专利名称：一种烟草表皮毛发育相关基因NtTTG2及其重组表达载体和应用的制作方法
技术领域：
本发明属于分子生物学领域，涉及一种烟草表皮毛发育相关基因NtTTG2及其重组表达载体和应用。
背景技术：
在植物体表面的表皮毛在不同种类的植物上表现出不同的形态特征。一般来说， 表皮毛是由表皮细胞分化出的毛状单细胞或者多细胞结构，这种结构可以作为植物最外层的天然屏障，有着不可替代的保护功能，如可以减弱植物在紫外线、干旱、辐射和毒性物质等非生物胁迫下所受到的伤害[1]。另外，植物表皮毛在植物抗击虫害和抵御病原物侵染过程中也起着非常重要的作用。在植物中，表皮毛发育的控制是一个相当复杂的过程。有许多证据显示，表皮毛的起始和发育是受正向调控因子和负向调控因子调控的。目前，对于拟南芥的表皮毛发育模型已经研究的比较透彻，这也成为了研究植物细胞分化分子基础的最好的模型之一。拟南芥的表皮毛是无腺体的单细胞表皮毛，一般有3个分支，在整个植株中均有分布。它的发育是一个由时空控制的过程，已经分离到的表皮毛突变体70多个，可归以下几种类型无表皮毛型、表皮毛簇生型、表皮毛减少型、表皮毛扭曲型和玻璃状表皮毛型， 涉及二十多个基因的参与 。为了阐释表皮毛发育起始的控制机制，克隆调控基因和研究这些调控基因的功能是非常必要的。目前认为，在这些基因中，有三个最为重要，分别是编码myb的GL1，编码bHLH的GL3和编码WD-40的TTG1，这三个基因表达的产物在矮牵牛中形成三元复合体，控制着花青苷的生物合成 ]。在拟南芥中，GLl (GLABR0US1)和 TTGl (TRANSPARENTTESTA GLABRA 1)两个基因发生功能缺失的突变体，叶片的表皮毛完全消失。GL3(GLABROUS;3)基因突变的突变体数量和表皮毛的分支明显减少或消失。表皮毛包括分泌型和非分泌型两种，是由表皮细胞层分化出来的单细胞或多细胞的结构。分泌型表皮毛具有腺体，可以分泌多种化合物，如多糖、机酸、萜烯类或者盐等。拟南芥的表皮毛是非分泌型的单细胞表皮毛，是表皮细胞分化成的三叉结构，一般认为起物理防卫的功能，表皮毛密度的增加可以减少被天敌选择的几率M。这种以表皮毛作为物理屏障的功能是一种直接的抗虫机制，可以避免植食性昆虫的伤害。另外，有些植物的表皮毛可以分泌化学物质来抵御外敌侵害，如分泌与防卫相关的酶类等等。烟草(Nicotiana repanda)表皮毛中含有去甲基尼古丁，这种生物碱可以抗击植食性昆虫，比尼古丁毒性更大。研究表明，去甲基尼古丁的产生是受茉莉酸甲酯或伤诱导的，而且被诱导后积累非常迅速，在抗虫中具有重要作用。表皮毛的分泌物含有大量的对天敌具有毒性或防御作用的物质，可以占到叶片干重的17% [5]0 Wagner等2004年实验证明，烟草表皮毛的分泌物在抗击蚜虫伤害起着重要的作用。表皮毛的分泌物可以流到叶片的表皮细胞上，当蚜虫爬过时，这些分泌物就会粘附于蚜虫身体上，从而被蚜虫带到植物的其他部位，启动其他部位的抗虫防卫反应。
以往研究证明，拟南芥表皮毛有利于真菌孢子和菌丝的吸附，无毛突变体gll 增强了对真菌侵染耐受能力。但进一步研究发现，表皮毛中可以高水平表达α-1， 3-glucanase，具有这种特性的表皮毛可以明显提高对真菌侵染的抗性。这种特性是不依赖于水杨酸或者茉莉酸防卫信号通路，只依赖于表皮毛内表达的α -l，3-glUCanaSe[6]。表皮毛在减轻植株对重金属的毒害也有重要作用。如拟南芥叶片表皮毛中可以积累十倍于表皮细胞的有毒金属量，还检测到高水平的谷胱甘肽的生物合成，表皮毛这种充当毒性分子存储库的功能可以降低植物中的养分值，从而防止植食性动物的袭击[7]。另外，植物的表皮毛具有较高的反射率，能够有效的反射大量的紫外线，减少紫外线直接照射与表皮细胞上，减轻植物所受的UV-B辐射破坏。总之，在植物的发育和防卫中，表皮毛起着非常重要的作用，而模式植物拟南芥表皮毛的发育调控机制的解析也带动了许多其他植物如烟草表皮毛的相关研究。这些研究将能更好的阐明表皮毛发育机制以及为抗病、高产基因工程育种提供优秀的基因资源。参考文献[l]Traw Μ. B and Feeny P (2008). Glucosinolates and trichomes track tissue value in two sympatric mustards. Ecology 89 :763-772.