提高木质纤维素生物质营养价值的方法和组合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及提高木质纤维素生物质营养价值的方法和组合物。本发明设及的方法 和组合物可使木质纤维素生物质成为动物饲料中惯常使用的谷物淀粉的适宜替代品。
【背景技术】
[0002] 每年供给动物营养的谷物约有7.5亿吨。使用更便宜的饲料来源替代运些谷物的 一部分会使全人类受益匪浅。
[0003] 将谷物（如玉米)替换为较廉价的纤维素材料(如木质纤维素生物质)会深刻影响 动物饲料市场，并且/或者增加人类食品和能源市场的稳定性。
[0004] 木质纤维素生物质的营养价值还不足W使其成为高能量饲料原料(例如谷物）的 可行替代品。单胃动物例如生猪或家禽，无法将纤维成分(例如农业废物）中的木质纤维素 消化并吸收其中葡萄糖，例如达到允许替代动物饮食中大量的谷物的程度。动物，尤其是单 胃动物，并不具备消化纤维素和半纤维素所需的酶；即便具备此类酶，在肠内的停留时间也 会成为纤维素转化为葡萄糖的限制因素。
[000引纤维素是化学式为(C抽10化)n的有机化合物，它是由直链的通过e(i 一 4)糖巧键连 接的D-葡萄糖单元组成的多糖。
[0006] 半纤维素是几种杂聚物(基质多糖）中的任一种，与纤维素共存于几乎所有的植物 细胞壁中。半纤维素包括木聚糖、葡糖醒酸木聚糖、阿拉伯木聚糖、葡甘露聚糖，和木葡聚 糖。半纤维素包含许多不同的糖单体。例如，除葡萄糖之外，半纤维素中的糖单体还可包括 木糖、甘露糖、半乳糖、鼠李糖，和阿拉伯糖。半纤维素包含大多数D-戊糖(C-5糖），有时也包 含少量心糖。多数情况下，木糖是含量最大的糖单体，而在软木中甘露糖可能是丰度最大的 糖。半纤维素中不仅存在常规糖，也存在常规糖的酸化形式(例如葡糖醒酸和半乳糖醒酸）。
[0007] Schutte等人(British J.Of Nu化ition 1991,66,83-93)研究了D-木糖在猪体内 的营养意义。Schutte等人提出D-木糖和D-葡萄糖的回肠消化率均接近100%。饮食中D-木 糖的存在降低了回肠食糜pH值并且增强了挥发性脂肪酸在回肠内的流动，运表明猪小肠内 发生了 D-木糖的微生物降解。Schutte提出在饲喂极高D-木糖含量饮食(例如每kg饮食中D-木糖为200g)的猪体内，干物质(DM)、有机物质(OM)、总能量(GE)和氮(N)的回肠消化率、粪 便消化率，W及氮保留率显著降低。Schutte(1991年）也发现在猪的饮食中添加10%的木 糖，其中50 %的木糖能量会随尿液排出。
[000引 Verstegen等人(J.Animal .F*hysiol .a. Anim.加化.77(1997)180-188)对猪进行实 验，评价了木糖作为猪能量来源的可行性。根据该文献使用的计算方法，当饮食中添加10% 木糖时，饮食中38%至64%的木糖能量W代谢能(ME)的形式存在，对比饲喂饮食中含有 10%木糖的猪与饲喂饮食中含有5%葡萄糖的对照猪，人们发现:两种饮食中的ME和两种饲 喂方式下猪的增重都相似。
[0009] SavoiT等人(British Journal of Nu1:;rition(l992) ,67,103-114)研究了禽类体 内由U-Mc标记的单糖的代谢转归，并提出禽类吸收木糖比吸收葡萄糖和半乳糖慢得多，但 比吸收甘露糖和阿拉伯糖快。Savory(1992年)也观察到鸟的排泄物中由U-I4C标记的木糖和 阿拉伯糖比己糖的回收率更大，因而木糖和阿拉伯糖比己糖(C6)的代谢程度更低。
【附图说明】
[0010] 图1示出通过纤维素酶SC处理化CS(经稀氨水预处理的玉米賴杆)而得的葡萄糖和 木糖产量。
[0011] 图2示出通过使用AGcellerase"Tri〇?、纤维素酶SC或者纤维素酶SC+内切木聚糖 酶而从化CS释放的葡萄糖和木糖的量。
