本发明属于农药
技术领域：
，具体地说，涉及一种含紫茎泽兰提取物的植物源杀菌剂组合物及其制备方法和应用。
背景技术：
：植物病害一直是农作物优质高产的重要制约因素之一。而在植物病害中，70％-80％的病害是病原真菌侵染所致的。植物真菌病害不仅直接造成农作物产量下降与品质降低，而且部分病原真菌在侵染农作物过程中，可分泌产生多种对人畜有害的毒素与代谢物，对农产品的安全性构成极大威胁。烟草黑胫病(phytophthoraparasiticavar.nicotianae)是烟草生产上一种毁灭性土传真菌性病害之一，寄主范围广，可为害烤烟、晾烟、晒烟、香料烟、白肋烟等所有栽培烟草，破坏性极强。烟草黑胫病菌可以在烟草的任何生育阶段侵染危害，主要为害移栽后的大田烟株，侵染成株的茎基部和根部。黑胫病病原菌的游动孢子可直接侵入感病寄主幼产生黑色病斑，病斑向上下扩展，延及茎、叶及根部，容易引起猝倒。大田烟株被黑胫病菌侵染后，根系或茎基部受侵染，病害向上扩展，破坏髓部及维管束，影响水分和养分的吸收运输；在大田农艺性状上表现出病叶凋萎、枯死，根部坏死，出现“黑胫”，病茎髓部变褐、变黑，干缩，变成碟片状。由于化学农药具有适用范围广、防效高等优点，作物真菌病害的控制往往依赖化学防治。但近几年，随着农药品种的单一使用及反复施用，不可避免地带来环境污染、农产品农药残留、病虫害抗药性增强和再度猖獗等问题，严重影响了农产品的安全性。随着人们对环保问题和食品安全问题的重视，更为绿色环保的植物源农药的研究开发和应用成为了当前农药和植保界广泛关注的热点。我国地域辽阔，植物资源丰富，植物本身存在着丰富的天然抗菌物质，其产生的次生代谢产物超过4×105种，其中大多数化学物质具有抗菌活性，如生物碱、萜烯类、黄酮类、酚类和多糖等均具有抗菌、抑菌活性。因此，充分利用丰富的植物资源，研究开发高效低毒，降解快，病菌不易产生抗性的抗真菌抑制剂具有重要的意义。紫茎泽兰(eupatoriumadenophorum)是菊科泽兰属植物，是一种传播速度快、侵占能力强且化感作用强烈的恶性有毒植物。该物种原产于中、南美洲的墨西哥至哥斯达黎加一带，于20世纪40年代从中缅边境传入中国云南省，经过半个多世纪的扩散，现已广泛分布于云南、贵州、四川、重庆、广西等各地，并且仍然以每年10～30km的速度向东、北扩散，到目前为止，云南80％面积的土地都有紫茎泽兰分布。国家环保局以将其列入我国首批外来入侵物种，并将其排在首位。紫茎泽兰是农、林、牧业生产的大敌，侵入农田、草地后，与农作物或牧草等争水、肥、阳光和空间，严重影响农作物、牧草的生长。一旦传入，很快就会排挤伴生植物形成大片的单优群落，导致侵入地生态环境恶化，带来灾难性的后果。紫茎泽兰的花粉能引起人畜过敏性疾病和马患气喘病，往往有家畜因误食引起中毒或死亡的事件发生，植株用来垫厩，会引起牛马烂蹄。紫茎泽兰体内含有多种生物活性物质，已有研究表明紫茎泽兰可用来开发植物源农药防治植物真菌病害。赵春富等发现紫茎泽兰提取液对某些植物病原真菌良好的抑菌效果；田宇等发现紫茎泽兰挥发油在浓度为3000mg/kg时对4种供试真菌的抑制率均大于60％，其中对番茄灰霉菌抑制作用最强，其ec50值为580.5mg/kg；张妙直等发现紫茎泽兰乙醇提取液，在浓度为100mg/ml时对4种真菌的抑制率均达到100％，并且在较低作用浓度下依然能发挥较高的抑制作用；罗文富等发现紫茎泽兰汁液对烟草疫霉有较高的抑制效果。