[2]Kirik V, Simon M, Huelskamp M, Schiefelbein J(2004). The ENHANCER OF TRY AND CPC lgene acts redundantly with TRIPTYCH0N and CAPRICE in trichome and root hair cell patterning in Arabidopsis. Dev. Biol. 268 :506-513.[3]Walker A. R,Davison P. A,Bolognesi-ffinfield A. C, James C. M,Srinivasan N, Blundell T. L, Esch J. J, David Marks M，Gray J. C(1999). The TRANSPARENT TESTA GLABRAllocus, which regulates trichome differentiation and anthocyanin biosynthesis in Arabidopsis, encodes a WD40repeat protein. Plant Cell 11 1337-1349.[4]Agrawal A. A and Fishbein M(2006). Plant defense syndromes. Ecology 87 :S132-S149.[5] Ambrosio S. R, Oki Y, Heleno V. C, Chaves J. S, Nascimento P. G, Lichston J. E, Constantino M. G, Varanda Ε. M, Da Costa F B (2008). Constituents of glandular trichomes of Tithonia diversifolia !relationships to herbivory and antifeedant activity. Phytochemistry. 69 :2052-2060.[6]Calo L, Garcia I, Gotor C, Romero L. C(2006). Leaf hairs influence phytopathogenic fungus infection and confer an increased resistance when expressing a Trichoderma a~l,3-glucanase. J. Experimental Botany. 57 :3911-3920.[7]Davidian J. C, Grill D, De Kok L. J, Stulen I，Hawkesford M. J, Schnug E, Rennenberg H(2003) · Sulfur transport and assimilation in plants !regulation, interaction, signaling. Leiden :Backhuys Publishers,pp :91-99.
发明内容
本发明的目的是提供一种烟草表皮毛发育相关基因NtTTG2。本发明的另一个目的是提供一种含有NtTTG2基因的重组表达载体。
本发明的又一目的是提供该基因的应用。一种含WD-40结构域的基因NtTTG2，该基因来源于普通烟草(Nicotiana tabacum)，核苷酸序列如SEQ ID NO. 1所示的。所述的含WD-40结构域的烟草表皮毛发育相关基因NtTTG2编码的蛋白质，其氨基酸序列如SEQ ID NO. 2所示的。一种重组表达载体，包括所述的烟草表皮毛发育相关基因NtTTG2和植物表达载体。所述的植物表达载体选自PBI121，PBI221或pCAMBIA1301中的一种。所述的植物表达载体选自pCAMBIA1301。所述的重组表达载体是通过将基因NtTTG2插入到载体pCAMBIA1301酶切位点Sac I/KpnI 间得到的载体 pCAMBIA1301: :NtTTG2。所述的重组表达载体是通过将基因NtTTG2插入到载体pCAMBIA1301酶切位点 Sac I/Kpnl间，并通过BamH I/Xba I酶切位点在NtTTG2后插入RFP基因得到的双元载体 PCAMBIA1301::NtTTG2-RFP。一种转化体，由所述的重组表达载体导入宿主细胞所得，所述的宿主细胞优选大肠杆菌细胞或农杆菌细胞。所述的烟草表皮毛发育相关基因NtTTG2在导入植物获得促进生长和/或增加产量的品种中的应用，优选导入烟草或小麦获得促进生长和/或增加产量的品种中的应用。所述的含烟草表皮毛发育相关基因NtTTG2的重组表达载体在导入植物获得促进生长和/或增加产量的品种中的应用，优选导入烟草或小麦获得促进生长和/或增加产量的品种中的应用。有益效果本发明提供了一种新的烟草表皮毛发育相关基因NtTTG2，该基因来源于普通烟草，含WD-40结构域，具有促进植物生长发育及种子饱满、种子数量的功能。利用该基因构建的重组表达载体，过量表达NtTTG2基因，将其转入农杆菌并进一步转化烟草，所获得的 NtTTG2过表达植株明显表现为促进生长及增加产量。