[001引图3示出通过使用Accelle成se@hi0?、纤维素酶SC118、纤维素酶151和SC118+木 聚糖酶而从化CS释放的糖的量。
[0013]图4示出通过使用Aecell鮮ase?化io?、纤维素酶SC和纤维素酶SC+四种不同的内 切木聚糖酶而得的化CS水解情况。
[0014]图5示出通过使用30iil Accellerase叫rio?而得的DaCS7jC解产物的HPLC色谱图。
[0015] 图6示出通过组合使用纤维素酶SC、纤维素酶SC和内切木聚糖酶(S〇1〇C118,50化） 而得的化CS水解产物的HPLC色谱图。
[0016] 图7示出通过使用Aee:ellemse?Tri〇?、纤维素酶SC和纤维素酶SC+内切木聚糖酶 而得化CS的水解情况。
[0017] 图8示出在加入或未加入纤维素酶SC118和内切木聚糖酶化nisco Xylanase?(参 见EP1222256，该文献W引用方式并入本文）的情况下，在50°C及抑5.0下，DaCS增溶40小时 后的结果(DaCS残渣的重量，Wg计）。
[0018] 图9示出在加入或未加入纤维素酶SC118和内切木聚糖酶化niscoXylanase?的情 况下，在50°C及抑5.0下，DaCS增溶40小时后的结果(增溶物质％ )。
[0019] 图10示出通过使用纤维素酶5(：118和木聚糖酶化1113(3〇乂71日11日36了》的剂量效应，在 50°C及pH 5.0下，在40小时内从化CS释放的单糖量。
[0020] 图11示出通过使用纤维素酶SCl 18和木聚糖酶化nisco Xylanase?的剂量效应，在 50°C及pH 5.0下，在40小时内从化CS释放的糖(单体+聚合物形式）。
[0021] 图12示出W进食木糖作为能量来源的肉鸡的采食量和体重增重。
[0022] 图13示出W进食木糖作为能量来源的肉鸡在饲喂第21天的体重。
[0023] 图14示出W进食木糖作为能量来源的肉鸡在饲喂第0至21天内的饲料转化率。
[0024] 图15示出编码内切木聚糖酶(FoxXyne)的核巧酸序列（SEQ ID No. 1)。信号序列W 黑体(大写体)示出。
[0025] 图16示出编码内切木聚糖酶(化巧yn6)的核巧酸序列（SEQ ID No.2)。
[0026] 图17示出内切木聚糖酶(FoxXyne)的多肤序列（SEQ ID No.3)。该序列为酶的活性 形式(如，酶的成熟形式）。
[0027] 图18示出编码内切木聚糖酶巧〇巧7114)的核巧酸序列（569 10齡.4)。信号序列^ 黑体(大写体)示出。
[0028] 图19示出编码内切木聚糖酶(化巧yn4)的核巧酸序列（SEQ ID No.5)。
[0029] 图20示出内切木聚糖酶(。〇巧7114)的多肤序列(569 10齡.6)。该序列为酶的活性 形式(如，酶的成熟形式）。
[0030] 图21示出编码来自黑曲霉(Aspergillus niger)(CBS513.88)的内切葡聚糖酶 化Gl)的核巧酸序列（SEQ ID No.7)。
[0031 ] 图22示出来自黑曲霉（CBS513.88)的内切葡聚糖酶化Gl)的多肤序列（SEQ ID No.8) O
[0032]图23示出编码来自黑曲霉CBS513.88的内切葡聚糖酶巧G2)的核巧酸序列（SEQ ID No.9) O
[003引图24示出来自黑曲霉CBS513.88的内切葡聚糖酶化G2)的多肤序列（SEQ ID No.10)。
[0034] 图25示出编码内切木聚糖酶的核巧酸序列（SEQ ID No. 11)。
[00巧]图26示出内切木聚糖酶的多肤序列（SEQ ID No. 12)。
[0036] 图27示出编码来自黑曲霉CBS513.88的0-葡萄糖巧酶的核巧酸序列（SEQ ID No.13)。
