本发明属于果蔬贮运学领域，具体涉及一种适用于猕猴桃贮藏的乙醇熏蒸处理保鲜方法。
背景技术：
中华猕猴桃(actinidiachinensisplanch)，又叫猕猴桃毛梨子、毛桃子等，是一种经济价值比较高的木质藤本植物，其果实营养非常丰富，具有较高的保健价值，其口感酸甜、可口，肉嫩多汁，风味极佳，有“水果之王”、“vc之冠”的美称。中华猕猴桃果实除了可以鲜食之外，还可以加工成多种食品和饮料，如果冻、果酱、果汁、果脯、罐头、果酒等，在国外有些国家的人们还把它制成沙司、沙拉等甜点。因其丰富的营养价值和经济价值，受到广大消费者青睐。然而，中华猕猴桃是一种极为典型的呼吸跃变型的多汁浆果，有较为明显的生理后熟过程，采后极易变软腐烂，有研究表明，常温下中华称猴桃果实的采后货架期仅为5-7天，因此研究一种适宜中华猕猴桃果实采后贮藏保鲜方法尤为重要。
目前，在食品工业中，乙醇是一种具有抗菌作用的食品添加剂，有研究发现，当乙醇体积分数达到40％时，即可完全抑制灰霉葡萄孢菌(bottrycinerea)孢子的萌发。乙醇处理主要通过抑制叶绿素降解、保持果实硬度、延缓组织衰老和控制采后腐烂等作用，对多种果蔬具有良好的保鲜效果。近年来，乙醇熏蒸技术被越来越多的应用于果蔬保鲜领域，乙醇熏蒸过程需要一个密闭的环境，目前实验教学、科研研究中多采用配有胶塞的玻璃干燥器作为熏蒸室，但是玻璃干燥器容易破损，体积大，并且内部体积无法精确测定。
技术实现要素：
为弥补现有技术的不足，本发明提供一种适用于猕猴桃贮藏的乙醇熏蒸处理保鲜方法，解决了中华猕猴桃货架期短的问题，在0℃条件下，采用本发明方法乙醇熏蒸处理的中华猕猴桃比未处理的中华猕猴桃货架期长15-20天。
本发明采用以下技术方案：一种适用于猕猴桃贮藏的乙醇熏蒸处理保鲜方法，包括以下步骤：
s1.将采摘后的猕猴桃预冷12-15小时；
s2.将猕猴桃放置于装有浓度0.1～1000μl/l乙醇的熏蒸装置中熏蒸12小时；
s3.取出熏蒸后猕猴桃，置于通风处1小时后分装于聚乙烯塑料袋中贮藏。
进一步的，所述步骤s1、s2、s3中均在-1～1℃，相对湿度为90-95％的条件下进行。
进一步的，所述步骤s2中，乙醇浓度为500μl/l。
上述方法中涉及的熏蒸装置结构如下：熏蒸装置包括熏蒸室和用于密封的上盖，所述熏蒸室为两层，上层为样品室，下层为挥发室在样品室和挥发室之间由隔板和支撑棱分隔开，所述隔板上设有通孔，在挥发室内设有小型风扇。
进一步的，所述的隔板的材质为具有透湿功能的聚乙烯材料。
进一步的，所述的小型风扇为便携式可充电式小型风扇。
进一步的，所述的支撑棱固定于熏蒸室的内壁，隔板搭在支撑棱上。
本发明利用乙醇的保鲜机理，处理中华猕猴桃，研究乙醇熏蒸处理对中华猕猴桃的保鲜效果，并且根据现有实验条件设计一种适用于果蔬采后熏蒸处理的装置，结合此装置发明一种最适用于猕猴桃贮藏的乙醇熏蒸处理保鲜方法。
本发明的有益效果是：熏蒸装置的结构简单，安全实用，加工简便；材料来源广、成本低，便于操作；装置大小可根据具体样品量进行设置，适用于教学、科研及实际生产中进行果蔬熏蒸处理。本发明提供的适用于猕猴桃贮藏的乙醇熏蒸处理保鲜方法，其选用材料安全无毒，且无残留，操作过程简单易行，解决了中华猕猴桃货架期短的问题，在0℃条件下，采用本发明方法乙醇熏蒸处理的中华猕猴桃比未处理的中华猕猴桃货架期长15-20天，是一种高效安全的保鲜方法。
附图说明
图1为本发明熏蒸装置的整体结构图；
图2是本发明熏蒸装置分体结构示意图；
图中附图标记如下：1、上盖，2、样品室，3、隔板，4、支撑棱5、挥发室，6、小型风扇。
图3为乙醇熏蒸处理中华猕猴桃果实对呼吸强度的影响；
图4为乙醇熏蒸处理中华猕猴桃果实对硬度的影响；