图 lpCAMBIA1301: :NtTTG23-UTK-intron-NtTTG23-υτκ 和 pCAMBIA1301: :NtTTG2_RFP 载体图谱。图 2pCAMBIA1301 :NtTTG2_RFP 载体酶切验证图，A. pCAMBIAl301 NtTTG2载体酶切验证图。M为Marker，泳道1为载体酶切验证图， 用SacI和KpnI进行酶切；B. pCAMBIA1301 :NtTTG2-RFP载体酶切验证图。M为Marker，泳道1为用Mc I和KpnI进行酶切，泳道2为用BamH I和)(ba I进行酶切，泳道3为用Sac I和Xba I进行酶切。图3潮霉素抗性平板筛选，A为非转基因烟草，B和C为转基因烟草种子。图 4pCAMBIA1301: :NtTTG2-intron-NtTTG2 转基因烟草基因表达检测，A. Northern杂交检测NtTTG2基因表达量，其中TCNC为野生型，TTG2iNCl，2，3为不同转基因株系；B.实时荧光定量PCR检测NtTTG2基因表达量，其中TCNC为野生型， TTG2iNCl，2，3为不同转基因株系。图5pCAMBIA1301: :NtTTG2-RFP转基因烟草基因表达检测，A. Northern杂交检测NtTTG2基因表达量，其中TCNC为野生型，T0TNC1，2，3为不同转基因株系；B.实时荧光定量PCR检测NtTTG2基因表达量，其中TCNC为野生型，TOTNC 1，2，3分别为不同转基因株系。图 6pCAMBIA1301: :NtTTG23 UTK-intron-NtTTG23 UTK(沉默植株)生长产量表型， A.野生型(TCNC)和沉默植株(TTG2iNC4)烟草在花盆中生长45天和115天表型；B.野生型(TCNC)和沉默植株(TTG2iNC4)烟草在种植10、20、30、40和50天后生长高度测定；C.野生型(TCNC)和沉默植株(TTG2iNC4)烟草在种植10、20、30、40和50天后鲜重测定。图7pCAMBIA1301: :NtTTG2-RFP (过表达植株)生长表型，A.野生型(TCNC)和过表达植株(T0TNC1，2，3)在生长45天后表型；B.野生型(TCNC)和过表达植株(T0TNC1,2, 3)花及角果表型；C.野生型(TCNC)和沉默植株(T0TNC1，2，3)烟草在种植10、20、30、40和 50天后鲜重测定；D.野生型(TCNC)和沉默植株(T0TNC1，2，;3)烟草角果内种子数统计。
具体实施例方式实施例1. NtTTG2基因的克隆与序列结构分析烟草(Nicotiana tabacum)品种NC89的种子直接播于装有营养土的直径为15cm 的花盆中，温室O3-27°C、10h光照/14h黑暗)培养，40日龄植株用于RNA的提取。总RNA提取以普通烟草为材料，总RNA的抽提采用Trizol试剂(Invitrogen， USA)按照说明操作，用分光度计检测其RNA含量和质量。反转录生成第一链取2μ g RNA作模板，根据!Iomega公司M-MLV反转录酶配套试剂使用说明，分别加入下游引物0. 5 μ g，定容至15μ L，70°C变性5min，立即在冰上放置 5min。然后分别加入 M-MLV 5 X buffer 5 μ L，dNTP (25mM) 5 μ 1，rRNasin Ribonuclease Inhibitor 25U,M-MLV 反转录酶 200U，DEPC 水补足 25rtL。42°C温育 lh，95°C 5min 灭活反转录酶。经过优化后，取适量的反转录产物用于随后的PCR。以cDNA第一链作为RT-PCR模板，常规方法做PCR，扩增NtTTG2基因PCR扩增引物序列上游引物SEQID NO. 3(5，-ACACACATAATTTCCCTTCCATTTCC-3，)下游引物SEQID Ν0· 4(5，-AGAGACCATATAAACACAGTGCCCT-3，)，25μ L 反应体系为10XEx taq buffer 2. 