专利名称：一种香菇多糖分离纯化的方法
技术领域：
本发明涉及一种香菇多糖分离纯化的方法，可用做消化系统等恶性肿瘤的治 疗，属于香菇多糖分离纯化技术领域。
背景技术：
香菇多糖是从人工培植的真菌类香菇子实体中提取、分离、纯化所得到的单 一多糖。作为抗肿瘤药物有其特殊的优点能调节免疫功能，而且使用剂量低、 疗效较好、毒副作用小等。主要做消化系统等恶性肿瘤的治疗。常常与化疗药物 配合使用，免除化疗所产生的不良反应。特别适合不能手术或复发的胃癌病人， 提高患者的生活质量，延长患者的生命。
香菇多糖的提取分离、纯化非常复杂，而且效率低、成本高、不易批i生产。 原有方法是香菇多糖粗糖溶液经圆柱型层析柱中的DEAE—纤维素吸附、洗脱分 离后，冷冻干燥所得到的香菇多糖单一组份。慮有方法所遇困难是由于香燕多
糖不易溶解，溶液的粘度大，而传统的层析柱由柱接口1和圆柱体2连接而成， 如图1所示，在>0.25%溶解含量时，通过量只能达到500mg/cm2，过之则易堵塞， 因粗品溶液中，如溶解含量大时，香菇多糖的粘稠溶液逐步聚积在DEAE—纤维 素临界表面，无法流通，形成堵塞达不到吸附分离的效果。
发明内容
本发明的目的是提供一种在层析柱中不易堵塞,可批量生产的香恭多糖分离 纯化的方法。
为实现以上目的，本发明的技术方案是提供一种香菇多糖分离纯化的方法，
其特征在于，香菇多糖粗品经预处理后，通过经改变异型柱中DEAE—纤维素吸
附、洗漆、各种浓度的NaOH溶液洗脱、中和、透析、沉淀、冻干而得到单一香
菇多糖，其方法为
步骤1.香菇多糖粗品经预处理，
将香菇多糖粗糖按2.5。/。以下溶解含1:的范围加热至50X: —99",溶解
在水中后冷却，在常温下扎透析袋，用自来水透析》60H后，透析液浓缩 至原体积的1/6—1/9范围内，在常温搅拌的条件下按l: l.l加入药用乙 醇沉淀，沉淀物分离出后，经2倍沉淀物体积的药用乙醇洗錄，再次分离 出沉淀物，在《60t条件下真空干燥，得到经预处理的香菇多糖； 步骤2.香菇粗糖按2.5%以下的比例范围内，加热至50'C—99'C,全部溶解在水 中，溶液自然冷却至常温，装在异型柱中，通过DEAE—纤维素吸附、 洗涤、浓度为0.5mol/L以下的NaOH溶液洗脱、中和、透析、浓缩、冻 干方法，得到香菇多糖单一组份。
所述的异型层析柱由柱接口连接上大下小漏斗体和圆柱体组成，其漏斗 体最大直径为圆柱体直径的1一10倍。
本发明将原层析柱从柱接口以下分成二部分，上半部分为坛大通过面积， 将原来的直柱形改成上大下小漏斗形，下半部分保持原有几何形状，使得效果不 变，采取逐步过渡的形式上下结合，在DEAE—纤维素与香菇多糖溶液临界接触 面增加了 1 10倍以上接触面积，另外再配以香菇多糖的预处理，使之能适应该 异型柱条件的吸附，改香燕多糖分离纯化变为香菇多糖动态高效分离纯化，产品 在经洗漆、洗脱、透析、沉淀、冻干等一系列处理后，即得到单一香菇多糖。
本发明的优点是适应大批量工业化生产，在方法简便、质量保证的前提下能 获得高效率、低成本的产品。
图1为原层析柱结构示意图；图2为本发明层析柱结构示意图。
具体实施例方式
以下结合附图和实施例对本发明作进一步说明。
实施例
如图2所示，为本发明层析柱结构示意图，所述的异型层析柱由柱接口 1 连接上大下漏斗体2和圆柱体2组成，其漏斗体最大直径为圆柱体直径的3倍。 一种香菇多糖分离纯化的方法为 步骤1.香菇多糖粗品经预处理
将香菇多糖粗糖按2%溶解含量加热至50X:—99"C，溶解在水中后冷却，
在常温下扎透析袋，用自来水透析^60H后，透析液浓縮至原体积的1/6—1/9 范围内，在常温搅拌的条件下按l: l.l加入药用乙醇沉淀，沉淀物分离出后， 经2倍沉淀物体积的药用乙醇洗涤，再次分离出沉淀物，在《60t条件下真空干 燥，得到经预处理的香菇多糖；
步骤2.香菇粗糖按2%的比例范围内，加热至50'C—99'C,全部溶解在水中，溶 液自然冷却至常温，装在异型柱中，通过DEAE—纤维素吸附、洗涤、浓 度为0.5mol/L以下的NaOH溶液洗脱、中和、透析、浓縮、冻干方法， 得到香菇多糖单一组份。 步骤2中的浓度为0.5mol/L以下的NaOH溶液洗脱、中和、透析、浓縮、
冻干方法为常规提取方法。
权利要求
1.一种香菇多糖分离纯化的方法，其特征在于，香菇多糖粗品经预处理后，通过经改变异型柱中DEAE-纤维素吸附、洗涤、各种浓度的NaOH溶液洗脱、中和、透析、沉淀、冻干而得到单一香菇多糖，其方法为步骤1.香菇多糖粗品经预处理，将香菇多糖粗糖按2.5％以下溶解含量的范围加热至50℃-99℃溶解，在水中后冷却，在常温下扎透析袋，用自来水透析≥60H后，透析液浓缩至原体积的1/6-1/9范围内，在常温搅拌的条件下按1∶1.1加入药用乙醇沉淀，沉淀物分离出后，经2倍沉淀物体积的药用乙醇洗涤，再次分离出沉淀物，在≤60℃条件下真空干燥，得到经预处理的香菇多糖；步骤2.香菇粗糖按2.5％以下的比例范围内，加热至50℃-99℃，全部溶解在水中，溶液自然冷却至常温，装在异型柱中，通过DEAE-纤维素吸附、洗涤、浓度为0.5mol/L以下的NaOH溶液洗脱、中和、透析、浓缩、冻干方法，得到香菇多糖单一组份。
2. 根据权利要求1所述一种香菇多糖分离纯化的方法，其特征在于，所述的异 型层析柱由柱接口 (1)连接上大下漏斗体(2)和圆柱体(2)组成，其漏斗 体最大直径为圆柱体直径的1一10倍。
全文摘要
本发明涉及一种香菇多糖分离纯化的方法，其特征在于，将传统层析柱的圆柱型柱改为异型柱后，香菇多糖粗品经预处理，使之能适应该异型柱条件的吸附，改香菇多糖分离纯化变为香菇多糖动态高效分离纯化，产品在经洗涤、洗脱、透析、沉淀、冻干等一系列处理后，即得到单一香菇多糖。本发明的有点是适应大批量工业化生产，在方法简便、质量保证的前提下能获得高效率、低成本的产品。
文档编号A23L1/28GK101161112SQ20061011695
公开日2008年4月16日 申请日期2006年10月10日 优先权日2006年10月10日
发明者朱益锋, 王立峰, 幸 金 申请人:上海慈瑞医药科技有限公司