紫茎泽兰提取物与不同的成分复配可防治多种植物病害，专利含苦参碱和紫茎泽兰的植物源农药组合物(申请号：201510623208.3，申请日：2015-09-17，公开号：cn105104441a，公开日：2015-12-02)报道一种含苦参碱和紫茎泽兰的杀虫剂；专利一种紫茎泽兰提取物与异菌脲复配的杀菌剂(申请号：201610029183.9，申请日：2016-01-18，公开号：cn105532707a，公开日：2016-05-04)报道一种紫茎泽兰提取物泽兰酮与异菌脲复配的杀菌剂，以群结腐霉为例；专利一种紫茎泽兰提取物与精甲霜灵复配的杀菌剂(申请号：201510536151.3，申请日：2015-08-27，公开号：cn105165830a，公开日：2015-12-23)以及专利一种紫茎泽兰提取物与代森锰锌复配的杀菌剂(申请号：201510515823.2，申请日：2015-08-21，公开号：cn105123721a，公开日：2015-12-09)均以防治辣椒疫霉病和群结腐霉病为例。然而，目前国内外还尚未发现利用紫茎泽兰提取物与其他药用植物提取物复配抗烟草黑胫病的研究报道及专利。技术实现要素：有鉴于此，本发明针对上述的问题，提供了一种含紫茎泽兰提取物的植物源杀菌剂组合物及其制备方法和应用。为了解决上述技术问题，本发明公开了一种含紫茎泽兰提取物的植物源杀菌剂组合物，按照以下重量百分比包括以下组分：紫茎泽兰提取物2-4％，中药粗提取物0.2-0.5％，助剂1-30％，余量为水，以上重量百分含量为100％。进一步地，所述紫茎泽兰提取物通过以下方法制备得到：采集紫茎泽兰植株地上部未木质化的部分阴干后粉碎，过60-100目筛，加入提取溶液，所述粉碎后的紫茎泽兰与提取溶液的料液比(g/ml)为1：8-1:10，所述提取溶液为水、丙酮、体积含量为95％乙醇、甲醇或氯仿中的一种，室温超声提取3次，每次20-40min，合并滤液，将滤液倒入旋转蒸发仪中，减压旋转蒸发浓缩至少量转入容量瓶中，用溶剂定容至1g/ml，即得紫茎泽兰提取液。进一步地，所述中药粗提取物通过以下方法制备得到：称取中药用植物，粉碎，加入提取溶液，所述粉碎后的中药用植物与提取溶液的料液比(g/ml)为1：8-1:10，所述提取溶液为水、丙酮、体积含量为体积含量为95％的乙醇、甲醇或氯仿中的一种，室温超声提取3次，每次20-40min，合并滤液，将滤液倒入旋转蒸发仪中，减压旋转蒸发浓缩至少量转入带刻度的容量瓶中，用溶剂定容至1g/ml，即得中药粗提取物，所述中药粗提取物为大黄、黄连、补骨脂、厚朴、银杏、黄柏、苦参中的一种或几种粗提取物。进一步地，所述助剂为聚乙烯吡咯烷酮、十二烷基苯磺酸钠、脂肪酸聚氧乙烯醚、脂肪酸聚氧乙烯酯、烷基萘磺酸盐中的一种或多种。本发明还公开了一种含紫茎泽兰提取物的植物源杀菌剂组合物的制备方法，包括以下步骤：(1)提取紫茎泽兰提取物：采集紫茎泽兰植株地上部未木质化的部分阴干后粉碎，过60-100目筛，加入溶剂，室温超声提取3次，合并滤液，将滤液倒入旋转蒸发仪中，减压旋转蒸发浓缩至少量转入容量瓶中，用溶剂定容至1g/ml，即得紫茎泽兰提取液；(2)提取中药粗提取物：称取中药用植物，粉碎，加入溶剂，室温超声提取3次，合并滤液，将滤液倒入旋转蒸发仪中，减压旋转蒸发浓缩至少量转入带刻度的容量瓶中，用溶剂定容至1g/ml，即得中药粗提取物；(3)称量：按照质量份称量以下组分：紫茎泽兰提取物2-4％，中药粗提取物0.2％-0.5％，助剂1％-30％，余量为水；(4)将称量好的紫茎泽兰提取物、中药粗提取物、表面活性剂和水搅拌混匀，即得含紫茎泽兰提取物的植物源杀菌剂组合物。进一步地，所述步骤(1)中的每次提取时间为20-40min，粉碎后的紫茎泽兰与提取溶液的料液比(g/ml)为1：8-1:10，所述提取溶液为水、丙酮、体积含量为95％的乙醇、甲醇或氯仿中的一种。进一步地，所述步骤(2)中的每次提取时间为20-40min，粉碎后的中药用植物与提取溶液的料液比(g/ml)为1：8-1:10，所述提取溶液为水、丙酮、体积含量为95％的乙醇、甲醇或氯仿中的一种。