剂粒径为5ym;
[0161] 流动相：甲醇-0. 03mol/L磯酸氨二钢（体积比为40 ;60);
[016引 柱温；35°C;
[016引 流速；1.Oml/min;
[0164]检测波长；280nm;
[0165] 进样量；20yl。
[0166] 按照实施例1的方法制备供试液并测定，结果表明；阿嗽沙班中间体II保留时间 为15. 013min，与相邻杂质的分离度为1. 723,理论塔板数（按中间体II计算）为64122,阿 嗽沙班中间体II的峰纯度指数为1. 000000,本发明反相高效液相色谱可W用于检测中间 体II的有关物质。
[0167] 实施例4采用反相高效液相色谱进行检测：
[0168] 色谱柱的填充剂：色谱柱的型号为WelchUltimateXB-C18,规格为；内径为 4. 6mm，长度为250mm，填充剂粒径为5ym;
[0169] 流动相：甲醇-0. 025mol/L磯酸氨二钢（体积比为30 ;70);
[0170]柱温；35°C;
[0171]流速；1.Oml/min;
[0172]检测波长；280nm;
[0173]进样量；20yl。
[0174] 按照实施例1的方法制备供试液并进样测定，结果表明；阿嗽沙班中间体II保 留时间为26.ISlmin，与相邻杂质的分离度为3. 977,理论塔板数（按中间体II计算）为 37752,阿嗽沙班中间体II的峰纯度指数为1. 000000,本发明反相高效液相色谱可W用于 检测起始物料中的有关物质。
[01巧]实施例5用反相高效液相色谱进行检测：
[0176] 色谱柱的填充剂：色谱柱的型号为WelchUltimateXB-C18,规格为；内径为 4. 6mm，长度为250mm，填充剂粒径为5ym;
[0177] 流动相：甲醇-0. 025mol/L磯酸氨二钢（体积比为35 ;6W;
[017引 柱温；35°C;
[0179]流速；1.Oml/min;
[0180]检测波长；280nm;
[0181] 进样量；20yl。
[0182] 按照实施例1的方法制备供试液并进样测定，结果表明；阿嗽沙班中间体II保 留时间为19. 014min，与相邻杂质的分离度为2. 301，理论塔板数（按中间体II计算）为 48833,阿嗽沙班中间体II的峰纯度指数为1. 000000,本发明反相高效液相色谱可W用于 检测起始物料中的有关物质。
[0183] 实施例6用反相高效液相色谱进行检测：
[0184] 色谱柱的填充剂：色谱柱的型号为WelchUltimateXB-C18,规格为；内径为 4. 6mm，长度为250mm，填充剂粒径为5ym;
[0185] 流动相：甲醇-0. 025mol/L磯酸氨二钢（体积比为40 ;60);
[0186]柱温；35°C;
[0187]流速；1.Oml/min;
[018引 检测波长；280nm;
[0189] 进样量；20yl。
[0190] 按照实施例1的方法制备供试液并进样测定，结果表明；阿嗽沙班中间体II保 留时间为15. 557min，与相邻杂质的分离度为1.691，理论塔板数（按中间体II计算）为 65222,阿嗽沙班中间体II的峰纯度指数为1. 000000,本发明反相高效液相色谱可W用于 检测中间体II的有关物质。
[0191] 实施例7用反相高效液相色谱进行检测：
[0192] 色谱柱的填充剂：色谱柱的型号为WelchUltimateXB-C18,规格为；内径为 4. 6mm，长度为250mm，填充剂粒径为5ym;
[0193] 流动相：甲醇-0. 035mol/L磯酸氨二钢（体积比为30 ;70);
[0194]柱温；35°C;
[019引流速；1.Oml/min;
[0196]检测波长；280nm;
[0197]进样量；20ul。。
[0198] 按照实施例1的方法制备供试液并进样测定，结果表明；阿嗽沙班中间体II保 留时间为25. 991min，与相邻杂质的分离度为3. 876,理论塔板数（按中间体II计算）为 36752,阿嗽沙班中间体II的峰纯度指数为1. 000000,本发明反相高效液相色谱可W用于 检测起始物料中的有关物质。
[0199] 实施例8用反相高效液相色谱进行检测：
[0200] 色谱柱的填充剂：色谱柱的型号为WelchUltimateXB-C18,规格为；内径为 4. 6mm，长度为250mm，填充剂粒径为5ym;
[0201] 流动相：甲醇-0. 035mol/L磯酸氨二钢（体积比为35 ;6W;
[0202] 柱温；35°C;
[020引流速；1.Oml/min;
[0204]检测波长；280nm;
[020引进样量；20ul。。
[0206] 按照实施例1的方法制备供试液并进样测定，结果表明；阿嗽沙班中间体II保 留时间为19. 117min，与相邻杂质的分离度为2. 303,理论塔板数（按中间体II计算）为 49929,阿嗽沙班中间体II的峰纯度指数为1. 000000,本发明反相高效液相色谱可W用于 检测起始物料中的有关物质。