[0037] 图28示出来自黑曲霉CBS513.88的0-葡萄糖巧酶的多肤序列（SEQ ID No.14)。
[0038] 图29示出编码来自黑曲霉CBS513.88的溶解性多糖单加氧酶的核巧酸序列（SEQ ID No.15)。
[0039] 图30示出来自黑曲霉CBS513.88的溶解性多糖单加氧酶的多肤序列（SEQ ID No.16)。
[0040] 图31示出编码来自黑曲霉(CBS513.88)的CHBlA的核巧酸序列（SEQ ID No. 17)。
[0041 ] 图32示出来自黑曲霉(CBS513.88)的CHBlA的多肤序列（SEQ ID No. 18)。
[0042] 图33示出编码来自黑曲霉(CBS513.88)的CHBlB的核巧酸序列（SEQ ID No. 19)。
[0043] 图34示出来自黑曲霉(CBS513.88)的CHBlB的多肤序列（SEQ ID No.20)。
[0044] 图35示出编码来自里氏木霉(Trichoderma reesei)的CHBl的核巧酸序列（SEQ ID No.21)。
[0045] 图36示出来自里氏木霉的CHBl的多肤序列（SEQ ID No.22)。
[0046] 图37示出编码来自里氏木霉的CHB2的核巧酸序列（SEQ ID No.23)。
[0047] 图38示出来自里氏木霉的CHB2的多肤序列（SEQ ID No.24)。
[0048] 图39示出编码来自里氏木霉的内切葡聚糖酶化Gl)的核巧酸序列（SEQ ID No.25)。
[0049] 图40示出来自里氏木霉的内切葡聚糖酶化Gl)的多肤序列（SEQ ID No.26)。
[0050] 图41示出编码来自里氏木霉的内切葡聚糖酶化G2)的核巧酸序列（SEQ ID No.27)。
[0051 ]图42示出来自里氏木霉的内切葡聚糖酶化G2)的多肤序列（SEQ ID No.28)。
[005引图43示出编码来自里氏木霉的内切葡聚糖酶化G3)的核巧酸序列（SEQ ID No.29)。
[0053] 图44示出来自里氏木霉的内切葡聚糖酶化G3)的多肤序列（SEQ ID No.30)。
[0054] 图45示出编码来自里氏木霉的溶解性多糖单加氧酶的核巧酸序列（SEQ ID No.31)。
[0055] 图46示出来自里氏木霉的溶解性多糖单加氧酶的多肤序列（SEQ ID No.32)。
[0056] 图47示出编码来自里氏木霉的内切木聚糖酶的核巧酸序列（SEQ ID No.33)。
[0057] 图48示出来自里氏木霉的内切木聚糖酶的多肤序列（SEQ ID No.34)。
[0058] 图49示出编码来自里氏木霉的(6-葡萄糖巧酶的核巧酸序列（SEQ ID No.35)。
[0059] 图50示出来自里氏木霉的(6-葡萄糖巧酶的多肤序列（SEQ ID No.36)。
【发明内容】
[0060] 在第一方面，本发明提供了一种制备饲料添加剂组合物的方法，该方法包括：
[0061] a.用物理和/或化学和/或生物方法预处理木质纤维素生物质，
[0062] b.将经物理和/或化学和/或生物方法预处理的木质纤维素生物质与酶组合物混 合，其中该酶组合物至少具有W下活性：内切葡聚糖酶活性、e-葡糖巧酶活性和内切木聚糖 酶活性，并且其中该酶组合物不具有、或基本上不具有e-木糖巧酶活性和/或〇寸-阿拉伯巧 喃糖酶活性，
[0063] C.将木质纤维素生物质与酶组合物的混合物溫育至少约3至120小时，优选地溫育 6至48小时，
[0064] d. W及任选地进行干燥和/或任选地进行包装。
[0065] 在另一个方面，本发明提供了酶组合物的用途，其中在制造用于提高木质纤维素 生物质对动物的营养价值的饲料添加剂组合物的过程中，酶组合物至少具有W下活性：内 切葡聚糖酶活性、e-葡萄糖巧酶活性和内切木聚糖酶活性，并且其中酶组合物不具有、或基 本上不具有e-木糖巧酶活性和/或〇寸-阿拉伯巧喃糖酶活性。
