本公开涉及氧化蛋白水解酶活性增强剂、糖化应激抑制剂以及含有这些的饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、类药品(医薬部外品)或药品。
背景技术：
已知生物体内的氧化反应和糖化反应对细胞和组织产生不良影响。氧化蛋白质和糖化蛋白质的生成和蓄积成为糖尿病并发症、阿尔茨海默病、白内障、动脉硬化等疾病以及皮肤等组织的老化和功能减退的原因。通常，这些蛋白质在氧化蛋白水解酶(oxidizedproteinhydrolase：oph)和蛋白酶体等蛋白水解酶作用下被分解除去，已知这些酶的活性随着年龄增加而下降。
作为增强oph活性的物质，提出了罗马洋甘菊、蕺菜、锐刺山楂、葡萄以及菱等植物的提取物(wo2011/004733和wo2014/126199)。
“糖化应激”是综合地囊括了由还原糖、醛负荷带给生物体的应激和此后的反应的概念。由糖化应激生成的异常蛋白质由于与生活习惯病等疾病和老化有关而受到关注。
异常蛋白质一般是由于年龄增加等而受到氧化、糖化或醛修饰等的蛋白质。通常认为，由于这些蛋白质在生物体内蓄积会引起功能性蛋白质的功能减退、炎症等，结果引起糖尿病并发症、阿尔茨海默病、白内障、动脉硬化等疾病以及皮肤等组织的老化和功能减退。
通常认为，异常蛋白质的生成原因之一是生物体内的美拉德反应。例如，由于生物体内的糖化反应(美拉德反应)，胶原等蛋白质被糖化，蛋白质中的氨基酸形成ages(晚期糖基化终末产物)，或者ages导致在蛋白质间形成交联结构等，从而形成异常蛋白质。
作为分解由ages导致的蛋白质间的交联结构的药剂，已知有n-苯酰甲噻唑溴(n-phenacylthiazoliumbromide，ptb)和n-苯甲酰甲基-4,5-二甲基噻唑溴化物(n-phenacyl-4,5-dimethylthiazoliumbromide，alt－711)(saravasan等，nature，382，p275-278(1996)和saravasan等，archivesofbiochemistryandbiophysics，419，p89-96(2003))。但是，从稳定性、副作用方面考虑，它们并未得以利用。此外，还研究了荷叶提取物和童氏落新妇(astilbethunbergii)提取物等(日本2007－119373号公报)。
技术实现要素：
ages和ales(脂质过氧化终产物)通过由葡萄糖等还原糖、脂质的β氧化和过氧化等产生的醛基和酮基等反应基团、与生物体中的蛋白质或脂质反应(美拉德反应)而生成。已经逐渐阐明，由于它们在生物体内生成、蓄积而产生功能性蛋白质的功能障碍和ages受体的活化等。并且认为，它们是导致功能减退、炎症、生活习惯病和老化等的主因之一，综合性地囊括了这一系列现象和症状的概念被称为糖化应激或羰基应激。
此外认为，当由于美拉德反应而功能性蛋白质被糖化、引起功能障碍时，活性氧过量产生或生物体内的活性氧的消除作用不再充分地发挥，结果引起氧化应激。通常认为，与糖化应激同样地，氧化应激也是以生活习惯病为代表的各种疾病和老化的主因之一。
从抗衰老和预防生活习惯病等观点出发，需要能够进行上述异常蛋白质的抑制、分解或除去等、抑制或降低糖化应激和氧化应激的新的物质和方法。
此外，还期待通过使oph等酶的活性增强而能够治疗和预防前述疾病、前述组织的老化和组织的功能减退。
因此，本公开在一个方式中提供一种能够增强oph活性的新物质和能够抑制或降低糖化应激的新物质。
本公开在一个方式中涉及一种氧化蛋白水解酶活性增强剂，其含有胡卢巴提取物作为有效成分。
本公开在另一个方式中涉及一种氧化蛋白水解酶活性增强剂，其含有选自由胡卢巴、茴香和玫瑰茄组成的组中的1种或2种以上植物的提取物作为有效成分。
作为本公开的另一个方式，涉及一种糖化应激抑制剂，其含有胡卢巴和茴香的提取物作为有效成分。
作为本公开的另一个方式，涉及一种用于抑制糖化应激的饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、类药品或药品，其含有胡卢巴和茴香的提取物作为有效成分。
本公开在另一个方式中涉及一种饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、类药品或药品，其含有本公开的氧化蛋白水解酶活性增强剂和本公开的糖化应激抑制剂中的至少一种作为有效成分。
根据本公开，在一个方式中可以提供一种新的oph活性增强剂，以及能够增强oph活性的饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、类药品或药品。
根据本公开，在一个方式中可以提供一种新的糖化应激抑制剂，以及能够抑制糖化应激的饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、类药品或药品。
具体实施方式
[oph活性增强剂]
本公开基于如下新见解：胡卢巴(学名trigonellafoenum－graecum)、茴香(学名foeniculumvulgare)和玫瑰茄(学名hibiscussabdariffa)的水提取物、尤其是热水提取物可以增强作为oph而已知的酰基氨基酸释放酶(acylamino-acid-releasingenzyme，aare)的酶活性。
已知oph在生物体内广泛分布，其优先分解氧化蛋白质和糖化蛋白质之类的、起因于生物体内的糖化应激或氧化应激的物质。因此，通过增强oph的酶活性，可以提高氧化蛋白质和糖化蛋白质的分解效率，从而可以期待能抑制或减轻糖化应激、氧化应激。由于本公开的oph活性增强剂可以增强oph的酶活性，因此在一个或多个实施方式中，可以分解除去氧化蛋白质或抑制氧化蛋白质的蓄积。根据本公开的oph活性增强剂，在一个或多个实施方式中，能抑制或减轻糖化应激和/或氧化应激。根据本公开的oph活性增强剂，在一个或多个实施方式中，能进行起因于糖化应激或氧化应激的疾病、组织的老化和组织的功能减退的预防、改善、或治疗。根据本公开的oph活性增强剂，在一个或多个实施方式中，能提高新陈代谢。
