专利名称：一种用吡嗪类小分子化合物诱导干细胞分化的方法
技术领域：
本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种用吡嗪类小分子化合物诱导干细胞分化 的方法。
背景技术：
川弯嗪(Ligustrazine)来源于伞形科植物川弯的干燥根莖,为批嗪类生物碱。川芎辛香行散，温通血脉，上行头颠，下走血海，功能活血行气，祛风止痛，被前人誉为血中之气药。现代研究表明川芎嗪有解痉、降低血管阻力和强烈抑制血小板聚集的作用，对已聚集的血小板有解聚作用，能明显降低全血粘度；还能增加冠脉流量、有改善心肌供氧、降低心肌耗氧的作用，治疗缺血性脑血管及冠心病效果良好，还可以治疗偏头痛和重症肺心病。川芎嗪的分子量为136. 20，分子式=C8H12N2，化学结构式如下
权利要求
1.川芎嗪在制备促进离体干细胞定向分化为特定组织细胞产品中的应用；或川芎嗪在制备用于离体干细胞移植治疗神经退行性疾病的产品和/或在制备修复重建损伤神经组织产品中的应用；或JI丨芎嗪在促进离体干细胞定向分化为特定组织细胞中的应用。
2.根据权利要求I所述的应用，其特征在于所述产品为药物；所述干细胞为胚胎干细胞、骨髓间充质干细胞和神经干细胞中的任意一种；所述特定组织细胞为神经细胞和骨细胞中的任意一种；所述离体干细胞定向分化为特定组织细胞为如下1)-4)中的任意一种1)离体胚胎干细胞定向分化为神经细胞；2)离体骨髓间充质干细胞定向分化为神经细胞；3)离体神经干细胞定向分化为神经细胞；4)离体骨髓间充质干细胞定向分化为成骨细胞；所述促进干细胞定向分化为特定组织细胞通过提高分化率体现。
3.—种由胚胎干细胞定向分化为神经细胞的培养基，按照如下方法制备将川芎嗪、N2添加剂、B27添加剂、胎牛血清、非必需氨基酸和DMEM/F12培养液混合，得到分化培养基，所述川芎嗪在所述分化培养基中的浓度为10_6mOl/L-10_8mOl/L ;所述N2添加剂在所述分化培养基中的百分浓度为1% (质量百分含量)；所述B27添加剂在所述分化培养基中的百分浓度为1% (质量百分含量)；所述胎牛血清在所述分化培养基中的浓度为I% (体积百分含量)；所述非必需氨基酸在所述分化培养基中的浓度为O. lmmol/L ;所述川芎嗪在分化培养基中的浓度具体为I(T6moI/L、l(TmoI/L或IΟΛιοI/L。
4.一种由胚胎干细胞定向分化为神经细胞的方法，包括如下步骤将胚胎干细胞在权利要求3所述的分化培养基中培养，得到神经细胞；所述培养时间为6-10天，所述培养时间具体为10天。
5.一种由骨髓间充质干细胞定向分化为神经细胞的培养基，按照如下方法制备将川芎嗪、碱性成纤维细胞生长因子、胎牛血清和L-DMEM培养液混合，得到分化培养基，所述川芎嗪在分化培养基中的浓度为10_6mOl/L-10_8mOl/L ;所述碱性成纤维细胞生长因子在分化培养基中的浓度为10ng/mL ;所述胎牛血清在分化培养基中的浓度为20% ;所述川芎嗪在分化培养基中的浓度具体为10-6mol/L、l(Tmol/L*10-8mol/L。
6.一种由骨髓间充质干细胞定向分化为神经细胞的方法，包括如下步骤将骨髓间充质干细胞在权利要求5所述的分化培养基中培养，得到神经细胞；所述培养时间为6-10天，所述培养时间具体为7天。
7.一种由神经干细胞定向分化为神经细胞的培养基，按照如下方法制备将川芎嗪和DMEM/F12培养液混合，得到分化培养基，所述川芎嗪在分化培养基中的浓度为10_6mol/L-IO^moI/L ;所述川芎嗪在分化培养基中的浓度具体为10-6mol/L、10-7mol/L或10_8mol/L。
8.一种由神经干细胞定向分化为神经细胞的方法，包括如下步骤将神经干细胞在权利要求7所述的分化培养基中培养，得到神经细胞；所述培养时间为7-10天，所述培养时间具体为7天或10天。
9.一种由骨髓间充质干细胞定向分化为成骨细胞的培养基，按照如下方法制备将川芎嗪、碱性成纤维细胞生长因子、胎牛血清和DMEM培养液混合，得到分化培养基，所述川芎嗪在分化培养基中的浓度为10_8-10_6mol/L ;所述碱性成纤维细胞生长因子在分化培养基中的浓度为10ng/mL;所述胎牛血清在分化培养基中的浓度为20% ;所述川芎嗪在分化培养基中的浓度具体为I(T6moI/L、l(TmoI/L或IΟΛιοI/L。
10.一种由骨髓间充质干细胞定向分化为成骨细胞的方法，包括如下步骤将骨髓间充质干细胞在权利要求9所述的分化培养基中培养，得到成骨细胞；所述培养时间6-21天，所述培养时间具体为21天。
全文摘要
本发明公开了一种用吡嗪类小分子化合物诱导干细胞分化的方法。本发明提供的一种川芎嗪在促进干细胞定向分化为特定组织细胞中的应用，所述干细胞为胚胎干细胞、骨髓间充质干细胞和神经干细胞中的任意一种；所述特定组织细胞为神经细胞和成骨细胞中的任意一种。本发明的实验证明，本发明提供吡嗪类小分子化合物川芎嗪的一种新用途，是由川芎嗪诱导干细胞(包括胚胎干细胞、神经干细胞、骨髓间充质干细胞)体外定向分化为多种单一类型细胞，包括神经细胞、成骨细胞、胰岛细胞、内皮细胞等，可以提高分化率和缩短分化时间。
文档编号C12N5/0775GK102952778SQ20111025044
公开日2013年3月6日 申请日期2011年8月29日 优先权日2011年8月29日
发明者田杰 申请人:北京清美联创干细胞科技有限公司