本发明涉及一种杈杷果可溶性糖的提取工艺，属于植物提取
技术领域：
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背景技术：
：杈杷果(Lonicerastandishii)又名无核樱桃、健身果，属于忍冬科忍冬属，为木本矮化野生果树，分布在豫西秦岭山脉。杈杷果果实艳红色，成熟后果实呈现悦目的半透明状，皮薄，果味浓甜芳香。陕、甘、豫等省山区群众久有采食杈杷果的习惯，认为食用其果实能强身健体，有很好的保健效果。这由于杈杷果中含有可溶性糖、矿质元素及维生素C等有效成分。其中，杈杷果中可溶性糖含量明显高于刺梨、沙棘和猕猴桃，尤其是其果实含酸量较低(0.18％)，糖酸比高达39∶1，这充分地表明了杈杷果是一种很有开发价值的野生鲜食果品。尽管杈杷果中可溶性糖含量比较高，但是有关杈杷果可溶性糖的提取研究还是非常有限的，这在某程度上限制了杈杷果的应用与发展。因此，继续探索与研究杈杷果可溶性糖的提取是非常价值的。技术实现要素：针对上述现有技术的不足，本发明所要解决的技术问题是提出了一种杈杷果可溶性糖的提取工艺。一种杈杷果可溶性糖的提取工艺，包括以下步骤：1)将风干的杈杷果果实洗净、消毒，粉碎成100～120目，并在60℃条件下干燥15～20min后，加入杈杷果果实干燥后重量5～10倍的60～80％乙醇搅拌，搅拌5～10min后用胶体磨研磨20～30min；2)将步骤1)所得的料液保持在温度40～50℃，并调节pH为4～6，同时加入占杈杷果果实干燥后重量0.1～0.3％的复合酶酶解1～2h，其中，复合酶是由4～6重量份纤维素酶和1～3重量份果胶酶混合而成；3)将步骤2)所得的酶解液于90～100℃保持6～9min灭菌后，置于600～700W下进行微波提取，提取3～5min，过滤，得到滤液1和滤渣1，备用；4)在步骤3)所得的滤渣1中加入滤渣1重量6～8倍的60～70％乙醇搅拌，搅拌10～15min后用胶体磨研磨30～40min，并置于超声频率30～40kHz，温度30～40℃下进行超声提取，提取10～15min，过滤，得到滤液2和滤渣2，备用；5)在步骤4)所得的滤渣2中加入滤渣2重量4～8倍的水搅拌，搅拌15～20min后用胶体磨研磨30～60min，并加热到90～100℃，提取30～40min，过滤，得到滤液3，备用；6)合并滤液1、2、3，并将滤液置于4000～5000转/min的离心机上离心6～10min，过滤，得到杈杷果提取液1，备用；7)将步骤6)所得的杈杷果提取液1依次通过孔径为0.1～1μm的微滤膜、孔径为0.01～0.2μm的超滤膜进行纯化，得到杈杷果提取液2，备用；8)将步骤7)所得的杈杷果提取液2通过聚酰胺柱层析，先用水洗柱至流出液澄清，再用分别用30～40％乙醇水溶液、50～60％乙醇水溶液洗柱，收集50～60％乙醇洗脱液，浓缩，干燥，即可得到杈杷果可溶性糖。进一步，步骤2)中，将步骤1)所得的料液保持在温度45℃，并调节pH为5，同时加入占杈杷果果实干燥后重量0.2％的复合酶酶解1.5h，其中，复合酶是由5重量份纤维素酶和2重量份果胶酶混合而成。进一步，步骤4)中，在步骤3)所得的滤渣1中加入滤渣1重量7倍的65％乙醇搅拌，搅拌12min后用胶体磨研磨35min，并置于超声频率35kHz，温度35℃下进行超声提取，提取12min，过滤，得到滤液2和滤渣2，备用。进一步，步骤8)中，将步骤7)所得的杈杷果提取液2通过聚酰胺柱层析，先用水洗柱至流出液澄清，再用分别用35％乙醇水溶液、55％乙醇水溶液洗柱，收集55％乙醇洗脱液，浓缩，干燥，即可得到杈杷果可溶性糖。与现有技术相比，本发明的有益效果是：1、本发明采用胶体磨研磨、纤维素酶和果胶酶酶解技术、微波提取技术、超声提取技术、水提技术以及滤膜和聚酰胺柱纯化技术等，提高了杈杷果可溶性糖的提取率和效率。其中，多次胶体磨研磨，提高了细胞破碎率，且粒度均匀，从而提高提取效率；滤膜和聚酰胺柱纯化技术，提高了除杂率，从而提高可溶性糖纯化率。2、本发明采用整个杈杷果的果实(包括果皮、果肉)来提取杈杷果，使杈杷果可溶性糖含量更加高，同时达到了合理利用原料的目的，避免浪费。