本公开在一个方式中，涉及一种oph活性增强剂，其含有胡卢巴提取物作为有效成分。本公开的oph活性增强剂在一个或多个实施方式中可以还含有茴香提取物。本公开的oph活性增强剂在一个或多个实施方式中可以还含有玫瑰茄的提取物。本公开的oph活性增强剂在一个或多个实施方式中含有胡卢巴提取物以及茴香和玫瑰茄中的至少一种的提取物作为有效成分。此外，本公开在另一方式中涉及一种oph活性增强剂，其含有选自由胡卢巴、茴香和玫瑰茄组成的组中的1种或2种以上植物的提取物作为有效成分。
本公开的oph活性增强剂在一个或多个实施方式中可以用于抑制糖化应激。本公开的oph活性增强剂在一个或多个实施方式中可以用于起因于糖化应激或氧化应激的疾病、组织的老化和组织的功能减退的预防、改善、或治疗。本公开的oph活性增强剂在一个或多个实施方式中可以用于抗衰老、或新陈代谢的提高。
本公开的oph活性增强剂含有胡卢巴以外的植物的提取物时，这些可以以相同的比率(相对于胡卢巴提取物1重量份为1重量份)来配合，也可以以不同的比率来配合。
本公开的oph活性增强剂在一个或多个实施方式中含有胡卢巴提取物和茴香提取物。在本方式中，就胡卢巴提取物和茴香提取物的配合比(干燥重量比)而言，相对于胡卢巴提取物1重量份，茴香提取物为0.1～10重量份，从增强oph活性的观点出发，茴香提取物为0.2～5重量份。
本公开的oph活性增强剂在一个或多个实施方式中含有胡卢巴提取物和玫瑰茄的提取物。在本方式中，就胡卢巴提取物和玫瑰茄的提取物的配合比(干燥重量比)而言，相对于胡卢巴提取物1重量份，玫瑰茄的提取物为0.1～10重量份，从增强oph活性的观点出发，玫瑰茄的提取物为0.2～5重量份。
本公开的oph活性增强剂在一个或多个实施方式中含有胡卢巴提取物、茴香提取物和玫瑰茄提取物。在本方式中，就胡卢巴提取物、茴香提取物和玫瑰茄提取物的配合比(干燥重量比)而言，相对于胡卢巴提取物1重量份，茴香提取物为0.05～20重量份、玫瑰茄提取物为0.05～20重量份，从增强oph活性的观点出发，茴香提取物为0.1～10重量份、玫瑰茄提取物为0.1～10重量份。
提取物可以为从任意部位提取出的物质。作为使用部位，在一个或多个实施方式中可以列举：整株植物、花、叶、种子、果实、枝、茎、根、花萼和苞等。使用部位可以为1种部位，也可以将2种以上部位组合使用。胡卢巴在一个或多个实施方式中优选为种子。茴香在一个或多个实施方式中优选为种子。玫瑰茄在一个或多个实施方式中优选为花萼和苞。
对提取方法没有特别限制，在一个或多个实施方式中可以列举溶剂提取等。作为提取溶剂，在一个或多个实施方式中可以列举：水、甲醇和乙醇等醇、醚等。提取物在一个或多个实施方式中可以列举：水提取物和有机溶剂提取物等。作为水提取物，在一个或多个实施方式中可以列举热水提取物等。关于溶剂提取的温度，在一个或多个实施方式中可以列举：60～100℃、70～90℃或80℃等。关于溶剂提取的时间，在一个或多个实施方式中可以列举：30分钟～5小时、1～5小时、2～5小时、3～5小时或1小时等。关于热水提取的温度，在一个或多个实施方式中可以列举：60～100℃、70～90℃或80℃等。关于热水提取的时间，在一个或多个实施方式中可以列举：30分钟～5小时、1～5小时、2～5小时、3～5小时或1小时等。提取物的形态在一个或多个实施方式中可以列举：水溶液、浓缩液和干燥物等。关于干燥，在一个或多个实施方式中可以通过对由溶剂提取得到的提取物进行加热处理来进行。关于加热温度，在一个或多个实施方式中为70～150℃或110℃。关于加热时间，在一个或多个实施方式中为1～10小时或4小时。
作为适合于制造本公开的oph活性增强剂的方法，在一个或多个实施方式中如下所述。将适量的葫芦巴粉末(例如2g)和茴香粉末(例如2g)用适量的蒸馏水(例如40ml)在80℃提取1小时，然后冷却到室温后，将所得到的浆液过滤，将所得到的过滤物作为植物提取物来使用。使用干燥植物提取物的情况下，将得到的植物提取物置于铝盘中，在例如设为110℃的恒温箱中干燥4小时。
对本公开的oph活性增强剂的形态没有特别限制，在一个或多个实施方式中可以列举：固态、颗粒、粉末、糊剂和液状等。
关于本公开的oph活性增强剂，在一个或多个实施方式中可以在不抑制有效成分的oph活性增强功能的范围内含有其它食品的提取物和其它成分。
本公开的oph活性增强剂在一个或多个实施方式中可以作为饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、饲料、类药品或药品等的原料来使用。对作为原料的形态没有特别限制，在一个或多个实施方式中可以列举：固态、颗粒、粉末、糊剂和液状等。
作为本公开的一个或多个实施方式，涉及一种饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、饲料、类药品或药品，其含有本公开的oph活性增强剂。
对本公开的oph活性增强剂的每日摄取量没有特别限制，在一个或多个实施方式中为5mg以上，或2000mg以下。
[oph活性增强剂的制造方法]
本公开在另一方式中涉及一种制造用于增强oph活性的oph活性增强剂的方法(本公开的oph活性增强剂的制造方法)。本公开的oph活性增强剂的制造方法在一个或多个实施方式中包含对胡卢巴进行溶剂提取的步骤。本公开的oph活性增强剂的制造方法在一个或多个实施方式中可以还包含如下步骤：对选自由茴香和玫瑰茄组成的组中的1种或2种以上植物进行溶剂提取。