图5为乙醇熏蒸处理中华猕猴桃果实中对维生素c含量的影响；
图6为乙醇熏蒸处理中华猕猴桃果实对叶绿素含量的影响；
图7为乙醇熏蒸处理中华猕猴桃果实对丙二醛含量的影响；
图8为乙醇熏蒸处理中华猕猴桃果实对cat活性的影响；
图9为乙醇熏蒸处理中华猕猴桃果实对pod活性的影响。
具体实施方式
下面通过附图和具体实施例详述本发明，但不限制本发明的保护范围。如无特殊说明，本发明所采用的实验方法均为常规方法，所用实验器材、材料、试剂等均可从商业渠道购买。
实施例1
一种适用于果蔬采后熏蒸处理的装置包括装置上盖1和熏蒸室，熏蒸室由样品室2，隔板3，支撑棱4，挥发室5组成，上盖1与熏蒸室可通过按扣密封，支撑棱4固定于熏蒸室的内壁，支撑棱4可设多个，用于将隔板3搭在支撑棱4上。隔板3将熏蒸室分成两个区域，上层为样品室2，下层为挥发室5，隔板材质为具有透湿功能的聚乙烯材料并设有小孔，小孔为直径为5mm的圆形。在挥发室5内设有小型风扇6。该小型风扇6为便携式可充电小型风扇。所述熏蒸室还可采用塑料保鲜盒。
具体使用方法如下：
s1.检查装置的密封性，在装置内放入少量水，扣紧上盖1确认是否有水漏出，确认好密封性后，将水倒出擦干。将采摘后的猕猴桃在-1～1℃，相对湿度为90-95％，预冷12-15小时；
s2.将浓度0.1～1000μl/l乙醇放置于挥发室5底部，随后快速打开小型风扇6，将隔板3放置于支撑棱上4，将猕猴桃放置于隔板上3，扣紧上盖，进行熏蒸处理12小时，温度-1～1℃，相对湿度为90-95％；
s3.取出熏蒸后猕猴桃，置于通风处1小时后分装于聚乙烯塑料袋中于温度-1～1℃，相对湿度为90-95％条件下贮藏。
实施例20μl/l浓度乙醇熏蒸处理中华猕猴桃果实(对照)
将96个中华猕猴桃，放入含有0μl/l的乙醇熏蒸装置中，进行熏蒸处理，12小时后，分别将四个中华猕猴桃为一组装入聚乙烯袋中。于第0d、14d、28d、42d、56d、70d测定猕猴桃的生理代谢及抗氧化的变化，整个实验过程均在-1～1℃，相对湿度为90-95％的条件下进行。
呼吸测定实验：
气相色谱的配置及工作条件：气相色谱配置有不锈钢填色谱充柱(8700型)，外层6’×1/4〃，内层6’×1/8〃。载气为he，流速30ml/min。进样温度120℃，柱的温度为35℃，检测的温度为120℃，压力为75.6kpa，1ml的进样量，电流为30ma。呼吸强度是根据1kg中华猕猴桃(鲜重)1小时内呼吸代谢所释放的co2的体积来表示。单位：mlco2/kg/h。
硬度测定实验：
使用textureexponent32的ta-xtplus食品质地检测仪来测定样品质地。探头选用p/50r，根据压缩中华猕猴桃的最大力来测定它的硬度，即第一次压缩时的最大峰值。
维生素c含量：
根据国标维生素c含量的测定方法，即2，6-二氯酚靛酚滴定液为参考，对中华猕猴桃中的维生素c的含量进行测定。
叶绿素含量测定实验：
称取1.0g果蔬样品放入研钵中，加少量石英砂和碳酸钙粉及2～3ml80％丙酮溶液，研成匀浆，再加10ml80％丙酮溶液继续研磨至组织变白。静置3～5min提取。用80％丙酮溶液将提取液定容至50ml，摇匀。注意，各器皿、用具在使用之前必须用80％丙酮溶液润洗。
丙二醛含量测定实验：
称取2.0g果蔬样品，加入10.0ml100g/ltca溶液，研磨匀浆后，于4℃、10000×g离心20min，收集上清液，低温保存备用。取6.0ml上清液(对照空白管中加入6.0ml100g/ltca溶液代替提取液)，加入6.0ml0.67％tba，混合后在沸水浴中煮沸20min，取出冷却后再离心一次。分别测定上清液在450nm、532nm和600nm波长处的吸光度值。重复三次。
cat活性测定实验：