5 μ L, dNTP 2. 0 μ L，Mg2+L 5 μ L，上、下游引物各 1 μ L, Ex taq 0. 2 μ L，模板 1 μ L，ddH20 15. 8 μ L。反应程序如下为 95°C 5min， 95°C 50sec，58°C 50sec，72°C lmin,72°C IOmin0 PCR 产物 NtTTG2 基因经纯化回收后，连接到 pMD 19-T Simple Vector 载体(Takara，Japan)上得到 pMD 19-T Simple: :NtTTG2 质粒，转化大肠杆菌感受态细胞DH5 α，送上海invitrogen公司测序，序列如SEQ ID N0. 1。实施例2.双元载体 pCAMBIA1301 NtTTG23-UTE-intron-NtTTG23-UTE 的构建根据NtTTG2基因3、不翻译区序列(3—UTR)设计引物，扩增其编码区部分片段 337bp，用于NtTTG2基因沉默载体的构建。上游引物SEQID N0. 5(5' -TGTAGCGGAGTTGGAAAGGCATCAGG-3 ‘)
下游引物SEQID NO. 6(5，-TCCCACCGCTGAGCAAAAGACATAC-3，)，以 pMD 19-T Simple :NtTTG2 质粒为模板，利用 SEQ ID NO. 5 和 SEQ ID NO. 6 进行PCR扩增长度为337bp的部分NtTTG23 UTK基因序列，条件如下95°C预变性5min ；95°C变性45sec、58°C复性30sec、72°C延伸30sec, 30个循环；最后72°C延伸5min。PCR产物用1 % 的琼脂糖胶电泳，溴化乙锭(EB)染色，用Agarose Gel DNA Purification Kit(TaKaRa)对电泳条带进行回收。将通过PCR方法获得的337bp部分NtTTG23 UTK基因序列，用T4连接酶连接至pUCm-T载体上得到pUCm-T NtTTG23、■载体，转化至大肠杆菌DH5 α。涂LB (含Amp 100 μ g/mL)平板，37°C培养16_20h后挑取若干克隆提取质粒，BamH I和I^st I双酶切验证后送公司测序。测序验证正确后，用I3St I/BamH I和I^st I/Xho I两种不同的双酶切方式分别切pUCm-T: :NtTTG23 UTK载体，酶切得到两端具有不同酶切位点的两种NtTTG23 UTK基因片段 NtTTG23 UTK(Pst I/BamH I)和 NtTTG23 UTK(Pst I/Xho I)，以进行下一步操作。利用存在于pBSSK-in载体(Invitrogen，上海)中的内含子构建发夹结构，该内 ^TX^i 600bp, g T Phaseolus vulgaris nitrite reductase (NIR)(JftiHT^ 花)，利用该内含子两侧的多克隆位点将已获得的NtTTG23 UTK基因片段反向重复地连在内含子两侧。具体步骤如下将NtTTG23 UTK(Pst I/BamH I)连入用BamH I与I^st I双酶切的 pBSSK-in ；该产物再用Nsi I与Xho I (或Sal I)双酶切，然后将NtTTG23 UTE(Pst I和Xho I)连接其上(Pst I和Nsi I是同尾酶，可发生连接，但连接后无法切开)，即构成RNAi载体。最后用Me I/Kpn I 将整个 RNAi 片段切下，得到 NtTTG23 UTK-intron-NtTTG23 UTK(S ac I/Kpn I)，连入穿梭载体pCAMBIA1301的组成型表达启动子35S之后的&ic I和Kpn I 酶切位点之间，构成转化单元 PCAMBIA1301: :NtTTG23 UTK-intron-NtTTG23 UTK(图 1)。将 pCA MBIAl3Ol NtTTG23-UTE-intron-NtTTG23-UTE 转入到农杆菌 EHAlO5 (Invitrogen,上海)中，为