此外，本公开的oph活性增强剂的制造方法在一个或多个实施方式中涉及制造用于增强oph活性的oph活性增强剂的方法，其包含对选自由胡卢巴、茴香和玫瑰茄组成的组中的1种或2种以上植物进行溶剂提取的步骤。根据本公开的oph活性增强剂的制造方法，可以制造本公开的oph活性增强剂。
溶剂提取在一个或多个实施方式中可以包含如下步骤：对干燥状态的植物进行溶剂提取。
本公开的oph活性增强剂的制造方法在一个或多个实施方式中可以包含如下步骤：对经溶剂提取而得到的提取物进行过滤或离心分离。
本公开的oph活性增强剂的制造方法在一个或多个实施方式中可以包含如下步骤：对得到的提取物进行干燥。
本公开的制造方法在一个或多个实施方式中可以包含如下步骤：将胡卢巴提取物和胡卢巴以外的植物的提取物混合，得到提取物的混合物。混合的比率在一个或多个实施方式中可以为相同的比率(相对于胡卢巴提取物1重量份为1重量份)，也可以为不同的比率。
本公开的制造方法在一个或多个实施方式中可以包含如下步骤：相对于胡卢巴提取物1重量份，按照茴香提取物达到0.1～10重量份的方式来混合这些提取物，从制造能够进一步增强oph活性的oph活性增强剂的观点出发，可以包含如下步骤：按照茴香提取物达到0.2～5重量份的方式来混合这些提取物。
本公开的制造方法在一个或多个实施方式中可以包含如下步骤：相对于胡卢巴提取物1重量份，按照玫瑰茄的提取物达到0.1～10重量份的方式来混合这些提取物，从制造能够进一步增强oph活性的oph活性增强剂的观点出发，可以包含如下步骤：按照玫瑰茄的提取物达到0.2～5重量份的方式来混合这些提取物。
本公开的制造方法在一个或多个实施方式中可以包含如下步骤：相对于胡卢巴提取物1重量份，按照茴香提取物达到0.05～20重量份、玫瑰茄的提取物达到0.05～20重量份的方式来混合这些提取物，从制造能够进一步增强oph活性的oph活性增强剂的观点出发，可以包含如下步骤：按照茴香提取物达到0.1～10重量份、玫瑰茄的提取物达到0.1～10重量份的方式来混合这些提取物。
本公开的制造方法在一个或多个实施方式中可以包含如下步骤：将胡卢巴和胡卢巴以外的植物混合，对得到的混合物进行溶剂提取，从而得到混合提取物。混合的比率在一个或多个实施方式中可以为相同的比率(相对于胡卢巴1重量份为1重量份)，也可以为不同的比率。此外，可以按照得到的混合提取物中的各植物的提取物的比率为相同的比率(相对于胡卢巴提取物1重量份为1重量份)的方式来混合，也可以按照为不同的比率的方式来混合。
[oph活性增强方法]
本公开在一个方式中涉及一种增强oph活性的方法，其包含对生物体施予胡卢巴提取物的步骤。本公开在一个方式中涉及一种增强oph活性的方法，其包含对生物体施予选自由胡卢巴、茴香和玫瑰茄组成的组中的1种或2种以上植物的提取物的步骤。本公开在一个方式中涉及增强oph活性的方法，其包含使人或人以外的生物摄取选自由胡卢巴、茴香和玫瑰茄组成的组中的1种或2种以上植物的提取物的步骤。本公开的oph活性增强方法在一个或多个实施方式中还可以使用本公开的oph活性增强剂、饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、类药品或药品，来代替上述提取物。
[用于增强oph活性的饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、类药品或药品的制造方法]
本公开在另一方式中涉及一种饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、类药品或药品的制造方法(本公开的饮料组合物等的制造方法)。本公开的饮料组合物等的制造方法包括在饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、类药品或药品中添加胡卢巴提取物的步骤，用以赋予oph活性增强效果。本公开的饮料组合物等的制造方法包括在饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、类药品或药品中添加选自由胡卢巴、茴香和玫瑰茄组成的组中的1种或2种以上植物的提取物的步骤，用以赋予oph活性增强效果。
提取物在一个或多个实施方式中可以列举：前述植物的水提取物和有机溶剂提取物等。作为水提取物，在一个或多个实施方式中可以列举热水提取物等。提取物的形态在一个或多个实施方式中可以列举：水溶液、浓缩液和干燥物等。
[用于增强oph活性的提取物组合物]
本公开在另一方式中涉及用于增强氧化蛋白水解酶活性的、选自由胡卢巴、茴香和玫瑰茄组成的组中的1种或2种以上植物的提取组合物。本公开中，“提取组合物”是指对植物进行提取处理而得到的液状物或固态物。作为提取组合物，在一个或多个实施方式中可以列举对植物进行溶剂提取而得到的上清和滤液等。作为提取溶剂，在一个或多个实施方式中可以列举：水、甲醇和乙醇等醇、醚等。关于提取组合物的形态，在一个或多个实施方式中可以列举：水溶液、浓缩液和干燥物等。本公开的提取物组合物在一个或多个实施方式中可以作为食品原料来使用。本公开中，“食品原料”是指在加工食品和健康食品等食品、营养补充剂等的制造中使用的素材或原料。关于食品原料的形态，在一个或多个实施方式中可以列举：水溶液、浓缩液和干燥物等。
本公开可涉及以下的一个或多个实施方式。
[a1]一种氧化蛋白水解酶活性增强剂，其含有胡卢巴提取物作为有效成分。
[a2]根据[a1]所述的氧化蛋白水解酶活性增强剂，其中，还含有茴香和玫瑰茄中的至少一种的提取物。
[a3]一种氧化蛋白水解酶活性增强剂，其含有选自由胡卢巴、茴香和玫瑰茄组成的组中的1种或2种以上植物的提取物作为有效成分。
[a4]根据[a1]～[a3]中任一项所述的氧化蛋白水解酶活性增强剂，其中，含有胡卢巴、茴香和玫瑰茄的提取物作为有效成分。
[a5]根据[a1]～[a4]中任一项所述的氧化蛋白水解酶活性增强剂，其中，前述提取物为水提取物和有机溶剂提取物中的至少一种。