[0066] 本发明的另外一方面为一种能够采用本发明的方法获得(例如，已获得)的饲料添 加剂组合物。
[0067] 在另一个方面，提供了一种饲料添加剂组合物或饲料成分，其包含由酶组合物水 解的经物理和/或化学和/或生物方法预处理的木质纤维素生物质，其中酶组合物至少具有 W下活性：内切葡聚糖酶活性、e-葡萄糖巧酶活性和内切木聚糖酶活性，并且不具有、或基 本上不具有e-木糖巧酶活性和/或〇寸-阿拉伯巧喃糖酶活性。
[0068] 本发明的另一方面提供了一种饲料或饲料原料，其包含根据本发明的饲料添加剂 组合物或饲料成分，或能够采用本发明的方法或用途获得(优选地已获得)的饲料添加剂组 合物。
[0069] 在另一方面，提供了一种预混物，其包含根据本发明的饲料添加剂组合物或饲料 成分，或能够采用本发明的方法或用途获得(优选地已获得）的饲料添加剂组合物，W及至 少一种矿物质和/或至少一种维生素。
[0070] 本发明还提供了一种制备饲料原料的方法，该方法包括将饲料组分与根据本发明 的饲料添加剂组合物或饲料成分、或能够采用本发明的方法或用途获得(任选地已获得)的 饲料添加剂组合物接触。
[0071] 本发明也提供了一种改善动物生物物理特性的方法，该方法包括给动物施用能够 通过本发明方法获得(例如，已获得）的饲料添加剂组合物，或根据本发明的饲料添加剂组 合物，或根据本发明的预混物，或根据本发明的饲料原料，或者能够通过本发明方法获得 (例如，已获得)的饲料原料。
[0072] 在又一方面，本发明提供了能够通过本发明的方法或用途获得(例如，已获得）的 饲料添加剂组合物、或者根据本发明的饲料添加剂组合物、或者根据本发明的预混物、或者 根据本发明的饲料原料、或者能够通过本发明方法获得(例如，已获得）的饲料原料用于改 善动物的生物物理特性的用途。
[0073] 在一个优选的实施例中，酶组合物不具有、或基本上不具有0-木糖巧酶活性，并且 不具有、或基本上不具有〇寸-阿拉伯巧喃糖酶活性。
[0074] 适宜地，酶组合物可进一步包含选自纤维二糖水解酶I和纤维二糖水解酶II的一 种或两种酶。
[0075] 适宜地，酶组合物可进一步包含溶解性多糖单加氧酶。
【具体实施方式】
[0076] 发明人的研究（参见实例5)已经证明饲料中高含量的C-5糖单体(例如木糖)能对 进食该饲料的动物健康造成不利影响。
[oow]然而，在饲料原料中使用高含量木质纤维素生物质可导致饲料原料的营养价值不 够高，或者为尝试使饲料原料具有更高营养价值而对木质纤维素生物质进行处理，则会导 致饲料原料中C-5糖单体(例如木糖)含量过高而可能对动物健康造成危害。
[0078] 因此，发明人得出在饲喂动物之前，应优选地将C-5糖单体从任何木质纤维素生物 质饲料中移除。
[0079] 本发明人现已发现一种使用酶组合物处理木质纤维素生物质的独特方法，该酶组 合物可使饲料原料或饲料添加剂组合物中C-5糖单体(例如木糖)含量降低，同时维持对动 物有益的(例如有营养价值的)高含量C-6低聚物和糖单体。
[0080] 令人惊讶的是，如果移除形成C-5碳水化合物单体的活性，则能够在不减损纤维素 转化为葡萄糖的效率或时间的前提下形成大量木糖寡聚物。所得组合物对饲料应用更加有 利。
[0081] 本发明人惊讶地发现，消除巧糖单体生成并提高巧低聚物生成同时伴有纤维素酶 活性(例如，从而生成C6低聚物和C6糖单体)是有利的活性配合效果。
[0082] 包括该酶组合物的方法和用途将允许在动物饲料和动物饮食中添加更高含量的 木质纤维素生物质。
