一种紫鹅绒组织培养用培养基系列及组培方法与流程

文档序号:14188809阅读:458来源:国知局

本发明涉及植物组织培养领域,具体涉及一种紫鹅绒组织培养用培养基系列及培养方法。



背景技术:

紫鹅绒(gynuraaurantiana)别名红凤菊、紫绒三七,为

菊科土三七属多年生长绿蔓性草本植物。茎粗壮多枝,叶对生,长卵形,叶缘具有较粗的重锯齿。因茎叶密披状如鹅绒的紫红色细毛而得名,在观叶植物中很有特色。紫鹅绒喜温暖、湿润、光照充足的半阴湿及通风环境,忌阳光直射,耐寒性不强。生长适温为18-25℃,越冬温度8℃左右。

目前紫鹅绒在市面上仍不算常见,大多数以进口为主,近年来逐步在国内流行起来。由于其特殊的观赏特点,紫鹅绒作为盆栽、绿墙植物越来越受到大众的青睐。

现阶段,紫鹅绒的繁殖主要以扦插为主,该方法繁殖系数小,在紫鹅绒需求逐渐增大的现状下,满足不了市场需求,寻求高效的繁殖手段,对紫鹅绒发展市场具有重要意义。而组织培养快繁技术具有繁殖系数大,培养性状稳定,适合批量生产的特点,能够符合紫鹅绒大量生产繁殖的市场需求。



技术实现要素:

本发明提供一种紫鹅绒组织培养用培养基系列及组培方法,能够提高紫鹅绒繁殖系数,加快繁殖速度,紫鹅绒繁殖不受外界环境影响,后代性状稳定,适合产业化生产。

为了实现上述目的,本发明提供以下紫鹅绒组织培养用培养基系列方案。

一种紫鹅绒组织培养用培养基系列包括外植体诱导培养基、增殖继代培养基和生根培养基。

进一步地,所述外植体诱导培养基由琼脂6g·l-1,基本培养基ms,6-苄基嘌呤6-ba1.0~2.0mg·l-1和萘乙酸naa0.1~0.5mg·l-1组成。

进一步地,所述增殖继代培养基由琼脂610g·l-1,基本培养基ms,6-苄基嘌呤6-ba1.0~2.0mg·l-1,萘乙酸naa0.1~0.3mg·l-1组成。

进一步地,所述生根培养基由琼脂6g·l-1,基本培养基ms,3-吲哚丁酸iba0.1~0.5mg·l-1,添加0.1%活性炭组成。

为了实现紫鹅绒快速批量繁殖生产,本发明提供以下组培方法技术方案,其特征是。

一种紫鹅绒组织培养方法包括以下步骤。

(1)外植体的获取。

(2)外植体的消毒灭菌。

(3)接入本发明培养基系列进行组织培养。

(4)生根后组培苗进行移栽种植。

进一步地,所述步骤(1)中,选择生长健壮的幼嫩茎段作为外植体。

进一步地,所述步骤(2)中,将外植体的叶片先用毛笔在流水下轻轻刷洗茎段,再用1%洗洁精水浸泡10~20min,并用流动的自来水冲洗干净。

进一步地,所述步骤(2)中,外植体经过第一次清洗后在超净工作台上,用75%乙醇溶液浸泡约10~30s,无菌水冲洗3~4次,再置于升汞溶液中浸泡10~15min,最后用无菌水冲洗4~5次。

进一步地,所述步骤(2)中,清洗完毕的外植体吸干表面水分后,把茎段切成1~2cm带1个侧芽的茎段,待接种。

进一步地,所述步骤(3)中,将步骤(2)制得的外植体在超净工作台上接种于外植体诱导培养基上,培养20~30天,得到不定芽。

进一步地,所述步骤(3)中,在不定芽诱导长至1~2cm时,将其从茎段上剪下,接种到增殖继代培养基上进行培养,得到幼芽。

进一步地,所述步骤(3)中,在幼芽生长为2~3cm高的壮苗时,切取芽枝转入生根培养基中进行生根培养。

进一步地,所述步骤(4)中,将进行生根培养后的紫鹅绒组培苗进行炼苗后移栽。

本发明与现有技术相比,具有以下优势。

通过本发明提供的一种紫鹅绒组织培养用培养基系列和组培方法,能够改善传统扦插繁殖方式紫鹅绒繁殖系数低的状况,紫鹅绒繁殖系数大大提高,组培条件下,紫鹅绒繁殖所受外在环境因素影响小,繁殖速度增快,后代繁殖性状稳定,对于批量产业化生产有明显的优势。

本发明的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。

附图说明

图1为一种紫鹅绒组织培养方法流程图。

具体实施方式

下面将结合流程图和实施例,对本发明作进一步描述,但它们不是对本发明的进一步限制。

实施例1。

组培操作按照以下步骤进行。

(1)培养基配制,3种培养基配方如下。

外植体诱导培养基,包括琼脂6g·l-1,基本培养基ms,6-苄基嘌呤6-ba0.5mg·l-1和萘乙酸naa0.1mg·l-1

增殖继代培养基,包括琼脂610g·l-1,基本培养基ms,6-苄基嘌呤6-ba1.0mg·l-1,萘乙酸naa0.1mg·l-1

生根培养基,包括琼脂6g·l-1,基本培养基ms,3-吲哚丁酸iba0.1mg·l-1,添加0.1%活性炭。

称取琼脂6g·l-1,用蒸馏水加热烧开熔化琼脂,待琼脂完全熔化后,把调配好的激素和稀土元素溶液加入,用ph试纸测ph值,并用0.1mol·l-1的naoh或hcl调节ph值为5.8,最后加水定容至所需体积。