[a6]根据[a1]～[a5]中任一项所述的氧化蛋白水解酶活性增强剂，其中，含有前述提取物的干燥物作为有效成分。
[a7]一种饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、类药品或药品，其以[a1]～[a6]中任一项所述的氧化蛋白水解酶活性增强剂为有效成分。
[a8]一种用于增强氧化蛋白水解酶活性的饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、类药品或药品，其含有选自由胡卢巴、茴香和玫瑰茄组成的组中的1种或2种以上植物的提取物作为有效成分。
[a9]一种氧化蛋白水解酶活性增强剂的制造方法，其包含对胡卢巴进行溶剂提取的步骤。
[a10]一种饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、类药品或药品的制造方法，其包含在饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、类药品或药品中添加选自由胡卢巴、茴香和玫瑰茄组成的组中的1种或2种以上植物的提取物的步骤，用以赋予氧化蛋白水解酶活性增强效果。
[糖化应激抑制剂]
本公开基于如下新见解：胡卢巴(学名trigonellafoenum－graecum)和茴香(学名foeniculumvulgare)的水提取物、尤其是热水提取物的混合物具有活化氧化蛋白水解酶(oxidizedproteinhydrolase：oph)的作用和高于作为ages分解剂而公知的ptb的ages分解能力，已知所述氧化蛋白水解酶优先分解氧化蛋白质和糖化蛋白质等因生物体内的氧化应激、糖化应激形成的物质。
本公开基于如下新见解：胡卢巴的水提取物、尤其是热水提取物具有淀粉酶和α－葡萄糖苷酶抑制活性。
此外，本公开基于如下新见解：通过将胡卢巴提取物和茴香提取物组合使用，从而在一个或多个实施方式中可以减少异常蛋白质。
本公开基于如下新见解：通过将胡卢巴提取物和茴香提取物组合使用，从而在一个或多个实施方式中能多方面地抑制糖化应激。
糖化应激是综合地囊括了由还原糖、醛负荷带给生物体的应激和此后的反应的概念。本公开中，“抑制糖化应激”包括：抑制异常蛋白质的生成、将异常蛋白质分解和/或除去、以及抑制高血糖。此外，作为抑制糖化应激，在一个或多个实施方式中可以包括：抑制成为异常蛋白质生成原因的氧化物质的生成、或者将氧化物质分解或消除。
“异常蛋白质”是指受到氧化、糖化或醛修饰等的蛋白质。关于异常蛋白质，在一个或多个实施方式中可以列举美拉德反应的产物(美拉德反应产物)。作为美拉德反应产物，在一个或多个实施方式中包括：由美拉德反应生成的中间体和由美拉德反应生成的最终产物。作为美拉德反应产物，在一个或多个实施方式中可以列举：含有ages的多肽和蛋白质、具有基于ages的交联结构的多肽和蛋白质、以及由美拉德反应生成的糖化蛋白质等。作为异常蛋白质，在一个或多个实施方式中可以列举：具有席夫碱/形成了席夫碱的多肽和蛋白质、阿马多利化合物(酮胺、糖化蛋白质)、具有α-二羰基化合物的多肽和蛋白质以及具有ages的多肽和蛋白质等。
作为抑制异常蛋白质的生成，在一个或多个实施方式中包括：抑制与异常蛋白质的生成直接或间接相关的物质的生成。作为抑制该物质的生成，在一个或多个实施方式中可以列举：淀粉酶抑制和α－葡萄糖苷酶抑制等。作为与异常蛋白质的生成直接或间接相关的物质，在一个或多个实施方式中可以列举：还原糖、乙二醛、甲基乙二醛和甘油醛等α-二羰基化合物，具有席夫碱的化合物，阿马多利化合物，醛以及ages等。作为ages，在一个或多个实施方式中可以列举：通过美拉德反应而被糖化后的氨基酸和二肽等，作为非限定性例子，可以列举：戊糖素、交联素、吡咯并吡啶(pyrropyridine)、吡咯素、羧甲基赖氨酸(cml)、羧乙基赖氨酸、羧甲基精氨酸(cma)、精氨嘧啶、咪唑啉酮化合物、乙二醛-赖氨酸二聚物(glyoxal-lysinedimer，gold)和甲基乙二醛-赖氨酸二聚物(methylglyoxal-lysinedimer，mold)等。
作为将异常蛋白质分解和/或除去，在一个或多个实施方式中可以列举将美拉德反应产物分解。作为将美拉德反应产物分解，在一个或多个实施方式中包括：将随着美拉德反应而形成的、基于ages的多肽和/或蛋白质间的交联结构切断。作为将美拉德反应产物分解，在一个或多个实施方式中，除此以外还可以包括：将含有ages的多肽和蛋白质、具有基于ages的交联结构的多肽和蛋白质、或通过美拉德反应而生成的糖化蛋白质分解。此外，在没有特别限定的一个或多个实施方式中，还可以包括：将含有ages的多肽和蛋白质、具有基于ages的交联结构的多肽和蛋白质、或通过美拉德反应而生成的糖化蛋白质中包含的二酮结构的c－c键切断。
作为抑制血糖值的急剧上升，在一个或多个实施方式中可以列举：抑制淀粉酶、抑制α－葡萄糖苷酶以及通过这些抑制等来抑制还原糖的生成。作为还原糖，在一个或多个实施方式中可以列举葡萄糖和果糖等单糖，乳糖和麦芽糖等麦芽糖型二糖、寡糖等。
作为抑制高血糖，在一个或多个实施方式中可以包括：抑制血糖值的急剧上升。
作为抑制氧化应激，可以列举：使用具有高抗氧化力的成分的物质等。
本公开在一个方式中涉及一种糖化应激抑制剂(本公开的糖化应激抑制剂)，其含有胡卢巴和茴香的提取物作为有效成分。
本公开的糖化应激抑制剂是指至少具有美拉德反应产物分解活性(也称为ages分解活性)和oph活性增强能力的物质。本公开的糖化应激抑制剂在一个或多个实施方式中可以具有一种或多种进一步的功能，所述进一步的功能为淀粉酶抑制作用、α－葡萄糖苷酶抑制作用和抗氧化活性等功能。此外，本公开的糖化应激抑制剂在一个或多个实施方式中可以进行成为异常蛋白质生成原因的物质的生成抑制、分解或除去以及异常蛋白质的分解、除去或生成抑制中的至少一种。