转基因奠定基础。实施例3.双元载体 pCAMBIA1301 :NtTTG2_RFP 的构建提取烟草总RNA，利用RT-PCR反转录合成cDNA。采用上游引物SEQ ID NO. 7 (5，-GAGCTCATGGAAAATTCAAGTCAAGAAT-3，)，下游引物SEQ ID NO. 8(5，-GGTACCTACTTTAA GCAGTTGCAACTTGT-3，)，以烟草 cDNA 为模板，扩增 NtTTG2，在 NtTTG2 两端引入 Sac I/Kpn I酶切位点，将扩增得到的NtTTG2基因连接到pMD 19-T SimpleVector载体(Takara, Japan)上转入大肠杆菌DH5 α中，测序正确后，用Me Ι/Κρη I对连接有NtTTG2基因的 pMD 19-T Simple Vector载体进行双酶切，得到测序正确的NtTTG2片段，然后将载体 PCAMBIA1301 (购自 CAMBIA 公司)也用 Sac I/Kpn I 酶切，将 NtTTG2 片段与 pCAMBIA1301 线性载体连接，NtTTG2被插入pCAMBIA1301载体中花椰菜花叶病毒35S启动子下游得到 PCAMBIA1301: :NtTTG2 载体。同样原理，用 BamH I/Xba I 将 pBIlM (Invitrogen，上海)上的RFP (红色荧光蛋白)切下，插入到用同样的酶切pCAMBIA1301 :NtTTG2载体下游的BamH I/Xba I酶切位点间，得到双元载体pCAMBIA1301 :NtTTG2-RFP,并进行酶切验证，结果见图 2。将pCAMBIA1301: :NtTTG2-RFP转入到农杆菌EHA105anvitrogen，上海)中，为转基因奠定基石出。实施例4.叶盘法转化烟草及其抗性筛选
具体步骤简述如下1农杆菌培养1)分别从平板上挑取转染 pCAMBIA1301: :NtTTG23 UTK-intron-NtTTG23、■载体 (NtTTG2基因沉默载体)的农杆菌EHA105单菌落以及含有pCAMBIA1301 :NtTTG2_RFP载体(NtTTG2基因过表达载体)的农杆菌EHA105单菌落，分别接种到3mL YEB液体培养基中 (Str 25 μ g/mL、Rif50 μ g/mL、Kan 80 μ g/mL)于恒温摇床上 27°C，180rpm 摇培过夜至 OD 600 为 0. 6-0. 8。2)摇培过夜的菌液按1 100的比例，转入新配置的含上述抗生素的YEB培养基中，在与上述相同的条件下培养Mi左右，0D600为0. 2-0. 5时即可用于转化。2侵染于超净工作台上，将菌液倒入无菌的小培养皿中。取不具潮霉素(Hm)抗性的烟草无菌苗的幼嫩、健壮叶片，去主脉，将叶片剪成0. 5cmX0. 5cm的小块，放入菌液中， 浸泡适当时间(一般5-lOmin)。取出叶片置于无菌滤纸上吸去附着的菌液。<注 > 同时设未经农杆菌侵染的叶盘作为阴性对照，以下步骤同。3共培养将侵染后的烟草叶片接种在不含任何激素和抗生素的MS基本培养基上，用封口膜封好培养皿，28°C黑暗中培养2-4d。4选择培养将黑暗中共培养2-4d的烟草叶片转移到带抗性的分化培养基 (MS+1 μ g/mL 6-苄氨基嘌呤+50 μ g/mL潮霉素+500 μ g/mL羧苄青霉素)中，用封口膜封好培养皿，在光照为2，000-10, 0001uX、25j8°C、16/ i光照/光暗条件下选择培养，结果见图 3。5生根培养约2-3周后，待不定芽长到Icm左右时，切下不定芽并转移到生根培养基(1/2MS+200 μ g/L ΙΑΑ+50 μ g/mL潮霉素+500 μ g/mL羧苄青霉素)上进行生根培养， 5-10d后长出不定根。根长好后，移入盆钵中培养。待烟草种子成熟后进行单株收种(Tl代，具有RR，Rr，rr型)，T1代种子继续在Hm 抗性平板上筛选，根据孟德尔遗传第一定律统计分析，将筛选获得T2代纯合品系，分别得到转入 pCAMBIA1301: :NtTTG23~UTR-intron-NtTTG23~UTR 的 NtTTG2 基因沉默植株纯合品系以及转入pCAMBIA1301: :NtTTG2-RFP的NtTTG2基因过表达植株纯合品系。实施例5转基因烟草中NtTTG2基因表达检测l.Northern 杂交，方法参考 Wu et al. 2007 :ffu X,ffu Τ, Long J, Yin Q, Zhang Y, Chen L,Liu R, Gao T and Dong H(2007). Productivity and biochemical properties of green tea in response to full-length and functional fragments of HpaG Xooc, a harpin protein from the bacterial rice leaf streak pathogen Xanthomonas oryzae pv. Oryzicola. J. Biosci. 