[0083] 本发明人惊讶地发现，可通过使用至少具有W下活性的酶组合物显著提高木质纤 维素生物质对动物(尤其是单胃动物）的营养价值：内切葡聚糖酶活性、e-葡萄糖巧酶活性 及内切木聚糖酶活性;其中在处理木质纤维素生物质的过程中，酶组合物不存在、或基本上 不存在W下活性中的一者或两者:e-木糖巧酶活性和/或〇寸-阿拉伯巧喃糖酶活性。
[0084] 已惊讶地发现降低或去除0-木糖巧酶活性和a-k阿拉伯巧喃糖酶活性，能够显著 提高木质纤维素生物质对动物(尤其是单胃动物)的营养价值。
[0085] 从数据中可W看出，运些益处是源于组合物中糖单体(尤其是C-5糖单体)含量降 低的同时组合物中低聚物糖(例如木糖寡聚物)含量显著提高。
[0086] 此发现令人惊讶，因为在本发明之前人们就已知如果将C6单体形成酶移出体系， 反应的反馈抑制会使产物(例如纤维二糖）的积累、酶反应逐渐减慢。因此在本发明之前人 们已知，当形成的糖单体含量降低时，反应的反馈机制会导致酶反应整体减慢。令人惊讶的 是，对于酶组合物未观察到明显的反馈机制，例如本发明所用的e-木糖巧酶活性和/或QA-阿拉伯巧喃糖酶活性很小的酶组合物。
[0087] 本发明人惊讶地发现，使用酶混合物的方法能够显著提高木质纤维素生物质对动 物(尤其是单胃动物）的营养价值，该酶混合物能够分解纤维素和半纤维素，但不具有形成 碳水化合物单体的活性或不具有形成还原单体的活性(尤其不具有形成C-5碳水化合物单 体的活性）。
[0088] 通过使用物理和/或化学和/或生物方法预处理木质纤维素生物质，可进一步增强 该效果。因此，首先使用物理和/或化学和/或生物方法处理木质纤维素生物质，然后使用酶 组合物处理经物理和/或化学和/或生物方法预处理的木质纤维素，其中酶组合物至少具有 W下活性：内切葡聚糖酶活性、e-葡萄糖巧酶活性和内切木聚糖酶活性;其中酶组合物中不 存在、或基本上不存在W下酶活性中的一者或两者:0-木糖巧酶活性和aA-阿拉伯巧喃糖 酶活性。
[0089] 本发明意味着，可用木质纤维素生物质替代动物饲料中惯常使用的淀粉(如，来自 谷物的淀粉）。运一做法有明显的好处。例如，利用本发明意味着，无需再按惯例在动物饲料 应用中W较大比例使用谷物来供给动物营养。本发明能使制备动物饲料的成本降低。除此 之外或作为另外一种选择，本发明减轻了长期W来由于人口规模增加和化石燃料供应限制 而对供应链造成的资源压力。
[0090] 本发明与单胃动物和反当动物皆有关联，但与单胃动物最明确地相关。
[0091] 就反当动物来说，可使用根据本发明的饲料补充剂、或通过本发明制备的饲料补 充剂替代谷物，来集约化生产反当动物的肉类和乳品，并/或增加系统效率。
[0092] 本发明设及一种制备饲料添加剂组合物的方法，所述方法包括：
[0093] a.用物理和/或化学和/或生物方法预处理木质纤维素生物质，
[0094] b .将经物理和/或化学和/或生物方法预处理的木质纤维素生物质与酶组合物混 合，其中该酶组合物至少具有W下活性：内切葡聚糖酶活性、e-葡糖巧酶活性和内切木聚糖 酶活性，并且其中该酶组合物不具有、或基本上不具有e-木糖巧酶活性和/或〇寸-阿拉伯巧 喃糖酶活性，
[0095] C.将木质纤维素生物质与酶组合物的混合物溫育至少约3至120小时，优选地溫育 6至48小时，
[0096] d. W及任选地进行干燥和/或任选地进行包装。
[0097] 本文所用的术语"不存在"或"不具有"是指酶组合物不具有0-木糖巧酶活性并且 不具有a-阿拉伯巧喃糖酶活性。
[0098] 本文结合0-木糖巧酶活性和/或a-k阿拉伯巧喃糖酶活性所用的术语"基本上不 存在"和"基本上不具有"是指使用本文提出的巧-木糖巧酶活性测定法"测定的0-木糖巧酶 活性低于3000单位/mg(适宜地低于2000单位/mg、适宜地低于1500单位/mg),并且/或者使 用本文提出的"Q-L-阿拉伯巧喃糖酶活性测定法'测定的a-レ阿拉伯巧喃糖酶活性低于 1000单位/mg(适宜地低于500单位/mg、适宜地低于450单位/mg)。