本公开的糖化应激抑制剂含有胡卢巴和茴香的提取物作为有效成分。因此，根据本公开的糖化应激抑制剂，在一个或多个实施方式中，能通过增强oph的酶活性、切断交联等而提高氧化蛋白质和糖化蛋白质的分解效率。根据本公开的糖化应激抑制剂，在一个或多个实施方式中，可以通过促进在生物体内生成的起因于ages的多肽和/或蛋白质间的交联结构的分解而抑制ages的蓄积。根据本公开的糖化应激抑制剂，在一个或多个实施方式中具有淀粉酶或α－葡萄糖苷酶抑制作用，因此可以抑制血糖值的急剧上升、抑制还原糖与蛋白质的非酶促反应、与葡萄糖过量存在相伴随的tca循环的反应不良等，结果可以抑制异常蛋白质的生成。此外，本公开的糖化应激抑制剂具有抗氧化作用，因此可以多方面地抑制与糖化应激和氧化应激相关的各种异常蛋白质的生成和蓄积。因此，根据本公开的糖化应激抑制剂，在一个或多个实施方式中，可以多方面地抑制或降低糖化应激和/或氧化应激。此外，根据本公开的糖化应激抑制剂，在一个或多个实施方式中，可以期待抗衰老、老化防止效果或生活习惯病的预防效果。因此，本公开的糖化应激抑制剂在一个或多个实施方式中还可以称为抗氧化应激剂、抗衰老剂、老化防止剂或生活习惯病预防剂。
本公开的糖化应激抑制剂使用胡卢巴和茴香等植物来源的提取物作为有效成分，因此能发挥安全性优良、此外生产率优良的效果。
本公开的糖化应激抑制剂中，胡卢巴提取物和茴香提取物可以以相同的比率(相对于胡卢巴提取物1重量份，茴香提取物为1重量份)来配合，也可以以不同的比率来配合。
本公开的糖化应激抑制剂中的胡卢巴提取物和茴香提取物的配合比(干燥重量比)在一个或多个实施方式中为：相对于胡卢巴提取物1重量份，茴香提取物为0.1～10重量份，从进一步提高糖化应激抑制效果的观点出发，茴香提取物为0.2～5重量份。
从进一步提高抗氧化力和淀粉酶抑制作用的观点出发，本公开的糖化应激抑制剂在一个或多个实施方式中可以含有玫瑰茄(学名hibiscussabdariffa)的提取物作为另一有效成分。本公开的糖化应激抑制剂在一个或多个实施方式中含有胡卢巴、茴香和玫瑰茄的提取物作为有效成分。
本公开的糖化应激抑制剂还含有玫瑰茄的提取物时，玫瑰茄的提取物可以以与胡卢巴提取物和/或茴香提取物相同的比率(相对于胡卢巴提取物或茴香提取物1重量份为1重量份)来配合，也可以以不同的比率来配合。
本公开的糖化应激抑制剂在一个或多个实施方式中含有胡卢巴提取物、茴香提取物和玫瑰茄的提取物。在本方式中，胡卢巴提取物、茴香提取物和玫瑰茄的提取物的配合比(干燥重量比)为：相对于胡卢巴提取物1重量份，茴香提取物为0.05～20重量份、玫瑰茄的提取物为0.05～20重量份，从进一步提高抗氧化力和淀粉酶抑制作用的观点出发，茴香提取物为0.1～10重量份、玫瑰茄的提取物为0.1～10重量份。
从进一步提高ages分解能力的观点出发，本公开的糖化应激抑制剂在一个或多个实施方式中可以含有香蜂花(学名melissaofficinalis)和迷迭香(学名rosmarinusofficinalis)中的至少一种作为又一有效成分。
提取物可以为从任意部位提取出的物质。作为使用部位，在一个或多个实施方式中可以列举：完整植株、花、叶、种子、果实、枝、茎、根、花萼和苞等。使用部位可以为1种，也可以将2种以上部位组合使用。茴香在一个或多个实施方式中优选为种子。胡卢巴在一个或多个实施方式中优选为种子。玫瑰茄在一个或多个实施方式中优选为蕚和苞。迷迭香在一个或多个实施方式中优选为叶。香蜂花在一个或多个实施方式中优选为叶。
对提取方法没有特别限制，在一个或多个实施方式中，可以列举溶剂提取等。作为提取溶剂，在一个或多个实施方式中可以列举：水、甲醇和乙醇等醇、醚等。提取物在一个或多个实施方式中可以列举：水提取物和有机溶剂提取物等。作为水提取物，在一个或多个实施方式中可以列举热水提取物等。关于溶剂提取的温度，在一个或多个实施方式中可以列举：60～100℃、70～90℃或80℃等。关于溶剂提取的时间，在一个或多个实施方式中可以列举：30分钟～5小时、1～5小时、2～5小时、3～5小时或1小时等。关于热水提取的温度，在一个或多个实施方式中可以列举：60～100℃、70～90℃或80℃等。关于热水提取的时间，在一个或多个实施方式中可以列举：30分钟～5小时、1～5小时、2～5小时、3～5小时或1小时等。提取物的形态在一个或多个实施方式中可以列举：水溶液、浓缩液和干燥物等。关于干燥，在一个或多个实施方式中可以通过对由溶剂提取得到的提取物进行加热处理来进行。关于加热温度，在一个或多个实施方式中为70～150℃或110℃。关于加热时间，在一个或多个实施方式中为1～10小时或4小时。
作为适合于制造本公开的糖化应激抑制剂的方法，在一个或多个实施方式中如下所述。将适量的葫芦巴粉末(例如2g)和茴香粉末(例如2g)用适量的蒸馏水(例如40ml)在80℃提取1小时，然后冷却到室温后，将所得到的浆液过滤，将所得到的过滤物作为植物提取物来使用。使用干燥植物提取物的情况下，将得到的植物提取物放置于铝盘中，在例如设为110℃的恒温箱中干燥4小时。
对本公开的糖化应激抑制剂的形态没有特别限制，在一个或多个实施方式中可以列举：固态、颗粒、粉末、糊剂和液状等。
关于本公开的糖化应激抑制剂，在一个或多个实施方式中可以在不抑制有效成分的糖化应激抑制功能的范围内含有其它提取物和其它成分。
关于本公开的糖化应激抑制剂，在一个或多个实施方式中可以作为饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、饲料、类药品或药品等的原料来使用。对作为原料的形态没有特别限制，在一个或多个实施方式中可以列举：固态、颗粒、粉末、糊剂和液状等。
作为本公开的一个或多个实施方式，涉及一种饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、饲料、类药品或药品，其含有本公开的糖化应激抑制剂。