取4g果肉，加入到20ml0.2mol/l磷酸缓冲溶液(ph＝6.4含0.2g聚乙烯吡咯烷酮)中，冰浴研磨，于4℃低温离心机13000×g离心30min，取上清液作为酶液提取液测定酶活性。酶促反应体系由2.9ml20mmol/lh2o2溶液和100μl酶提取液组成。以蒸馏水为参比空白，在反应15s是开始记录反应体系在波长240nm处吸光值作为初始值，每隔30s记录一次，连续测定，至少获取6个点的数据。重复3次。
酶液提取：
取4g果肉，加入到20ml0.2mol/l磷酸缓冲溶液(ph＝6.4含0.2g聚乙烯吡咯烷酮)中，冰浴研磨，于4℃低温离心机13000×g离心30min，取上清液作为酶液提取液测定酶活性。酶促反应体系由0.5ml粗酶提取液、2ml0.05m愈创木酚(用0.2mol/lph＝6.4的磷酸缓冲液配成)、1ml0.08％h2o2(用0.2mol/lph＝6.4的磷酸缓冲液配成)组成，测定1min内460nm处吸光值变化，重复3次。
实施例3：250μl/l浓度乙醇熏蒸处理中华猕猴桃果实
本实施例与实施例2的区别在于所用乙醇熏蒸浓度为250μl/l。
实施例4：500μl/l浓度乙醇熏蒸处理中华猕猴桃果实
本实施例与实施例2的区别在于所用乙醇熏蒸浓度为500μl/l。
实施例5：1000μl/l浓度乙醇熏蒸处理中华猕猴桃果实
本实施例与实施例2的区别在于所用乙醇熏蒸浓度为1000μl/l。
呼吸作用是果蔬采后生命活动的中心，与其品质变化、采后生理变化以及货架期有着较为密切的联系。检测结果表明，实施例3-5熏蒸处理均可对中华猕猴桃呼吸产生抑制作用，以250μl/l乙醇熏蒸处理抑制效果最好。
果实硬度是衡量果实成熟度和贮藏品质的重要指标之一，在果实成熟、衰老过程中，果实硬度逐渐降低。检测结果表明，以250μl/l乙醇熏蒸处理的中华猕猴桃硬度保持最佳。
叶绿素是植物进行光合作用的重要色素物质。随着果蔬成熟衰老，叶绿素含量不断下降。结果检测表明，250μl/l、500μl/l与1000μl/l乙醇熏蒸处理的中华猕猴桃果实中叶绿素含量分解速率均低于同期对照。
维生素c具有很强的抗氧化能力，在果蔬衰老过程中起抗氧化剂的作用。在整个检测过程中，中华猕猴桃果实中维生素c的含量均呈下降趋势，经过乙醇熏蒸处理的中华猕猴桃果实中维生素c含量显著高于同期对照。
丙二醛是脂质过氧化作用的主要产物之一，对果蔬的抗氧化能力有抑制作用，不利于果蔬贮藏。检测结果表明，500μl/l与1000μl/l乙醇熏蒸处理的中华猕猴桃果实中丙二醛含量显著低于同期对照。250μl/l乙醇熏蒸处理的作用效果不明显。
当果蔬中的活性氧积累过多而不能及时清除时，果蔬的衰老速度将加快。cat能够催化果蔬体内积累的过氧化氢(h2o2)，从而减少h2o2对果蔬带来的氧化损伤。检测结果表明三种乙醇熏蒸处理的cat活性均高于同期对照。
pod是果蔬体内普遍一种重要的氧化还原酶，它与果蔬的许多生理代谢过程密切相关，具有很强的抗性(抗病、抗氧化、抗逆境胁迫等)。检测结果表明，500μl/l与1000μl/l乙醇处理的中华猕猴桃pod活性均高于同期对照。
综合以上各项生理生化指标，采用本发明的保鲜方法，中华猕猴桃的呼吸速率减小，软化速度减慢，维生素c、叶绿素含量下降速率减慢，抗氧化酶活性提高，细胞膜伤害、后熟老化速率减缓，以500μl/l乙醇熏蒸处理综合效果较好。
以上所述，仅为本发明创造较佳的具体实施方式，但本发明创造的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明创造披露的技术范围内，根据本发明创造的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明创造的保护范围之内。