯苓3～6份、泽泻3～6份组成。本发明的优点在于根据组方各味药的主要有效成分及其理化性质，采用各自不同的溶媒提取，采用D101大孔吸附树脂柱分离提纯除杂，不仅使服用量大副度减少，较原桂附地黄胶囊服用量少了40～85％，较桂附地黄丸减少了87～96％。而且采用脂溶性的基质分散，大大缩短了崩解溶散时限，使提取物分散于基质中，利于吸收，提高生物利用度，提高疗效。克服了原桂附地黄胶囊服后漂浮于胃中的不适感，解决了桂附地黄丸用生药制成的诸多弊端。动物实验表明对肾阳虚证具有显著改善作用，急性毒性试验表明桂附地黄制剂临床应用安全，且质控标准较桂附地黄丸和原桂附地黄胶囊有较大的提高，保障了成品质量的稳定和疗效的稳定。
文档编号G01N30/90GK102872295SQ20111019607
公开日2013年1月16日 申请日期2011年7月14日 优先权日2011年7月14日
发明者孔伶俐, 魏吉城 申请人:天津丹溪国药研究所