对本公开的糖化应激抑制剂的每日摄取量没有特别限制，在一个或多个实施方式中为5mg以上，或2000mg以下。
[糖化应激抑制剂的制造方法]
本公开在另一方式中涉及一种制造糖化应激抑制剂的方法，其包含对胡卢巴和茴香进行溶剂提取的步骤。根据本公开的制造方法，可以制造本公开的糖化应激抑制剂。
本公开的制造方法在一个或多个实施方式中可以包含如下步骤：将胡卢巴提取物和茴香提取物混合，得到提取物的混合物。混合的比率在一个或多个实施方式中可以为相同的比率(相对于胡卢巴提取物1重量份，茴香提取物为1重量份)，也可以为不同的比率。
本公开的制造方法在一个或多个实施方式中可以包含如下步骤：相对于胡卢巴提取物1重量份，按照茴香提取物达到0.1～10重量份的方式来混合这些提取物，从制造能够进一步提高糖化应激抑制效果的糖化应激抑制剂的观点出发，可以包含如下步骤：按照茴香提取物达到0.2～5重量份的方式来混合这些提取物。
本公开的制造方法在一个或多个实施方式中可以包含如下步骤：将胡卢巴和茴香混合，对得到的混合物进行溶剂提取，从而得到混合提取物。混合的比率在一个或多个实施方式中可以为相同的比率(相对于胡卢巴1重量份，茴香为1重量份)，也可以为不同的比率。此外，可以按照得到的混合提取物中的各植物的提取物的比率为相同的比率(相对于胡卢巴提取物1重量份，茴香提取物为1重量份)的方式来混合，也可以按照为不同的比率的方式来混合。
本公开的糖化应激抑制剂的制造方法在一个或多个实施方式中还可以包含如下步骤：对选自由玫瑰茄、香蜂花和迷迭香组成的组中的至少一种植物进行溶剂提取的步骤。
本公开的制造方法在一个或多个实施方式中可以包含如下步骤：对干燥状态的植物进行溶剂提取。
本公开的制造方法在一个或多个实施方式中可以包含如下步骤：对经溶剂提取而得到的提取物进行过滤或离心分离。
本公开的制造方法在一个或多个实施方式中可以包含如下步骤：对得到的提取物进行干燥。
本公开的制造方法在一个或多个实施方式中可以包含如下步骤：将胡卢巴提取物、茴香提取物和这些以外的植物的提取物混合，得到提取物的混合物。混合的比率在一个或多个实施方式中可以为与胡卢巴提取物和/或茴香提取物相同的比率(相对于胡卢巴提取物或茴香提取物1重量份为1重量份)，也可以为不同的比率。
本公开的制造方法在一个或多个实施方式中可以包含如下步骤：相对于胡卢巴提取物1重量份，按照茴香提取物达到0.05～20重量份、玫瑰茄的提取物达到0.05～20重量份的方式来混合这些提取物，从制造能够进一步提高抗氧化力和淀粉酶抑制作用的糖化应激抑制剂的观点出发，可以包含如下步骤：按照茴香提取物达到0.1～10重量份、玫瑰茄的提取物达到0.1～10重量份的方式来混合这些提取物。
本公开的制造方法在一个或多个实施方式中可以包含如下步骤：将胡卢巴、茴香和这些以外的植物混合，对得到的混合物进行溶剂提取，从而得到混合提取物。混合的比率在一个或多个实施方式中可以为与胡卢巴和/或茴香相同的比率(相对于胡卢巴或茴香1重量份为1重量份)，也可以为不同的比率。此外，可以按照得到的混合提取物中的各植物的提取物的比率为相同的比率(相对于胡卢巴提取物或茴香提取物1重量份为1重量份)的方式来混合，也可以按照为不同的比率的方式来混合。
[糖化应激抑制方法]
本公开在一个方式中涉及一种抑制糖化应激的方法，其包含对生物体施予胡卢巴和茴香的提取物的步骤。本公开的糖化应激抑制方法在一个或多个实施方式中可以包含如下步骤：对生物体进一步施予选自由玫瑰茄、香蜂花和迷迭香组成的组中的至少一种植物的提取物。本公开的糖化应激抑制方法在一个或多个实施方式中也可以使用本公开的糖化应激抑制剂、饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、类药品或药品，来代替上述提取物。
[用于赋予糖化应激抑制功能的饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、类药品或药品的制造方法]
本公开在另一方式中涉及一种饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、类药品或药品的制造方法(本公开的第2饮料组合物等的制造方法)。本公开的第2饮料组合物等的制造方法包含在饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、类药品或药品中添加胡卢巴和茴香的提取物的步骤，用以赋予糖化应激抑制效果。
本公开的第2饮料组合物等的制造方法在一个或多个实施方式中还可以包含如下步骤：在饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、类药品或药品中添加选自由玫瑰茄、香蜂花和迷迭香组成的组中的至少一种植物的提取物。
提取物在一个或多个实施方式中可以列举：前述植物的水提取物和有机溶剂提取物等。作为水提取物，在一个或多个实施方式中可以列举热水提取物等。提取物的形态在一个或多个实施方式中可以列举：水溶液、浓缩液和干燥物等。
[用于赋予糖化应激抑制功能的提取物组合物]
本公开在另一方式中涉及一种用于赋予糖化应激抑制功能的胡卢巴和茴香的提取组合物。作为提取组合物，在一个或多个实施方式中可以列举：对植物进行溶剂提取而得到的上清和滤液等。作为提取溶剂，在一个或多个实施方式中可以列举：水、甲醇和乙醇等醇、醚等。关于提取组合物的形态，在一个或多个实施方式中可以列举：水溶液、浓缩液和干燥物等。本公开的提取物组合物在一个或多个实施方式中可以作为食品原料来使用。食品原料的形态在一个或多个实施方式中可以列举：水溶液、浓缩液和干燥物等。
本公开的提取物组合物在一个或多个实施方式中可以含有选自由玫瑰茄、香蜂花和迷迭香组成的组中的至少一种植物的提取物。