将配好的培养基分装于培养瓶中,分装时注意不要把培养基倒在瓶口上,以防引起污染,然后用封口膜或瓶盖封口,装入高压蒸汽灭菌锅进行灭菌。

(2)从预先准备好的紫鹅绒中选取健壮、合适的个体作为外植体供体。

(3)将外植体的叶片先用毛笔在流水下轻轻刷洗茎段,再用1%洗洁精水浸泡10min,并用流动的自来水冲洗干净。在超净工作台上,用75%乙醇溶液浸泡约10s,无菌水冲洗3~4次,再置于升汞溶液中浸泡15min,最后用无菌水冲洗4~5次。吸干材料表面水分后,把茎段切成1cm带1个侧芽的茎段,待接种。

(4)将步骤(2)制得的外植体在超净工作台上接种于外植体诱导培养基上,培养20~30天后,当诱导的不定芽长至1~2cm时,将其从茎段上剪下,接种到增殖继代培养基上进行培养;当芽生长为2~3cm高的壮苗时,切取芽枝转入生根培养基中进行生根培养。

(5)将进行生根培养后的紫鹅绒组培苗进行炼苗后移栽。

实施例2。

组培操作按照以下步骤进行。

(1)培养基配制,3种培养基配方如下。

外植体诱导培养基,包括琼脂6g·l-1,基本培养基ms,6-苄基嘌呤6-ba1.0mg·l-1和萘乙酸naa0.3mg·l-1

增殖继代培养基,包括琼脂610g·l-1,基本培养基ms,6-苄基嘌呤6-ba2.0mg·l-1,萘乙酸naa0.3mg·l-1

生根培养基,包括琼脂6g·l-1,基本培养基ms,3-吲哚丁酸iba0.5mg·l-1,添加0.1%活性炭。

称取琼脂6g·l-1,用蒸馏水加热烧开熔化琼脂,待琼脂完全熔化后,把调配好的激素和稀土元素溶液加入,用ph试纸测ph值,并用0.1mol·l-1的naoh或hcl调节ph值为5.8,最后加水定容至所需体积。

将配好的培养基分装于培养瓶中,分装时注意不要把培养基倒在瓶口上,以防引起污染,然后用封口膜或瓶盖封口,装入高压蒸汽灭菌锅进行灭菌。

(2)从预先准备好的紫鹅绒中选取健壮、合适的个体作为外植体供体。

(3)将外植体的叶片先用毛笔在流水下轻轻刷洗茎段,再用1%洗洁精水浸泡20min,并用流动的自来水冲洗干净。在超净工作台上,用75%乙醇溶液浸泡约30s,无菌水冲洗3~4次,再置于升汞溶液中浸泡10min,最后用无菌水冲洗4~5次。吸干材料表面水分后,把茎段切成2cm带1个侧芽的茎段,待接种。

(4)将步骤b制得的外植体在超净工作台上接种于外植体诱导培养基上,培养20~30天后,当诱导的不定芽长至1~2cm时,将其从茎段上剪下,接种到增殖继代培养基上进行培养。

(5)将进行生根培养后的紫鹅绒组培苗进行炼苗后移栽。

实施例3。

(1)培养基配制,3种培养基配方如下。

外植体诱导培养基,包括琼脂6g·l-1,基本培养基ms,6-苄基嘌呤6-ba2.0mg·l-1和萘乙酸naa0.5mg·l-1

增殖继代培养基,包括琼脂610g·l-1,基本培养基ms,6-苄基嘌呤6-ba1.0mg·l-1,萘乙酸naa0.2mg·l-1

生根培养基,包括琼脂6g·l-1,基本培养基ms,3-吲哚丁酸iba0.5mg·l-1,添加0.1%活性炭。

称取琼脂6g·l-1,用蒸馏水加热烧开熔化琼脂,待琼脂完全熔化后,把调配好的激素和稀土元素溶液加入,用ph试纸测ph值,并用0.1mol·l-1的naoh或hcl调节ph值为5.8,最后加水定容至所需体积。

将配好的培养基分装于培养瓶中,分装时注意不要把培养基倒在瓶口上,以防引起污染,然后用封口膜或瓶盖封口,装入高压蒸汽灭菌锅进行灭菌。

(2)从预先准备好的紫鹅绒中选取健壮、合适的个体作为外植体供体。

(3)将外植体的叶片先用毛笔在流水下轻轻刷洗茎段,再用1%洗洁精水浸泡15min,并用流动的自来水冲洗干净。在超净工作台上,用75%乙醇溶液浸泡约20s,无菌水冲洗3~4次,再置于升汞溶液中浸泡12min,最后用无菌水冲洗4~5次。吸干材料表面水分后,把茎段切成1.5cm带1个侧芽的茎段,待接种。

(4)将步骤(2)制得的外植体在超净工作台上接种于外植体诱导培养基上,培养20~30天后,当诱导的不定芽长至1~2cm时,将其从茎段上剪下,接种到增殖继代培养基上进行培养;当芽生长为2~3cm高的壮苗时,切取芽枝转入生根培养基中进行生根培养。

(5)将进行生根培养后的紫鹅绒组培苗进行炼苗后移栽。

以上仅为本发明中较佳的实施例,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内所做的任何修改,等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

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