具体实施方式实施例1一种杈杷果可溶性糖的提取工艺，包括以下步骤：1)将风干的杈杷果果实洗净、消毒，粉碎成120目，并在60℃条件下干燥18min后，加入杈杷果果实干燥后重量8倍的70％乙醇搅拌，搅拌8min后用胶体磨研磨25min；2)将步骤1)所得的料液保持在温度45℃，并调节pH为5，同时加入占杈杷果果实干燥后重量0.2％的复合酶酶解1.5h，其中，复合酶是由5重量份纤维素酶和2重量份果胶酶混合而成；3)将步骤2)所得的酶解液于95℃保持8min灭菌后，置于700W下进行微波提取，提取4min，过滤，得到滤液1和滤渣1，备用；4)在步骤3)所得的滤渣1中加入滤渣1重量7倍的65％乙醇搅拌，搅拌12min后用胶体磨研磨35min，并置于超声频率35kHz，温度35℃下进行超声提取，提取12min，过滤，得到滤液2和滤渣2，备用；5)在步骤4)所得的滤渣2中加入滤渣2重量6倍的水搅拌，搅拌18min后用胶体磨研磨45min，并加热到95℃，提取35min，过滤，得到滤液3，备用；6)合并滤液1、2、3，并将滤液置于5000转/min的离心机上离心8min，过滤，得到杈杷果提取液1，备用；7)将步骤6)所得的杈杷果提取液1依次通过孔径为1μm的微滤膜、孔径为0.2μm的超滤膜进行纯化，得到杈杷果提取液2，备用；8)将步骤7)所得的杈杷果提取液2通过聚酰胺柱层析，先用水洗柱至流出液澄清，再用分别用35％乙醇水溶液、55％乙醇水溶液洗柱，收集55％乙醇洗脱液，浓缩，干燥，即可得到杈杷果可溶性糖。实施例2一种杈杷果可溶性糖的提取工艺，包括以下步骤：1)将风干的杈杷果果实洗净、消毒，粉碎成100目，并在60℃条件下干燥15min后，加入杈杷果果实干燥后重量5倍的60％乙醇搅拌，搅拌5min后用胶体磨研磨20min；2)将步骤1)所得的料液保持在温度40℃，并调节pH为4，同时加入占杈杷果果实干燥后重量0.1％的复合酶酶解1h，其中，复合酶是由4重量份纤维素酶和1重量份果胶酶混合而成；3)将步骤2)所得的酶解液于90℃保持6min灭菌后，置于600W下进行微波提取，提取3min，过滤，得到滤液1和滤渣1，备用；4)在步骤3)所得的滤渣1中加入滤渣1重量6倍的60％乙醇搅拌，搅拌10min后用胶体磨研磨30min，并置于超声频率30kHz，温度30℃下进行超声提取，提取10min，过滤，得到滤液2和滤渣2，备用；5)在步骤4)所得的滤渣2中加入滤渣2重量4倍的水搅拌，搅拌15min后用胶体磨研磨30min，并加热到90℃，提取30min，过滤，得到滤液3，备用；6)合并滤液1、2、3，并将滤液置于4000转/min的离心机上离心6min，过滤，得到杈杷果提取液1，备用；7)将步骤6)所得的杈杷果提取液1依次通过孔径为0.1μm的微滤膜、孔径为0.01μm的超滤膜进行纯化，得到杈杷果提取液2，备用；8)将步骤7)所得的杈杷果提取液2通过聚酰胺柱层析，先用水洗柱至流出液澄清，再用分别用30％乙醇水溶液、50％乙醇水溶液洗柱，收集50％乙醇洗脱液，浓缩，干燥，即可得到杈杷果可溶性糖。实施例3一种杈杷果可溶性糖的提取工艺，包括以下步骤：1)将风干的杈杷果果实洗净、消毒，粉碎成120目，并在60℃条件下干燥20min后，加入杈杷果果实干燥后重量10倍的80％乙醇搅拌，搅拌10min后用胶体磨研磨30min；2)将步骤1)所得的料液保持在温度50℃，并调节pH为6，同时加入占杈杷果果实干燥后重量0.3％的复合酶酶解2h，其中，复合酶是由6重量份纤维素酶和3重量份果胶酶混合而成；3)将步骤2)所得的酶解液于100℃保持9min灭菌后，置于700W下进行微波提取，提取5min，过滤，得到滤液1和滤渣1，备用；4)在步骤3)所得的滤渣1中加入滤渣1重量8倍的70％乙醇搅拌，搅拌15min后用胶体磨研磨40min，并置于超声频率40kHz，温度40℃下进行超声提取，提取15min，过滤，得到滤液2和滤渣2，备用；5)在步骤4)所得的滤渣2中加入滤渣2重量8倍的水搅拌，搅拌20min后用胶体磨研磨60min，并加热到100℃，提取40min，过滤，得到滤液3，备用；6)合并滤液1、2、3，并将滤液置于5000转/min的离心机上离心10min，过滤，得到杈杷果提取液1，备用；7)将步骤6)所得的杈杷果提取液1依次通过孔径为1μm的微滤膜、孔径为0.2μm的超滤膜进行纯化，得到杈杷果提取液2，备用；8)将步骤7)所得的杈杷果提取液2通过聚酰胺柱层析，先用水洗柱至流出液澄清，再用分别用40％乙醇水溶液、60％乙醇水溶液洗柱，收集60％乙醇洗脱液，浓缩，干燥，即可得到杈杷果可溶性糖。另外，申请人对实施例1～3制备的可溶性糖进行测定，测定结果如表1所示。表1可溶性糖测定结果类型可溶性糖得率(％)实施例16.92实施例26.81实施例36.89当然，上面只是本发明优选的具体实施方式作了详细描述，并非以此限制本发明的实施范围，凡依本发明的原理、构造以及结构所作的等效变化，均应涵盖于本发明的保护范围内。当前第1页1 2 3