本公开可涉及以下的一个或多个实施方式。
[b1]一种糖化应激抑制剂，其含有胡卢巴和茴香的提取物作为有效成分。
[b2]根据[b1]所述的糖化应激抑制剂，其中，还含有玫瑰茄的提取物作为有效成分。
[b3]根据[b1]或[b2]所述的糖化应激抑制剂，其中，前述提取物为水提取物和有机溶剂提取物中的至少一种。
[b4]根据[b1]～[b3]中任一项所述的糖化应激抑制剂，其中，含有前述提取物的干燥物作为有效成分。
[b5]一种饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、类药品或药品，其以[b1]～[b4]中任一项所述的糖化应激抑制剂为有效成分。
[b6]一种用于抑制糖化应激的饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、类药品或药品，其含有胡卢巴和茴香的提取物作为有效成分。
[b7]一种糖化应激抑制剂的制造方法，其包含对胡卢巴和茴香进行溶剂提取的步骤。
[b8]一种饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、类药品或药品的制造方法，其包含在饮料组合物、食品组合物、功能性食品、化妆品、营养补充剂、类药品或药品中添加胡卢巴和茴香的提取物的步骤，用以赋予糖化应激抑制功能。
以下使用实施例进一步说明本公开。但是，本公开并不被解释为限于以下的实施例。
实施例
[植物提取物的制备]
将下述表1所示植物的干燥粉末2g用80℃的蒸馏水40ml提取1小时后，冷却到常温，然后进行过滤，将得到的滤液作为植物提取物来使用。
关于各样品的固态成分浓度，将得到的滤液5ml添加到铝盘中，在设为110℃的恒温箱中干燥4小时后测定残留量而算出。将其结果示于下述表1。
[oph活化确认试验(其1)]
作为oph，使用酰基氨基酸释放酶(aare)(宝生物公司制)，溶解于附带的磷酸钠缓冲液中制备为0.5u/ml后，用0.2mol/ltris－hcl(ph7.4)稀释到500倍而使用。作为oph的反应底物，使用0.05mol/ln－乙酰基－l－丙氨酸对硝基苯胺(aapa)的50％乙醇溶液。
按照达到下述表2所示的配合量的方式，将下述表1的植物的提取物、oph溶液、aapa溶液和tris－hcl添加到96孔微孔板(perkinelmer)。使微孔板在温度调节为37℃的酶标仪(spectramaxparadigmmulti－modemicroplatereader)(moleculardevise制)中反应48小时(2880分钟)，连续测定波长405nm处的吸光度。
oph活性通过反应24小时的结果来评价。将oph的aapa分解活性(不添加植物提取物)设为100％，使用各反应液a，b、c和d的吸光度通过下述式以相对值形式算出各植物提取物的oph活化率(％)。将其结果以将香蜂花的活化率设为100时的相对值形式示于下述表1。
oph的活化率(％)＝(a－b)/(c－d)×100
(表1)
(表2)
如表1所示，茴香、玫瑰茄和胡卢巴与香蜂花相比，显示出5倍以上的oph活性增加作用。
[植物提取粉末的制备]
在下述表3的各植物中加入15倍量的水，在温度100℃下提取30分钟，进行固液分离、浓缩后，在100℃以上进行30分钟以内的杀菌后进行喷雾干燥，制成植物提取粉末。
[试样溶液的制备]
将上述各植物提取粉末用蒸馏水稀释为5mg/ml，作为试样溶液。
[oph活化确认试验(其2)]
将酰基氨基酸释放酶(aare)(宝生物公司制)溶解于附带的磷酸钠缓冲液，用0.2mol/ltris－hcl(ph7.4)制备成0.01u/ml、0.005u/ml或0.001u/ml的oph溶液。作为oph的反应底物，使用0.05mol/ln－乙酰基－l－丙氨酸对硝基苯胺(aapa)50％乙醇溶液。
在96孔微孔板的各孔中，混合添加oph溶液、aapa溶液和试样溶液(5mg/ml)，在设为37℃的恒温箱中反应24小时。用酶标仪测定反应液在405nm处的吸光度。
求出每1小时的吸光度变化量(反应速度)作为oph的酶活性(试样的oph反应速度)。同时，作为对照(ref)，不添加试样溶液但进行同样的测定，求出反应速度(ref的oph反应速度)。使用试样的oph反应速度和ref的oph反应速度，通过下述式算出oph活化率(％)(n＝3)。将其结果示于下述表3。
oph活化率(％)＝{(试样的oph反应速度)/(ref的oph反应速度)}×100
作为阴性对照，使用表没食子儿茶素没食子酸酯(egcg)(5mg/ml)，进行同样的测定。将其结果示于下述表3。
(表3)
※1相对于胡卢巴提取粉末1重量份，茴香提取粉末为1重量份，玫瑰茄提取粉末为1重量份
※2相对于胡卢巴提取粉末1重量份，茴香提取粉末为2重量份，玫瑰茄提取粉末为0.5重量份
※3相对于胡卢巴提取粉末1重量份，茴香提取粉末为1重量份，玫瑰茄提取粉末为0.25重量份
※4相对于胡卢巴提取粉末1重量份，茴香提取粉末为1重量份，玫瑰茄提取粉末为0.14重量份
如表3所示，任一者均可以确认到超过170％的oph活性增加作用。此外，在将茴香、玫瑰茄和胡卢巴组合使用时，也可以确认到与单独使用时同等程度或更大的oph活性增加作用。
[ages交联切断作用确认试验(其1)]
基于saravasan等，nature，382，pp275-278(1996)的记载而进行。
作为底物，使用具有α-二酮结构的作为ages交联模型的反应底物的1-苯基-1,2-丙二酮(ppd)，作为阳性对照，使用n-苯酰甲噻唑溴(ptb)。
将植物提取液、10mmol/lppd和0.2mol/l磷酸缓冲液(ph7.4)按照5:1:4的比例混合，在37℃下反应8小时(n＝3)。反应结束后，加入盐酸使反应停止，得到反应液。