32 :1119-1131.)1. IRNA甲醛凝胶变性电泳分别提取并纯化pCAMBIA1301 :NtTTG2-intron_NtTTG2转基因烟草以及 PCAMBIA1301: :NtTTG2-RFP转基因烟草的RNA。去纯化的RNA样品进行甲醛变性电泳。 首先用0. lmol/L NaOH浸泡电泳槽及梳子5min，然后用0. 1 % DEPC水仔细冲洗；在灭菌印pendorf管中建立变性反应；然后，55 °C水浴60min，冰水中放置IOmin，离心；加入2 μ 110 X甲醛凝胶加样缓冲液并将印pendorf管重新放置于冰上；制备1 OOmL含有 2. 2mol/L甲醛的1.5%琼脂糖凝胶。加1. 5g琼脂糖到72mL灭菌水中，加热溶解琼脂糖，在冷却至55°C的溶液中同时加入IOmL 10XMOPS电泳缓冲液和18mL去离子甲醛，并在通风橱内灌制凝胶(0. 5%的凝胶可以用来分离0. 5-8Kb的RNA，若要分离更大的RNA，则使用 1. 0% -1. 2%的琼脂糖凝胶)；将琼脂糖/甲醛凝胶装入水平电泳槽中，加入足够1XM0PS 电泳缓冲液覆盖凝胶约1mm，预电泳5min(5V/Cm)；凝胶浸入1XM0PS电泳缓冲液中，4-5V/ cm电压下进行电泳，直到溴酚蓝移出约8cm(电泳过程中，由于电泳缓冲液的pH值会发生变化，导致在较高电压下，条带会模糊不清。电泳过程中可以使用蠕动泵将两极缓冲液循环， 每电泳Ih换一次缓冲液。)；电泳结束后将胶块置于凝胶成相系统中，观察RNA的完整性， 记录18S、28S条带离加样孔的距离，并在DEPC水中冲洗。
权利要求
1.一种含WD-40结构域的烟草表皮毛发育相关基因NtTTG2，其特征在于该基因来源于普通烟草(Nicotiana tabacum)，核苷酸序列如SEQ ID NO. 1所示的。
2.权利要求1所述的含WD-40结构域的烟草表皮毛发育相关基因NtTTG2编码的蛋白质，其特征在于氨基酸序列如SEQ ID NO. 2所示的。
3.一种重组表达载体，其特征在于包括权利要求1所述的基因NtTTG2和植物表达载体。
4.根据权利要求3所述的重组表达载体，其特征在于所述的植物表达载体选自 PBI121, PBI221 或 pCAMBIA1301 中的一种，优选 pCAMBIA1301。
5.根据权利要求4所述的重组表达载体，其特征在于所述的重组表达载体的启动子为组成型启动子，优选花椰菜花叶病毒35S启动子。。
6.根据权利要求4所述的重组表达载体，其特征在于所述的重组表达载体是通过将NtTTG2基因插入到载体pCAMBIA1301酶切位点Mc I/Kpn I间得到的载体 PCAMBIA1301::NtTTG20
7.根据权利要求4所述的重组表达载体，其特征在于所述的重组表达载体是通过将 NtTTG2基因插入到载体pCAMBIA1301酶切位点Me I/Kpn I间，并通过BamH I Xba I酶切位点在NtTTG2后插入RFP基因得到的双元载体pCAMBIA1301 :NtTTG2_RFP。
8.一种转化体，其特征在于由权利要求3所述的重组表达载体导入宿主细胞所得，所述的宿主细胞优选大肠杆菌细胞或农杆菌细胞。
9.权利要求1所述的烟草表皮毛发育相关基因NtTTG2在导入植物获得促进生长和/ 或增加产量的品种中的应用，优选导入烟草或小麦获得促进生长和/或增加产量的品种中的应用。
10.权利要求3所述的重组表达载体在导入植物获得促进生长和/或增加产量的品种中的应用，优选导入烟草或小麦获得促进生长和/或增加产量的品种中的应用。
全文摘要
本发明属于分子生物学领域，涉及一种烟草表皮毛发育相关基因NtTTG2及其重组表达载体和应用。该基因来源于普通烟草，具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，其编码的产物氨基酸序列为SEQ ID NO.2。本发明还提供一种重组表达载体，包括本发明所述的基因NtTTG2。该基因在促进植物生长发育及种子饱满、种子数量方面有重要作用，是一种理想促生及增加产量的基因，可在导入植物获得促进生长和/或增加产量的品种中应用，优选导入烟草或小麦获得促进生长和/或增加产量的品种中应用。
文档编号C12N15/82GK102304522SQ20111026467
公开日2012年1月4日 申请日期2011年9月8日 优先权日2011年9月8日
发明者崔润芝, 徐衡, 李宝燕, 董汉松, 蔡洪生 申请人:南京农业大学