[0207] 实施例9用反相高效液相色谱进行检测：
[0208] 色谱柱的填充剂：色谱柱的型号为WelchUltimateXB-C18,规格为；内径为 4. 6mm，长度为250mm，填充剂粒径为5ym;
[020引流动相：甲醇-0. 035mol/L磯酸氨二钢（体积比为40 ;60);
[0210] 柱温；35°C;
[0211] 流速；1.Oml/min;
[0引引检测波长；280nm;
[0引引进样量；20yl。
[0214] 按照实施例1的方法制备供试液并进样测定，结果表明；阿嗽沙班中间体II保 留时间为14. 127min，与相邻杂质的分离度为1. 698,理论塔板数（按中间体II计算）为 68875,阿嗽沙班中间体II的峰纯度指数为1. 000000,本发明反相高效液相色谱可W用于 检测起始物料中的有关物质。
[0215] 综上所述，本发明反相高效液相色谱检测阿嗽沙班中中间体II有关物质的方法， 中间体II与各杂质成分之间分离良好，流动相组成简单；同时本发明方法的检测结果准 确、可靠，通过控制阿嗽沙班合成过程中起始物料的质量进一步的加强了成品合成的过程 控制。
【主权项】
1. 反相高效液相色谱检测阿哌沙班中间体II的方法，其特征在于：它包括以下步骤： a、 制备供试品溶液：称取起始中间体II用流动相溶解并稀释，得到浓度为0.4~ 0? 6mg/ml的供试品溶液； b、 采用反相高效液相色谱分别对供试品溶液进行检测： 其中，色谱条件如下： 色谱柱的固定相：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂； 流动相为甲醇、〇. 025-0. 035mol/L磷酸氢二钠溶液，两者按体积比30% :70%~40% : 60 %混合： 检测波长为270nm~290nm ; c、 按面积归一化法计算供试品中单个杂质和总杂质的含量。2. 根据权利要求1所述的反相高效液相色谱检测阿哌沙班中间体II的方法，其特征在 于：步骤a中供试品溶液的浓度为0. 5mg/ml。3. 根据权利要求1所述的反相高效液相色谱检测阿哌沙班中间体II的方法，其特征在 于：步骤b中色谱柱的规格：内径为4. 6mm，长度为150-250mm，填料粒径为3. 5-5 y m ; 优选的，步骤b中，色谱柱的规格：内径为4. 6mm，长度为250mm，填料粒径为5 y m。4. 根据权利要求1或3所述的反相高效液相色谱检测阿哌沙班中间体II的方法，其特 征在于：步骤b中色谱柱为Welch Ultimate XB-C18。5. 根据权利要求1所述的反相高效液相色谱检测阿哌沙班中间体II的方法，其特征 在于：步骤b中所述0? 025-0. 035mol/L磷酸氢二钠溶液为0? 03mol/L磷酸氢二钠溶液、 0. 025mol/L磷酸氢二钠溶液或0. 035mol/L磷酸氢二钠溶液； 优选的，步骤b中甲醇与0. 03mol/L磷酸氢二钠溶液的体积比为30% :70%~40% : 60% ;甲醇与0. 〇25mol/L磷酸氢二钠溶液的体积比为30% :70%~40% :60% ;甲醇与 0.035111〇1/1磷酸氢二钠的体积比为30%:70%~40%:60%。6. 根据权利要求1所述的反相高效液相色谱检测阿哌沙班中间体II的方法，其特征在 于：步骤b中甲醇与0. 03mol/L磷酸氢二钠的体积比为35% :65%。7. 根据权利要求1所述的反相高效液相色谱检测阿哌沙班中间体II的方法，其特征在 于：步骤b中柱温为30°C~40°C ;流速为0? 8ml/min~I. 2ml/min。8. 根据权利要求7所述的反相高效液相色谱检测阿哌沙班中间体II的方法，其特征在 于：步骤 b 中柱温为 30°C或 35°C或 40°C ;流速为 0? 8ml/min 或 1.0 ml/min 或 I. 2ml/min。9. 根据权利要求1所述的反相高效液相色谱检测阿哌沙班中间体II的方法，其特征在 于：步骤b中检测波长为280nm。10. 根据权利要求1所述的反相高效液相色谱检测阿哌沙班中间体II的方法，其特征 在于：步骤b中进样量为20 y 1。
【专利摘要】本发明属于分析检测领域，涉及一种反相高效液相色谱检测阿哌沙班中间体II的方法，它包括以下步骤：a、制备供试品溶液；b、采用反相高效液相色谱对供试品进行检测；c、按面积归一化法计算供试品中单个杂质和总杂质的含量。本发明反相高效液相色谱检测阿哌沙班中间体II的方法，通过简单的流动相组份，就能实现中间体II与各杂质色谱峰之间的完全分离；同时，本发明方法的检测结果准确、可靠，为控制阿哌沙班合成过程中中间产品的质量提供了可能。
【IPC分类】G01N30/89
【公开号】CN104950066
【申请号】CN201510387689
【发明人】孙毅, 宋务雄
【申请人】成都百裕科技制药有限公司
【公开日】2015年9月30日
【申请日】2015年6月30日