将反应液在20℃下以3,000×g离心分离10分钟，用反相hplc分析上清中的苯甲酸量。减去另行测定的植物提取液中的苯甲酸量而求出反应液中的苯甲酸量。1mol的ppd生成1mol的苯甲酸，因此通过下述式算出交联切断率。将其结果示于下述表4。
交联切断率(％)＝{(a－b)/c}×100
a：反应液中的苯甲酸量
b：植物提取液中的苯甲酸量
c：供于反应的ppd量(底物量)
作为对照，使用10mmol/lptb来代替植物提取液而进行。
(表4)
如表4所示，与作为分解ages相关的交联结构的化合物而报道的ptb相比，茴香、香蜂花和迷迭香中的任一者均显示出更高的交联切断率。特别是，茴香显示出接近ptb的2倍的交联切断率。
[ages交联切断作用确认试验(其2)]
基于saravasan等nature，382，pp275-278(1996)的记载而进行。
在预先包被有胶原的市售的96孔微孔板中，以300μl/孔添加superblockt20(pbs)封闭缓冲液，在37℃下反应1小时。反应后，用0.05％聚氧乙烯(20)失水山梨醇单月桂酸酯(tween20)/pbs(-)洗涤，然后将预先ages化的牛血清白蛋白(age-bsa)添加到微孔板的各孔中，在37℃下进行4小时交联反应。反应后，用tween20/pbs(-)洗涤，然后在各孔中添加植物提取液，在37℃下进行18小时切断反应。然后，用tween20/pbs(-)洗涤，添加一抗(anti-albuminbovineserumrabbit-polyclonal，兔抗牛血清白蛋白多抗)，在室温下反应30分钟。进一步用tween20/pbs(-)洗涤后，添加二抗(goatanti-rabbitigghorseradishperoxidase(hrp)conjugate，辣根过氧化物酶标记山羊抗兔igg结合物)，在室温下反应30分钟。然后，用tween20/pbs(-)洗涤，加入tmb单组分hrp微孔板底物(tmbonecomponenthrpmicrowellsubstrate)。进一步添加peg6000溶液并反应20分钟。添加作为反应终止液的1nhcl，用酶标仪测定450nm(主波长)/630nm(副波长)的吸光度。age-bsa的残存量通过改变age-bsa量而得的标准曲线来求出。此外，age-bsa分解率(胶原交联分解率)使用下述式来求出。将其结果示于下述表5。
age-bsa分解率＝{(添加age-bsa量－残存age-bsa量)/添加age-bsa量}×100
作为阳性对照，使用已知具有美拉德反应活性抑制效果的5mmol/l安石榴苷(punicalagin)来代替植物提取液并进行同样的试验。
(表5)
如表5所示，可以确认到茴香、香蜂花和胡卢巴具有胶原交联分解活性。特别是，可以确认到香蜂花具有与安石榴苷同等的胶原交联分解活性。
[ages交联切断作用确认试验(其3)]
使用下述表6所示的植物提取液的混合液，除此以外，与ages交联切断作用确认试验(其1)同样进行测定。将其结果示于下述表6。
(表6)
如表6所示，茴香、玫瑰茄和胡卢巴的混合液显示出接近ptb的约2倍的ages交联切断率。
[淀粉酶抑制作用确认试验]
使用enzychromα-淀粉酶检测试剂盒(bioassaysystem)和来源于猪胰腺的α-淀粉酶(α-amylasefromporcinepancreas)(西格玛)。
在微孔板的各孔中分别注入试剂盒附带的酶、检测缓冲液、葡萄糖标准品各10μl。然后，在各孔中分别注入含有下述表7所示的植物提取液的反应液各40μl，搅拌后反应15分钟。然后，在各孔中分别注入显色试剂150μl，在室温下反应20分钟后，测定585nm的吸光度，求出抑制率和ic50(n＝3)。将得到的ic50示于下述表7。
(表7)
如表7所示，胡卢巴和玫瑰茄的ic50均小于0.1mg/ml，可以确认到胡卢巴和玫瑰茄具有淀粉酶的高抑制活性。从而，胡卢巴和玫瑰茄可以抑制血糖值的急剧上升，该结果提示，能够抑制可能成为异常蛋白质的生成原因的二羰基化合物和ages等的生成。
[α－葡萄糖苷酶抑制作用确认试验]
使用quantichromα-葡萄糖苷酶检测试剂盒dagd-100(bioassaysytem)和大鼠小肠丙酮粉末(西格玛、α-葡萄糖苷酶)。
将酶标仪的测定部温度设为30℃后，在微孔板的各孔中分别注入含有下述表8所示的植物提取液的试样溶液200μl(含有底物溶液8ul)和α－葡萄糖苷酶溶液20μl并搅拌，使反应开始，测定30分钟的405nm的吸光度变化。作为抑制作用的阳性对照，使用作为α－葡萄糖苷酶抑制药的阿卡波糖(acarbose)，α－葡萄糖苷酶活性抑制率(％)通过下述式子来算出(n＝3)，求出ic50。
α－葡萄糖苷酶活性抑制率(％)＝{1－(a/b)}×100
a：样品、阳性对照的各浓度的值(δabs30分钟)
b：total(总显色)的值(δabs30分钟)
(表8)
如表8所示，可以确认到胡卢巴和茴香具有α－葡萄糖苷酶抑制活性。从而，胡卢巴和茴香可以抑制血糖值的急剧上升，该结果提示，能够抑制可能成为异常蛋白质的生成原因的二羰基化合物和ages等的生成。
[抗氧化力确认试验]
使用爱科来公司的spotchem(商标)i-packoxystresstest(商标)。
将含有硫氰酸盐的spotchem试剂r190μl和含有氯化铁(iii)的spotchem试剂r236μl混合。在该混合液126μl中添加下述表9的植物提取液18μl，使用spotchem测定465nm的吸光度，求出抗氧化力(μmol/l)。
另外，使用标准试剂抗坏血酸来代替植物提取液，同样进行吸光度测定，制作表示抗坏血酸浓度和吸光度的相关关系的标准曲线。然后，由植物提取液的吸光度和标准曲线，将抗氧化力换算为抗坏血酸当量(mg/l)。将其结果示于下述表9。
(表9)
如表9所示，可以确认到玫瑰茄具有高抗氧化力。由此提示，玫瑰茄能够消除成为异常蛋白质生成原因的氧化物质。