进一步地，所述步骤(3)中的助剂为聚乙烯吡咯烷酮、十二烷基苯磺酸钠、脂肪酸聚氧乙烯醚、脂肪酸聚氧乙烯酯、烷基萘磺酸盐中的一种或多种。本发明还公开了一种上述的含紫茎泽兰提取物的植物源杀菌剂组合物在防治植物真菌病上的应用。进一步地，所述的真菌病为烟草黑胫病。与现有技术相比，本发明可以获得包括以下技术效果：1)本发明的植物源杀菌剂组合物一定配比范围内表现良好的增效作用，对烟草黑胫病的防治效果明显。2)本发明的植物源杀菌剂组合物以药用植物为原料，药剂对人畜毒性低，不会造成农药残留问题；与单独使用化学源农药相比，对环境友好。3)本发明的植物源杀菌剂组合物使用时有效浓度低，成本低廉。当然，实施本发明的任一产品并不一定需要同时达到以上所述的所有技术效果。具体实施方式以下将配合实施例来详细说明本发明的实施方式，藉此对本发明如何应用技术手段来解决技术问题并达成技术功效的实现过程能充分理解并据以实施。实施例1：含紫茎泽兰提取物的植物源杀菌剂组合物的制备(1)提取：采集紫茎泽兰植株地上部未木质化的部分阴干后粉碎，过80目筛，加入溶剂，室温超声提取3次，每次30min，合并滤液，将滤液倒入旋转蒸发仪中，减压旋转蒸发浓缩至少量转入带刻度的容量瓶中，用溶剂定容至1g/ml，即得紫茎泽兰提取液z1～z3，其中，各参数见表1。称取中药用植物，粉碎，加入溶剂，室温超声提取3次，每次30min，合并滤液，将滤液倒入旋转蒸发仪中，减压旋转蒸发浓缩至少量转入带刻度的容量瓶中，用溶剂定容至1g/ml，即得其他药用植物提取液q1～q3，其中，各参数见表2。(2)制剂：按重量百分比用移液管吸取紫茎泽兰提取液、其他药用植物提取液和助剂，搅拌混匀，即得含紫茎泽兰提取物的植物源杀菌剂组合物sjj-01～sjj-08，其中，各参数见表3。表1表2表3实施例2(1)提取紫茎泽兰提取物：采集紫茎泽兰植株地上部未木质化的部分阴干后粉碎，过60目筛，加入提取溶液，所述粉碎后的紫茎泽兰与提取溶液的料液比(g/ml)为1:10，所述提取溶液为体积含量为95％的乙醇，室温超声提取3次，每次20min，合并滤液，将滤液倒入旋转蒸发仪中，减压旋转蒸发浓缩至少量转入容量瓶中，用溶剂定容至1g/ml，即得紫茎泽兰提取液；(2)提取中药粗提取物：称取中药用植物，粉碎，加入提取溶液，所述粉碎后的中药用植物与提取溶液的料液比(g/ml)为1:10，所述提取溶液为水、丙酮、体积含量为乙醇、甲醇或氯仿中的一种，室温超声提取3次，每次20min，合并滤液，将滤液倒入旋转蒸发仪中，减压旋转蒸发浓缩至少量转入带刻度的容量瓶中，用溶剂定容至1g/ml，即得中药粗提取物，所述中药粗提取物为大黄粗提取物；(3)称量：按照质量份称量以下组分：紫茎泽兰提取物2％，中药粗提取物0.5％，助剂1％，余量为水；(4)将称量好的紫茎泽兰提取物、中药粗提取物、表面活性剂和水搅拌混匀，即得含紫茎泽兰提取物的植物源杀菌剂组合物。实施例3(1)提取紫茎泽兰提取物：采集紫茎泽兰植株地上部未木质化的部分阴干后粉碎，过100目筛，加入提取溶液，所述粉碎后的紫茎泽兰与提取溶液的料液比(g/ml)为1：8，所述提取溶液为水，室温超声提取3次，每次40min，合并滤液，将滤液倒入旋转蒸发仪中，减压旋转蒸发浓缩至少量转入容量瓶中，用溶剂定容至1g/ml，即得紫茎泽兰提取液；(2)提取中药粗提取物：称取中药用植物，粉碎，加入提取溶液，所述粉碎后的中药用植物与提取溶液的料液比(g/ml)为1：8，所述提取溶液为水，室温超声提取3次，每次40min，合并滤液，将滤液倒入旋转蒸发仪中，减压旋转蒸发浓缩至少量转入带刻度的容量瓶中，用溶剂定容至1g/ml，即得中药粗提取物，所述中药粗提取物为黄柏粗提取物；(3)称量：按照质量份称量以下组分：紫茎泽兰提取物4％，中药粗提取物0.2％，助剂30％，余量为水；(4)将称量好的紫茎泽兰提取物、中药粗提取物、表面活性剂和水搅拌混匀，即得含紫茎泽兰提取物的植物源杀菌剂组合物。