[0099] 在一个实施例中，本文结合0-木糖巧酶活性和/或a-k阿拉伯巧喃糖酶活性所用 的术语"基本上不存在"和"基本上不具有"是指使用本文提出的"0-木糖巧酶活性测定法" 巧憶的e-木糖巧酶活性低于1500单位/mg,并且/或者使用本文提出的"a-k阿拉伯巧喃糖 酶活性测定法'测定的QA-阿拉伯巧喃糖酶活性低于450单位/mg。
[0100] 在一个实施例中，本发明所用的酶组合物具有使用本文提出的"0-木糖巧酶活性 测定法"测定的低于3000单位/mg (适宜地低于2000单位/mg、适宜地低于1500单位/mg)的0-木糖巧酶活性，W及使用本文提出的"QA-阿拉伯巧喃糖酶活性测定法"测定的低于1000单 位/mg(适宜地低于500单位/mg、适宜地低于450单位/mg)的〇寸-阿拉伯巧喃糖酶活性。
[0101] 在一个实施例中，本文结合e-木糖巧酶活性和/或a-k阿拉伯巧喃糖酶活性所用 的术语"基本上不存在"和"基本上不具有"是指使用本文提出的"0-木糖巧酶活性测定法" 巧憶的e-木糖巧酶活性低于1500单位/mg,并且使用本文提出的"aA-阿拉伯巧喃糖酶活性 巧憶法'测定的QA-阿拉伯巧喃糖酶活性低于450单位/mg。
[0102] 在一个优选的实施例中，酶组合物可不具有、或基本上不具有(6-木糖巧酶活性，并 且不具有、或基本上不具有〇寸-阿拉伯巧喃糖酶活性。
[0103] 在一个优选的实施例中，酶组合物可不具有e-木糖巧酶活性，并且不具有〇-心阿 拉伯巧喃糖酶活性。
[0104] 在一个优选的实施例中，本发明所用的木质纤维素生物质可为经物理预处理的、 经化学预处理的、经生物预处理的、或经它们的组合预处理的木质纤维素生物质。
[0105] 在另一个实施例中，经物理和/或化学和/或生物方法预处理的木质纤维素生物质 可与酶组合物一起溫育至少约6至48小时。
[0106] 在另一个优选的实施例中，本发明所用的酶组合物可基本上由W下活性组成(或 由W下活性组成）：内切葡聚糖酶活性、e-葡萄糖巧酶活性和内切木聚糖酶活性。
[0107] 在一个实施例中，本发明所用的酶组合物可还具有W下酶活性中的一者或两者： 纤维二糖水解酶I活性和纤维二糖水解酶II活性。
[0108] 在一个实施例中，本发明所用的酶组合物可还具有溶解性多糖单加氧酶活性。
[0109] 在一些实施例中，本发明所用的酶组合物可具有内切葡聚糖酶活性、0-葡萄糖巧 酶活性和内切木聚糖酶活性，W及W下酶活性中的一者或多者:纤维二糖水解酶I活性、纤 维二糖水解酶II活性或溶解性多糖单加氧酶活性。
[0110] 在一些实施例中，本发明所用的酶组合物可基本上由W下酶活性组成(或由W下 酶活性组成）：内切葡聚糖酶活性、e-葡萄糖巧酶活性和内切木聚糖酶活性，W及W下酶活 性中的一者或多者:纤维二糖水解酶I活性、纤维二糖水解酶II活性或溶解性多糖单加氧酶 活性。
[0111] 在一些实施例中，本发明所用的酶组合物可具有内切葡聚糖酶活性、0-葡萄糖巧 酶活性和内切木聚糖酶活性，W及W下酶活性中的两者或更多者(适宜地为=者）：纤维二 糖水解酶I活性、纤维二糖水解酶II活性或溶解性多糖单加氧酶活性。
[0112] 在一些实施例中，本发明所用的酶组合物可基本上由W下酶活性组成(或由W下 酶活性组成）：内切葡聚糖酶活性、e-葡萄糖巧酶活性和内切木聚糖酶活性，W及W下酶活 性中的两者或更多者(适宜地为=者）：纤维二糖水解酶I活性、纤维二糖水解酶II活性或溶 解性多糖单加氧酶活性。
[0113] 在一个实施例中，本发明所用的酶组合物可通过其酶活性来表征。
[0114] 在一个实施例中，本发明所用的酶组合物具有至少W下酶活性(或基本上由