实施例4：紫茎泽兰提取液与其他药用植物提取液不同配比的室内抑菌试验供试菌：烟草黑胫病菌供试药剂：紫茎泽兰乙醇提取液(z3)、补骨脂乙醇提取液(b)、黄柏乙醇提取液(h)以及上述配比的植物源杀菌剂组合物。采用菌丝生长速率法对供试菌进行了离体生物活性测定。以最小二乘法求得毒力回归方程(y＝a+bx)，并由此计算出每种药剂的ec50值，然后按wadley的方法评价药剂复配的增效作用，并通过下述公式计算理论ec50。式中：x1——复配剂的ec50理论值，mg/l；pa——复配剂中a的百分含量，％；pb——复配剂中b的百分含量，％；a——复配剂中a的ec50，mg/l；b——复配剂中b的ec50，mg/l。增效比值(sr)＝ec50理论值/ec50实际值以增效比值(sr)判定不同混合组配的抑菌活性作用，sr<0.5为拮抗作用，sr＝0.5～1.5为相加作用，sr>l.5为增效作用。实验结果见表4：由表4可知，紫茎泽兰提取液与其他药用植物在重量比为20-40:2-5的混配时与单剂相比，具有较强的协同增效的效果，可有效抑制烟草黑胫病菌的生长。实施例5：紫茎泽兰提取液与其他药用植物提取液不同配比的田间防效试验(1)试验材料：供试作物及对象：烟草黑胫病供试药剂：紫茎泽兰乙醇提取液(z3)、补骨脂乙醇提取液(b)以及不同重量比的复配液sjj-01～sjj-12；所有药剂均加入助剂2.5g十二烷基苯磺酸钠和1.5g聚乙烯吡咯烷酮。清水对照(ck)(2)试验设计参照国家标准gb/t17980.90-2004《农药田间药效试验准则(二)杀菌剂防治烟草黑胫病》设计小区试验。本试验8个复配药剂，2个单剂，1个空白对照，3次重复，共33个小区。小区间及四周均有隔离行，小区面积12m2，小区各处理随机排列。将药剂sjj-01～sjj-12，z3，b-03加水稀释500倍，再喷施到植株叶面，以叶面上出现一层水膜，药液不下滴为宜。每小区采用五点取样法调查，每点查5株～10株，记录调查总株数及各级病株数。分级方法：0级：全株无病；1级：茎部病斑不超过茎围的三分之一，个别叶片萎焉；3级：茎部病斑不超过茎围的二分之一，或半数以下叶片轻度凋萎，或下部少数叶片出现病斑；5级：茎部病斑超过茎围的二分之一，或半数以上叶片轻度凋萎；7级：茎部病斑环绕茎围，或三分之二以上叶片凋萎；9级：病株全部叶片凋萎或枯死。计算公式：(3)试验结果根据上述分级方法和数据计算公式统计施药后10d后的总株数和病株数，计算得到病情指数和防治效果，结果见表5。表5：供试药剂配比稀释倍数药后病情指数防治效果(％)z3\80023.6751.24b\80017.5661.18h\150010.4377.91z3+b20:2150010.4678.32z3+b20:315009.8181.18z3+b20:4150011.8774.32z3+b30:2150010.8876.96z3+b30:4150010.2379.41z3+b30:5150011.3875.22z3+b40:3150010.1580.21z3+b40:580023.6751.24由表5可知，含紫茎泽兰提取液的植物源杀菌剂组合物对烟草黑胫病具有较好的防效。喷施本发明的含紫茎泽兰提取液的植物源杀菌剂组合物对烤烟生长无不良影响，也不污染周围环境。上述说明示出并描述了发明的若干优选实施例，但如前所述，应当理解发明并非局限于本文所披露的形式，不应看作是对其他实施例的排除，而可用于各种其他组合、修改和环境，并能够在本文所述发明构想范围内，通过上述教导或相关领域的技术或知识进行改动。而本领域人员所进行的改动和变化不脱离发明的精神和范围，则都应在发明所附权利要求的保护范围内。当前第1页12